基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討五味消毒飲治療乳腺癌的活性成分及作用機(jī)制

劉欣遙

【摘要】? 目的? 探討五味消毒飲治療乳腺癌的潛在活性成分及作用機(jī)制。方法 利用TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)和DrugBank數(shù)據(jù)庫(kù)檢索五味消毒飲的相關(guān)化學(xué)成分及作用靶點(diǎn)，通過(guò)GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)和OMIM數(shù)據(jù)庫(kù)查找與乳腺癌相關(guān)的靶點(diǎn)，在VENNY 2.1在線平臺(tái)篩選交集基因，運(yùn)用String 12.0構(gòu)建蛋白互做網(wǎng)絡(luò)（PPI），使用DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行GO和KEGG富集分析，并以Autodock Vina驗(yàn)證靶點(diǎn)結(jié)合能力。結(jié)果? 數(shù)據(jù)庫(kù)檢索得到五味消毒飲40個(gè)潛在有效成分，374個(gè)目標(biāo)靶點(diǎn)基因，799個(gè)乳腺癌相關(guān)靶點(diǎn)，分析得出137個(gè)潛在靶點(diǎn)基因，構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)圖得出五味消毒飲治療乳腺癌的9個(gè)關(guān)鍵基因和5個(gè)關(guān)鍵化學(xué)成分。GO富集結(jié)果顯示其生物學(xué)過(guò)程主要為參與激酶活性調(diào)節(jié)、RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄因子活性調(diào)節(jié)、轉(zhuǎn)錄激活因子的結(jié)合等，KEGG通路富集結(jié)果顯示144條相關(guān)通路主要涉及內(nèi)分泌抵抗信號(hào)通路、白細(xì)胞介素-17（IL-17）信號(hào)通路、ErbB信號(hào)通路、催乳素信號(hào)通路、VEGF信號(hào)通路等。分子對(duì)接模擬結(jié)果表明關(guān)鍵活性成分與核心靶點(diǎn)蛋白均有較強(qiáng)的結(jié)合能力。結(jié)論? 五味消毒飲治療乳腺癌主要通過(guò)槲皮素、木犀草素、山奈酚、巖藻黃質(zhì)和β-谷甾醇等活性成分影響了TP53、STAT3、AKT1、ESR1等乳腺癌靶基因和144條相關(guān)信號(hào)通路。該方在乳腺癌治療過(guò)程中具有多成分、多途徑、多靶點(diǎn)、多機(jī)制的特點(diǎn)，為后續(xù)開(kāi)發(fā)利用提供了新的思路。

【關(guān)鍵詞】? 五味消毒飲；網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)；乳腺癌；中藥名方

中圖分類號(hào)? R273? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼? A? ? 文章編號(hào)? 1671-0223（2024）13--06

Based on network pharmacology， the active ingredients and mechanism of action of WuWeiXiaoDuYin in the treatment of breast cancer were discussed? Liu Xinyao.Tianjin First Central Hospital， Tianjin 300192， China

【Abstract】? Objective? To explore the potential active ingredients and mechanism of WuWeiXiaoDuYin in the treatment of breast cancer. Methods? TCMSP database and DrugBank database were used to retrieve the related chemical components and targets of WuWeiXiaoDuYin， GeneCards database and OMIM database were used to find the targets related to breast cancer， the intersection genes were screened on the VENNY 2.1 online platform， String 12.0 was used to construct an egg white interaction network （PPI）， DAVID database was used to carry out GO and KEGG enrichment analysis， and Autodock Vina was used to verify the target binding ability. Results? 40 potential active ingredients， 374 target genes and 799 breast cancer related targets of WuWeiXiaoDuYin were obtained through database retrieval and analysis， 137 potential target genes were obtained through analysis， and 9 key genes and 5 key chemical components of WuWeiXiaoDuYin in the treatment of breast cancer were obtained by constructing PPI network map. The GO enrichment results showed that its biological processes mainly involve kinase activity regulation， RNA polymerase II transcription factor activity regulation， and transcription activator binding. The KEGG pathway enrichment showed that 144 related pathways mainly involve endocrine resistance pathway， IL-17 pathway， ErbB pathway， prolactin pathway， VEGF pathway， etc. The molecular docking simulation results indicate that the key active ingredients have strong binding ability with core target proteins. Conclusion? WuWeiXiaoDuYin mainly affects TP53， STAT3， AKT1， ESR1 and other breast cancer target genes and 144 related signal pathways in the treatment of breast cancer through active ingredients such as quercetin， luteolin， and kaempferol. This prescription has the characteristics of multi-component， multi-channel， multi target and multi mechanism in the treatment of breast cancer， which provides a new idea for subsequent development and utilization.

【Key words】? WuWeiXiaoDuYin; Network Pharmacology; Breast Cancer; Traditional Chinese Medicine Formulas

癌癥是一種威脅人類生命健康的重大難治性疾病，根據(jù)美國(guó)癌癥學(xué)會(huì)（American Cancer Society， ACS）預(yù)測(cè)，到2030年全球癌癥死亡人數(shù)將上升至2170萬(wàn)[1]。在我國(guó)，肺癌在惡性腫瘤發(fā)病率中居于首位，乳腺癌、胃癌和結(jié)直腸癌的致死率也正在逐步上升[2]。乳腺癌是女性中最常見(jiàn)的惡性腫瘤，已經(jīng)成為全球最常診斷的病癥[3]。根據(jù)癌癥統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，2020年，全球新增226萬(wàn)例乳腺癌確診病例，占2020年新發(fā)癌癥病例的11.7%[4]。目前乳腺癌的一線治療仍以手術(shù)與化療為主，但單組分化療藥物易產(chǎn)生的耐藥性以及難以預(yù)見(jiàn)的不良反應(yīng)使得預(yù)后不佳，因此高效能、低毒性、多組分的中藥方劑引起了臨床醫(yī)生和藥學(xué)家的注意。

五味消毒飲出自《醫(yī)宗金鑒》，有清熱解毒，消散疔瘡之功效。已有五味消毒飲治療晚期肺癌、鼻咽癌，預(yù)防治療人乳頭瘤病毒感染的文獻(xiàn)報(bào)道[5-7]，在膀胱癌、肝癌等術(shù)后護(hù)理中也具有良好的價(jià)值[8-9]，因此該方有巨大的深入研究?jī)r(jià)值。通過(guò)利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測(cè)五味消毒飲抗乳腺癌有效成分與潛在靶點(diǎn)及作用通路，并以分子對(duì)接模擬進(jìn)行驗(yàn)證，為五味消毒飲等中藥名方的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)與利用提供參考。

1? 資料與方法

1.1? 五味消毒飲的成分及靶點(diǎn)篩選

五味消毒飲由野菊花、紫花地丁、紫背天葵子、蒲公英和金銀花五味中藥構(gòu)成。利用TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//tcmsp.91medicine.cn/）檢索這五味中藥的化學(xué)成分。設(shè)定化學(xué)成分的生物利用度（OB）≥30%，類藥性指數(shù)（DL）≥0.18，篩選出符合要求的化學(xué)成分。通過(guò)TCMSP和DrugBank數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//go.drugbank.com/）檢索符合要求化學(xué)成分的所有靶點(diǎn)，將靶點(diǎn)數(shù)據(jù)上傳至UniPort數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//www.uniprot.org/），設(shè)定物種為“human”，把靶點(diǎn)轉(zhuǎn)換為基因的SYMBOL格式。

1.2? 乳腺癌相關(guān)靶點(diǎn)的收集

在GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//www.genecards.org/）和OMIM數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//www.omim.org/org/）中查找與乳腺癌相關(guān)的靶點(diǎn)并將基因轉(zhuǎn)換為SYMBOL格式。

1.3? 五味消毒飲與乳腺癌靶點(diǎn)交集

將1.1中得到的五味中藥的靶點(diǎn)進(jìn)行合并并刪除重復(fù)值。在VENNY 2.1在線平臺(tái)（https：//bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/）中分別輸入五味消毒飲和乳腺癌的靶點(diǎn)基因，篩選二者的交集基因，并以韋恩圖的形式展示。

1.4? 蛋白互做網(wǎng)絡(luò)（PPI）分析

將1.3中的交集基因?qū)隨tring 12.0數(shù)據(jù)庫(kù)，使用“Multiple proteins”模塊進(jìn)行分析，設(shè)定“Organisms”處為“Homo sapiens”，以minimum required interaction score≥0.900為篩選標(biāo)準(zhǔn)，導(dǎo)出交集基因的PPI圖。在Cytoscape 3.10.1中對(duì)PPI圖作進(jìn)一步分析，根據(jù)靶點(diǎn)的作用強(qiáng)度（Degree）得出關(guān)鍵靶標(biāo)。

1.5? 構(gòu)建“中藥-活性成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)圖

根據(jù)1.3中的交集基因反向篩選對(duì)應(yīng)的中藥化學(xué)成分，將中藥、化學(xué)成分及共同靶點(diǎn)基因等數(shù)據(jù)導(dǎo)入Cytoscape 3.10.1，構(gòu)建“中藥-活性成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)圖。

1.6? GO富集分析與KEGG通路富集分析

為了對(duì)1.3中的交集基因的功能和通路進(jìn)行注釋，使用DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//david.ncifcrf.gov/）的功能注釋模塊進(jìn)行GO和KEGG富集分析，P<0.05的GO和KEGG被認(rèn)為顯著富集。利用微生信在線平臺(tái)（https：//www.bioinformatics.com.cn/）繪制富集結(jié)果。

1.7? 分子對(duì)接驗(yàn)證

從Pubchem數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/）中下載核心靶點(diǎn)活性成分的SDF格式，導(dǎo)入Chemdraw 3D中，利用MM2模塊對(duì)活性成分進(jìn)行能量最小化，獲得能量最低的優(yōu)勢(shì)構(gòu)象并保存為.pdb文件。使用Autodock Vina[10]對(duì)活性成分進(jìn)行加氫、加電荷、檢測(cè)配體的root、進(jìn)行可旋轉(zhuǎn)鍵的搜尋與定義，并保存為.pdbqt文件。從PDB數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//www.rcsb.org/）中下載核心靶點(diǎn)蛋白的三維結(jié)構(gòu)，利用Autodock Vina對(duì)蛋白進(jìn)行去水分子、加氫、計(jì)算電荷，將其定義為受體并保存為.pdbqt文件。使用Autodock Vina軟件將配體與受體進(jìn)行對(duì)接，并用PyMOL 3.0軟件進(jìn)行可視化。

2? 結(jié)果

2.1? 五味消毒飲的成分及靶點(diǎn)篩選

在TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)中以O(shè)B≥30%及DL≥0.18為標(biāo)準(zhǔn)篩選得到五味消毒飲有40個(gè)化學(xué)成分（野菊花9個(gè)、紫花地丁1個(gè)、紫背天葵子7個(gè)、蒲公英6個(gè)、金銀花17個(gè)）。

通過(guò)TCMSP和DrugBank數(shù)據(jù)庫(kù)檢索符合要求化學(xué)成分的所有靶點(diǎn)，并通過(guò)UniPort規(guī)范基因名后，得到野菊花的作用靶點(diǎn)基因197個(gè)，紫花地丁的作用靶點(diǎn)基因3個(gè)，紫背天葵子的作用靶點(diǎn)基因18個(gè)，蒲公英的作用靶點(diǎn)基因357個(gè)，金銀花的作用靶點(diǎn)218個(gè)，將上述靶點(diǎn)數(shù)據(jù)合并并刪除重復(fù)值后共得到374個(gè)靶點(diǎn)基因。

2.2? 乳腺癌相關(guān)靶點(diǎn)的收集及五味消毒飲與乳腺癌靶點(diǎn)交集預(yù)測(cè)

在GeneCards和OMIM數(shù)據(jù)庫(kù)一共檢索到935個(gè)乳腺癌相關(guān)靶點(diǎn)，經(jīng)過(guò)去重后得到799個(gè)乳腺癌相關(guān)靶點(diǎn)。將2.1中374個(gè)活性成分對(duì)應(yīng)的靶點(diǎn)與799個(gè)乳腺癌相關(guān)靶點(diǎn)輸入至VENNY 2.1平臺(tái)，共獲得137個(gè)交集靶點(diǎn)，如圖1。

2.3? 藥物-疾病靶點(diǎn)蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

將137個(gè)中藥疾病共有靶點(diǎn)基因?qū)隨tring平臺(tái)，選定“Homo sapiens”，構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)圖。將PPI網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)導(dǎo)入Cytoscape 3.10.1，通過(guò)該軟件設(shè)置節(jié)點(diǎn)的大小及顏色隨Degree數(shù)值大小變化而構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)圖（得出92個(gè)節(jié)點(diǎn)，603條邊），如圖2。Degree越高代表該靶點(diǎn)對(duì)治療乳腺癌的關(guān)系越密切，由此推測(cè)， 細(xì)胞腫瘤抗原p53（TP53）、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3（STAT3）、蛋白激酶B （AKT1）、肉瘤基因（SRC）、人雌激素受體（ESR1）、JUN重組蛋白（JUN）、熱休克蛋白90（HSP90AA1）、表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）、磷酸肌醇-3-激酶（PIK3CA）等相關(guān)基因?qū)ξ逦断撅嬛委熑橄侔┲陵P(guān)重要。

2.4? “中藥-活性成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建結(jié)果

為了展示中藥、活性成分及作用靶點(diǎn)之間的相互作用關(guān)系，將1.3中的數(shù)據(jù)導(dǎo)入Cytoscape 3.10.1，如圖3所示，該網(wǎng)絡(luò)有266個(gè)節(jié)點(diǎn)，845條邊，其中節(jié)點(diǎn)表示中藥、活性成分及靶點(diǎn)基因，邊表示“中藥-活性成分”“活性成分-靶點(diǎn)基因”之間的關(guān)系，節(jié)點(diǎn)的大小根據(jù)節(jié)點(diǎn)Degree值的大小而變化。利用Network Analyzer進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)拓?fù)浞治?，依?jù)節(jié)點(diǎn)Degree值排序，前5名的藥物活性成分分別為槲皮素（CAS：117-39-5）、木犀草素（CAS：491-70-3）、山奈酚（CAS：520-18-3）、巖藻黃質(zhì)（CAS：3351-86-8）和β-谷甾醇（64997-52-0），以上活性成分可能是五味消毒飲治療乳腺癌的關(guān)鍵活性成分。

2.5? GO和KEGG富集分析結(jié)果

將1.3中的交集基因上傳至DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行GO和KEGG富集分析，顯著性水平設(shè)為P<0.05，共得到297個(gè)GO富集結(jié)果條目，其中生物過(guò)程（BP）為188條，分子功能（MF）為79條，細(xì)胞組分（CC）為31條。以P值為指標(biāo)，對(duì)各組進(jìn)行篩選，選擇BP、MF、CC排名前10位的條目，結(jié)果如圖4所示。由圖4可知，其生物學(xué)過(guò)程主要為參與激酶活性調(diào)節(jié)、RNA聚合酶II轉(zhuǎn)錄因子活性調(diào)節(jié)、轉(zhuǎn)錄激活因子的結(jié)合等，主要發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)膜、核質(zhì)、胞質(zhì)等部位，分子功能為主要參與蛋白質(zhì)磷酸化、RNA聚合酶II啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄的調(diào)控、激酶活性調(diào)節(jié)等。

KEGG通路富集結(jié)果顯示，共篩選得到144條相關(guān)通路，主要涉及內(nèi)分泌抵抗信號(hào)通路、白細(xì)胞介素-17（IL-17）信號(hào)通路、酪氨酸激酶受體（ErbB）信號(hào)通路、催乳素信號(hào)通路、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）信號(hào)通路等，根據(jù)P值篩選前20個(gè)條目并繪制氣泡圖，結(jié)果如圖5所示。

2.6? 分子對(duì)接

將中藥疾病共同靶點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的中藥活性成分按照Degree度值排序，選擇前5的中藥活性成分（槲皮素、木犀草素、山奈酚、巖藻黃質(zhì)和β-谷甾醇）與核心靶點(diǎn)度值前5名的基因（TP53、STAT3、AKT1、SRC、ESR1）分別進(jìn)行分子對(duì)接，并獲取最低結(jié)合能，通常認(rèn)為配體和受體結(jié)合能數(shù)值越低，其結(jié)合能力越強(qiáng)，評(píng)估結(jié)合性良好一般以結(jié)合能＜-1.2 kcal/mol為標(biāo)準(zhǔn)。本研究中五味消毒飲的關(guān)鍵活性成分與TP53、STAT3、AKT1、SRC、ESR1的結(jié)合能均小于-1.2 kcal/mol，說(shuō)明關(guān)鍵中藥活性成分與核心靶點(diǎn)蛋白有較強(qiáng)的結(jié)合能力，見(jiàn)圖6，根據(jù)結(jié)合能選取結(jié)合最好的四組進(jìn)行對(duì)接模式分析作圖，如圖7所示。

3? 討論

乳腺癌已經(jīng)是導(dǎo)致女性死亡的主要原因之一，居于所有女性惡性腫瘤發(fā)病率和致死率的首位。近年來(lái)，由于飲食、生活環(huán)境、孕齡和其他未知因素的變化，其發(fā)病率仍處于逐年上升的趨勢(shì)。大約6%～10%的乳腺癌患者在初診時(shí)患有轉(zhuǎn)移性乳腺癌，20%～30%的晚期乳腺癌患者會(huì)發(fā)生轉(zhuǎn)移并導(dǎo)致不良預(yù)后。五味消毒飲主治疔瘡初起，發(fā)熱惡寒，以及癰瘍癤腫，紅腫熱痛，舌紅苔黃。臨床常用于治療急性乳腺炎、蜂窩組織炎等外科急性感染，急性泌尿系感染、膽囊炎、肺炎、流行性乙型腦炎等性傳染病具有熱毒證候者。有證據(jù)表明五味消毒飲能夠下調(diào)白介素水平[11]，白介素家族與炎癥密切相關(guān)，隨著近年來(lái)分子生物學(xué)深入研究，發(fā)現(xiàn)白介素家族也影響著乳腺癌的發(fā)生發(fā)展[12-13]。因此，以全局視角系統(tǒng)完整地研究五味消毒飲與乳腺癌間的聯(lián)系具有一定的臨床價(jià)值。本研究運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的方法對(duì)五味消毒飲治療乳腺癌的潛在活性成分及靶點(diǎn)進(jìn)行挖掘，探討其可能的作用機(jī)制，并采用分子對(duì)接的方法進(jìn)行驗(yàn)證。

PPI網(wǎng)絡(luò)分析發(fā)現(xiàn)，TP53、STAT3、AKT1、SRC、ESR1等可能是五味消毒飲治療乳腺癌的核心靶點(diǎn)。TP53是一種抑癌基因，被稱為“基因組的守護(hù)者”，它控制著腫瘤生長(zhǎng)過(guò)程中的細(xì)胞周期、DNA復(fù)制和細(xì)胞分裂[14]。在乳腺癌中，TP53是最常見(jiàn)的突變基因，其突變率在30%～35%[15]。突變型TP53基因會(huì)使其抑癌特性喪失，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖及轉(zhuǎn)移，使腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性[16]。STAT3是信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活子，在細(xì)胞增殖、分化及凋亡過(guò)程中發(fā)揮重要作用。在乳腺癌中，STAT3可以被多種細(xì)胞因子過(guò)度激活，導(dǎo)致乳腺癌干細(xì)胞富集，進(jìn)而產(chǎn)生更具有侵襲性的乳腺癌表型[17]。AKT1是PI3K-Akt信號(hào)通路的下游蛋白，參與乳腺癌等多種上皮細(xì)胞癌的發(fā)生發(fā)展[18]。SRC基因是哺乳動(dòng)物中發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)原癌基因，該基因在促進(jìn)乳腺癌、肺癌等諸多腫瘤的發(fā)生、進(jìn)展和惡化中起著重要的作用[19]。有研究表明，SRC通過(guò)磷酸化LIPIN-1基因加速乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)，促進(jìn)小鼠模型中乳腺癌的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移[20]。ESR1突變可以導(dǎo)致乳腺癌細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性，其通過(guò)激活I(lǐng)GF-1R/IRS-1/Akt通路，或與輔助激活/抑制因子結(jié)合情況的改變而使雌激素受體活性增強(qiáng)，從而顯示出對(duì)化療藥物治療的耐藥性[21]。

“中藥-活性成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)分析結(jié)果表明，槲皮素、木犀草素、山奈酚、巖藻黃質(zhì)和β-谷甾醇等可能是五味消毒飲發(fā)揮抑制乳腺癌作用的關(guān)鍵活性成分。研究表明，槲皮素有抗炎、抗氧化、抗病毒、調(diào)節(jié)免疫、調(diào)節(jié)血脂、抗腫瘤等活性[22]，也可以通過(guò)下調(diào)PI3K、Akt蛋白表達(dá)抑制糖酵解從而促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞的凋亡[23]。木犀草素具有抗腫瘤的作用，其作用機(jī)制包括抑制腫瘤血管的生成[24]、調(diào)節(jié)細(xì)胞周期、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡和抑制腫瘤細(xì)胞遷移[25]。山奈酚具有抗炎、抗病毒、抗腫瘤、抗血栓、鎮(zhèn)痛等作用，其通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，調(diào)節(jié)細(xì)胞周期，抑制新生血管生成和腫瘤轉(zhuǎn)移等作用抑制腫瘤細(xì)胞增殖和侵襲，并可通過(guò)調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激反應(yīng)和抑制炎性因子發(fā)揮抗腫瘤作用[26]。巖藻黃質(zhì)屬于天然胡蘿卜素，對(duì)皮膚癌、結(jié)腸癌、前列腺癌和肝癌等多種惡性腫瘤有明顯的抑制作用[27]。β-谷甾醇也對(duì)腫瘤有抑制作用，它可以抑制腫瘤細(xì)胞的增殖、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡、調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的免疫功能[28]。

GO功能富集結(jié)果顯示，五味消毒飲主要通過(guò)激酶活性調(diào)節(jié)、RNA聚合酶II轉(zhuǎn)錄因子活性調(diào)節(jié)、轉(zhuǎn)錄激活因子的結(jié)合等生物學(xué)過(guò)程發(fā)揮抗乳腺癌的作用。KEGG通路富集結(jié)果顯示，五味消毒飲治療乳腺癌與內(nèi)分泌抵抗信號(hào)通路、IL-17信號(hào)通路、ErbB信號(hào)通路、催乳素信號(hào)通路、VEGF信號(hào)通路等密切相關(guān)。內(nèi)分泌治療已經(jīng)成為激素受體陽(yáng)性乳腺癌的主要治療手段，隨著治療的進(jìn)行，腫瘤細(xì)胞會(huì)對(duì)內(nèi)分泌治療藥物出現(xiàn)耐藥性即內(nèi)分泌抵抗[29]。有研究表明，IL-17在乳腺癌中高表達(dá)，其可以使COX-2表達(dá)增加，引起組織增生，促進(jìn)血管生成，及炎癥介質(zhì)的過(guò)度表達(dá)，抑制腫瘤相關(guān)的免疫應(yīng)答，促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)[30]。ErbB家族中的ErbB2基因可以直接自體形成二聚體或異二聚體，可以活化受體酪氨酸激酶，激活下游信號(hào)通路，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖和侵襲轉(zhuǎn)移[31]。催乳素信號(hào)通路與乳腺癌密切相關(guān)，該通路中的催乳素與催乳素受體結(jié)合后發(fā)揮作用，通過(guò)抑制細(xì)胞的凋亡和縮短細(xì)胞周期的方式促進(jìn)腫瘤的發(fā)生和發(fā)展[32]。VEGF可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞分泌信號(hào)分子，從而誘導(dǎo)正常細(xì)胞形成新的血管，為腫瘤提供氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)、增殖和遷移[33]。

分子對(duì)接結(jié)果顯示，關(guān)鍵活性成分與核心靶點(diǎn)之間有良好的結(jié)合能力，提示五味消毒飲可能通過(guò)TP53、STAT3、AKT1、SRC、ESR1等靶點(diǎn)發(fā)揮抗乳腺癌作用。

綜上所述，本研究通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接的方法初步證明了五味消毒飲可能通過(guò)槲皮素、木犀草素、山奈酚、巖藻黃質(zhì)、β-谷甾醇等活性成分，作用于TP53、STAT3、AKT3.1、SRC、ESR1等靶點(diǎn)，調(diào)節(jié)分泌抵抗信號(hào)通路、IL-17信號(hào)通路、ErbB信號(hào)通路、催乳素信號(hào)通路、VEGF信號(hào)通路，進(jìn)而抑制腫瘤的血管生成、增強(qiáng)腫瘤免疫浸潤(rùn)、促進(jìn)腫瘤凋亡、抑制乳腺腫瘤的生長(zhǎng)、增殖和遷移侵襲。這一過(guò)程體現(xiàn)了多成分、多靶點(diǎn)、多途徑的治療特點(diǎn)，為后續(xù)研究及臨床應(yīng)用提供了參考價(jià)值。

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[2024-06-21收稿]