三磷酸鳥苷對鉬-鋅單原子納米酶的類過氧化物酶活性的影響及其便攜式檢測

摘要 采用濕化學(xué)-熱解法制備了具有類過氧化物酶（POD）活性的Mo-Zn單原子納米酶（Mo-ZnSANs），探究了三磷酸鳥苷（GTP）、三磷酸腺苷（ATP）、三磷酸胞苷（CTP）、三磷酸尿苷（UTP）、二磷酸鳥苷（GDP）、一磷酸鳥苷（GMP）和鳥苷（G）這7 種分子對Mo-Zn SANs 類POD 活性的影響。結(jié)果表明， GTP 通過靜電作用和配位作用與Mo-Zn SANs 結(jié)合形成新的絡(luò)合物，由于帶負(fù)電的磷酸基團的引入，增加了對底物TMB 的親和力，可顯著增強Mo-Zn SANs 的催化活性，而其它核苷酸如ATP、CTP 和UTP 等對Mo-Zn SANs 的類POD 活性幾乎沒有影響。基于此原理，構(gòu)建了一種手機輔助信號輸出的比色傳感器，用于GTP 的便攜式檢測。本方法用于檢測GTP 時具有良好的靈敏度和選擇性，能將GTP 與其結(jié)構(gòu)類似物區(qū)分開，在最優(yōu)條件下，檢測GTP 的線性范圍為1～10 μmol/L， 檢出限為0.97 μmol/L， 滿足生物樣本的檢測需求。

關(guān)鍵詞 單原子納米酶；類過氧化物酶；三磷酸鳥苷；便攜式檢測

三磷酸鳥苷（GTP）是一種重要的多功能核苷酸[1]，在許多生物過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，如酶促反應(yīng)、細(xì)胞生長和傳遞細(xì)胞信號等[2-3]。GTP 不僅是RNA 合成底物，也是一些代謝反應(yīng)和蛋白質(zhì)合成的能量來源，其濃度與生理和病理狀態(tài)密切相關(guān)，是多種疾病（如肝炎、膽囊炎和不同類型的癌癥）的重要指標(biāo)[4]，因此，監(jiān)測體內(nèi)GTP 的水平至關(guān)重要。然而，生物體內(nèi)存在GTP 的結(jié)構(gòu)類似物，包括與其結(jié)構(gòu)高度類似的三磷酸腺苷（ATP）、三磷酸胞苷（CTP）和三磷酸尿苷（UTP），以及二磷酸鳥苷（GDP）、一磷酸鳥苷（GMP）和鳥苷（G），這些類似物干擾GTP 的檢測。目前，已報道的有機人工GTP 傳感器合成復(fù)雜、選擇性差[1]，導(dǎo)致其應(yīng)用受限，因此，開發(fā)簡單、快速、靈敏及特異性檢測GTP 的方法具有重要意義。

納米酶是一類具有類酶活性的納米材料[5]，與天然酶相比，具有穩(wěn)定性好、成本低、易于合成和修飾等優(yōu)點[6-9]。GTP 含有氮、氧孤對電子和3 個帶負(fù)電的磷酸基團[10]，因此，納米酶中若存在中心離子，并且能提供接受孤對電子的空軌道，通?？膳cGTP 配位。Dadakhani 等[11]合成了具有類過氧化物酶（POD）活性的FeCo-LDH@WO3 納米復(fù)合材料，并采用GTP 對該納米復(fù)合材料表面進行改性，兩者通過配位作用結(jié)合，修飾后的納米復(fù)合材料具有更高的類POD 活性，被用于抗壞血酸的靈敏檢測。納米酶優(yōu)異的物理化學(xué)性質(zhì)使其在傳感、腫瘤治療等多個領(lǐng)域廣泛應(yīng)用，然而，納米酶的結(jié)構(gòu)復(fù)雜且活性位點少，通常難以滿足高催化活性和清晰的催化機制的需求，阻礙了納米酶的進一步發(fā)展和應(yīng)用[12]。單原子納米酶（Single-atom nanozymes， SANs）是利用單原子合成技術(shù)制備的具有類酶活性的材料，其明確的原子結(jié)構(gòu)和電子配位環(huán)境有助于活性位點的鑒定和催化機理的研究，原子級分散的金屬活性位點提高了原子利用率和催化效率[13]，在一定程度上彌補了傳統(tǒng)納米酶的不足。SANs 中若有能提供空軌道的離子，即有與GTP 發(fā)生相互作用的潛力，因此改變SANs 的表面性質(zhì)，可望實現(xiàn)GTP 對SANs 催化性能的調(diào)控。

本研究以聚乙烯醇（PVA）氣凝膠作為金屬原子載體，制備了具有優(yōu)異類POD 活性的Mo-Zn 單原子納米酶（Mo-Zn SANs）。此材料具有以下優(yōu)點：雙親性PVA 氣凝膠載體經(jīng)過熱解后，不會發(fā)生結(jié)構(gòu)坍塌，仍可維持三維多孔結(jié)構(gòu)，有利于反應(yīng)物和產(chǎn)物在孔道內(nèi)運輸，增大了反應(yīng)物與催化活性位點的接觸機會，極大地提高了金屬Mo 和Zn 原子的利用率和催化效率；以具有宏觀尺寸的三維多孔PVA 氣凝膠作為載體負(fù)載Mo 和Zn 原子，可有效提高暴露在催化劑表面的金屬原子含量，有助于金屬原子與配體之間絡(luò)合反應(yīng)的進行。本研究考察了GTP、ATP、CTP、UTP、GDP、GMP 和G 對Mo-Zn SANs 的類POD 活性的影響，發(fā)現(xiàn)只有GTP 可以顯著提高Mo-Zn SANs 的類POD 活性，其增強機制可能是GTP 和Mo-Zn SANs通過靜電相互作用及配位作用結(jié)合形成新的絡(luò)合物，由于此絡(luò)合物存在帶負(fù)電荷的磷酸基團，增加了其對底物TMB 的親和力[14]。由于Mo-Zn SANs 表面的Mo 和Zn 含量豐富，與配體結(jié)合效率高，存在較少的GTP 配體時即可顯著提高其催化效率?；贕TP 對Mo-Zn SANs 的類POD 活性的調(diào)控作用，構(gòu)建了一種手機輔助的比色傳感方法，實現(xiàn)了對GTP 的靈敏、便攜式檢測（圖1）。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

JEM-ARM200F 掃描透射電子顯微鏡/透射電子顯微鏡（日本JEOL 公司）；ESCALAB-MKⅡ X 射線光電子能譜儀（英國VG 公司）；FiveEasy Plus FE28 pH 計（梅特勒-托利多儀器有限公司）；Christ-Alpha 1-2Ldplus 凍干機（德國Marin Christ 公司）；101A-1E 電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海精宏實驗儀器有限公司）；YIU-100B 恒溫混勻儀（長春市海涵儀器有限公司）；SparkTM 酶標(biāo)儀（瑞士Tecan 公司）。

聚乙烯醇（PVA， Mw～195000）、順丁烯二酸（MA，分析純）、Na2MoO4·2H2O（分析純）和ZnCl2·2H2O（分析純）（阿拉丁試劑公司）；多壁碳納米管水分散液（MWCNTs， 10%，南京先鋒納米材料科技有限公司）；3，3′，5，5′-四甲基聯(lián)苯胺（TMB，分析純）、二磷酸鳥苷（GDP， 90%）和一磷酸鳥苷（GMP， 98%）（上海麥克林試劑公司）；三磷酸腺苷（ATP，試劑純，生工生物工程股份有限公司）；三磷酸鳥苷（GTP，75 mmol/L）、三磷酸尿苷（UTP， 75 mmol/L）、三磷酸胞苷（CTP， 75 mmol/L）（美國賽默飛世爾科技有限公司）；鳥苷（G， 98%，北京索萊寶科技有限公司）。實驗用水為超純水（18.25 MΩ·cm）。

1.2 實驗方法

1.2.1 Mo-Zn SANs 的合成

參照文獻(xiàn)[15]的方法合成Mo-Zn SANs。取11 mL PVA 溶液（8%， m/V）加入到聚四氟乙烯反應(yīng)釜中，再加入580 mg MA，磁力攪拌至完全溶解后，逐滴加入1 mL 濃H2SO4，繼續(xù)攪拌10 min， 隨后加入1 mL 預(yù)先超聲分散好的MWCNTs 分散液，攪拌30 min， 將反應(yīng)釜置于干燥箱中，在200 ℃下反應(yīng)24 h。得到的產(chǎn)物在超純水中浸泡至中性，以除去過量的H2SO4，然后冷凍干燥得到PVA 氣凝膠。將Mo 和Zn 的前驅(qū)體材料多金屬氧酸鹽和超分子配位化合物溶解在乙腈里，配制成終濃度為9 和3 mmol/L 的溶液，滴加到PVA 氣凝膠上直至飽和，待樣品干燥后，放入管式爐中，在N2 氣氛下，以5 ℃/min 的速率升溫至800 ℃，煅燒30 min， 自然冷卻。將得到的最終產(chǎn)物Mo-Zn SANs 研磨成粉末，待用。

1.2.2 GTP 及其類似物對Mo-Zn SANs 類POD 活性的影響

考察了GTP、ATP、CTP、UTP、GMP、GDP 和G 對Mo-Zn SANs 的類POD 活性的影響。分別將5 μL 1 mmol/L 上述GTP 及其類似物和3 μL 2 mg/mL Mo-Zn SANs 加入到10 μL 10 mmol/L Tris-HCl 緩沖溶液（pH 7.5， 10 mmol/L NaCl）中，補加超純水至終體積為25 μL， 在室溫下孵育5 min。向上述體系中加入10 μL 0.2 mmol/L HAc-NaAc 緩沖溶液（pH 3.5）、8 μL 100 mmol/L H2O2 和4 μL 30 mmol/L TMB，補加超純水至終體積為100 μL，置于恒溫金屬浴中，在40 ℃下反應(yīng)15 min。采用酶標(biāo)儀測量反應(yīng)液的紫外-可見吸收光譜及652 nm 處的吸光度值（A652 nm）。

1.2.3 GTP 的檢測

將2 μL 不同濃度的GTP 與1.5 μL 2 mg/mL Mo-Zn SANs 加入到10 μL 10 mmol/L Tris-HCl 緩沖溶液（pH 7.5， 10 mmol/L NaCl）中，補加超純水至終體積為25 μL， 室溫下孵育5 min；向上述反應(yīng)體系加入10 μL 0.2 mol/L HAc-NaAc 緩沖溶液（pH 4）、5 μL 50 mmol/L TMB 和6 μL 100 mmol/L H2O2，補加超純水至終體積為100 μL， 混合均勻后置于恒溫金屬浴中，于40 ℃反應(yīng)20 min。采用酶標(biāo)儀測量反應(yīng)溶液的紫外-可見吸收光譜及A652 nm 值，同時利用拍照裝置拍攝顏色深淺不同的照片，并用手機程序軟件（APP）分析數(shù)據(jù)，提取RGB 值，建立G 值與GTP 濃度之間的標(biāo)準(zhǔn)曲線，用于GTP 的便攜式檢測。

為了探究此傳感策略檢測GTP 的特異性，考察了ATP、CTP、UTP、GMP、GDP 和G 這6 種體內(nèi)常見的GTP 結(jié)構(gòu)類似物對檢測GTP 的影響。向體系中分別加入2 μL 500 μmol/L GTP 或其類似物，其它步驟與上述GTP 檢測過程相同。

1.2.4 人血清中GTP 的檢測

人血清樣本來源于本研究組的健康志愿者，本人知情同意，相關(guān)研究得到了倫理道德委員會批準(zhǔn)。將人血清樣本用1 mmol/L Tris-HCl緩沖溶液（pH 7.5， 1 mmol/L NaCl）稀釋100 倍，加入2 μL不同濃度的GTP溶液（最終濃度分別為2、5和10 μmol/L）；向加標(biāo)的血清樣本中加入1.5 μL 2 mg/mL Mo-Zn SANs，室溫下孵育5 min。人血清樣本中GTP含量檢測的后續(xù)操作步驟與1.2.3節(jié)相同。

2 結(jié)果與討論

2.1 Mo-Zn SANs 的結(jié)構(gòu)表征及其類POD 活性考察

利用像差校正高角環(huán)形暗場掃描透射電鏡（HAADF STEM）表征Mo-Zn SANs 的微觀結(jié)構(gòu)。如圖2A所示，大多數(shù)金屬原子以單原子形式存在（圓圈內(nèi)），也有一些金屬原子成簇存在（方框內(nèi)），但是Mo 和Zn原子序數(shù)相近，很難被區(qū)分開。利用X 射線光電子能譜（XPS）研究了Mo-Zn SANs 的元素組成和金屬價態(tài)（圖2B），在284、532、399、232 和1022 eV 處的峰分別對應(yīng)C 1s、O 1s、N 1s、Mo 3d 和Zn 2p[15-18]。通過元素分析得到C、N 和H 的百分含量分別為65.6%、1.2%和1.7%。根據(jù)文獻(xiàn)[15]中的ICP 原子發(fā)射光譜結(jié)果推論， Mo 和Zn 的含量總和通常小于10%，由于C 和O 含量高，譜峰也高，所以在XPS 圖譜上含量較少的N、Mo 和Zn 元素的譜峰不明顯。高分辨Mo 3d 光譜圖中，結(jié)合能為232.3 和235.5 eV 處的峰分別對應(yīng)Mo（Ⅵ） 3d5/2 和Mo（Ⅵ） 3d3/2（圖2C）[19]；Zn 2p 的XPS 擬合曲線顯示位于1022.7 eV 和1045.7 eV處的峰分別對應(yīng)于Zn（Ⅱ） 2p3/2 和Zn（Ⅱ） 2p1/2（圖2D）[20]。

通過對4 個體系（TMB、TMB+H2O2、TMB+Mo-Zn SANs、TMB+H2O2+Mo-Zn SANs）進行紫外-可見吸收光譜分析，驗證Mo-Zn SANs 的類POD 活性。如圖2E 所示， TMB+H2O2+Mo-Zn SANs 體系在652 nm 處具有明顯的氧化態(tài)TMB 的特征吸收峰，而TMB+H2O2 和TMB+Mo-Zn SANs 體系在652 nm 處的吸收峰非常弱，可忽略不計，說明Mo-Zn SANs 具有良好的類POD 活性，而無類氧化酶活性。

2.2 GTP 及其類似物對Mo-Zn SANs 類POD 活性的影響

考察了ATP、CTP、UTP和GTP對Mo-Zn SANs 類POD 活性的影響，這4 種核苷酸在結(jié)構(gòu)上只存在堿基差異。由圖3A和3B可見， GTP可以顯著增強Mo-Zn SANs的類POD活性。加入ATP， Mo-Zn SANs的類POD 活性略增，但是與GTP 對Mo-Zn SANs 的活性增強效果區(qū)分明顯；加入CTP 和UTP，吸光度值與對照組相差較小，說明CTP和UTP 對Mo-Zn SANs 的類POD 活性影響可忽略不計。4種核苷酸對Mo-Zn SANs的類POD 活性增強的程度不同，導(dǎo)致氧化TMB 的顯色程度不同，因而可以通過比色法分辨出GTP。G、GMP、GDP 與GTP 在結(jié)構(gòu)上高度相似，僅磷酸基團數(shù)量不同。考察了上述4 種分子對Mo-Zn SANs 的類POD活性的影響，由圖3C和3D可見，加入GTP的體系的A652 nm 值最大，說明GTP對Mo-Zn SANs的類POD活性的增強能力最強；加入G的體系的A652 nm 與對照組類似，說明G對Mo-Zn SANs的POD活性影響可忽略不計；加入GMP 的體系的A652 nm 略增，說明GMP 對Mo-Zn SANs 的類POD 活性的增強能力較弱；加入GDP的體系的A652 nm 高于GMP體系，表明GDP對Mo-Zn SANs的類POD活性的增強能力較強，但是其類酶活性增強效果僅約是GTP的1/2，根據(jù)對Mo-Zn SANs的類POD活性增強程度的差異，可將兩者區(qū)分開。因此，基于GTP及其類似物對Mo-Zn SANs催化活性的不同影響，可建立GTP的檢測方法。

2.3 GTP 增強Mo-Zn SANs 的類POD 活性的可能機理及檢測GTP 的可行性驗證

相較而言， Mo（Ⅵ）離子攜帶較多的正電荷， Zn（Ⅱ）離子有較強的路易斯酸性質(zhì)和靈活的配位數(shù)，在與陰離子結(jié)合方面具有優(yōu)勢[21]。如圖4A 所示，加入GTP 后， Mo SANs、Zn SANs 和Mo-Zn SANs 三個體系的A652 nm 均有所升高，表明GTP 與Zn（Ⅱ）和Mo（Ⅵ）離子均可發(fā)生相互作用，并增強其類POD 活性；由于Mo（Ⅵ）和Zn（Ⅱ）離子之間存在協(xié)同效應(yīng)， GTP 對Mo-Zn SANs 類POD 活性的增強效果最顯著。GTP 與Zn（Ⅱ）和Mo（Ⅵ）離子可能通過G 堿基的N2 位點結(jié)合，其中N 原子可以提供孤對電子， Zn（Ⅱ）和Mo（Ⅵ）離子具有可接受孤對電子的空軌道，通過孤對電子相互作用而結(jié)合[22-23]。同時，金屬離子與帶負(fù)電的磷酸基團之間也存在靜電相互作用[1，24-25]，促進了GTP 與Zn（Ⅱ）和Mo（Ⅵ）離子的有效配位結(jié)合[26]。在GTP 與Mo（Ⅵ）和Zn（Ⅱ）離子之間的相互作用下，形成了新的絡(luò)合物，該絡(luò)合物由于存在帶負(fù)電荷的磷酸基團，增加了對底物TMB 的親和力，提高了TMB 的氧化效率。其它核苷酸與Zn（Ⅱ）的不同反應(yīng)歸因于核苷酸堿基的不同化學(xué)結(jié)構(gòu)以及核苷酸與金屬離子之間的不同結(jié)合作用。在鳥嘌呤、腺嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶和尿嘧啶5 種堿基中，鳥嘌呤具有最大的還原電位，因此是最易給出電子的供體[27]，在配位時具有優(yōu)勢，與ATP 相比， GTP 對Mo-Zn SANs 的類POD 活性的影響更顯著。CTP 和UTP 可能由于堿基中的N 原子數(shù)少[28]，與金屬離子相互作用弱，對Mo-Zn SANs 的類POD 活性影響不大。核苷酸中的磷酸基團數(shù)目與所帶負(fù)電荷數(shù)目密切相關(guān)，負(fù)電荷越多，越有利于發(fā)生配位相互作用以及增加對底物TMB 的親和力。綜上， GTP 及其類似物對Mo-Zn SANs 的類POD 活性增強效果有以下趨勢：GTPgt;GDPgt;GMPgt;G。

GTP 可與Mo-Zn SANs 發(fā)生配位反應(yīng)，改變Mo-Zn SANs 的表面性質(zhì)，從而提高了GTP 修飾的Mo-Zn SANs 對底物TMB 的親和力，加快TMB 氧化的速度。分別加入0、5、10 和20 μmol/L GTP，經(jīng)過孵育和反應(yīng)后， TMB 的氧化產(chǎn)物的A652 nm 隨著加入的GTP 濃度增加而增大（圖4B）。因此，可以利用GTP 對Mo-Zn SANs的類POD 活性的增強作用，增強底物TMB 的顯色程度，構(gòu)建用于GTP檢測的比色傳感器。

2.4 比色反應(yīng)條件的優(yōu)化

基于GTP 對Mo-Zn SANs 的類POD 活性的影響，建立了GTP 的比色檢測方法。以A/A0 （A/A0 定義為SANs+H2O2+TMB 體系加入（A）與不加入（A0）GTP 時體系的A652 nm 的比值）為指標(biāo)，考察了pH 值、溫度、TMB 濃度、Mo-Zn SANs 用量、GTP 與Mo-Zn SANs 的孵育時間以及反應(yīng)時間對方法檢測性能的影響。如圖5A 所示，加入pH 4.0 的緩沖溶液時， Mo-Zn SANs 的A/A0 最高，此時體系的pH=4.11，表明在該pH 值下， GTP 對Mo-Zn SANs 的類POD 活性增強作用最顯著。隨著溫度升高， A/A0 先升高后降低，40 ℃時A/A0 達(dá)到最高值（圖5B），因而選擇40 ℃作為后續(xù)的反應(yīng)溫度。如圖5C 所示， Mo-Zn SANs 濃度為30 μg/mL 時， A/A0 最高。對TMB 濃度進行優(yōu)化，隨著TMB 濃度增加， Mo-Zn SANs 以及加入GTP 后的反應(yīng)體系催化反應(yīng)速率均加快，但相較于Mo-Zn SANs 體系，加入GTP 后的體系氧化TMB 的速率更快，GTP 的增強效果更顯著。TMB 濃度超過2.5 mmol/L 后， A/A0 出現(xiàn)下降的趨勢，所以選擇2.5 mmol/L TMB用于后續(xù)實驗（圖5D）。對GTP 與Mo-Zn SANs 的孵育時間進行優(yōu)化，由圖5E 可見，將兩者混合均勻反應(yīng)5 min 時， A/A0 接近最大值，之后趨于穩(wěn)定，因此，選擇孵育時間為5 min。最后，對反應(yīng)時間進行了優(yōu)化，如圖5F 所示，隨著反應(yīng)時間延長， A/A0 先升高后降低，反應(yīng)20 min 時， A/A0 最大，因此后續(xù)檢測反應(yīng)時間選擇為20 min。

2.5 GTP的比色檢測

在優(yōu)化的實驗條件下，采用本方法檢測不同濃度的GTP。如圖6A 所示，隨著GTP 濃度增加，體系的A652 nm 逐漸升高。如圖6B 所示，采用吸收光譜法時，在1～10 μmol/L 范圍內(nèi)， GTP 濃度與反應(yīng)體系A(chǔ)652 nm值呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，線性方程為A652 nm=0.114C+0.64（R2=0.995），檢出限為0.36 μmol/L（3σ）。本方法與文獻(xiàn)報道的GTP 檢測方法的分析性能相當(dāng)（表1），但具有簡單易行、成本低的優(yōu)勢。

采用智能手機與便攜式拍照裝置（由LED 燈、柔光板、可拆卸96 孔板和小箱體組成）作為信號輸出設(shè)備，對GTP 進行現(xiàn)場可視化檢測（圖7A）。如圖7B 中的插圖所示，隨著GTP 濃度升高，溶液的顏色逐漸加深。采用手機拍攝顏色深淺不同的溶液的照片，然后將照片導(dǎo)入配套開發(fā)的手機APP 中，通過APP 中的RGB 模式分析照片，得到每個孔中溶液的R、G 和B 值。G 值指示溶液顏色的強度，與溶液的吸光度值呈負(fù)相關(guān)，可以通過G 值與GTP 濃度的擬合關(guān)系實現(xiàn)GTP 的定量檢測。如圖7B 所示，在1～10 μmol/L 濃度范圍內(nèi)， GTP 濃度與G 值呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，線性方程為G=–3.567C+204.73（R2=0.991），檢出限為0.97 μmol/L（3σ）。為了探究此傳感器檢測GTP 的特異性，考察了與GTP 結(jié)構(gòu)相似的6 種分子（ATP、CTP、UTP、G、GMP 和GDP）對檢測GTP 的影響，結(jié)果表明，加入GTP 的體系的G 值變化遠(yuǎn)大于GTP 類似物引起的G 值變化，證實所提出的比色生物傳感器對GTP 檢測具有良好的靈敏度、特異性和抗干擾能力（圖7C）。值得注意的是，選擇性實驗條件和探究GTP 及其類似物對Mo-ZnSANs 的類POD 活性影響的實驗條件不同，所以在GTP 及其類似物對Mo-Zn SANs 的類POD 活性影響程度方面存在差異。

2.6 實際樣品檢測

采用此傳感策略檢測人血清樣品中的GTP，以考察制備的傳感器的實用性。將人血清樣品稀釋100 倍，加入不同濃度的GTP，采用本方法進行檢測，結(jié)果如表2 所示， 3 個加標(biāo)濃度下的回收率在106.7%～110.6%之間，說明本方法用于檢測實際樣品中的GTP 具有較高的準(zhǔn)確性，在復(fù)雜生物體系中GTP 檢測方面具有應(yīng)用潛力。

3 結(jié)論

以PVA 氣凝膠為載體合成了具有類POD 活性的Mo-ZnS SANs， GTP 可增強其類POD 酶活性，基于此原理構(gòu)建了手機輔助的比色傳感器，用于檢測GTP。采用吸收光譜法時， GTP 濃度在1～10 μmol/L 范圍內(nèi)與A652 nm 呈線性關(guān)系，檢出限為0.36 μmol/L；以手機作為信號輸出設(shè)備， GTP 濃度在1～10 μmol/L范圍內(nèi)與G 值呈線性關(guān)系，檢出限為0.97 μmol/L。此傳感策略具有較高的檢測靈敏度和特異性，能以簡單的比色方法特異性檢測GTP，避免了復(fù)雜的合成修飾過程，無需使用大型儀器。本方法用于實際樣品檢測時具有較高的準(zhǔn)確性，在GTP 檢測方面具有實用價值。

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