UCH-L1、PRDX1與AIS患者阿替普酶治療效果的關(guān)系

[摘要]目的研究泛素羧基末端水解酶L1（ubiquitincarboxylterminalhydrolaseL1，UCH-L1）、過氧化還原蛋白1（peroxiredoxprotein1，PRDX1）與急性缺血性腦卒中（acuteischemicstroke，AIS）患者阿替普酶治療效果的關(guān)系。方法選取2020年6月至2022年6月嘉興市第一醫(yī)院收治的198例AIS患者作為研究組，選取同期100名健康體檢者作為健康組，利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）檢測(cè)血清UCH-L1、PRDX1水平。AIS患者均使用阿替普酶靜脈溶栓治療，治療10d后評(píng)價(jià)臨床療效，比較不同療效患者臨床資料及血清UCH-L1、PRDX1水平差異，分析UCH-L1、PRDX1與阿替普酶治療效果的關(guān)系。結(jié)果研究組患者的UCH-L1、PRDX1水平高于健康組（P<0.05）。重癥AIS患者的UCH-L1、PRDX1水平高于中癥、輕癥患者（P<0.05）。完全前循環(huán)梗死型AIS患者的UCH-L1、PRDX1水平高于腔隙性梗死、后循環(huán)梗死、部分前循環(huán)梗死型（P<0.05）。AIS患者阿替普酶治療后UCH-L1、PRDX1水平低于治療前，且阿替普酶治療效果越差UCH-L1、PRDX1水平越高（P<0.05）。UCH-L1、PRDX1聯(lián)合預(yù)測(cè)AIS患者阿替普酶治療效果的效能優(yōu)于單一預(yù)測(cè)（P<0.05）。年齡、疾病嚴(yán)重程度、入院時(shí)美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表評(píng)分、UCH-L1、PRDX1是影響AIS患者阿替普酶治療效果的危險(xiǎn)因素（P<0.05）。結(jié)論UCH-L1、PRDX1水平在AIS患者血清中升高，與患者疾病嚴(yán)重程度、腦卒中分型有關(guān)，是影響AIS患者阿替普酶治療效果的危險(xiǎn)因素，可用于阿替普酶治療效果的早期預(yù)測(cè)。

[關(guān)鍵詞]泛素羧基末端水解酶L1；過氧化還原蛋白1；急性缺血性腦卒中；阿替普酶

[中圖分類號(hào)]R743[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A[DOI]10.3969/j.issn.1673-9701.2024.18.003

TherelationshipbetweenUCH-L1，PRDX1andthetherapeuticeffectofateplaseinAISpatients

PANJie，MENGDanyang，HUJin

DepartmentofNeurology，theFirstHospitalofJiaxing，Jiaxing314001，Zhejiang，China

[Abstract]ObjectiveTostudytherelationshipbetweenubiquitincarboxylterminalhydrolaseL1（UCH-L1），peroxiredoxprotein1（PRDX1），andthetherapeuticeffectofateplaseinpatientswithacuteischemicstroke（AIS）.MethodsAtotalof198AISpatientsadmittedtotheFirstHospitalofJiaxingfromJune2020toJune2022wereselectedasthestudygroup，and100healthyindividualswhounderwentphysicalexaminationsduringthesameperiodwereselectedasthehealthygroup.TheserumlevelsofUCH-L1andPRDX1weredetectedusingenzymelinkedimmunosorbentassay（ELISA）.AISpatients&nbsp;werealltreatedwithintravenousthrombolysiswithateplase.After10daysoftreatment，theclinicalefficacywasevaluated.ClinicaldataofpatientswithdifferenttherapeuticeffectsanddifferencesinserumUCH-L1andPRDX1levelswerecompared，andtherelationshipbetweenUCH-L1，PRDX1andthetherapeuticeffectofateplasewasanalyzed.ResultsTheUCH-L1andPRDX1ofpatientsinthestudygroupwerehigherthanthoseinthehealthygroup（P<0.05）.ThelevelsofUCH-L1andPRDX1insevereAISpatientswerehigherthanthoseinmoderateandmildAISpatients（P<0.05）.UCH-L1andPRDX1incompleteanteriorcirculationinfarctiontypeAISpatientswerehigherthanthoseinlacunarinfarction，posteriorcirculationinfarction，andpartialanteriorcirculationinfarctiontypes（P<0.05）.Aftertreatmentwithateplase，thelevelsofUCH-L1andPRDX1inAISpatientswerelowerthanbeforetreatment，andtheworsethetreatmenteffectofateplase，thehigherthelevelsofUCH-L1andPRDX1（P<0.05）.ThecombinedpredictionofUCH-L1andPRDX1fortheefficacyofateplasetherapyinAISpatientswasbetterthanasingleprediction（P<0.05）.Age，severityofdisease，NationalInstituteofHealthstrokescalescoreatadmission，UCH-L1，PRDX1areriskfactorsthataffecttherecoveryofAISpatientsafterateplasetreatment（P<0.05）.ConclusionTheelevatedlevelsofUCH-L1andPRDX1intheserumofAISpatientsarerelatedtotheseverityofthediseaseandstrokeclassification，andareriskfactorsaffectingtheefficacyofateplasetreatmentinAISpatients.Theycanbeusedforearlypredictionoftheefficacyofateplasetreatment.

[Keywords]UbiquitincarboxylterminalhydrolaseL1;Peroxiredoxprotein1;Acuteischemicstroke;Ateplase

急性缺血性腦卒中（acuteischemicstroke，AIS）是一種腦組織血液供應(yīng)障礙性疾病，其發(fā)病率、致死率、致殘率均較高。目前，阿替普酶靜脈溶栓是AIS的主要治療方法，其可快速溶解血栓、開通罪犯血管，但仍有部分患者受多種因素的影響治療效果并不理想[1-3]。研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)腦組織缺氧、缺血時(shí)過氧化還原蛋白1（peroxiredoxprotein1，PRDX1）為清除機(jī)體過氧化脂質(zhì)而大量生成，但隨著腦缺血的加重和神經(jīng)細(xì)胞壞死，PRDX1失去氧化還原平衡功能，經(jīng)誘導(dǎo)炎癥介質(zhì)釋放加重腦組織損傷[4]；且在腦組織病理損傷后泛素羧基末端水解酶L1（ubiquitincarboxylterminalhydrolaseL1，UCH-L1）分泌增加，通過影響神經(jīng)元細(xì)胞存活和突觸重塑性引起神經(jīng)功能進(jìn)行性損傷[5]。由于AIS發(fā)生過程中腦組織病理損傷涉及多個(gè)細(xì)胞因子，總結(jié)既往研究UCH-L1、PRDX1在此過程中均有一定的致腦組織病理損傷加重效應(yīng)，推測(cè)兩者可能在某一機(jī)制下共同影響AIS。鑒于此，本研究擬分析AIS患者血清UCH-L1、PRDX1水平與阿替普酶治療效果的關(guān)系，為AIS的臨床研究提供參考。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2020年6月至2022年6月嘉興市第一醫(yī)院收治的198例AIS患者作為研究組，其中男104例，女94例，年齡50～78歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合AIS診斷[6]，且經(jīng)影像學(xué)確診，疾病嚴(yán)重程度根據(jù)患者確診時(shí)美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表（NationalInstituteofHealthstrokescale，NIHSS）評(píng)分評(píng)價(jià)：≤3分為輕癥，4～15分為中癥，>15分為重癥；②首次確診，發(fā)病12h內(nèi)入院；③研究對(duì)象均知情，簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①顱內(nèi)血管畸形、顱腦腫瘤或外傷者；②出血性腦卒中者；③凝血功能不全者；④入院前已治療者；⑤腦干梗死者；⑥嚴(yán)重感染性疾病者。選取同期100名健康體檢者作為健康組，無腦血管疾病史，男58名，女42名，年齡51～77歲。兩組納入者的基線資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。本研究經(jīng)嘉興市第一醫(yī)院倫理委員會(huì)審批通過（倫理審批號(hào)：2024-LY-362）。

1.2方法

1.2.1UCH-L1、PRDX1檢測(cè)抽取兩組納入者3ml空腹靜脈血，3000轉(zhuǎn)/min、r=10cm離心10min獲得血清，使用賽默飛VarioskanLUX多功能酶標(biāo)儀利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）法檢測(cè)血清UCH-L1、PRDX1水平，試劑盒由上海烜雅生物科技有限公司提供。

1.2.2阿替普酶治療及效果評(píng)價(jià)AIS患者在入院確診后使用阿替普酶（批準(zhǔn)文號(hào)：國藥準(zhǔn)字S20160055，生產(chǎn)單位：BoehringerIngelheimPharmaGmbH&Co.KG，規(guī)格：50mg）治療，總療程為10d。治療10d后根據(jù)NIHSS評(píng)分評(píng)價(jià)治療效果，降低率>90%為痊愈，降低率45%～90%為顯效，降低率18%～44%為有效，降低率<18%為無效。

1.3指標(biāo)觀察

①比較兩組納入者的血清UCH-L1、PRDX1水平，并進(jìn)一步分析不同疾病嚴(yán)重程度、不同腦卒中分型AIS患者血清UCH-L1、PRDX1水平差異。疾病嚴(yán)重程度根據(jù)患者確診時(shí)NIHSS評(píng)分評(píng)價(jià)，其中輕癥35例，中癥95例，重癥68例。腦卒中分型依據(jù)英國牛津郡社區(qū)腦卒中分型[7]：腔隙性梗死（lacunarinfarction，LACI）型34例，后循環(huán)梗死（posteriorcirculationinfarction，POCI）型38例，部分前循環(huán)梗死（partialanteriorcirculationinfarction，PACI）型56例，完全前循環(huán)梗死（completeanteriorcirculationinfarction，TACI）型70例。②比較AIS患者阿替普酶治療前后血清UCH-L1、PRDX1水平的變化，并根據(jù)阿替普酶治療效果分為痊愈組65例、顯效組55例、有效組48例、無效組30例。比較四組患者的性別、年齡、吸煙史、飲酒史、高血壓病史、糖尿病病史、冠心病病史、腦卒中分型、疾病嚴(yán)重程度、發(fā)病至入院時(shí)間、入院時(shí)NIHSS評(píng)分、實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)等臨床資料及UCH-L1、PRDX1水平變化。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS25.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差齊性檢驗(yàn)，兩兩比較采用LSD-t事后分析方法檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)（百分率）[n（%）]表示，比較采用c2檢驗(yàn)；等級(jí)資料采用秩和檢驗(yàn)；經(jīng)Spearman相關(guān)性分析UCH-L1、PRDX1水平與AIS患者阿替普酶治療效果的相關(guān)性；經(jīng)受試者操作特征曲線（receiveroperatingcharacteristiccurve，ROC曲線）分析UCH-L1、PRDX1水平對(duì)AIS患者阿替普酶治療效果的預(yù)測(cè)價(jià)值；經(jīng)多因素Logistic回歸分析探討影響AIS患者阿替普酶治療效果的危險(xiǎn)因素。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1UCH-L1、PRDX1水平的比較

研究組患者的UCH-L1[（0.49±0.09）ng/ml]、PRDX1[（9.50±1.08）ng/ml]水平高于健康組[（0.20±0.05）ng/ml、（3.00±0.76）ng/ml]（P<0.05），且重癥患者的UCH-L1、PRDX1水平高于中癥、輕癥患者（P<0.05）；TACI型患者的UCH-L1、PRDX1水平高于LACI、POCI、PACI型（P<0.05），見表1。

2.2AIS患者阿替普酶治療前后UCH-L1、PRDX1水平的比較

AIS患者阿替普酶治療后UCH-L1[（0.28±0.05）ng/ml]、PRDX1[（4.63±0.79）ng/ml]水平低于治療前[（0.49±0.09）ng/ml、（9.50±1.08）ng/ml]（P<0.05），且無論是輕癥、中癥，還是重癥患者在阿替普酶治療后UCH-L1、PRDX1水平均低于治療前（P<0.05），見表2。

2.3阿替普酶不同治療效果AIS患者臨床資料及血清UCH-L1、PRDX1水平比較

四組患者的年齡、冠心病病史、疾病嚴(yán)重程度、入院時(shí)NIHSS評(píng)分、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞比值、UCH-L1水平、PRDX1水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表3。

2.4UCH-L1、PRDX1與AIS患者阿替普酶治療效果的相關(guān)性

UCH-L1、PRDX1與AIS患者阿替普酶治療效果有關(guān)，見圖1。

2.5UCH-L1、PRDX1對(duì)AIS患者阿替普酶治療效果的預(yù)測(cè)價(jià)值

血清UCH-L1、PRDX1聯(lián)合預(yù)測(cè)AIS患者阿替普酶治療效果的效能優(yōu)于單一預(yù)測(cè)（P<0.05），見表4。

2.6影響AIS患者阿替普酶治療效果的危險(xiǎn)因素分析

年齡、疾病嚴(yán)重程度、入院時(shí)NIHSS評(píng)分、UCH-L1、PRDX1是影響AIS患者阿替普酶治療效果的危險(xiǎn)因素（P<0.05），見表5。

3討論

臨床針對(duì)AIS的發(fā)生機(jī)制提出可通過有效時(shí)間窗內(nèi)經(jīng)阿替普酶靜脈溶栓挽救組織缺血損傷，但由于有效時(shí)間窗較窄，血管再通后機(jī)體再灌注損傷，加之多種細(xì)胞因子表達(dá)異常引起腦組織缺血性進(jìn)行性損傷，從而降低臨床療效[8]。

PRDX1屬于過氧化物酶家族成員，被認(rèn)為與腦組織缺血性疾病有關(guān)。臨床認(rèn)為，在缺血應(yīng)激期間，一方面腦細(xì)胞內(nèi)PRDX1的高表達(dá)對(duì)缺血導(dǎo)致的氧化應(yīng)激具有神經(jīng)保護(hù)作用，但在死亡細(xì)胞所釋放的細(xì)胞外PRDX1可激活免疫細(xì)胞中的Toll樣受體并產(chǎn)生炎癥因子，從而誘發(fā)T細(xì)胞介導(dǎo)的AIS后遲發(fā)性炎癥[9-11]；另一方面，缺血性腦細(xì)胞死亡的基礎(chǔ)在于受損腦細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞中一氧化氮合酶產(chǎn)生的一氧化氮反應(yīng)和缺血時(shí)產(chǎn)生的亞硝化應(yīng)激，而更長(zhǎng)期、更嚴(yán)重的缺血發(fā)生時(shí)PRDX1可介導(dǎo)亞硝化應(yīng)激，從而引起更嚴(yán)重的腦細(xì)胞損傷[12]。本研究發(fā)現(xiàn)，PRDX1水平在AIS患者的血清中升高，此結(jié)果與張俊湖等[13]報(bào)道一致；尤其是重癥患者、TACI型患者，可能與AIS發(fā)生后PRDX1從凋亡的神經(jīng)元細(xì)胞中釋放，無以保護(hù)腦組織，反而激活神經(jīng)炎癥促進(jìn)疾病進(jìn)展有關(guān)。

UCH-L1是一種廣泛分布于神經(jīng)纖維、神經(jīng)元的泛素-蛋白酶降解系統(tǒng)的重要蛋白，具有維持突觸穩(wěn)定、腦損傷后自我修復(fù)的作用。研究表明，UCH-L1主要包括3種功能[14-15]：①水解多聚泛素鏈，使泛素單體可重復(fù)使用；②穩(wěn)定泛素分子單體，經(jīng)調(diào)節(jié)泛素單體水平穩(wěn)定泛素-蛋白酶體系統(tǒng)；③以二聚體形式競(jìng)爭(zhēng)性抑制k-48形式泛素鏈與異常蛋白的結(jié)合，使異常蛋白不能被蛋白酶體識(shí)別、降解。AIS發(fā)生后血-腦脊液屏障通透性增加，促使神經(jīng)元釋放的UCH-L1直接經(jīng)受損血-腦脊液屏障由腦組織間隙入血[16-17]。研究顯示腦組織損傷加重過程中，神經(jīng)元內(nèi)的UCH-L1被大量釋放后經(jīng)細(xì)胞膜、損傷的血-腦脊液屏障釋放入血[18]。本研究發(fā)現(xiàn)重癥患者、TACI型患者血清UCH-L1水平明顯高于非重癥、非TACI型患者，推測(cè)可能與神經(jīng)元損傷越嚴(yán)重，UCH-L1經(jīng)損傷的神經(jīng)元釋放入血越多有關(guān)。

阿替普酶是目前治療AIS的常用藥物，可在短時(shí)間內(nèi)清除血栓部位的纖維蛋白溶酶，恢復(fù)血供，避免缺血半暗帶腦組織壞死[19]。本研究發(fā)現(xiàn)，雖有84.85%的患者治療有效，但仍有15.15%的患者治療無效，治療無效的患者UCH-L1、PRDX1水平明顯更高。

綜上所述，AIS患者血清UCH-L1、PRDX1高表達(dá)，且UCH-L1、PRDX1水平與阿替普酶治療效果有關(guān)，可用于阿替普酶治療效果的早期預(yù)測(cè)。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突。

[參考文獻(xiàn)]

[1] WARACHSJ，RANTAA，KIMJ，etal.Symptomaticintracranialhemorrhagewithtenecteplasevs.alteplaseinpatientswithacuteischemicstroke：Thecomparativeeffectivenessofroutinetenecteplasevs.qlteplaseinacuteischemicstroke（CERTAIN）collaboration[J].JAMANeurol，2023，80（7）：732–738.

[2] WEIH，F(xiàn)UB，YANGC，etal.Theefficacyandsafetyofintravenousthrombolysiswithtenecteplaseversusalteplaseforacuteischemicstroke：AsystematicreviewandMeta-analysis[J].NeurolSci，2023，44（9）：3005–3015.

[3] YANGN，LEEH，WUC.Intravenousthrombolysisforacuteischemicstroke：Fromalteplasetotenecteplase[J].BrainCirc，2023，9（2）：61–63.

[4] KIMS，LEEW，JOH，etal.Theantioxidantenzymeperoxiredoxin-1controlsstroke-associatedmicrogliaagainstacuteischemicstroke[J].RedoxBiol，2022，54（1）：102347.

[5] 常振紅，張玉代，劉澤民，等.急性缺血性腦卒中患者血清Hepc25、鐵蛋白水平及UCH-L1的臨床意義[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2023，22（9）：934–937.

[6] 中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)病學(xué)分會(huì)，中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)病學(xué)分會(huì)腦血管病學(xué)組.中國急性缺血性腦卒中診治指南2018[J].中華神經(jīng)科雜志，2018，51（9）：666–682.

[7] BAMFORDJ，SANDERRCOCKP，DENNISM，etal.Classificationandnaturalhistoryofclinicallyidentifiablesubtypesofcerebralinfarction[J].Lancet，1991，337（8756）：1521–1526.

[8] ABUELAZMM，SERIAR，AWANDAK，etal.Theefficacyandsafetyoftenecteplaseversusalteplaseforacuteischemicstroke：Anupdatedsystematicreview，pairwise，andnetworkmeta-analysisofrandomizedcontrolledtrials[J].JThrombThrombolysis，2023，55（2）：322–338.

[9] KARAKUSA，GIRERDN，SANCHEZJC，etal.Identifyingpatientswithcerebralinfarctionwithinthetimewindowcompatiblewithreperfusiontherapy，diagnosticperformanceofglutathiones-transferase-π（GST-π）andperoxiredoxin1（PRDX1）：ExploratoryprospectivemulticentrestudyFLAG-1protocol[J].BMJOpen，2021，11（8）：e046167.

[10] 龐旭陽，郝曉靜，郭宏盛，等.急性缺血性腦卒中患者血清PRDX1、Sestrin2水平與病情及預(yù)后的關(guān)系[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2021，31（9）：51–55.

[11] YUANY，TANH，CHENH，etal.Peroxiredoxin1alleviatesoxygen-glucosedeprivation/reoxygenationinjuryinN2acellsviasuppressingtheJNK/caspase-3pathway[J].IranJBasicMedSci，2023，26（11）：1305–1312.

[12] 楊金智，劉芳，宋光.急性缺血性腦卒中患者血管緊張素Ⅱ受體樣1受體內(nèi)源性配體13、過氧化還原蛋白1水平檢測(cè)在預(yù)后中的評(píng)估作用[J].實(shí)用醫(yī)院臨床雜志，2022，19（5）：44–47.

[13] 張俊湖，張國榮，胡銘，等.不同病情急性缺血性腦卒中患者血清過氧化還原蛋白1、鈣調(diào)蛋白、觸珠蛋白水平與預(yù)后的關(guān)系分析[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2020，20（24）：4789–4792，4751.