神經(jīng)退行性疾病早期標(biāo)志物檢測(cè)的研究進(jìn)展

[摘要]神經(jīng)退行性疾病是一組由神經(jīng)元變性或髓鞘缺失而引起的慢性疾病。常見(jiàn)的神經(jīng)退行性疾病主要包括阿爾茨海默病、帕金森病和亨廷頓病等。神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病率與年齡相關(guān)，致殘率和致死率高，對(duì)中老年患者來(lái)說(shuō)是極其致命的。神經(jīng)退行性疾病不僅使患者飽受病痛折磨，還會(huì)無(wú)形中增加家庭和社會(huì)負(fù)擔(dān)。目前，神經(jīng)退行性疾病常通過(guò)患者的臨床表現(xiàn)予以確診，但確診時(shí)患者已發(fā)生不可逆性損傷，延誤疾病的治療。若在疾病發(fā)生輕微病理變化之前早期快速、準(zhǔn)確地發(fā)現(xiàn)疾病隱患，不僅可延緩疾病進(jìn)程，還能減輕患者的痛苦和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)?；诖耍疚膶?duì)神經(jīng)退行性疾病早期標(biāo)志物檢測(cè)的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，分析各檢測(cè)方法的優(yōu)缺點(diǎn)，為該類疾病的診斷和治療提供借鑒和幫助。

[關(guān)鍵詞]神經(jīng)退行性疾?。话柎暮Ｄ。慌两鹕?；檢測(cè)方法；早期標(biāo)志物

[中圖分類號(hào)]R319[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A[DOI]10.3969/j.issn.1673-9701.2024.21.032

神經(jīng)退行性疾病是一種與中老年人群有關(guān)的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，主要包括阿爾茨海默?。ˋlzheimer’sdisease，AD）、帕金森?。≒arkinson’sdisease，PD）和亨廷頓?。℉untingtondisease，HD）等。其中，HD是一種罕見(jiàn)的常染色體顯性遺傳病，主要由亨廷頓基因上的CAG三核苷酸重復(fù)表達(dá)，導(dǎo)致異常蛋白質(zhì)生成并堆積在腦內(nèi)，影響神經(jīng)細(xì)胞的功能，進(jìn)而導(dǎo)致一系列臨床癥狀的發(fā)生。臨床上可根據(jù)家族性譜系分析和基因檢測(cè)技術(shù)早期確診HD。在孕婦產(chǎn)前檢查時(shí)，應(yīng)用上述方法也可極大降低HD患兒的出生率，降低HD的患病率。HD的早期檢測(cè)方法特異性高、方法單一，在臨床上較為成熟。相比于HD，AD和PD的檢測(cè)方法則更為多樣。臨床上尚無(wú)治療AD和PD的特效藥，根治成為臨床治療的難題之一。為緩解疾病進(jìn)展，早期檢測(cè)成為AD和PD治療的一項(xiàng)重大舉措?，F(xiàn)階段，AD和PD的確診常通過(guò)患者的臨床表現(xiàn)進(jìn)行判斷；這易使患者錯(cuò)過(guò)最佳的治療時(shí)間。部分檢測(cè)方法價(jià)格昂貴，具有侵襲性，對(duì)家屬和患者來(lái)說(shuō)也是一個(gè)難題。因此，亟待尋找一種檢測(cè)方法，可通過(guò)疾病的早期標(biāo)志物檢測(cè)發(fā)現(xiàn)、延緩或預(yù)防疾病。本文主要分析和總結(jié)AD和PD的早期標(biāo)志物檢測(cè)方法，并對(duì)這些方法進(jìn)行比較和評(píng)估，以期為AD和PD的早期發(fā)現(xiàn)及干預(yù)治療提供幫助和參考。

1AD早期標(biāo)志物的檢測(cè)

AD是一種起病隱匿的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病。β-淀粉樣蛋白（amyloid-β，Aβ）沉積及由微管相關(guān)蛋白Tau形成的神經(jīng)元纖維纏結(jié)是AD的典型病理特征。AD的發(fā)生已影響到全球5000萬(wàn)例患者，預(yù)計(jì)到2050年AD患者將達(dá)150萬(wàn)例[1]。因此亟需醫(yī)療領(lǐng)域發(fā)現(xiàn)一種有效方法以扼制患病人數(shù)的增加，且防重于治，目前AD的早期檢測(cè)成為迫切需求。臨床上AD的檢測(cè)主要有以下方法：醫(yī)生根據(jù)患者的臨床癥狀進(jìn)行評(píng)估，這要求醫(yī)生具有豐富的臨床經(jīng)驗(yàn)；利用磁共振成像技術(shù)檢測(cè)大腦內(nèi)部結(jié)構(gòu)和功能的變化，雖然該方法具有無(wú)創(chuàng)性，圖像直觀，但這種技術(shù)不能在早期診斷；利用正電子發(fā)射斷層成像（positronemissiontomography，PET）檢測(cè)活體病灶，該方法可從分子和細(xì)胞水平進(jìn)行早期檢測(cè)，但價(jià)格昂貴，不利于大多數(shù)患者接受；通過(guò)腦脊液分析患者大腦內(nèi)的Aβ、Tau蛋白等，該方法診斷AD的敏感度及特異性較高，但腦脊液標(biāo)本不易取材。上述方法均存在一定的缺陷，尋找一種敏感度高、操作簡(jiǎn)單、安全性高、費(fèi)用低的檢測(cè)方法尤為重要。目前，研究報(bào)道的幾種新型的AD早期標(biāo)志物若能應(yīng)用于臨床，可盡早發(fā)現(xiàn)疾病并進(jìn)行干預(yù)治療。

1.1外周血中外泌體微RNA的檢測(cè)

外泌體是細(xì)胞與細(xì)胞間傳遞信息的膜性囊泡，可攜帶小分子物質(zhì)在體液中傳播。外泌體微RNA（microRNA，miRNA）可通過(guò)血-腦脊液屏障進(jìn)入外周血，為研究AD早期標(biāo)志物提供更有益的價(jià)值。Yang等[2]研究發(fā)現(xiàn)外泌體miR-193b在AD患者血清中低表達(dá)，而外泌體miR-135a和外泌體miR-384在AD患者血清中高表達(dá)，三者聯(lián)合應(yīng)用早期檢測(cè)AD的準(zhǔn)確性優(yōu)于單獨(dú)應(yīng)用。另有研究發(fā)現(xiàn)，外泌體miR-132、miR-212在AD和輕度認(rèn)知障礙患者血漿中檢測(cè)到低表達(dá)水平，與腦脊液中高水平的Aβ42存在相關(guān)性，提示外泌體miR-132和miR-212是診斷AD的潛在標(biāo)志物[3]。然而，外泌體miRNA只是作為一種潛在的早期診斷生物標(biāo)志物，能否應(yīng)用于臨床仍需大量研究。

外泌體分離常采用的方法有超速離心法、聚合沉淀法和試劑盒提取法等，這些方法因單獨(dú)使用時(shí)具有成本高、純度低、不適合大規(guī)模分離等缺點(diǎn)，受限于臨床應(yīng)用。Zhao等[4]通過(guò)離心微流控技術(shù)檢測(cè)外周血中的外泌體，發(fā)現(xiàn)該方法速度快、效率高、價(jià)格便宜，是臨床篩選外泌體的實(shí)用性方法。外泌體分離后，使用總外泌體miRNA提取試劑盒進(jìn)行分離提取，最后使用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)或高通量技術(shù)對(duì)外泌體miRNA進(jìn)行評(píng)估。微流控技術(shù)可提高外泌體分離效率，電化學(xué)發(fā)光、表面等離子共振等技術(shù)也是檢測(cè)外泌體miRNA的方法[5]。綜上，雖有新型的高效分離外泌體及外泌體miRNA檢測(cè)的技術(shù)，但能否用于臨床血液檢測(cè)仍屬未知，只能在現(xiàn)有的檢測(cè)方法基礎(chǔ)上進(jìn)行摸索和改進(jìn)。

1.2載脂蛋白E4與AD相關(guān)神經(jīng)絲蛋白的檢測(cè)

載脂蛋白E（apolipoproteinE，ApoE）是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中參與脂質(zhì)代謝的重要膽固醇載體，ApoE基因有E2、E3和E4三種常見(jiàn)的等位基因型。其中，ApoE4被認(rèn)為是導(dǎo)致AD發(fā)生的最強(qiáng)風(fēng)險(xiǎn)因子。ApoE4的存在并不一定直接導(dǎo)致AD的發(fā)生發(fā)展，但這種遺傳亞型的存在可加速疾病進(jìn)程。研究發(fā)現(xiàn)ApoE4對(duì)AD發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的影響主要通過(guò)抑制Aβ清除及促進(jìn)Aβ聚集，Aβ的積聚正是導(dǎo)致AD發(fā)生的病理特征之一[6]。AD相關(guān)神經(jīng)絲蛋白（Alzheimer-associatedneuralthreadprotein，AD7c-NTP）是一種跨膜磷脂蛋白，該蛋白的表達(dá)可導(dǎo)致神經(jīng)元的凋亡和神經(jīng)炎的發(fā)生。研究發(fā)現(xiàn)AD的嚴(yán)重程度與AD7c-NTP水平呈正相關(guān)，0.94ng/ml的AD7c-NTP可區(qū)分AD和輕度認(rèn)知障礙[7]。AD患者尿液中可檢測(cè)到AD7c-NTP，極大可能是由于腦組織中的AD7c-NTP通過(guò)血-腦脊液屏障進(jìn)入外周血，再經(jīng)腎小球?yàn)V過(guò)并經(jīng)尿液排出。ApoE4雖是AD的危險(xiǎn)因素之一，但其單獨(dú)診斷AD的能力有限，特異性和敏感度較低。ApoE4與AD7c-NTP聯(lián)合檢測(cè)可進(jìn)一步提高AD診斷的準(zhǔn)確性，彌補(bǔ)單獨(dú)應(yīng)用的不足。

ApoE4的血液檢測(cè)可應(yīng)用核酸提取試劑盒收集DNA，再通過(guò)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)進(jìn)行DNA擴(kuò)增，最后將其與基因芯片上的特異性核酸探針進(jìn)行雜交，確定ApoE4基因型。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附分析技術(shù)可檢測(cè)患者尿液中的AD7c-NTP，該方法取樣具有無(wú)創(chuàng)性，易被患者接受，更適合臨床應(yīng)用。目前，ApoE4檢測(cè)由檢驗(yàn)科完成，方法較為成熟；而尿液AD7c-NTP檢測(cè)試劑盒只能用于科學(xué)研究，是否可應(yīng)用于臨床仍有待證實(shí)。

1.3β位點(diǎn)淀粉樣前體蛋白裂解酶1及其反義轉(zhuǎn)錄物的檢測(cè)

β位點(diǎn)淀粉樣前體蛋白裂解酶1[β-siteamyloid-βprecursorprotein（AβPP）cleavingenzyme1，BACE1]是一種可將淀粉樣前體蛋白催化為Aβ的酶，Aβ的形成及清除失衡是導(dǎo)致AD發(fā)生的原因之一。AD患者血漿中的BACE1水平高于健康人群。血漿中的BACE1活性測(cè)定具有高特異性和高敏感度，可作為診斷AD的早期標(biāo)志物。輕度認(rèn)知障礙患者腦脊液中的BACE1活性高于健康對(duì)照者[8]；表明BACE1的生成可作為AD的早期標(biāo)志物之一。

另外，BACE1-反義轉(zhuǎn)錄物（antisensetranscript，AS）是一種長(zhǎng)鏈非編碼RNA。BACE1-AS可促進(jìn)BACE1的生成。與其他反義轉(zhuǎn)錄物不同，BACE1-AS不是與BACE1信使RNA的互補(bǔ)區(qū)域互補(bǔ)抑制其信使RNA的翻譯，而是增強(qiáng)其穩(wěn)定性，從而產(chǎn)生ce85019253bd3741e6d65ebbacd91be123c73ddecb53789faf5a278414d1db7c更多的Aβ[9]。AD患者血漿中的BACE1-AS水平遠(yuǎn)高于健康人群，可作為診斷AD的新型血液生物標(biāo)志物[10-11]。

已有研究將氧化石墨烯還原為還原氧化石墨烯，再涂抹在摻氟氧化錫載玻片上，最后使BACE1抗體固定在載玻片上，用于檢測(cè)BACE1抗原[12]。該方法檢測(cè)速度快，敏感度和特異性較高，可用于臨床BACE1的檢測(cè)。外周血中BACE1-AS的檢測(cè)主要通過(guò)提取血漿總RNA，反轉(zhuǎn)錄后進(jìn)行聚合酶鏈反應(yīng)擴(kuò)增，最后進(jìn)行電泳和產(chǎn)物測(cè)序。BACE1表達(dá)水平的增加雖是引發(fā)AD的因素之一，但BACE1始終是一種蛋白生物標(biāo)志物。BACE1-AS作為一種分子標(biāo)志物剛好可彌補(bǔ)蛋白生物標(biāo)志物的不足，更能夠早期診斷AD。二者若能聯(lián)合使用，將更有利于AD的早期判斷。

1.4其他標(biāo)志物的檢測(cè)

當(dāng)滿足一定條件時(shí)，不僅尿液中可檢測(cè)到AD的早期標(biāo)志物，唾液中也可檢測(cè)出相關(guān)標(biāo)志物[13]。但由于唾液中雜質(zhì)較多，對(duì)檢測(cè)條件要求更高，不易于標(biāo)志物的檢測(cè)。另外，在AD標(biāo)志物檢測(cè)方面，生物傳感器因其檢測(cè)速度快、較為特異且敏感，近幾年被越來(lái)越多地用作血液和唾液中AD標(biāo)志物的檢測(cè)[14]。此外，視網(wǎng)膜變化是早期診斷AD和監(jiān)測(cè)疾病進(jìn)展的潛在生物標(biāo)志物，光學(xué)相干斷層成像技術(shù)常用于早期AD患者的篩查[15]。

2PD早期標(biāo)志物的檢測(cè)

PD也是一種常見(jiàn)的與年齡有關(guān)的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，發(fā)病率僅次于AD。除部分PD的發(fā)生由基因突變引起，大部分PD的發(fā)病機(jī)制目前還不清楚。PD主要的病理特征包括中腦黑質(zhì)致密部多巴胺能神經(jīng)元凋亡和路易小體的形成。2015年調(diào)查結(jié)果顯示，中國(guó)社區(qū)人口中PD患者數(shù)估計(jì)高達(dá)362萬(wàn)例[16]。PD患者也常在神經(jīng)元完全退化后才出現(xiàn)臨床表現(xiàn)，錯(cuò)失最佳治療時(shí)間，且治療方案較少，價(jià)格昂貴，不易被大眾接受。因此，早期檢測(cè)、及時(shí)干預(yù)成為當(dāng)前PD治療的一項(xiàng)重要且艱巨的任務(wù)。

2.1α-突觸核蛋白的檢測(cè)

α-突觸核蛋白（α-synuclein，α-syn）是構(gòu)成路易小體的主要成分。α-syn的過(guò)表達(dá)和異常聚集可形成具有神經(jīng)毒性的寡聚體，致使神經(jīng)元受到毒性損傷[17]。α-syn寡聚體的形成先于神經(jīng)元損傷。研究表明PD患者外周血中α-syn主要在疾病發(fā)生的早期階段升高，可作為診斷PD的早期標(biāo)志物[18]。此外，腦脊液、胃腸道和血漿外泌體中的α-syn都有作為診斷PD的早期標(biāo)志物的潛能。

目前，國(guó)內(nèi)有實(shí)驗(yàn)室建立基于熒光免疫分析技術(shù)檢測(cè)鼠血漿中129位絲氨酸磷酸化α-syn水平的方法，該方法的敏感度和特異性較高，可為在人體中檢測(cè)α-syn提供參考方法[19]。還有實(shí)驗(yàn)室使用新型電化學(xué)、光化學(xué)技術(shù)和生物傳導(dǎo)器對(duì)α-syn進(jìn)行檢測(cè)，雖然生物傳感器具有成本低、敏感度高的優(yōu)點(diǎn)，但該方法目前僅用于實(shí)驗(yàn)室研究，對(duì)檢測(cè)臨床樣本中微量和形態(tài)較為復(fù)雜的α-syn的通用性和實(shí)用性仍有待提高[20]。

2.2外泌體miRNA的檢測(cè)

PD患者血液中分離出的外泌體miRNA有可能成為PD進(jìn)展研究的重要標(biāo)志物。為證實(shí)這一點(diǎn)，研究者通過(guò)收集PD患者血清外泌體分析后發(fā)現(xiàn)，血清外泌體has-miR-22-5p、has-miR-151a-5p等miRNA可作為PD早期診斷的生物標(biāo)志物[21]。雖然越來(lái)越多的外泌體miRNA通過(guò)RNA測(cè)序和生物信息學(xué)等方法進(jìn)行檢測(cè)，但外泌體miRNA檢測(cè)方法的金標(biāo)準(zhǔn)仍為逆轉(zhuǎn)錄-定量聚合酶鏈反應(yīng)。近年來(lái)，場(chǎng)效應(yīng)晶管體生物傳感器因其高精密度和免標(biāo)記的特點(diǎn)被廣泛用作核酸等早期標(biāo)志物的檢測(cè)，但場(chǎng)效應(yīng)管功能化方法較為單一，限制了檢測(cè)的敏感度，在臨床上的應(yīng)用也存在一定的挑戰(zhàn)[22]。

2.3神經(jīng)絲輕鏈的檢測(cè)

神經(jīng)絲輕鏈（neurofilamentlightchain，NFL）是神經(jīng)絲正常神經(jīng)元結(jié)構(gòu)的一部分。神經(jīng)元損傷可導(dǎo)致NFL釋放到腦脊液和血液中，其在腦脊液和血液中的水平與各種神經(jīng)系統(tǒng)疾病的軸索損傷程度成比例增加。由此推測(cè)NFL有望在PD患者出現(xiàn)典型臨床癥狀前或神經(jīng)元發(fā)生輕微損傷時(shí)被檢測(cè)到，可作為早期診斷PD的標(biāo)志物。電化學(xué)發(fā)光的新型夾心免疫測(cè)定法雖可定量檢測(cè)血液和腦脊液中的NFL，但單分子免疫陣列（singlemoleculearray，Simoa）技術(shù)的敏感度更高。腦脊液標(biāo)本取材時(shí)對(duì)患者的創(chuàng)傷性較大，不易獲取，而外周血?jiǎng)t恰好可彌補(bǔ)這一缺陷。臨床上已有實(shí)驗(yàn)室采集血漿進(jìn)行Simoa檢測(cè)，這一方法可極大提高檢測(cè)效率，使檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確。

2.4溶酶體酶的檢測(cè)

溶酶體是真核細(xì)胞中具有降解功能的細(xì)胞器，包含60多種溶酶體酶。組織蛋白酶D被認(rèn)為是降解α-syn最主要的溶酶體酶。當(dāng)該溶酶體功能發(fā)生障礙時(shí)，因α-syn不能及時(shí)清除而聚集成有毒性的聚集體，損傷神經(jīng)細(xì)胞，最終導(dǎo)致神經(jīng)變性。提高組織蛋白酶D活性不僅可增強(qiáng)大腦神經(jīng)元及α-syn的清除率，還能預(yù)防神經(jīng)退行性疾病的發(fā)生。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)組織蛋白酶D的方法：雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清中組織蛋白酶D水平，免疫印跡法檢測(cè)尿液中組織蛋白酶D水平。雖然該標(biāo)志物有診斷PD的潛能，但組織蛋白酶D的特異性不高，是否能作為PD早期檢測(cè)標(biāo)志物用于臨床還需更多的研究進(jìn)行證實(shí)。

葡糖腦苷脂酶也是溶酶體酶。葡糖腦苷脂酶對(duì)PD發(fā)生的影響較大，葡糖腦苷脂酶1突變時(shí)可導(dǎo)致PD的患病率風(fēng)險(xiǎn)升高20～30倍。葡糖腦苷脂酶1突變可能會(huì)導(dǎo)致葡糖腦苷脂酶功能喪失、α-syn聚集及清除異常[23]。因此，葡糖腦苷脂酶1基因編碼的葡糖腦苷脂酶可能成為早期檢測(cè)PD的生物標(biāo)志物。早期檢測(cè)葡糖腦苷脂酶主要使用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定葡糖腦苷脂酶的活性。酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)也被用來(lái)檢測(cè)葡糖腦苷脂酶的含量。對(duì)葡糖腦苷脂酶的研究同組織蛋白酶D一樣，大多在于該物質(zhì)可治療PD，特異性也不高。

雖然上述兩種溶酶體酶均有作為PD早期生物標(biāo)志物的潛能，但單獨(dú)使用時(shí)其診斷準(zhǔn)確度及特異性并不高，聯(lián)合多種溶酶體酶共同診斷可提高檢測(cè)結(jié)果的特異性，使診斷結(jié)果更加可靠。

3小結(jié)與展望

衰老是神經(jīng)退行性疾病主要的危險(xiǎn)因素之一，這對(duì)老年患者的身體健康極其不利，對(duì)家庭和社會(huì)也是極大的挑戰(zhàn)[24]。VASOkOogamA5Z4aKRyN61A==在神經(jīng)退行性疾病確診時(shí)，患者的身體已出現(xiàn)不可逆性損傷。家屬不僅需要付出大量的時(shí)間和精力照顧患者，患者在生活中也異常痛苦和不便。為避免這種情況的發(fā)生，越來(lái)越多的研究團(tuán)隊(duì)把目光集中于神經(jīng)退行性疾病的早期研究。在疾病發(fā)生的早期快速確診，可很好地預(yù)防和減緩疾病的發(fā)生、發(fā)展。

研究表明血液和腦脊液中的生物標(biāo)志物具有早期診斷疾病的價(jià)值[25]。多種腦脊液的生物標(biāo)志物聯(lián)合診斷神經(jīng)退行性疾病已成為一種較好的診斷方法。同時(shí)，將血液標(biāo)志物用于診斷神經(jīng)退行性疾病也被認(rèn)為是一種侵襲性較小、可為大多患者接受并廣泛適用于臨床的方法。利用價(jià)格昂貴的儀器和技術(shù)或通過(guò)侵襲性手段診斷神經(jīng)退行性疾病非長(zhǎng)久之計(jì)，不為大眾所接受。本綜述主要搜集近年來(lái)在腦脊液、血液、尿液等體液中的神經(jīng)退行性疾病標(biāo)志物，并分析相關(guān)檢測(cè)方法，希望能為臨床研究神經(jīng)退行性疾病提供借鑒和幫助。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Alzheimer’sDiseaseInternational.WorldAlzheimerreport2018.Thestateoftheartofdementiaresearch：Newfrontiers[EB/OL].[2024-06-25].https：//www.alzint.org/u/WorldAlzheimerReport2018.pdf.

[2] YANGTT，LIUCG，GAOSC，etal.TheserumexosomederivedmicroRNA-135a，-193b，and-384werepotentialAlzheimer’sdiseasebiomarkers[J].BiomedEnvironSci，2018，31（2）：87-96.

[3] CHADJ，MENGELD，MUSTAPICM，etal.MiR-212andmiR-132aredownregulatedinneurallyderivedplasmaexosomesofAlzheimer’spatients[J].FrontNeurosci，2019，13：1208.

[4] ZHAOL，WANGH，F(xiàn)UJ，etal.Microfluidic-basedexosomeisolationandhighlysensitiveaptamerexosomemembraneproteindetectionforlungcancerdiagnosis[J].BiosensBioelectron，2022，214：114487.

[5] PISHBINE，SADRIF，DEHGHANA，etal.RecentadvancesinisolationanddetectionofexosomalmicroRNAsrelatedtoAlzheimer’sdisease[J].EnvironRes，2023，227：115705.

[6] YAMAZAKIY，ZHAON，CAULFIELDTR，etal.ApolipoproteinEandAlzheimerdisease：Pathobiologyandtargetingstrategies[J].NatRevNeurol，2019，15（9）：501-518.

[7] XUMR，DAIRF，WEIQQ，etal.UrinaryAD7c-NTPevaluatescognitionimpairmentanddifferentiallydiagnosesADandMCI[J].AmJAlzheimersDisOtherDemen，2022，37：15333175221115247.

[8] ALEXOPOULOSP，THIERJUNGN，GRIMMERT，etal.CerebrospinalfluidBACE1activityandsAβPPβasbiomarkercandidatesofAlzheimer’sdisease[J].DementGeriatrCognDisord， 2018，45（3-4）：152-161.

[9] LIF，WANGY，YANGH，etal.TheeffectofBACE1-ASonβ-amyloidgenerationbyregulatingBACE1mRNAexpression[J].BMCMolBiol，2019，20（1）：23.

[10] FOTUHISN，KHALAJ-KONDORIM，HOSEINPOURFEIZIMA，etal.Longnon-codingRNABACE1-ASmayserveasanAlzheimer’sdiseaseblood-basedbiomarker[J].JMolNeurosci，2019，69（3）：351-359.

[11] WANGD，WANGP，BIANX，etal.ElevatedplasmalevelsofexosomalBACE1-AScombinedwiththevolumeandthicknessoftherightentorhinalcortexmayserveasabiomarkerforthedetectionofAlzheimer’sdisease[J].MolMedRep，2020，22（1）：227-238.

[12] HAMPELH，LISTAS，VANMECHELENE，etal.β-Secretase1biologicalmarkersforAlzheimer’sdisease：State-of-artofvalidationandqualification[J].AlzheimersResTher，2020，12（1）：130.

[13] 馬國(guó)武，趙鵬程.唾液生物標(biāo)志物在阿爾茨海默病早期檢測(cè)中的應(yīng)用[J].口腔醫(yī)學(xué)研究，2022，38（7）：591-596.

[14] KIMJ，CAMPBELLAS，DEáVILABE，etal.Wearablebiosensorsforhealthcaremonitoring[J].NatBiotechnol，2019，37（4）：389-406.

[15] ZHANGY，WANGY，SHIC，etal.AdvancesinretinaimagingaspotentialbiomarkersforearlydiagnosisofAlzheimer’sdisease[J].TranslNeurodegener，2021，10（1）：6.

[16] QIS，YINP，WANGL，etal.PrevalenceofParkinson’sdisease：Acommunity-basedstudyinChina[J].MovDisord，2021，36（12）：2940-2944.

[17] MEHRAS，SAHAYS，MAJISK.α-Synucleinmisfoldingandaggregation：implicationsinParkinson’sdiseasepathogenesis[J].BiochimBiophysActaProteinsProteom，2019，1867（10）：890-908.