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    不同發(fā)情處理方案對梅花鹿同期發(fā)情效果的影響

    2024-06-29 00:00:00崔鶴馨陳琦呼延含蓉苑冬梅尚麗元宋延來劉沂霖孫興忠郝良玉馮凱田來明
    野生動物學(xué)報 2024年2期
    關(guān)鍵詞:梅花鹿前列腺素

    摘 要 為探索梅花鹿(Cervus nippon)最佳同期發(fā)情方案,在吉林省雙陽鹿業(yè)良種繁育有限公司挑選163只健康、發(fā)情周期正常、繁殖機(jī)能良好的供試母鹿隨機(jī)分為3組:A組采用國產(chǎn)陰道孕酮栓(CIDR),B組采用進(jìn)口CIDR,C組采用二次前列腺素(PG),均輔以孕馬血清促性腺激素(PMSG)法處理。另挑選100只供試母鹿隨機(jī)均分為4組,采用篩選出的較優(yōu)方案結(jié)合不同劑量PMSG法處理(Ⅰ組100 IU、Ⅱ組300 IU、Ⅲ組500 IU、Ⅳ組700 IU),探析不同發(fā)情處理方案對梅花鹿母鹿發(fā)情效果、發(fā)情時間分布、受胎率和雙胎率的影響以及不同PMSG劑量對母鹿發(fā)情受胎的影響。結(jié)果表明:A、B組同期發(fā)情率差異不顯著,但A、B組同期發(fā)情率分別較C組高23. 5%和33. 3%(plt;0. 01),且A組掉栓率較B組高8. 8%(plt;0. 05);3種處理方案對發(fā)情時間分布的影響極顯著(plt;0. 01);B組與A、C組比較,受胎率和產(chǎn)仔率分別高6. 5%和9. 8%(pgt;0. 05),雙胎率分別高13. 4%和17. 6%(pgt;0. 05);采用進(jìn)口CIDR輔以不同劑量PMSG法對梅花鹿進(jìn)行同期發(fā)情處理,發(fā)現(xiàn)Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組同期發(fā)情率較Ⅰ組分別高36. 0%、40. 0%和48. 0%(plt;0. 05),呈隨PMSG 劑量升高而升高的趨勢,其他各組間差異不顯著(pgt;0. 05),但發(fā)情時間均集中在24~48 h,Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組受胎率分別為46. 2%、61. 9%、59. 1%和50. 0%,呈先升高后下降的趨勢(pgt;0. 05)。綜上所述,陰道埋栓的發(fā)情方案顯著好于二次PG法,進(jìn)口CIDR優(yōu)于國產(chǎn)CIDR;進(jìn)口CIDR+PMSG法的母鹿發(fā)情率和受胎率隨PMSG劑量的增加而升高,但發(fā)情時間不受PMSG劑量的影響,PMSG適宜劑量為300 IU。

    關(guān)鍵詞:梅花鹿;同期發(fā)情;陰道孕酮栓;前列腺素;孕馬血清促性腺激素

    中圖分類號:Q954. 4;S865. 4+2 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A 文章編號:2310 - 1490(2024)- 02 - 0262 - 07

    DOI:10.12375/ysdwxb.20240204

    我國東北地區(qū)梅花鹿(Cervus nippon)資源雖然較豐富,但由于母鹿個體發(fā)情時間分散且難以鑒定,其繁衍一直沿用傳統(tǒng)配種方法,無法最大限度發(fā)揮優(yōu)良種公鹿的效能,因此嚴(yán)重制約梅花鹿產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。產(chǎn)業(yè)發(fā)展良種先行,人工授精和胚胎移植等先進(jìn)繁殖技術(shù)的推廣應(yīng)用是加快梅花鹿良種化進(jìn)程的有效途徑,而同期發(fā)情是必需的程序。同期發(fā)情技術(shù)是采用外源激素使母畜自然發(fā)情周期改變,讓母畜集中發(fā)情、配種和妊娠。國內(nèi)外對鹿類同期發(fā)情技術(shù)均進(jìn)行了探索研究[1?10],但國內(nèi)對梅花鹿同期發(fā)情的試驗效果[1,3,5?6,11]均不理想。因此,本試驗通過研究不同發(fā)情處理方案對梅花鹿母鹿發(fā)情效果、發(fā)情時間分布、受胎率和雙胎率的影響,以及不同孕馬血清促性腺激素(PMSG)劑量對母鹿發(fā)情受胎的影響,旨在探索最佳同期發(fā)情方案,為進(jìn)一步提高和推廣梅花鹿人工繁殖技術(shù)奠定基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1. 1 試驗動物

    選擇健康、發(fā)情周期正常和繁殖機(jī)能良好的試驗梅花鹿母鹿263只,年齡5~9歲。選擇性器官發(fā)育良好、情欲充沛、膘肥體壯和膽小溫順的試情梅花鹿公鹿25只,年齡3~5歲。上述梅花鹿均由吉林省雙陽鹿業(yè)良種繁育有限公司提供。

    1. 2 試驗藥品

    麻藥眠乃靈、解藥蘇醒靈均購自吉林省華牧動物保健品有限公司,國產(chǎn)和進(jìn)口陰道孕酮栓(cyc?logest intravaginal device release,CIDR)分別購自河南法牧農(nóng)業(yè)科技有限公司和新西蘭哈密爾頓公司,前列腺素(PG)和孕馬血清促性腺激素(PMSG)購自寧波第二激素廠,優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)梅花鹿冷凍精液(0. 25 mL/管)購自吉林省雙陽鹿業(yè)良種繁育有限公司。

    1. 3 試驗設(shè)計

    從263 只供試母鹿中隨機(jī)挑選163 只,分為3組:A組(58只)采用國產(chǎn)CIDR,B組(65只)采用進(jìn)口CIDR,C組(40只)采用二次PG,均結(jié)合PMSG進(jìn)行處理,篩選出較優(yōu)處理方案。然后將剩余100只供試母鹿隨機(jī)均分為4組,采用較優(yōu)處理方案,結(jié)合不同劑量PMSG,Ⅰ組100 IU、Ⅱ組300 IU、Ⅲ組500 IU、Ⅳ組700 IU。

    1. 4 試驗方法

    1. 4. 1 同期發(fā)情處理

    在發(fā)情季節(jié)里任選一天,分批次麻醉供試母鹿。A、B組,植入CIDR,計為第0天,處理后用蘇醒靈解麻醉,在第12天取CIDR時肌內(nèi)注射PMSG 350 IU。C組,第1次注射PG 0. 5 mg/只,計為第0天,第10天第2 次注射PG 0. 5 mg/只,第11 天肌內(nèi)注射PMSG400 IU。較優(yōu)方案+PMSG不同劑量處理組,較優(yōu)方案處理第1天計為第0天,之后按較優(yōu)方案PMSG注射時間分別注射PMSG 100、300、500、700 IU,篩選出最優(yōu)處理方案。

    1. 4. 2 發(fā)情鑒定

    采用公鹿試情法鑒定母鹿是否發(fā)情。同期發(fā)情處理后的12 h,將帶試情布的試情公鹿按1∶15~1∶20與供試母鹿混群,每隔2~4 h 試情1 次,每次持續(xù)0. 5~1. 0 h,持續(xù)觀察96 h。當(dāng)母鹿靜止站立、穩(wěn)定接受公鹿爬胯時,記錄發(fā)情時間和母鹿耳號,并統(tǒng)計0~24 h、gt;24~48 h、gt;48~72 h和gt;72~96 h的母鹿發(fā)情數(shù)量。

    1. 4. 3 人工輸精

    供試母鹿經(jīng)同期發(fā)情處理后,采用直腸把握法予以人工輸精,每只用量為1管解凍精液(精子活力保持在0. 3以上),僅輸精1次。

    1. 4. 4 妊娠診斷

    人工輸精后第10天,將試情公鹿放入配種后的母鹿群進(jìn)行觀察,返情的母鹿判定為未受孕,未返情的母鹿判定為受孕。

    1. 5 統(tǒng)計分析

    利用SPSS 23. 0軟件中的χ2檢驗和精確檢驗比較分析不同組之間的差異;采用Z 檢驗邦弗侖尼法對不同發(fā)情時間母鹿發(fā)情比例的多重比較作顯著性分析。以plt;0. 05表示差異顯著,plt;0. 01表示差異極顯著。

    2 結(jié)果

    2. 1 不同發(fā)情處理方案對母鹿同期發(fā)情效果的影響

    A、B兩組的同期發(fā)情率較C組分別高23. 5%和33. 3%(plt;0. 01);B組同期發(fā)情率較A組高9. 8%(pgt;0. 05);B組掉栓率較A組低8. 8%(plt;0. 05)(表1)。

    2. 2 不同發(fā)情處理方案對母鹿同期發(fā)情時間分布的影響

    3種處理方案對發(fā)情時間分布的影響差異極顯著(plt;0. 01)。表2多重比較表明,0~24 h的A組、B組和C組發(fā)情率分別為5. 2%、12. 3%和5. 0%,差異不顯著(pgt;0. 05);gt;24~48 h的發(fā)情率分別為74. 1%、84. 6%和40. 0%,A、B兩組間無顯著差異(pgt;0. 05),C 組和A、B 組間均差異極顯著(plt;0. 01);gt;48~72 h的發(fā)情率分別為19. 0%、3. 1% 和35. 0%,A、C 組間無顯著差異(pgt;0. 05),B和A、C組間均差異極顯著(plt;0. 01);gt;72~96 h 的發(fā)情率分別為1. 7%、0 和20. 0%,A、B組間無顯著差異(pgt;0. 05),C和A、B組間均差異極顯著(plt;0. 01)。

    2. 3 不同發(fā)情處理方案對受胎率、產(chǎn)仔率和雙胎率的影響

    B組受胎率和產(chǎn)仔率均高于A組6. 5%,均高于C組9. 8%,雙胎率比A、C組分別高13. 4%和17. 6%(表3),但3種處理方案對母鹿受胎率、產(chǎn)仔率和雙胎率的影響均無顯著差異(pgt;0. 05)。

    2. 4 不同劑量PMSG 對母鹿繁殖效果的影響

    采用進(jìn)口CIDR 輔以不同劑量PMSG 法對梅花鹿進(jìn)行同期發(fā)情處理,經(jīng)多重比較,發(fā)現(xiàn)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組間無顯著差異(pgt;0. 05),但各組均與Ⅰ組差異顯著(plt;0. 05),各組發(fā)情時間主要分布于gt;24~48 h。各組間受胎率差異均不顯著(pgt;0. 05)(表4)。

    3 討論

    3. 1 梅花鹿同期發(fā)情效果分析

    母鹿在未受精條件下,卵泡期(性興奮期)和黃體期(性靜止期)交替循環(huán)出現(xiàn),構(gòu)成完整的發(fā)情周期。若要母鹿進(jìn)入卵泡期同時發(fā)情,關(guān)鍵是調(diào)控黃體期,使其同時終止,為引起同時發(fā)情創(chuàng)造一個共同的基準(zhǔn)線。同期發(fā)情輔助藥物采用PMSG。本研究采用延長和縮短黃體期的2種方案,3種處理方式進(jìn)行同期發(fā)情處理,得到同期發(fā)情率:國產(chǎn)CIDR組為81. 0%,進(jìn)口CIDR 組為90. 8%,二次PG 處理組為57. 5%。不同CIDR處理組之間差異不顯著,但均顯著高于二次PG處理組(plt;0. 05)。國產(chǎn)和進(jìn)口CIDR處理組的掉栓率分別為10. 3% 和1. 5%,差異顯著(plt;0. 05),這可能與CIDR裝置采用的發(fā)泡硅橡膠的品質(zhì)不同有關(guān)。佟敬賓等[12]研究報道,利用自制海綿栓+PMSG和進(jìn)口CIDR+PMSG對東北馬鹿(Cervuselaphus xanthopygus)進(jìn)行同期發(fā)情處理后,發(fā)現(xiàn)同期發(fā)情率均優(yōu)于二次PG+PMSG處理,但二者無顯著差異,本試驗結(jié)果與之相似。趙喜堂等[13]在對塔里木馬鹿(C. e. yarkandensis)同期發(fā)情的研究中,利用CIDR+PMSG 獲得了相近的同期發(fā)情率。任航行等[14]應(yīng)用國產(chǎn)CIDR+PMSG 對梅花鹿進(jìn)行處理,得到了100%同期發(fā)情率,這可能與試驗所選母鹿數(shù)量少(5只)有關(guān)。劉麗娟等[15]對馬鹿采用二次PG輔以PMSG的處理方式,發(fā)現(xiàn)同期發(fā)情率達(dá)93. 3%,遠(yuǎn)高于本試驗結(jié)果。出現(xiàn)這些差異,除與試驗品種、數(shù)量有關(guān)外,還可能與母鹿的營養(yǎng)狀況、生殖狀況、藥品選擇和季節(jié)條件等影響同期發(fā)情效果的因素有關(guān)[16]。另外,應(yīng)激反應(yīng)對發(fā)情效果也具有一定影響[15]。梅花鹿野性較強(qiáng),與一般家畜相比,對外界環(huán)境變化或刺激更敏感[17],且由于個體差異也會產(chǎn)生不同程度的應(yīng)激反應(yīng),反應(yīng)小的母鹿發(fā)情效果相對較好,反之發(fā)情效果較差。馬澤芳等[18]采用二次PG配合PMSG和HCG對梅花鹿進(jìn)行同期發(fā)情處理,發(fā)現(xiàn)PG高劑量組(600 μg/只)和低劑量組(500 μg/只)的同期發(fā)情率分別為25. 0%和14. 2%,低于本試驗結(jié)果,這可能是由激素的選擇、搭配、生產(chǎn)廠家和用量不同等因素導(dǎo)致。

    同期發(fā)情技術(shù)是調(diào)控梅花鹿高效繁殖的核心技術(shù)之一,其目的是使母鹿在短時間內(nèi)集中發(fā)情,發(fā)情時間集中程度越高,越利于對母鹿集中試情和定時人工輸精,實現(xiàn)集中配種和產(chǎn)仔,方便生產(chǎn)管理集中進(jìn)行,最大限度節(jié)約成本。有研究表明,在同種藥物作用下,母鹿自身對同種激素的敏感性有差異[19]。為此,本試驗應(yīng)用不同激素對梅花鹿進(jìn)行同期發(fā)情處理,發(fā)現(xiàn)母鹿發(fā)情時間分布各組之間差異顯著,即B 組(進(jìn)口CIDR)gt;A 組(國產(chǎn)CIDR)gt;C 組(二次PG處理)。Willard等[9]應(yīng)用CIDR結(jié)合PMSG處理梅花鹿,于CIDR取出后(34. 6±1. 9) h發(fā)情。魏海軍等[20]應(yīng)用進(jìn)口CIDR 和PMSG 誘導(dǎo)梅花鹿同期發(fā)情,于CIDR取出后(33. 3±7. 0) h發(fā)情。以上研究表明,進(jìn)口CIDR結(jié)合PMSG誘導(dǎo)梅花鹿發(fā)情時間集中程度高,絕大多數(shù)集中在24~48 h,與本試驗結(jié)果相符。二次PG處理法同期發(fā)情時間比較分散,主要是因為鹿是季節(jié)性發(fā)情動物,每年春季產(chǎn)仔,秋季發(fā)情,循環(huán)往復(fù)。在發(fā)情季節(jié),一般也僅有1~3個發(fā)情周期,由于PG具有高效溶解黃體的作用[21],而此時卵巢上可能尚未形成黃體。另外鹿存在個體差異,對PG的反應(yīng)易造成發(fā)情時間分散。受胎率和產(chǎn)仔率是衡量生產(chǎn)效率的重要指標(biāo),其高低直接影響?zhàn)B鹿業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益。呂津等[22]報道,孕酮可減少早期胚胎的退化進(jìn)而提高受胎率。本研究應(yīng)用不同藥物對母鹿進(jìn)行同期發(fā)情處理,發(fā)現(xiàn)各組受胎率略有差異但不顯著,這與韓志強(qiáng)等[23]研究報道的不同方法對同期發(fā)情后妊娠率無顯著影響的結(jié)果相似。趙列平等[11]研究發(fā)現(xiàn),CIDR放置11 d,將梅花鹿深度麻醉,用直腸把握法將凍精進(jìn)行輸精,受胎效果較好,平均受胎率為58. 6%,與本試驗結(jié)果基本符合。蔣濤等[24]利用CIDR+PMSG對天山馬鹿(C. e. songaricus)做同期發(fā)情處理,獲得57. 5%的受胎率,與本試驗相近。王全凱等[25]應(yīng)用進(jìn)口CIDR結(jié)合PMSG對梅花鹿進(jìn)行同期發(fā)情處理,發(fā)現(xiàn)母鹿平均受胎率為62. 45%;向振博等[26]采用相同方式進(jìn)行同期發(fā)情處理,鹿受胎率達(dá)71. 8%。劉麗娟等[15]利用二次PG 結(jié)合PMSG 處理馬鹿,取得了73. 3%的受胎率。以上研究的受胎率絕大多數(shù)均高于本試驗,此差異除受鹿體膘情、經(jīng)產(chǎn)與否和輸精時間等因素的影響外[27],也可能與輸精技術(shù)熟練程度有關(guān)[24]。梅花鹿自然發(fā)情的雙胎率為2. 99%[28],本試驗CIDR+PMSG處理組獲得的梅花鹿母鹿雙胎率均高于自然發(fā)情,進(jìn)一步證實CIDR+PMSG具有誘發(fā)母鹿排雙卵的作用,與趙列平等[11]的研究結(jié)果相符。雖然激素藥物的使用能提高雙胎率,但同期發(fā)情的3組間雙胎率均不理想,可能是供試母鹿自身卵巢機(jī)能所限,每個發(fā)情周期內(nèi)成熟的卵泡數(shù)量較少。

    3. 2 PMSG 劑量對母鹿繁殖效果的影響

    PMSG可促進(jìn)卵泡生長發(fā)育、成熟排卵和黃體形成,生產(chǎn)中廣泛應(yīng)用于母畜繁殖和生殖系統(tǒng)疾病的治療。本研究利用進(jìn)口CIDR結(jié)合肌內(nèi)注射不同劑量的PMSG對梅花鹿進(jìn)行同期發(fā)情處理,結(jié)果顯示發(fā)情時間趨勢大致相同,24~48 h內(nèi)各組發(fā)情率分別為75. 0%、85. 7%、86. 4% 和79. 2%,發(fā)情時間相對集中,與魏海軍等[20]的研究結(jié)果相似。張振良等[29]采用相同方法對同為季節(jié)性發(fā)情的動物巴什拜羊進(jìn)行處理后,發(fā)現(xiàn)其發(fā)情時間主要集中在24~48 h,與本研究結(jié)果相符。本試驗對Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組分別肌內(nèi)注射PMSG 100、300、500、700 IU,發(fā)現(xiàn)供試母鹿同期發(fā)情率有增高的趨勢,這與魏海軍等[20]的結(jié)論相符。佟敬賓等[12]在CIDR結(jié)合不同劑量PMSG對馬鹿發(fā)情影響的研究中,也得出相同結(jié)論。本研究同期發(fā)情率除Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組與Ⅰ組差異顯著外,其他各組間差異不顯著,這可能是梅花鹿自身體質(zhì)對激素刺激不敏感導(dǎo)致。

    本試驗中,隨著PMSG劑量的增加,受胎率出現(xiàn)先升高后下降的趨勢,但各組之間差異不顯著,這可能是PMSG 對卵巢發(fā)育存在最適閾濃度[30]。當(dāng)PMSG劑量過低時,PMSG無法有效促進(jìn)卵泡生長,提高繁殖力;當(dāng)PMSG 劑量過高時,由于其半壽期長,體內(nèi)殘留時間長,易引起卵泡過度生長,誘發(fā)卵巢囊腫,從而阻礙胚胎的發(fā)育著床。

    4 結(jié)論

    在繁殖季節(jié)里,綜合比較母鹿同期發(fā)情率、掉栓率、發(fā)情時間集中程度、受胎率、產(chǎn)仔率和雙胎率,陰道埋栓的發(fā)情方案顯著好于二次PG法,進(jìn)口CIDR優(yōu)于國產(chǎn)CIDR。進(jìn)口CIDR+PMSG法的發(fā)情率和受胎率隨PMSG劑量的增加而升高,但發(fā)情時間不受PMSG劑量的影響,PMSG適宜劑量為300 IU。

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