NAC轉(zhuǎn)錄因子：參與植物諸多生命過(guò)程的調(diào)控因子

摘要 NAC（NAM、ATAF1/2、CUC2）轉(zhuǎn)錄因子家族是植物中最大的蛋白家族之一，在多種植物中均發(fā)現(xiàn)其家族成員。NAC轉(zhuǎn)錄因子（NAC transcription factors，NAC TFs）一般由保守的N端特殊的DNA結(jié)合域以及多樣的C端調(diào)控結(jié)構(gòu)域組成，其數(shù)量十分龐大且功能多種多樣，主要通過(guò)調(diào)控靶基因的表達(dá)水平參與調(diào)控諸多生命過(guò)程，進(jìn)而調(diào)控植物的次生代謝產(chǎn)物合成、生長(zhǎng)發(fā)育和應(yīng)激反應(yīng)，探究其生物學(xué)功能及分子調(diào)控機(jī)制，對(duì)改良植物農(nóng)藝性狀具有重要意義。系統(tǒng)綜述了NAC TFs的研究現(xiàn)狀、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、作用模式和進(jìn)化歷程，及其對(duì)植物生命活動(dòng)的調(diào)控包括次生生長(zhǎng)、生物合成、生物/非生物脅迫響應(yīng)、器官衰老等，旨在為改良植物農(nóng)藝性狀提供理論基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞 NAC；功能；生長(zhǎng)；脅迫；激素響應(yīng)

中圖分類號(hào) Q943.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611（2024）15-0022-08

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2024.15.005

開(kāi)放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）：

NAC Transcription Factors： Regulatory Factors Involved in Many Life Processes of Plants

ZHANG Zhao-ran，WANG Li-na，ZHU Bo-yi et al

（College of Food Science and Biology，Hebei University of Science and Technology，Shijiazhuang，Hebei 050000）

Abstract The NAC（NAM，ATAF1/2，CUC2）protein family is one of the largest protein families in plants，and its members are detected in many plants.The NAC protein family is involved in the regulation of many plant life processes as a transcriptional regulator.NAC transcription factors （NAC TFs） generally consists of a special N-terminal DNA binding domain and a variety of C-terminal transcriptional activation / inhibition regions.The number of NAC TFs is very large and their functions are diverse，which plays an important role in regulating plant life activities.Therefore，it is of great significance to explore their biological functions and molecular regulatory networks for improving plant agronomic traits.In recent years，the research on NAC TFs has been hot.This paper systematically reviewed the research status，structural characteristics，action mode and evolution process of NAC TFs，as well as its regulation of specific plant life activities including secondary growth，biosynthesis，biotic/abiotic stress，hormone response，organ senescence，etc.，and prospected its research trend.

Key words NAC;Function;Growth;Stress;Hormone response

在植物正常生命活動(dòng)中基因的有序表達(dá)是維持生命進(jìn)程的重要環(huán)節(jié)，而在基因表達(dá)中轉(zhuǎn)錄因子又是最基本的參與元件之一。NAC家族成員廣泛分布在陸生植物中，其調(diào)控作用在多種植物中均有報(bào)道。1996年，Souer等［1］在矮牽牛中發(fā)現(xiàn)第1個(gè)NAC基因NAM（no apical meristem），其參與矮牽牛頂端分生組織的發(fā)育；而后在擬南芥中發(fā)現(xiàn)ATAF1/2（arabidopsis transcription activation factor 1/2）基因和CUC2（cup-shaped cotyledon 2）基因［2］，前者編碼重要的轉(zhuǎn)錄激活因子，后者的表達(dá)產(chǎn)物可影響植物葉片的發(fā)育，以上3個(gè)基因具有不同的生物學(xué)功能，但均有相似的N端結(jié)構(gòu)域，NAC的命名即根據(jù)具有該結(jié)構(gòu)域的這3個(gè)基因的首字母而來(lái)。在隨后的研究中，NAC TFs在水稻（Oryza sativa）、小麥（Triticum aestivum）、白菜（Brassica rapa）、獼猴桃（Actinidia chinensii）、辣椒（Capsicum annuum）和花生（Triticum aestivum）［3］等多種植物中被發(fā)現(xiàn)。大量研究表明，NAC TFs參與植物諸多生命活動(dòng)。

1 NAC TFs的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

NAC蛋白家族一般由200～500個(gè)氨基酸組成，具有典型的空間結(jié)構(gòu)，由幾個(gè)α螺旋圍繞中央一個(gè)反向平行的β折疊片層組成，中央β折疊直接與DNA結(jié)合，以擬南芥中的ANAC019的三維結(jié)構(gòu)為例，3個(gè)α螺旋圍繞1個(gè)β折疊，2個(gè)ANAC019通過(guò)N端二聚體結(jié)合域形成二聚體［4］，見(jiàn)圖1。NAC TFs的N端較為保守，由150～160個(gè)氨基酸組成［5］，通常分為5個(gè)子域（A～E），與靶DNA的識(shí)別和結(jié)合十分重要。ACD 亞結(jié)構(gòu)域保守性較高，且與NAC二聚體的形成以及DNA結(jié)合等過(guò)程相關(guān)；B、E亞結(jié)構(gòu)域較其他3個(gè)子域保守性低，可能和NAC TFs的功能多樣性有關(guān)。大部分的NAC蛋白的CD結(jié)構(gòu)域中有核定位信號(hào)，引導(dǎo)NAC轉(zhuǎn)錄因子于細(xì)胞核中發(fā)揮作用。C端為轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)域，與N端相比其保守性較差，且具有多樣性，該端往往富含一些出現(xiàn)頻率很高的簡(jiǎn)單氨基酸，例如：絲氨酸、蘇氨酸、谷氨酸等［6］。其可通過(guò)調(diào)控NAC轉(zhuǎn)錄因子與靶蛋白相互作用發(fā)揮功能。研究表明，C端的基序?qū)τ谝粋€(gè)特定的NAC亞家族往往是保守的，而不同NAC亞家族的C端基序差異明顯。部分NAC蛋白的C端也有跨膜結(jié)構(gòu)，可與細(xì)胞質(zhì)膜或內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)合，稱為NAC膜結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子（NAC membranebound transcription factors，NAC MTFs）。有些NAC蛋白的N端有一個(gè)特殊的鋅指結(jié)構(gòu)域（zinc finger domain），或有2個(gè)重復(fù)串聯(lián)的N端結(jié)構(gòu)域，甚至缺乏C端結(jié)構(gòu)域［5］，還有一些NAC TFs的啟動(dòng)子上含有多個(gè)響應(yīng)激素信號(hào)和逆境脅迫的元件，表明NAC TFs受到激素影響的同時(shí)參與調(diào)控植物的逆境脅迫反應(yīng)［7］。

2 NAC TFs的系統(tǒng)發(fā)育和分類

NAC基因家族成員幾乎存在于所有陸地植物中，從“簡(jiǎn)單”苔蘚植物到“復(fù)雜”被子植物，甚至存在于原始鏈生綠藻中。根據(jù)系統(tǒng)發(fā)育分析，NAC TFs的起源可能發(fā)生在距今約7.25億～12.00億年前的鏈狀植物（Streptophytina）的多樣進(jìn)化時(shí)期，其結(jié)構(gòu)域的中央β折疊與WRKY蛋白家族的DNA結(jié)合域有著同源的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)，因此推測(cè)其是原始真核生物的WRKY蛋白進(jìn)化而來(lái)的［8-9］。鏈狀植物包括淡水和陸生兩大部分。在大約4.70億年前，陸生苔蘚植物出現(xiàn)，為適應(yīng)陸生環(huán)境，NAC TFs家族出現(xiàn)了第一次擴(kuò)張，主要是參與調(diào)控水分傳導(dǎo)和提供機(jī)械強(qiáng)度的基因；第二次擴(kuò)張發(fā)生于1.45億年前的早白堊紀(jì)，與被子植物的進(jìn)化同步［10］。

Pereira-Santana等［11］通過(guò)對(duì)24種陸地植物中3 187個(gè)NAC蛋白進(jìn)行比較基因組分析，將這些蛋白分為6個(gè)主要類群（Ⅰ～Ⅵ組）。NAC Ⅰ組蛋白主要包括維管NAC結(jié)構(gòu)域（vascular NAC domain，VND）亞組和次生壁相關(guān)NAC結(jié)構(gòu)域蛋白（secondary wall-associated NAC domain protein，SND）亞組，主要參與最基本的生命活動(dòng)，包括細(xì)胞壁組成、生物合成、水分傳導(dǎo)和木質(zhì)部發(fā)育等。NAC Ⅱ組中的蛋白主要參與植物的生長(zhǎng)發(fā)育，例如莖尖分生組織（SAM）形成和調(diào)控子葉分離等。NAC Ⅲ組被稱為跨膜基序（transmembrane Motif，TMM）組，TMM基序受膜內(nèi)蛋白酶的水解切割調(diào)控，通常由生物和非生物脅迫信號(hào)介導(dǎo)。NAC Ⅳ組包括參與控制多個(gè)發(fā)育過(guò)程時(shí)序的蛋白，例如擬南芥開(kāi)花時(shí)間調(diào)控基因LOV1［12］和擬南芥壽命主效調(diào)控基因ANAC042［13］等。NAC Ⅴ組包含多個(gè)參與應(yīng)激反應(yīng)和衰老過(guò)程的蛋白成員。NAC Ⅵ組包括多種含有被子植物特異性序列的NAC TFs。隨著植物生存的需要，NAC TFs數(shù)量不斷擴(kuò)增且功能趨于多樣化。

3 植物NAC家族的功能研究

NAC家族具有時(shí)間特異性，在植物不同發(fā)育時(shí)期和多種環(huán)境因素誘導(dǎo)下，激活特定基因的表達(dá)，發(fā)揮生物學(xué)功能。NAC蛋白家族數(shù)量眾多且功能各異，在植物生長(zhǎng)、激素調(diào)節(jié)、響應(yīng)外界環(huán)境脅迫等基本生命活動(dòng)中發(fā)揮作用。隨著對(duì)植物基因組的深入研究，越來(lái)越多的NAC TFs被發(fā)現(xiàn)（表1）。不同NAC TFs在植物系統(tǒng)中的作用見(jiàn)圖2。

3.1 參與植物的次生生長(zhǎng)

在植物的生活史中，次生生長(zhǎng)是一重要的生命活動(dòng)，細(xì)胞壁次生加厚、木質(zhì)化程度增加，幫助植物抵御機(jī)械損傷的同時(shí)控制水分散失，次生維管組織發(fā)育增強(qiáng)了植物的養(yǎng)分運(yùn)輸和機(jī)械支撐，尤其是一些木本喬木的次生生長(zhǎng)，對(duì)人們的生產(chǎn)生活有重要意義。在NAC TFs中有很多成員參與次生生長(zhǎng)過(guò)程，在擬南芥中NAC次生壁加厚促進(jìn)因子（NAC secondary wall thickening promoting factor，NST）、SND、VND被發(fā)現(xiàn)共同調(diào)控?cái)M南芥次生生長(zhǎng)過(guò)程，NST1/2參與花藥藥室內(nèi)壁的次生加厚，SND亞組中SND1參與維管組織中次生壁發(fā)育，并調(diào)控其他SNDs的表達(dá)，SND2/3參與纖維細(xì)胞次生壁發(fā)育，VND1～7被證實(shí)影響次生木質(zhì)部發(fā)育以及導(dǎo)管的形成［36-37］。Zhong等［38］在擬南芥中鑒定出1個(gè)NAC基因ANAC099，其表達(dá)產(chǎn)物稱為次生壁相關(guān)NAC結(jié)構(gòu)域蛋白5（SND5），ANAC099在木質(zhì)部導(dǎo)管中特異表達(dá)，正調(diào)控?cái)M南芥次生壁合成，同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)SND5及其同源物SND4（ANAC075的表達(dá)產(chǎn)物）在次生壁形成細(xì)胞特異表達(dá)，如果抑制其功能，植物的次生壁增厚明顯被抑制，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)SND2/3/4/5通過(guò)結(jié)合次生壁NAC結(jié)合元件（secondary wall NAC binding elements，SNBEs）調(diào)控靶基因表達(dá)，SND2/3與次生壁NAC主開(kāi)關(guān)（secondary wall NAC master switch，SWNs）MYB46 / MYB83結(jié)合而后激活下游次生壁相關(guān)基因的表達(dá)，MYB46 / MYB83已經(jīng)被證實(shí)能夠誘導(dǎo)植物次生壁纖維素、木聚糖和木質(zhì)素的積累。白樺BpNAC5參與調(diào)控次生壁的合成，BpNAC5過(guò)表達(dá)植株的最終株高高于野生型（WT），且其纖維素含量、木質(zhì)素含量明顯高于野生型，而半纖維素含量低于野生型，說(shuō)明BpNAC5基因正向調(diào)控植物次生壁的生長(zhǎng)以及組分的合成［25］。2021年Kim等［27］利用RNA測(cè)序（RNA sequencing，RNA-seq）和Pac Bio SMRT等測(cè)序技術(shù)對(duì)赤松維管組織進(jìn)行特異性轉(zhuǎn)錄組分析，從62個(gè)NAC家族成員中鑒定了7個(gè)在木質(zhì)部發(fā)育組織中高表達(dá)的PdeNAC基因，并證明了4個(gè)與VND（vascular-related NAC domain）、NST和SND4/ANAC075同源的PdeNAC基因（PdeNAC2、PdeNAC9、PdeNAC38、PdeNAC41）均可促進(jìn)木質(zhì)部導(dǎo)管細(xì)胞的發(fā)育。

3.2 調(diào)控植物根的生長(zhǎng)

NAC家族在調(diào)控植物根的生長(zhǎng)發(fā)育中起到關(guān)鍵作用。在擬南芥中E2啟動(dòng)子結(jié)合因子（E2 promoter-binding factors，E2Fs）是調(diào)控細(xì)胞分裂、DNA修復(fù)和細(xì)胞分化的重要轉(zhuǎn)錄因子［39］。E2啟動(dòng)子結(jié)合因子a（E2Fa）已被證明通過(guò)控制G1/S細(xì)胞周期轉(zhuǎn)換來(lái)調(diào)節(jié)根的生長(zhǎng)。擬南芥NAC1直接作用于E2Fa的啟動(dòng)子從而抑制E2Fa的表達(dá)，進(jìn)而通過(guò)調(diào)控核內(nèi)周期來(lái)控制根分生組織細(xì)胞分裂，促進(jìn)根部生長(zhǎng)。nac1突變體主根發(fā)育明顯不良，根尖分生組織萎縮，分生組織細(xì)胞數(shù)量減少，而NAC1過(guò)表達(dá)株系主根顯著長(zhǎng)于WT，根尖分生組織增大，分生組織細(xì)胞數(shù)量增加，同時(shí)發(fā)現(xiàn)NAC1過(guò)表達(dá)株系中E2Fa表達(dá)下調(diào)［40］。OsNAC2在調(diào)控水稻根系和節(jié)間生長(zhǎng)中起到重要作用，OsNAC2上調(diào)與生長(zhǎng)素（IAA）失活相關(guān)基因（GH3.6和GH3.8）的表達(dá)，下調(diào)生長(zhǎng)素（IAA）反應(yīng)基因（OsARF25）和細(xì)胞分裂素（CTK）氧化酶基因（OsCKX4）的表達(dá)，從而增強(qiáng)細(xì)胞分裂素應(yīng)答，但削弱根系生長(zhǎng)中的生長(zhǎng)素應(yīng)答，負(fù)調(diào)控根系生長(zhǎng)［41］。Xu［42］通過(guò)篩選擬南芥NAC蛋白亞家族Ⅲ，發(fā)現(xiàn)了核定位的受硝酸鹽誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄激活因子基因NAC056，NAC056可促進(jìn)側(cè)根生長(zhǎng)并增強(qiáng)其在硝酸鹽缺乏脅迫時(shí)的耐受性。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，NAC056調(diào)控NO3-同化所需基因的表達(dá)，直接靶向結(jié)合硝酸鹽同化關(guān)鍵基因NIA1的啟動(dòng)子促進(jìn)其表達(dá)，NIA1編碼硝酸還原酶，同時(shí)正調(diào)控?cái)M南芥?zhèn)雀陌l(fā)育。在高硝態(tài)氮環(huán)境中，NAC056促進(jìn)了硝態(tài)氮同化，進(jìn)而促進(jìn)了根系生長(zhǎng)。小麥TaNAC2-5A同樣受硝酸鹽誘導(dǎo)表達(dá)，染色質(zhì)免疫共沉淀試驗(yàn)表明，TaNAC2-5A可以直接結(jié)合到編碼硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白和谷氨酰胺合成酶基因的啟動(dòng)子區(qū)域，在小麥中過(guò)表達(dá)TaNAC2-5A促進(jìn)了根系生長(zhǎng)和硝態(tài)氮內(nèi)流速［43］。2019年Yang等［44］利用擬南芥過(guò)表達(dá)載體研究大豆NAC基因GmNAC109的功能，序列分析表明，GmNAC109與調(diào)控生物和非生物脅迫響應(yīng)的ATAF1A高度同源。過(guò)表達(dá)GmNAC109可以提高非生物脅迫耐受性并促進(jìn)側(cè)根的形成。之前的研究發(fā)現(xiàn)，擬南芥中異位表達(dá)大豆GmNAC20，GmNAC20通過(guò)調(diào)控DREB/CBF-COR、生長(zhǎng)素信號(hào)通路，提高轉(zhuǎn)基因擬南芥的耐鹽性和抗凍性，并誘導(dǎo)側(cè)根的形成［45］。Yarra等［46］發(fā)現(xiàn)，在水稻中過(guò)表達(dá)GmNAC20，可顯著提高非生物脅迫響應(yīng)相關(guān)基因（OsDREB1A、OsDREB1B、OsDREB1C、OsICE1、OsTPP1、OsLEA3、OsP5CS、SNAC1）的表達(dá)水平，增強(qiáng)其耐鹽性和耐寒性；同時(shí)也提高了生長(zhǎng)素相關(guān)基因（OsIAA11、OsIAA13、OsAUX1）的表達(dá)，使轉(zhuǎn)基因水稻側(cè)根數(shù)量明顯增加。

3.3 參與調(diào)控非生物脅迫

低溫、干旱、鹽等非生物脅迫會(huì)影響植物的生長(zhǎng)發(fā)育，甚至?xí)斐芍参锼劳?。NAC TFs在脅迫環(huán)境下對(duì)相關(guān)基因表達(dá)的調(diào)控，對(duì)植物在非生物脅迫響應(yīng)過(guò)程中有重要的作用。

3.3.1 NAC TFs對(duì)干旱脅迫的響應(yīng)。

水分是植物維持正常生命活動(dòng)的基本要素之一，在干旱脅迫下植物細(xì)胞原生質(zhì)體脫水進(jìn)而影響諸多生理代謝進(jìn)程，如葉綠體對(duì)光能的吸收和轉(zhuǎn)化能力減弱導(dǎo)致光合速率減慢、產(chǎn)生活性氧自由基（ROS）破壞抗氧化系統(tǒng)和細(xì)胞膜的完整性，影響植物正常生理代謝。植物為應(yīng)對(duì)干旱脅迫，進(jìn)化出多種防御機(jī)制，如氣孔關(guān)閉降低蒸騰作用以減少水分的散失；積累親水性強(qiáng)的氨基酸、蛋白質(zhì)和無(wú)機(jī)物，加大胞質(zhì)濃度鎖住水分；產(chǎn)生復(fù)雜的防御機(jī)制例如抗氧化酶系統(tǒng)（antioxidant enzyme system）包括超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）和過(guò)氧化物酶（POD）在內(nèi)的幾種酶來(lái)清除ROS帶來(lái)的氧化損傷［31］；在植物激素方面，脫落酸（ABA）和乙烯（ETH）在響應(yīng)干旱脅迫過(guò)程中關(guān)鍵作用，ABA參與調(diào)節(jié)氣孔開(kāi)閉、保衛(wèi)細(xì)胞活動(dòng)、誘導(dǎo)干旱脅迫相關(guān)基因表達(dá)［47］，ETH會(huì)影響其他內(nèi)源激素生長(zhǎng)素（IAA）、赤霉素（GA）、脫落酸（ABA）的生物合成，同時(shí)ETH會(huì)影響抗氧化酶系統(tǒng)和滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)，對(duì)植物抗旱性產(chǎn)生影響［48］。DREB、bZIP、MYB、NAC等轉(zhuǎn)錄因子家族參與植物干旱脅迫，通過(guò)調(diào)控靶基因表達(dá)響應(yīng)干旱脅迫應(yīng)答［49］，近年來(lái)越來(lái)越多的NAC TFs被證實(shí)與植物干旱脅迫相關(guān)。李兆偉等［50］對(duì)基因編輯敲除突變體osnac2d進(jìn)行干旱脅迫，發(fā)現(xiàn)其根系與幼苗生長(zhǎng)受到抑制、生物量積累減少，而同等干旱脅迫條件下野生型水稻的根系、幼苗生長(zhǎng)基本正常，OsNAC2d表達(dá)量隨干旱脅迫程度而增加，說(shuō)明OsNAC2d在水稻干旱脅迫響應(yīng)中具有正向調(diào)節(jié)作用。還有報(bào)道指出水稻OsNAC1［51］調(diào)控葉片氣孔關(guān)閉，以減少葉片細(xì)胞的水分丟失。Li等［31］發(fā)現(xiàn)，煙草NAC基因家族基因NtNAC053的啟動(dòng)子區(qū)具有多個(gè)逆境響應(yīng)元件，可被外源ABA誘導(dǎo)表達(dá)。在鹽和干旱脅迫下，NtNAC053過(guò)表達(dá)株系相比于野生型具有較高的 SOD、CAT和POD活性，來(lái)清除氧化自由基（ROS）帶來(lái)的影響，同時(shí)過(guò)表達(dá)株系中與干旱和高鹽脅迫相關(guān)的基因NtCOR15A、NtRAB18、NtDREB1A、NtERF5、NtKAT2、NtERD11的表達(dá)量顯著上調(diào)，通過(guò)激發(fā)下游脅迫響應(yīng)基因，賦予煙草干旱和鹽脅迫耐受性。Yang等［52］在研究大豆的抗逆性中發(fā)現(xiàn)，在干旱脅迫下，GmNAC12表達(dá)量顯著上調(diào)10倍以上，GmNAC12過(guò)表達(dá)株系的存活率比野生型提高了57%以上，而GmNAC12敲除株系的存活率至少降低了46%，表明GmNAC12在調(diào)控大豆耐旱性方面具有積極作用。Hu等［53］在花椒NAC家族抗逆性的研究中發(fā)現(xiàn)，ZbNAC007、ZbNAC018、ZbNAC047、ZbNAC072、ZbNAC079是花椒抗旱的關(guān)鍵NAC基因。茶樹(shù)CsNAC28在所有器官中組成型表達(dá)，對(duì)ABA處理和干旱脅迫表現(xiàn)出顯著的響應(yīng)。擬南過(guò)表達(dá)CsNAC28株系顯著提高了對(duì)ABA處理的敏感性，ROS積累減少，在干旱條件下，CsNAC28過(guò)表達(dá)株系中ABA途徑相關(guān)基因和干旱脅迫誘導(dǎo)基因的表達(dá)量均高于野生型［32］。

3.3.2 NAC TFs對(duì)鹽脅迫的響應(yīng)。

土地鹽堿化會(huì)破壞植物細(xì)胞離子和滲透平衡，在鹽脅迫下過(guò)量的Na+進(jìn)入細(xì)胞導(dǎo)致Na+/K+失衡，破壞細(xì)胞膜的靜息電位，導(dǎo)致代謝紊亂和離子毒性［54］；在高鹽中，植物根細(xì)胞的水勢(shì)高于外部環(huán)境，水勢(shì)差不能用于吸水，吸水量低于蒸騰量，導(dǎo)致生理干旱以及ROS積累。為應(yīng)對(duì)鹽脅迫損傷，植物可以通過(guò)積累滲透調(diào)節(jié)劑、調(diào)節(jié)Na+的轉(zhuǎn)運(yùn)、通過(guò)氧化防御機(jī)制消除ROS以減少氧化損傷等方式應(yīng)對(duì)鹽脅迫損傷［55］。轉(zhuǎn)錄因子可以同時(shí)調(diào)控多個(gè)下游脅迫響應(yīng)基因，激活植物的耐鹽反應(yīng)，減少或消除鹽脅迫造成的損害［56］。Zhao等［57］在對(duì)咖啡黃葵NAC家族的研究中，利用病毒誘導(dǎo)的基因沉默（virus induced gene silencing，VIGS）技術(shù)降低AeNAC83的表達(dá)量，增強(qiáng)了植株對(duì)鹽脅迫的敏感性，此外鹽脅迫下過(guò)表達(dá)AeNAC83植株中苯丙素和類黃酮生物合成途徑的相關(guān)基因表達(dá)量相比野生型顯著上調(diào)，苯丙烷途徑產(chǎn)生木質(zhì)素、類黃酮和其他次生代謝產(chǎn)物，有助于植物的防御和生長(zhǎng)；黃酮類化合物能夠減少植物組織中的活性氧。結(jié)果表明，過(guò)表達(dá)AeNAC83增強(qiáng)了對(duì)鹽脅迫的耐受性。在水稻抗逆性的研究中許多NAC TFs已經(jīng)被證實(shí)與抗鹽性相關(guān)，如SNAC2、OsNAC6、OsNAC5、OsNAC10等［49，58-61］。2016年Hong等［62］在水稻中鑒定了一個(gè)新的逆境響應(yīng)NAC基因OsNAC022，研究發(fā)現(xiàn)OsNAC022的表達(dá)受干旱、高鹽和ABA的誘導(dǎo)。OsNAC022表達(dá)株系相比野生型失水率和蒸騰速率降低，在根和莖中積累更少的Na+，氣孔開(kāi)度減小，脯氨酸和可溶性糖含量增加，表現(xiàn)出更強(qiáng)的抗旱性與抗鹽性。同時(shí)發(fā)現(xiàn)鹽脅迫響應(yīng)基因（OsRAB21、OsLEA3、OsP5CS1）在OsNAC022過(guò)表達(dá)水稻中上調(diào)表達(dá)。Wang等［63］發(fā)現(xiàn)，StNAC053過(guò)表達(dá)擬南芥株系中COR15A、DREB1A、ERD11、RAB18、ERF5、KAT2等多個(gè)鹽、干旱脅迫相關(guān)基因的表達(dá)量較野生型顯著上調(diào)，對(duì)鹽和干旱的耐受性顯著提高。之前的研究表明，在植物中施加外源硫化氫（H2S）可以顯著增強(qiáng)植物對(duì)干旱、高鹽等非生物脅迫的耐受性［64-65］。Sun等［66］在水稻耐鹽品種Sea Rice 86中鑒定了OsNACL35的功能，OsNACL35的表達(dá)受鹽脅迫的誘導(dǎo)顯著上調(diào)，OsNACL35促進(jìn)H2S生物合成基因OsDCD1的表達(dá)，導(dǎo)致H2S含量增加，減輕了高鹽對(duì)水稻的毒害作用，從而增強(qiáng)水稻的抗鹽能力。GmNAC06在鹽脅迫響應(yīng)中發(fā)揮的作用，GmNAC06表達(dá)上調(diào)，誘導(dǎo)鹽脅迫響應(yīng)基因GmUBC2和GmHKT1表達(dá)，GmUBC2調(diào)節(jié)脯氨酸、甘氨酸和甜菜堿的積累，同時(shí)激活氧化應(yīng)激反應(yīng)，GmHKT1通過(guò)調(diào)節(jié)Na+和K+的轉(zhuǎn)運(yùn)來(lái)維持離子穩(wěn)態(tài)和滲透平衡，保證了鹽脅迫下根系能夠正常生長(zhǎng)，提高了植株的耐鹽性［67］。

3.3.3 NAC TFs對(duì)低溫脅迫的響應(yīng)。

低溫脅迫是植物生命活動(dòng)中常見(jiàn)的逆境脅迫。在低溫環(huán)境下，膜結(jié)構(gòu)被破壞，植物生理代謝活動(dòng)減弱，從而影響植物正常生理功能。植物在適應(yīng)寒冷的過(guò)程中進(jìn)化出很多機(jī)制，許多植物中都被發(fā)現(xiàn)存在冷脅迫相關(guān)信號(hào)通路和冷反應(yīng)基因（cold-regulated，COR）［68］。研究發(fā)現(xiàn)，許多NAC TFs參與植物冷脅迫響應(yīng)。茶樹(shù)CsNAC1和CsNAC2在高溫（38 ℃）和低溫（4 ℃）下存在顯著表達(dá)差異，暗示茶樹(shù)NAC家族參與溫度脅迫響應(yīng)［69］。香蕉MaNAC1的表達(dá)受低溫的誘導(dǎo)，MaNAC1通過(guò)參與ICE1-CBF（inducer of CBF expression1-C-repeat binding factor）信號(hào)通路互作來(lái)調(diào)控香蕉的低溫脅迫應(yīng)答［70］。2016年，Zhao等［71］在芒果中鑒定了MlNAC9的功能，發(fā)現(xiàn)過(guò)表達(dá)MlNAC9的轉(zhuǎn)基因擬南芥對(duì)干旱和冷脅迫的耐受性增強(qiáng)。為了深入了解MlNAC9在耐冷脅迫中的作用機(jī)制，對(duì)MlNAC9過(guò)表達(dá)植株進(jìn)行差異表達(dá)基因分析，檢測(cè)到6個(gè)冷脅迫響應(yīng)相關(guān)基因（COR15、DREB1A、ERD11、ERF5、RAB18、RD29A）表達(dá)上調(diào)，證明了MlNAC9響應(yīng)植物冷脅迫。Hou等［72］利用VIGS技術(shù)在辣椒植株中沉默CaNAC064，發(fā)現(xiàn)了沉默植株表現(xiàn)出更高的冷害指數(shù)，增強(qiáng)了對(duì)冷脅迫的敏感性；而過(guò)表達(dá)CaNAC064的擬南芥植株則有較低的冷害指數(shù)，降低了對(duì)冷脅迫的敏感性。結(jié)果表明，CaNAC064提高擬南芥對(duì)冷脅迫的耐受性。

3.4 NAC TFs對(duì)激素的響應(yīng)

在植物中，植物激素對(duì)植物的生長(zhǎng)、開(kāi)花結(jié)實(shí)、逆境脅迫、衰老死亡等具有重要的調(diào)控作用，研究發(fā)現(xiàn)，許多NAC TFs的啟動(dòng)子有激素響應(yīng)元件，例如鹽和干旱相關(guān)的NAC TFs啟動(dòng)子常常含有ABA響應(yīng)元件，表明NAC TFs調(diào)控植物生命活動(dòng)中可能受激素水平的誘導(dǎo)，同時(shí)一些NAC TFs表達(dá)水平的改變也可調(diào)控植物體內(nèi)激素的生物合成、代謝和信號(hào)傳導(dǎo)，進(jìn)而影響植物的生理表現(xiàn)。大白菜轉(zhuǎn)錄抑制因子BrNAC041受衰老/脫落酸（ABA）的誘導(dǎo)，BrNAC041通過(guò)NAC結(jié)合序列（NAC-binding sequence，NACBS）靶向結(jié)合脫落酸分解代謝基因BrCYP707A3和2個(gè)赤霉素（GAs）生物合成基因BrKAO2和BrGA20ox2的啟動(dòng)子，抑制BrCYP707A3、BrKAO2、BrGA20ox2的轉(zhuǎn)錄，解釋了白菜ABA和赤霉素（GAs）在介導(dǎo)植物發(fā)育過(guò)程中拮抗作用的分子機(jī)理［73］。番茄SlNAC4和SlNAC9通過(guò)參與ABA和乙烯代謝的下游通路來(lái)協(xié)調(diào)番茄果實(shí)成熟，SlNAC4 / 9與ABA下游受體SlPYL9互作，兩者分別與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)下游的重要基因SAPK3和SlAREB1互作，激活番茄ABA響應(yīng)信號(hào)通路，SlNAC4激活A(yù)BA代謝關(guān)鍵酶SlCYP707A1的啟動(dòng)子區(qū)，調(diào)控對(duì)ABA的響應(yīng)；除了ABA正向促進(jìn)乙烯合成外，SlNAC4還通過(guò)與乙烯合成關(guān)鍵基因SlACS2和SlACO1的編碼蛋白互作，正向激活乙烯合成下游基因SlACS8和SlACO6的表達(dá)，從而加速乙烯合成，促進(jìn)果實(shí)成熟［74］。獼猴桃AcNAC2、AcNAC3、AcNAC4通過(guò)控制AcACS1的表達(dá)水平來(lái)調(diào)節(jié)果實(shí)成熟過(guò)程中乙烯的生物合成，調(diào)控果實(shí)的成熟［75］。蓮NnNAC003、NnNAC016、NnNAC043、NnNAC045、NnNAC060、NnNAC070多個(gè)鹽脅迫相關(guān)NAC TFs響應(yīng)鹽脅迫的功能依賴ABA信號(hào)［34］。茶樹(shù)CsNAC28的表達(dá)受ABA和干旱脅迫誘導(dǎo)，CsNAC28可能作為轉(zhuǎn)錄因子作用于ABA響應(yīng)元件結(jié)合因子2 （CsABF2）的下游，CsNAC28通過(guò)調(diào)節(jié)ABA相關(guān)基因的表達(dá)來(lái)提高耐旱性［32］。BrNAC087通過(guò)與葉綠素分解代謝基因BrPPH、BrRCCR和GA失活基因BrGA2ox1的NACBS結(jié)合直接激活這些基因的表達(dá)。通過(guò)調(diào)控GA失活基因的轉(zhuǎn)錄從而降低植物內(nèi)源GA含量加速菜心葉片衰老，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，BrNAC087受到GA3的負(fù)調(diào)控，在經(jīng)過(guò)GA3處理后發(fā)現(xiàn)，GA3抑制了BrNAC087及其相關(guān)結(jié)構(gòu)基因（BrPPH、BrRCCR、BrGA2ox1）的轉(zhuǎn)錄活性，延緩了葉片衰老［76］。水稻OsNAC2負(fù)調(diào)控GA的合成，通過(guò)抑制GA合成關(guān)鍵基因OsKO2和OsKAO以及開(kāi)花時(shí)間相關(guān)基因Hd3A的表達(dá)，以及增強(qiáng)GA生物合成阻遏因子OsEATB的表達(dá)發(fā)揮作用，過(guò)表達(dá)OsNAC2植株節(jié)間和小穗變短，開(kāi)花時(shí)間延遲并且對(duì)GA3敏感性降低［77］。

3.5 參與植物抗病

近年來(lái)，NAC TFs已被證明參與植物-病原體相互作用，作為下游防御相關(guān)基因的正或負(fù)調(diào)節(jié)劑。NAC TFs參與植物激素之間的信號(hào)通路，包括水楊酸（SA）、茉莉酸（JA）、脫落酸（ABA）以調(diào)節(jié)對(duì)病原體的抵抗力［78］。小麥TaNAC069的表達(dá)受小麥銹病真菌（Puccinia triticina，Pt）的誘導(dǎo)，TaNAC069沉默植株的Pt抗性顯著降低，暗示TaNAC069增強(qiáng)小麥的Pt抗性，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)TaNAC069正調(diào)控SABP2、SPCP的表達(dá)。SABP2編碼水楊酸結(jié)合蛋白2，能激活宿主SA介導(dǎo)的對(duì)生物脅迫的防御反應(yīng)。SPCP是一種功能性衰老相關(guān)基因。綜上所述，TaNAC069通過(guò)激活PR基因（protection related gene）來(lái)增強(qiáng)小麥對(duì)Pt的抗性［79］。Wang等［80］在水稻中發(fā)現(xiàn)一個(gè)具有侵染誘導(dǎo)性的轉(zhuǎn)錄因子OsNAC096，OsNAC096的表達(dá)受稻瘟病菌、水稻白葉枯病菌、茉莉酸甲酯（MeJA）的誘導(dǎo)，經(jīng)序列分析和亞細(xì)胞定位發(fā)現(xiàn)其在細(xì)胞核中發(fā)揮作用，ONAC096基因敲除植株對(duì)稻瘟病菌和水稻白葉枯病菌的免疫能力下降，相反過(guò)表達(dá)ONAC096增強(qiáng)了水稻對(duì)這2種病原菌的免疫，根據(jù)轉(zhuǎn)錄激活試驗(yàn)和EMSA的結(jié)果，ONAC096直接結(jié)合下游靶基因OsRap2.6、OsWRKY62和PAL1的啟動(dòng)子增強(qiáng)其表達(dá)，這3個(gè)基因是已知的調(diào)節(jié)水稻免疫力的防御和信號(hào)基因［81-83］，結(jié)果表明，ONAC096正向促進(jìn)水稻對(duì)稻瘟病菌和白葉枯病菌的免疫。辣椒中的CaNAC2c抑制植株生長(zhǎng)，同時(shí)受馬鈴薯青枯菌感染（ralstonia solanacearum infection，RSI）誘導(dǎo)，RSI感染后，CaNAC2c在細(xì)胞核中與CaNAC029相互作用，通過(guò)激活茉莉酸介導(dǎo)的免疫和H2O2積累促進(jìn)對(duì)RSI的免疫［84］。番茄SlSRN1（solanum lycopersicum stress-related NAC1）受SA、JA和1-氨基環(huán)丙烷-1-羧酸（ACC）3種常見(jiàn)防御信號(hào)激素誘導(dǎo)，正調(diào)控番茄對(duì)灰芽孢桿菌（B.cinerea）和丁香假單胞菌（Pseudomonas syringae）的抗病性［85］。香蕉MaNAC5與MaWRKY1和MaWRKY2相互作用激活MaPR1-1、MaPR2、MaPR10c和MaCHIL1等PR基因的表達(dá)，提高香蕉的抗病性［86］。

3.6 調(diào)控植物葉片衰老

研究表明，NAC TFs在調(diào)控植物葉片衰老中有關(guān)鍵作用，NAP亞家族（NAC-like，activated by APETALA 3/PISTILLATA，NAP）是NAC家族中最大亞家族之一，主要參與調(diào)控植物的葉片衰老，在擬南芥葉片衰老期間AtNAP特異性表達(dá)，其過(guò)表達(dá)導(dǎo)致擬南芥早熟，而敲除突變體則表現(xiàn)為葉片衰老延遲［87］，AtNAP上調(diào)衰老相關(guān)基因SAG113的表達(dá)，SAG113促進(jìn)氣孔開(kāi)放和水分散失從而加速植物衰老［88］。之前的研究表明，甜瓜CmNAC60是擬南芥AtNAP的同源基因［89］，2019年Cao等［35］研究了CmNAC60在葉片衰老中的潛在作用，系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)顯示CmNAC60和AtNAP同屬一簇，在衰老葉片中CmNAC60的表達(dá)量明顯升高，CmNAC60過(guò)表達(dá)擬南芥株系在正常條件下生長(zhǎng)14 d后與WT相比，表現(xiàn)出早熟衰老。結(jié)果表明，CmNAC60促進(jìn)轉(zhuǎn)基因擬南芥葉片衰老。百合LoNAC29在衰老花和葉片中高表達(dá)，進(jìn)一步研究證明了LoNAC29是百合衰老過(guò)程中的關(guān)鍵調(diào)控因子，LoNAC29強(qiáng)烈誘導(dǎo)LoSAG39的啟動(dòng)子活性，LoSAG39是半胱氨酸蛋白酶，在蛋白降解中發(fā)揮作用，促進(jìn)植物衰老［90］。油菜BnaNAC46受多種脅迫和植物激素處理誘導(dǎo)表達(dá)，在衰老葉片中高表達(dá)。通過(guò)雙熒光素酶、凝膠遷移和染色質(zhì)免疫共沉淀的結(jié)果分析，BnaNAC46通過(guò)NACBS元件直接結(jié)合到與細(xì)胞程序性死亡和葉綠素降解相關(guān)基因（BnaBFN1、BnaCEP1、BnaMC9、BnaγVPE、BnaNYE1、BnaPPH）啟動(dòng)子上，上調(diào)衰老基因的表達(dá)，誘導(dǎo)過(guò)敏反應(yīng)（hypersensitive response，HR）樣細(xì)胞死亡和葉綠素降解，以加速植物衰老［91］。白菜BrNAC029正調(diào)控葉綠素分解代謝基因BrPAO和BrSGR2、細(xì)胞分裂素氧化酶基因BrCKX1和衰老標(biāo)記基因BrSAG113的表達(dá)加速植物葉片衰老，但BrNAC029的表達(dá)會(huì)被外源氯吡脲（CPPU）所抑制［92］。綜上所述，對(duì)植物尤其是葉菜作物中NAC TFs調(diào)控葉片衰老的研究對(duì)食物保鮮和采后品質(zhì)存在潛在價(jià)值。

4 結(jié)論與展望

NAC蛋白家族成員眾多，功能各異，在植物生長(zhǎng)發(fā)育、激素響應(yīng)、抵御環(huán)境脅迫等方面都有著關(guān)鍵調(diào)控作用。外界環(huán)境或植物自身信號(hào)可調(diào)控相關(guān)NAC TFs的表達(dá)影響下游靶基因表達(dá)，通過(guò)激活或抑制相關(guān)信號(hào)通路，調(diào)節(jié)植物自身生命活動(dòng)。綜上，NAC轉(zhuǎn)錄因子的深入研究對(duì)于植物分子育種具有重要意義。

目前，對(duì)于NAC TFs功能的研究大多通過(guò)模式植物例如轉(zhuǎn)基因擬南芥、轉(zhuǎn)基因煙草對(duì)其進(jìn)行初步的基因功能鑒定，關(guān)于如何參與調(diào)控植物重要生命活動(dòng)的具體機(jī)制和下游調(diào)控網(wǎng)絡(luò)還有待探索。隨著生物技術(shù)的高速發(fā)展，對(duì)NAC TFs的研究可以從以下幾個(gè)方面展開(kāi)：①隨著高通量技術(shù)的出現(xiàn)，多組學(xué)分析應(yīng)運(yùn)而生，可以從基因組、轉(zhuǎn)錄組、蛋白質(zhì)組對(duì)復(fù)雜的基因、調(diào)控因子、蛋白等不同層面之間的信息進(jìn)行整合，構(gòu)建調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，NAC TFs對(duì)植物的調(diào)控作用涉及大量蛋白-基因、蛋白-蛋白的相互作用，單一組學(xué)對(duì)NAC TFs的研究具有局限性，利用多組學(xué)技術(shù)分析研究它們的信號(hào)網(wǎng)絡(luò)對(duì)闡明NAC TFs的功能十分重要。②鑒于NAC TFs亞家族之間不同的功能關(guān)系，利用生物信息學(xué)技術(shù)和已有數(shù)據(jù)庫(kù)分析NAC TFs結(jié)構(gòu)和功能之間的聯(lián)系尤為必要。③NAC TFs的研究大多數(shù)在擬南芥和水稻2種模式植物中展開(kāi)，對(duì)于其他重要糧食經(jīng)濟(jì)作物中NAC TFs的研究相對(duì)匱乏，以往的研究表明NAC TFs在植物生長(zhǎng)、脅迫響應(yīng)方面有顯著作用，研究糧食經(jīng)濟(jì)作物中NAC TFs的功能對(duì)改良農(nóng)藝品質(zhì)具有廣闊前景。基因編輯、轉(zhuǎn)錄激活分析、Co-IP和ChIP等技術(shù)的發(fā)展，極大地幫助了對(duì)植物中NAC TFs的功能和機(jī)制的研究，利用基因工程手段調(diào)控NAC相關(guān)基因表達(dá)水平或蛋白活性，定向改良植物，特別是農(nóng)作物的農(nóng)藝性狀以獲得優(yōu)良新品種已成為可能，因此對(duì)NAC TFs的研究在農(nóng)作物育種中具有巨大的潛在價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

［1］

SOUER E，VAN HOUWELINGEN A，KLOOS D，et al.The no apical meristem gene of petunia is required for pattern formation in embryos and flowers and is expressed at meristem and primordia boundaries［J］.Cell，1996，85（2）：159-170.

［2］ AIDA M，ISHIDA T，F(xiàn)UKAKI H，et al.Genes involved in organ separation in Arabidopsis：An analysis of the cup-shaped cotyledon mutant［J］.The plant cell，1997，9（6）：841-857.

［3］ 榮歡，任師杰，汪梓坪，等.植物NAC轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)及功能研究進(jìn)展［J］.江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2020，48（18）：44-53.

［4］ WELNER D H，LINDEMOSE S，GROSSMANN J G，et al.DNA binding by the plant-specific NAC transcription factors in crystal and solution：A firm link to WRKY and GCM transcription factors［J］.The biochemical journal，2012，444（3）：395-404.

［5］ 趙才美，黃興奇，殷富有，等.水稻NAC轉(zhuǎn)錄因子家族的研究進(jìn)展［J］.植物科學(xué)學(xué)報(bào)，2020，38（2）：278-287.

［6］ OLSEN A N，ERNST H A，LEGGIO L L，et al.NAC transcription factors：Structurally distinct，functionally diverse［J］.Trends in plant science，2005，10（2）：79-87.

［7］ 王芳，孫立嬌，趙曉宇，等.植物NAC轉(zhuǎn)錄因子的研究進(jìn)展［J］.生物技術(shù)通報(bào)，2019，35（4）：88-93.

［8］ ZHU T T，NEVO E，SUN D F，et al.Phylogenetic analyses unravel the evolutionary history of NAC proteins in plants［J］.Evolution，2012，66（6）： 1833-1848.

［9］ TIMME R E，BACHVAROFF T R，DELWICHE C F.Broad phylogenomic sampling and the sister lineage of land plants［J］.PLoS One，2012，7（1）：1-23.

［10］ MATHEW I E，AGARWAL P.May the fittest protein evolve： Favoring the plant-specific origin and expansion of NAC transcription factors［J］.BioEssays，2018，40（8）：19-38.

［11］ PEREIRA-SANTANA A，ALCARAZ L D，CASTAO E，et al.Comparative genomics of NAC transcriptional factors in angiosperms： Implications for the adaptation and diversification of flowering plants［J］.PLoS One，2015，10（11）：1-21.

［12］ YOO S Y，KIM Y，KIM S Y，et al.Control of flowering time and cold response by a NAC-domain protein in Arabidopsis［J］.PLoS One，2007，2（7）：1-10.

［13］ WU A H，ALLU A D，GARAPATI P，et al.JUNGBRUNNEN1，a reactive oxygen species-responsive NAC transcription factor，regulates longevity in Arabidopsis［J］.The plant cell，2012，24（2）：482-506.

［14］ 周士釗，羅婷，劉莉.苔蘚NAC基因家族的生物信息學(xué)分析［J］.基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)，2022，41（4）：822-833.

［15］ 詹鵬，鐘祖昌，向妮艷，等.紅花NAC基因家族鑒定及干旱脅迫響應(yīng)分析［J］.中國(guó)中藥雜志，2022，47（20）：5520-5529.

［16］ NURUZZAMAN M，MANIMEKALAI R，SHARONI A M，et al.Genome-wide analysis of NAC transcription factor family in rice［J］.Gene，2010，465（1/2）：30-44.

［17］ LI M，LIU S S，ZHANG C X，et al.Genome-wide identification and expression analysis of NAC transcription factors in Ziziphus jujuba Mill.reveal their putative regulatory effects on tissue senescence and abiotic stress responses［J］.Industrial crops & products，2021，173：1-16.

［18］ 王勇鋒，楊翠玲，冷秋麗，等.甘藍(lán)型油菜BnNAC轉(zhuǎn)錄因子鑒定與非生物脅迫響應(yīng)分析［J］.中國(guó)油料作物學(xué)報(bào)，2020，42（4）：545-553.

［19］ OOKA H，SATOH K，DOI K，et al.Comprehensive analysis of NAC family genes in Oryza sativa and Arabidopsis thaliana［J］.DNA research，2003，10（6）：239-247.

［20］ 范中奇.4個(gè)菜心NAC轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控ABA誘導(dǎo)的采后葉片衰老的機(jī)制分析［D］.廣州：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2019.

［21］ LE D T，NISHIYAMA R，WATANABE Y，et al.Genome-wide survey and expression analysis of the plant-specific NAC transcription factor family in soybean during development and dehydration stress［J］.DNA research，2011，18（4）：263-276.

［22］ HU R B，QI G，KONG Y Z，et al.Comprehensive analysis of NAC domain transcription factor gene family in Populus trichocarpa［J］.BMC plant biology，2010，10：145-168.

［23］ WANG N，ZHENG Y，XIN H P，et al.Comprehensive analysis of NAC domain transcription factor gene family in Vitis vinifera［J］.Plant cell reports，2013，32（1）：61-75.

［24］ GONG X，ZHAO L Y，SONG X F，et al.Genome-wide analyses and expression patterns under abiotic stress of NAC transcription factors in white pear （Pyrus bretschneideri）［J］.BMC plant biology，2019，19（1）：1-18.

［25］ 崔志遠(yuǎn).白樺NAC轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控次生細(xì)胞壁形成和非生物脅迫反應(yīng)的分子機(jī)制［D］.哈爾濱：東北林業(yè)大學(xué)，2015.

［26］ 亢超，郭彩華，張雪蒙，等.核桃NAC基因家族的全基因組鑒定與分析［J］.果樹(shù)學(xué)報(bào)，2021，38（9）：1444-1458.

［27］ KIM M H，TRAN T N A，CHO J S，et al.Wood transcriptome analysis of Pinus densiflora identifies genes critical for secondary cell wall formation and NAC transcription factors involved in tracheid formation［J］.Tree physiology，2021，41（7）：1289-1305.

［28］ 張璋，王毅，羅瑪妮婭，等.牛樟干旱與低溫脅迫相關(guān)NAC轉(zhuǎn)錄因子的鑒定及表達(dá)分析［J］.基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)，2022，41（2）：363-371.

［29］ 曹瑞蘭，李知青，歐陽(yáng)雯婷，等.油茶NAC基因鑒定及對(duì)干旱脅迫響應(yīng)分析［J］.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2021，43（6）：1357-1370.

［30］ 李鵬祥.花生NAC轉(zhuǎn)錄因子在干旱響應(yīng)中的作用［D］.濟(jì)南：山東師范大學(xué)，2021.

［31］ LI X X，WANG Q，GUO C，et al.NtNAC053，A novel NAC transcription factor，confers drought and salt tolerances in tobacco［J］.Frontiers in plant science，2022，13：1-14.

［32］ ZHANG X Y，LI L Y，LANG Z L，et al.Genome-wide characterization of NAC transcription factors in Camellia sinensis and the involvement of CsNAC28 in drought tolerance［J］.Frontiers in plant science，2022，13：1-17.

［33］ 陳秀玲，王傲雪，張珍珠，等.番茄NAC轉(zhuǎn)錄因子家族的鑒定及生物信息學(xué)分析［J］.植物生理學(xué)報(bào)，2014，50（4）：461-470.

［34］ ZHAO S P，JIANG T，ZHANG Y，et al.Identification of the NAC transcription factors and their function in ABA and salinity response in Nelumbo nucifera［J］.International journal of molecular sciences，2022，23（20）：12394-12410.

［35］ CAO S X，ZHANG Z B，WANG C H，et al.Identification of a novel melon transcription factor CmNAC60 as a potential regulator of leaf senescence［J］.Genes，2019，10（8）：1-17.

［36］ NAKANO Y，YAMAGUCHI M，ENDO H，et al.NAC-MYB-based transcriptional regulation of secondary cell wall biosynthesis in land plants［J］.Frontiers in plant science，2015，6：1-18.

［37］ OHTANI M，AKIYOSHI N，TAKENAKA Y，et al.Evolution of plant conducting cells：Perspectives from key regulators of vascular cell differentiation［J］.Journal of experimental botany，2017，68（1）：17-26.

［38］ ZHONG R Q，LEE C H，HAGHIGHAT M，et al.Xylem vessel-specific SND5 and its homologs regulate secondary wall biosynthesis through activating secondary wall NAC binding elements［J］.The new phytologist，2021，231（4）：1496-1509.

［39］ DE VEYLDER L，BEECKMAN T，BEEMSTER G T S，et al.Control of proliferation，endoreduplication and differentiation by the Arabidopsis E2Fa-DPa transcription factor［J］.The EMBO journal，2002，21（6）：1360-1368.

［40］ XIE C T，DING Z J.NAC1 maintains root meristem activity by repressing the transcription of E2Fa in Arabidopsis［J］.International journal of molecular sciences，2022，23（20）：1-13.

［41］ MAO C J，HE J M，LIU L N，et al.OsNAC2 integrates auxin and cytokinin pathways to modulate rice root development［J］.Plant biotechnology journal，2020，18（2）：429-442.

［42］ XU P P，MA W，HU J B，et al.The nitrate-inducible NAC transcription factor NAC056 controls nitrate assimilation and promotes lateral root growth in Arabidopsis thaliana［J］.PLoS genetics，2022，18（3）：1-23.

［43］ HE X，QU B Y，LI W J，et al.The nitrate-inducible NAC transcription factor TaNAC2-5A controls nitrate response and increases wheat yield［J］.Plant physiology，2015，169（3）：1991-2005.

［44］ YANG X F，KIM M Y，HA J M，et al.Overexpression of the soybean NAC gene GmNAC109 increases lateral root formation and abiotic stress tolerance in transgenic Arabidopsis plants［J］.Frontiers in plant science，2019，10：1-12.

［45］ HAO Y J，WEI W，SONG Q X，et al.Soybean NAC transcription factors promote abiotic stress tolerance and lateral root formation in transgenic plants［J］.The plant journal，2011，68（2）：302-313.

［46］ YARRA R，WEI W.The NAC-type transcription factor GmNAC20 improves cold，salinity tolerance，and lateral root formation in transgenic rice plants［J］.Functional & integrative genomics，2021，21（3/4）：473-487.

［47］ 李園園，陳永忠，羅秀云，等.作物響應(yīng)干旱脅迫應(yīng)答的分子機(jī)制［J］.化學(xué)與生物工程，2015，32（12）：3-8.

［48］ 韓露，韓烈保，許立新.乙烯利影響植物抗旱性研究進(jìn)展［J］.草地學(xué)報(bào)，2013，21（4）：631-636.

［49］ HU H H，YOU J，F(xiàn)ANG Y J，et al.Characterization of transcription factor gene SNAC2 conferring cold and salt tolerance in rice［J］.Plant molecular biology，2008，67（1/2）：169-181.

［50］ 李兆偉，莫祖意，孫聰穎，等.OsNAC2d基因編輯水稻突變體的創(chuàng)建及其對(duì)干旱脅迫的響應(yīng)［J］.作物學(xué)報(bào)，2023，49（2）：365-376.

［51］ HU H H，DAI M Q，YAO J L，et al.Overexpressing a NAM，ATAF，and CUC （NAC） transcription factor enhances drought resistance and salt tolerance in rice［J］.Proceedings of the national academy of sciences of the United States of America，2006，103（35）：12987-12992.

［52］ YANG C F，HUANG Y Z，LV P Y，et al.NAC transcription factor GmNAC12 improved drought stress tolerance in soybean［J］.International journal of molecular sciences，2022，23（19）：1-14.

［53］ HU H C，MA L，CHEN X，et al.Genome-wide identification of the NAC gene family in Zanthoxylum bungeanum and their transcriptional responses to drought stress［J］.International journal of molecular sciences，2022，23（9）：1-22.

［54］ YAO T，ZHANG J，XIE M，et al.Transcriptional regulation of drought response in Arabidopsis and woody plants［J］.Frontiers in plant science，2021，11：1-12.

［55］ VAN ZELM E，ZHANG Y X，TESTERINK C.Salt tolerance mechanisms of plants［J］.Annual review of plant biology，202，71：403-433.

［56］ LI M，WU Z Y，GU H，et al.AvNAC030，a NAC domain transcription factor，enhances salt stress tolerance in kiwifruit［J］.International journal of molecular sciences，2021，22（21）：1-62.

［57］ ZHAO X，WU T T，GUO S X，et al.Ectopic expression of AeNAC83，a NAC transcription factor from Abelmoschus esculentus，inhibits growth and confers tolerance to salt stress in Arabidopsis［J］.International journal of molecular sciences，2022，23（17）：1-18.

［58］ NAKASHIMA K，TRAN L S P，VAN NGYUEN D，et al.Functional analysis of a NAC-type transcription factor OsNAC6 involved in abiotic and biotic stress-responsive gene expression in rice［J］.The plant journal，2007，51（4）：617-630.

［59］ ZHENG X N，CHEN B，LU G J，et al.Overexpression of a NAC transcription factor enhances rice drought and salt tolerance［J］.Biochemical and biophysical research communications，2009，379（4）：985-989.

［60］ JEONG J S，KIM Y S，BAEK K H，et al.Root-specific expression of OsNAC10 improves drought tolerance and grain yield in rice under field drought conditions［J］.Plant physiology，2010，153（1）：185-197.

［61］ SONG S Y，CHEN Y，CHEN J，et al.Physiological mechanisms underlying OsNAC5-dependent tolerance of rice plants to abiotic stress［J］.Planta，2011，234（2）：331-345.

［62］ HONG Y B，ZHANG H J，HUANG L，et al.Overexpression of a stress-responsive NAC transcription factor gene ONAC022 improves drought and salt tolerance in rice［J］.Frontiers in plant science，2016，7：1-19.

［63］ WANG Q，GUO C ，LI Z Y，et al.Potato NAC transcription factor StNAC053 enhances salt and drought tolerance in transgenic Arabidopsis［J］.International journal of molecular sciences，2021，22（5）：2568-2568.

［64］ CHRISTOU A，MANGANARIS G A，PAPADOPOULOS I，et al.Hydrogen sulfide induces systemic tolerance to salinity and non-ionic osmotic stress in strawberry plants through modification of reactive species biosynthesis and transcriptional regulation of multiple defence pathways［J］.Journal of experimental botany，2013，64（7）：1953-1966.

［65］ THAKUR M，ANAND A.Hydrogen sulfide： An emerging signaling molecule regulating drought stress response in plants［J］.Physiologia plantarum，2021，172（2）：1227-1243.

［66］ SUN Y，SONG K Q，GUO M M，et al.A NAC transcription factor from ‘sea rice 86’ enhances salt tolerance by promoting hydrogen sulfide production in rice seedlings［J］.International journal of molecular sciences，2022，23（12）：1-20.

［67］ LI M，CHEN R，JIANG Q Y，et al.GmNAC06，a NAC domain transcription factor enhances salt stress tolerance in soybean［J］.Plant molecular biology，2021，105（3）：333-345.

［68］ 吳丹，毛東海，趙小英.植物低溫響應(yīng)的分子機(jī)制研究進(jìn)展［J］.生命科學(xué)研究，2022，26（1）：67-75.

［69］ 王永鑫，劉志薇，吳致君，等.茶樹(shù)中2個(gè)NAC轉(zhuǎn)錄因子基因的克隆及溫度脅迫的響應(yīng)［J］.西北植物學(xué)報(bào)，2015，35（11）：2148-2156.

［70］ 單偉.NAC類轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控香蕉果實(shí)誘導(dǎo)耐冷性及成熟的機(jī)制分析［D］.廣州：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2016.

［71］ ZHAO X，YANG X W，PEI S Q，et al.The Miscanthus NAC transcription factor MlNAC9 enhances abiotic stress tolerance in transgenic Arabidopsis［J］.Gene，2016，586（1）：158-169.

［72］ HOU X M，ZHANG H F，LIU S Y，et al.The NAC transcription factor CaNAC064 is a regulator of cold stress tolerance in peppers［J］.Plant science，2020，291：1-10.

［73］ FAN Z Q，TAN X L，SHAN W，et al.Involvement of BrNAC041 in ABA-GA antagonism in the leaf senescence of Chinese flowering cabbage［J］.Postharvest biology and technology，2020，168：1-10.

［74］ 33ac66be82359cd7a4de727b3d65d2dbYANG S，ZHOU J Q，WATKINS C B，et al.NAC transcription factors SNAC4 and SNAC9 synergistically regulate tomato fruit ripening by affecting expression of genes involved in ethylene and abscisic acid metabolism and signal transduction［J］.Postharvest biology and technology，2021，178：1-16.

［75］ NIEUWENHUIZEN N，CHEN X Y，PELLAN M，et al.Regulation of wound ethylene biosynthesis by NAC transcription factors in kiwifruit［J］.BMC plant biology，2021，21（1）：411-427.

［76］ FAN Z Q，WEI W，TAN X L，et al.A NAC transcription factor BrNAC087 is involved in gibberellin-delayed leaf senescence in Chinese flowering cabbage［J］.Postharvest biology and technology，2021，181：1-11.

［77］ CHEN X，LU S C，WANG Y F，et al.OsNAC2 encoding a NAC transcription factor that affects plant height through mediating the gibberellic acid pathway in rice［J］.The plant journal，2015，82（2）：302-314.

［78］ BIAN Z Y，GAO H H，WANG C Y.NAC transcription factors as positive or negative regulators during ongoing battle between pathogens and our food crops［J］.International journal of molecular sciences，2020，22（1）：1-20.

［79］ ZHANG Y J，GENG H M，CUI Z C，et al.Functional analysis of wheat NAC transcription factor，TaNAC069，in regulating resistance of wheat to leaf rust fungus［J］.Frontiers in plant science，2021，12：1-15.

［80］ WANG H，BI Y，GAO Y Z，et al.A pathogen-inducible rice NAC transcription factor ONAC096 contributes to immunity against Magnaprothe oryzae and Xanthomonas oryzae pv.oryzae by direct binding to the promoters of OsRap2.6，OsWRKY62，and OsPAL1［J］.Frontiers in plant science，2021，12：1-20.

［81］ WAMAITHA M J，YAMAMOTO R，WONG H L，et al.OsRap2.6 transcription factor contributes to rice innate immunity through its interaction with Receptor for Activated Kinase-C 1 （RACK1）［J］.Rice，2012，5（1）：1-14.

［82］ DUAN L，LIU H B，LI X H，et al.Multiple phytohormones and phytoalexins are involved in disease resistance to Magnaporthe oryzae invaded from roots in rice［J］.Physiologia plantarum，2014，152（3）：486-500.

［83］ KIM D S，HWANG B K.An important role of the pepper phenylalanine ammonia-lyase gene （PAL1） in salicylic acid-dependent signalling of the defence response to microbial pathogens［J］.Journal of experimental botany，2014，65（9）：2295-2306.

［84］ CAI W W，YANG S，WU R J，et al.Pepper NAC-type transcription factor NAC2c balances the trade-off between growth and defense responses［J］.Plant physiology，2021，186（4）：2169-2189.

［85］ LIU B，OUYANG Z G，ZHANG Y F，et al.Tomato NAC transcription factor SlSRN1 positively regulates defense response against biotic stress but negatively regulates abiotic stress response［J］.PLoS One，2014，9（7）：1-21.

［86］ SHAN W，CHEN J Y，KUANG J F，et al.Banana fruit NAC transcription factor MaNAC5 cooperates with MaWRKYs to enhance the expression of pathogenesis-related genes against Colletotrichum musae［J］.Molecular plant pathology，2016，17（3）：330-338.

［87］ KOU X H，WATKINS C B，GAN S S.Arabidopsis AtNAP regulates fruit senescence［J］.Journal of experimental botany，2012，63（17）：6139-6147.

［88］ ZHANG K W，GAN S S.An abscisic acid-AtNAP transcription factor-SAG113 protein phosphatase 2C regulatory chain for controlling dehydration in senescing Arabidopsis leaves［J］.Plant physiology，2012，158（2）：961-969.

［89］ WEI S W，GAO L W，ZHANG Y D，et al.Genome-wide investigation of the NAC transcription factor family in melon （Cucumis melo L.） and their expression analysis under salt stress［J］.Plant cell reports，2016，35（9）：1827-1839.

［90］ LUO J，LI R R，XU X T，et al.SMRT and illumina RNA sequencing and characterization of a key NAC gene LoNAC29 during the flower senescence in Lilium oriental ‘Siberia’［J］.Genes，2021，12（6）：869-887.

［91］ CUI X，ZHAO P Y，LI Y，et al.Rapeseed NAC46 positively regulates hypersensitive response-like cell death and chlorophyll degradation［J］.Environmental and experimental botany，2021，189：1-12.

［92］ LI F J，SHAN Y X，WANG H B，et al.A NAC transcriptional factor BrNAC029 is involved in cytokinin-delayed leaf senescence in postharvest Chinese flowering cabbage［J］.Food chemistry，2022，404：1-9.