豬3型圓環(huán)病毒研究進(jìn)展

千國(guó)勝 於慶雄 婁昆鵬 胡永明 彭俊平 歐偉業(yè)

摘要：豬圓環(huán)病毒（Porcine circovirus，PCV）是目前危害全球養(yǎng)豬業(yè)的重要病原之一。該病除了導(dǎo)致斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）、豬皮炎與腎病綜合征（PDNS）等，還可以導(dǎo)致新生仔先天性腦震顫（CT）、母豬繁殖障礙、增生性腸炎、豬呼吸道綜合征等。目前為止，該病毒有發(fā)現(xiàn)總共有PCV-1、PCV-2、

PCV-3和PCV-4四種基因型，其中PCV-2的致病性最強(qiáng)。近年來(lái)，隨著PCV-3的檢出率不斷提高，給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)了新的問題。本文就PCV-3圓環(huán)病毒的病原學(xué)、流行病學(xué)、致病機(jī)理、臨床癥狀、診斷方法及防治措施作了全面的綜述，為更加全面地認(rèn)識(shí)該病毒，防控該病毒在規(guī)?；i場(chǎng)暴發(fā)做基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：豬3型圓環(huán)病毒；PCV診斷；防治

豬圓環(huán)病毒隨著養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展，流行毒株也在發(fā)生變化。迄今為止，圓環(huán)病毒發(fā)現(xiàn)4種型號(hào)。PCV-1最早是由德國(guó)學(xué)者Tischer等于1974年在豬腎傳代細(xì)胞系PK15中分離發(fā)現(xiàn)，該病毒存在豬源原代、傳代細(xì)胞內(nèi)，不表現(xiàn)細(xì)胞病變，對(duì)豬群健康沒有臨床表現(xiàn)。PCV-2最早是由Allan等1998年從有PMWS癥狀豬體內(nèi)分離，該病的致病性較強(qiáng)，可以導(dǎo)致仔豬斷奶后綜合征（PMWS）和皮炎腎病綜合征（PDNS）等癥狀。PCV3最早發(fā)現(xiàn)于美國(guó)，在2015年北卡羅來(lái)納州一個(gè)豬場(chǎng)分離出一種新型的豬圓環(huán)病毒，后被命名為豬圓環(huán)病毒3型（PCV3），2016年華南農(nóng)業(yè)大學(xué)首次分離到毒株P(guān)CV3，China/GD2016株，該毒株和美國(guó)PCV3毒株同源性97.4%～98.5%。2019年，湖南大學(xué)生物學(xué)院研究團(tuán)隊(duì)在有嚴(yán)重臨床癥狀的豬只中分離到了一種新型的圓環(huán)病毒，暫命名為PCV4。該病毒其基因組的大小為

1 770個(gè)核苷酸，河南農(nóng)業(yè)大學(xué)研究團(tuán)隊(duì)把PCV4和其他圓環(huán)病毒同源性比較，發(fā)現(xiàn)PCV4和PCV2的Cap蛋白同源性在44%～46%，韓國(guó)學(xué)者在健康豬群也檢測(cè)到了PCV4，因此PCV4的致病性有待進(jìn)一步研究。

1 病原學(xué)

PCV屬于圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬。豬圓環(huán)病毒是一種小型的環(huán)狀、無(wú)包膜、單鏈DNA病毒。所有的PCV具有相似的形態(tài)，由一個(gè)緊密的環(huán)狀單鏈DNA基因組組成，PCV3病毒顆粒是無(wú)囊膜、直徑約13～25nm，基因組全長(zhǎng)2 000個(gè)nt，主要包括3個(gè)開放性閱讀框。其中ORF1編碼的復(fù)制酶（replicase，Rep）蛋白，與病毒復(fù)制相關(guān)，ORF2編碼的衣殼（capsid，Cap）蛋白與病毒的免疫相關(guān)，ORF3編碼的氨基酸組成的蛋白，其功能有待研究。PCV1和PCV2的基因組同源性接近80%，而PCV3與PCV1和PCV2的基因核苷酸同源性僅為37%。PCV-2的基因型中又分為PCV-2a、PCV-2b、PCV-2c、PCV-2d、PCV-2e五種基因亞型。在我國(guó)豬病流行調(diào)查中發(fā)現(xiàn)由最初的PCV2a檢出率高，但最近幾年發(fā)現(xiàn)PCV-2b和PCV-2d是逐漸成為主流毒株，已經(jīng)占到發(fā)病率的87%，PCV-2b和PCV-2d的致病力較強(qiáng)，給豬群造成的危害最大，在防控中一定要引起重視，尤其是疫苗的選擇上一定要結(jié)合本場(chǎng)的毒株選擇適合的毒株疫苗。而PCV3可分為3個(gè)基因亞型分別是PCV3a、PCV3b和PCV3c，在國(guó)內(nèi)的調(diào)研發(fā)現(xiàn)PCV3c的檢出率最高。PCV4該病毒其基因組的大小為1，770個(gè)核苷酸，與其他圓環(huán)病毒的同源性相對(duì)較低。

2 流行病學(xué)

豬圓環(huán)3型病毒最早發(fā)現(xiàn)于美國(guó)，2015年，美國(guó)學(xué)者Palinski在北卡羅來(lái)納州患病母豬及流產(chǎn)胎兒、豬皮炎腎病綜合征的豬群體內(nèi)首次檢測(cè)發(fā)現(xiàn)PCV3病毒。隨后世界上大部分養(yǎng)豬國(guó)家都報(bào)道了PCV3在豬場(chǎng)中的流行，表明該病毒在全球范圍內(nèi)廣泛分布和傳播，屬于世界流行性病毒。我國(guó)最早是在2016年開始PCV3流行病學(xué)調(diào)查和病毒分離研究的實(shí)驗(yàn)室，分別是華中農(nóng)業(yè)大學(xué)團(tuán)隊(duì)及華南農(nóng)業(yè)大學(xué)研究團(tuán)隊(duì)。結(jié)果表明PCV3在華南地區(qū)各省份的樣品陽(yáng)性率為（313/1078）29.04%，豬場(chǎng)陽(yáng)性率為（79/177）44.63%，并證實(shí)了PCV3在國(guó)內(nèi)豬場(chǎng)中的流行和對(duì)豬群的致病性（Shen et al.，2018）。PCV3在各抽樣省份均有流行，其中吉林總陽(yáng)性率為100%（8/8），廣東總陽(yáng)性率為44.29%（62/140），山東總陽(yáng)性率為7.69%（2/26），甘肅總陽(yáng)性率為3.75%（6/160），廣西總陽(yáng)性率為8.82%（3/34），四川總陽(yáng)性率為13.85%（9/65），云南總陽(yáng)性率為1.04%（1/96），內(nèi)蒙古總陽(yáng)性率為23.33%（7/30）。湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)一份調(diào)研了中國(guó)

17個(gè)省份的PCV3檢出率。結(jié)果顯示母豬群62.2%，育肥豬28.9%，以及保育豬11.7%，哺乳仔豬的檢出率為8.9%，數(shù)據(jù)表明母豬的感染率最高?；蛐蛄酗@示大部分屬于PCV3c的感染率最高，2020年華中農(nóng)業(yè)大學(xué)何啟蓋團(tuán)隊(duì)對(duì)我國(guó)15個(gè)省市的211個(gè)豬場(chǎng)調(diào)研顯示，PCV3總體陽(yáng)性率是24.17%，其中PCV3c所占比例是61.8%[1]，提示PCV3c亞型可能是目前主流毒株。

雖然家豬是PCV3的天然宿主，但一些家養(yǎng)的和野生的動(dòng)物，如牛、狐貍、犬、水貂、野豬都有檢出PCV3。也有研究發(fā)現(xiàn)蜱蟲和蚊子體內(nèi)分離到PCV3病毒，提示該病毒也可通過蜱蟲和蚊子生物媒介來(lái)傳播，給養(yǎng)豬業(yè)防控該病增加了難度。

圓環(huán)3型病毒的傳播途徑：研究表明，目前已發(fā)現(xiàn)PCV3有幾種不同的排毒途徑，該病毒既可以垂直傳播，通過感染和胎盤或者母乳中病毒垂直傳播。又可以通過接觸水平傳播，通過與感染豬群接觸、感染豬群的糞便、尿液、唾液傳播疾病，以及污染的飼料、器具、排到環(huán)境中病毒來(lái)傳播該病。也有研究發(fā)現(xiàn)蜱蟲和蚊子作為生物媒介傳播的風(fēng)險(xiǎn)。有研究表明，在其胎盤、所產(chǎn)木乃伊胎和產(chǎn)后立即死亡的弱仔豬中檢測(cè)到了病毒。Eddicks等對(duì)一家種公豬站的人工授精的精液檢測(cè)發(fā)現(xiàn)PCV3，說(shuō)明3型圓環(huán)病毒也可以通過精液傳播散毒，因此也要加強(qiáng)外購(gòu)精液的檢測(cè)。

3 致病機(jī)理

病毒潛伏期時(shí)間：相關(guān)研究表明，PCV3病毒感染豬群后最早在感染后3 d就能檢出病原，到感染后21 d時(shí)，陽(yáng)性豬檢出比例達(dá)到最高。不同毒株、感染病毒載量不同、豬群健康狀況不同有所差異，也有報(bào)道豬群在感染后28 d才可以檢測(cè)到持續(xù)的病毒血癥，有些病例在感染后42 d才確診。

體外試驗(yàn)結(jié)果表明，PCV3 Cap蛋白可通過視黃酸誘導(dǎo)基因樣解旋酶或Toll樣受激活促炎細(xì)胞因子白細(xì)胞介素6、腫瘤壞死因子α以及核因子-κB信號(hào)。對(duì)體內(nèi)先天性免疫反應(yīng)模型的評(píng)估表明，PCV3感染對(duì)IL-8有調(diào)節(jié)作用，與PCV2感染類似。PCV3感染并不具有PCV2的大多數(shù)特征，如淋巴細(xì)胞減少、淋巴組織中組織細(xì)胞替代以及巨噬細(xì)胞和B細(xì)胞對(duì)病毒的吸收。

2021年，哈爾濱收益研究所蔡雪輝團(tuán)隊(duì)從分離的圓環(huán)3型病毒做了攻毒試驗(yàn)。試驗(yàn)表明，未表現(xiàn)出明顯的臨床癥狀或肉眼可見的病變，但PCV3病毒表現(xiàn)出廣泛的組織嗜性，在心臟、肝臟、脾臟、肺、腎臟、腦、淋巴結(jié)和扁桃體均可檢出，其中肺和淋巴結(jié)病毒載量最高。華中農(nóng)大何啟蓋團(tuán)隊(duì)研究表明PCV3在感染豬群的淋巴結(jié)和扁桃體等器官檢出率最高，該病毒也會(huì)引起肺臟間質(zhì)性肺炎、淋巴小結(jié)增生、嗜酸性粒細(xì)胞增多等病變[2]。

4 臨床癥狀

4.1 母豬繁殖障礙和皮炎腎病綜合征

母豬感染PCV3表現(xiàn)出的癥狀以繁殖障礙為主，主要表現(xiàn)為不發(fā)情、返情率高、流產(chǎn)、木乃伊和死胎增加；2015年美國(guó)學(xué)者Ben M.Hause在一個(gè)商業(yè)母豬場(chǎng)暴發(fā)豬皮炎與腎病綜合征疾病的臨床和組織學(xué)發(fā)現(xiàn)，并將其命名為PCV3，同時(shí)發(fā)現(xiàn)其能引起繁殖障礙疾病并引起死胎。2020年西班牙學(xué)者M(jìn)arina Sibila從豬繁殖障礙病例的流產(chǎn)胎兒和死胎中檢測(cè)到PCV3。目前華中農(nóng)業(yè)大學(xué)和華南農(nóng)業(yè)大學(xué)的研究團(tuán)隊(duì)關(guān)于PCV3病毒分離及致病性取得了一些研究進(jìn)展，通過相應(yīng)的細(xì)胞系能夠?qū)CV3傳至第10代左右，動(dòng)物攻毒試驗(yàn)后表現(xiàn)出典型的皮炎腎病綜合征。

4.2 仔豬主要臨床表現(xiàn)

感染該病的仔豬多在斷奶前死亡率升高、斷奶后消瘦/死亡，斷奶前和斷奶后疾病主要為非特異性臨床綜合征：厭食、發(fā)熱、皮膚蒼白、消瘦、中樞神經(jīng)系統(tǒng)，部分豬群有皮炎腎病綜合征表現(xiàn)（PMWS），PCV3會(huì)破壞小腸絨毛，解剖出現(xiàn)雞腸病變，仔豬表現(xiàn)為頑固性腹瀉。華南農(nóng)業(yè)大學(xué)馬靜云課題組對(duì)先天性震顫的仔豬進(jìn)行PCV3檢測(cè)，在6個(gè)發(fā)病的豬場(chǎng)仔豬中均檢測(cè)到PCV3，這提示PCV3可能與仔豬先天性震顫相關(guān)。

4.3 生長(zhǎng)育肥

育肥豬感染后癥狀不明顯，出現(xiàn)厭食，個(gè)別發(fā)熱、丘疹、咳喘等癥狀。臨床上也有一定比例的急性死亡，豬只身上蒼白貧血。在生產(chǎn)實(shí)踐中育肥豬的3型檢出率呈逐漸上升趨勢(shì)。

4.4 混合感染比例高

臨床實(shí)踐中，3型圓環(huán)與其他病原的混合感染比較常見。尤其是PCV3和PCV2、豬繁殖與呼吸綜合征、細(xì)小病毒的混合感染。有研究顯示，豬圓環(huán)3型病毒和細(xì)小病毒混合感染后，推測(cè)細(xì)小病毒可能刺激了PCV3病毒的復(fù)制，從而增加了PCV3的病毒血癥。臨床實(shí)踐中，豬繁殖與呼吸綜合征和圓環(huán)病毒混合感染最多，揚(yáng)州大學(xué)李向東研究發(fā)現(xiàn)PCV3和PRRSV混感比例是62.5%，PCV3和PCV2混感比例是45.8%。藍(lán)耳病的NADC-30like毒株和圓環(huán)病毒混合感染時(shí)，豬群會(huì)有呼吸道綜合征、仔豬斷奶后PMWS等癥狀，并且導(dǎo)致豬群的發(fā)病率和死亡率明顯增加，有研究表明圓環(huán)病毒的活躍可以增加豬繁殖與呼吸綜合征病毒的復(fù)制，導(dǎo)致豬群發(fā)病死亡。PCV3和PRRSV或PCV2混合感染的協(xié)同效應(yīng)還在研究中。因此，豬場(chǎng)生產(chǎn)實(shí)際中，藍(lán)耳病和圓環(huán)病毒的防疫上要更加重視。

5 診斷方法

5.1 臨床診斷

豬群生產(chǎn)出現(xiàn)波動(dòng)時(shí)，及時(shí)觀察豬群表現(xiàn)，母豬出現(xiàn)繁殖障礙，死胎木乃伊增加，仔豬出現(xiàn)斷奶后衰竭綜合征。生長(zhǎng)豬群出現(xiàn)PDNS，以及中大豬出現(xiàn)輕微呼吸道癥狀，皮膚蒼白、偶有急性死亡等癥狀，初步判斷豬群圓環(huán)病毒感染。及時(shí)檢測(cè)豬圓環(huán)2型和3型的病原檢測(cè)，尤其是當(dāng)豬場(chǎng)出現(xiàn)死胎木乃伊增加、繁殖周期延長(zhǎng)、受胎率和分娩率下降時(shí)，在排除了PRRS、PRV等其他病原時(shí)，一定要引起注意，加強(qiáng)檢測(cè)PCV3的檢測(cè)。

5.2 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)診斷

臨床中對(duì)可疑豬群血清、唾液、鼻拭子、流產(chǎn)胎兒、產(chǎn)房仔豬睪丸液采集樣品，送往有資質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，可以采取 PCR的診斷檢測(cè)方法，來(lái)確診3型圓環(huán)病毒的感染。

6 防治措施

豬圓環(huán)病毒是全球養(yǎng)豬業(yè)流行比較廣泛的疾病之一。隨著流行毒株的不斷變異，給養(yǎng)豬生產(chǎn)的防疫帶來(lái)了巨大壓力。目前國(guó)內(nèi)2型圓環(huán)病毒的檢出率和致病性仍然最高，并且PCV3和PCV2的混合感染比例較高。因此在圓環(huán)病毒防控上要做好豬群圓環(huán)疫苗的免疫。第一，要重視母豬和后備母豬的疫苗防疫，可以有效切斷母豬的垂直傳播病毒的風(fēng)險(xiǎn)。第二，引種時(shí)后備豬群加強(qiáng)PCV3的檢測(cè)，避免把該病原引到本場(chǎng)。第三，重視生產(chǎn)的生物安全措施，加強(qiáng)環(huán)境的消毒，降低生產(chǎn)環(huán)境中的病毒量。第四，全進(jìn)全出生產(chǎn)模式，有效切斷豬群水平傳播的風(fēng)險(xiǎn)。第五，加強(qiáng)生產(chǎn)管理，降低豬群應(yīng)激因素，提升豬群免疫力同樣重要。

參考文獻(xiàn)

[1] Ku X，Zhang C，Li P，et al.Epidemiological and genetic

characteristics of porcine circovirus 3 in 15 provinces and

municipalities of China between 2016 and 2020[J].Virology journal，2022，19（1）：187.

[2] 庫(kù)旭鋼，張坤，劉羽茜，等.豬A群輪狀病毒的分離與鑒定[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2012，43（2）：7.