鵝呼腸孤病毒病的診斷和防控

張紅 田秋豐 馬志剛 董佳強(qiáng) 苗艷 王麗坤 陳志峰

中圖分類(lèi)號(hào)：S858.33文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：C文章編號(hào)：1673-1085（2024）06-0120-02

鵝呼腸孤病毒?。╣oosereovirus，GRV）是由鵝呼腸孤病毒感染引起的一種傳染性疾病，主要病變特征為肝臟和脾臟出現(xiàn)點(diǎn)狀白色灶性壞死。近年來(lái)該病在我國(guó)有些省份發(fā)生，嚴(yán)重影響了我國(guó)鵝產(chǎn)業(yè)的健康與快速發(fā)展。本文介紹了鵝呼腸孤病毒病的流行病學(xué)、臨床癥狀、剖檢病變、診斷方法和防控措施，旨在為今后該病的綜合防控提供一定的參考。

1? 流行病學(xué)

發(fā)病鵝和帶毒鵝是鵝呼腸孤病毒病的主要傳染源，該病主要通過(guò)消化道和呼吸道感染，可水平傳播，也可垂直傳播。水平傳播由鵝的直接或間接接觸發(fā)生感染，機(jī)體感染病毒后排毒時(shí)間可長(zhǎng)達(dá)十余天，排泄物是接觸感染的主要傳染源。鵝的生殖器官中可以檢測(cè)到呼腸孤病毒，證明該病可垂直傳播[1]。鵝的日齡與該病的發(fā)病率和死亡率息息相關(guān)，日齡越小的鵝，其發(fā)病率和死亡率越高。

2? 臨床癥狀和剖檢病變

鵝感染呼腸孤病毒主要表現(xiàn)為精神沉郁、羽毛凌亂無(wú)光澤、食欲不振、瘦弱、行動(dòng)困難，病鵝伴有腹瀉癥狀；有時(shí)出現(xiàn)跖關(guān)節(jié)和跗關(guān)節(jié)腫大?；践Z剖檢可見(jiàn)肝臟和脾臟出現(xiàn)白色灶性壞死，胰臟出血、腫大，有散在的針尖大小的灰白色壞死灶。腎臟出血、腫大，有彌漫性針尖大小的灰白色壞死灶。關(guān)節(jié)部位皮下出血，腫脹的關(guān)節(jié)腔內(nèi)有膿性滲出物[2]。

3? 診斷方法

對(duì)發(fā)病鵝群進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，觀察其臨床癥狀及剖檢后病變可做出初步診斷。確診需要進(jìn)一步作實(shí)驗(yàn)室診斷。實(shí)驗(yàn)室診斷鵝呼腸孤病毒的方法包括抗原檢測(cè)方法和血清抗體檢測(cè)方法，其中抗原檢測(cè)方法包括病毒中和試驗(yàn)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）、實(shí)時(shí)熒光定量PCR和環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)（LAMP）。抗體檢測(cè)方法包括瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)（AGID）和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）?？乖瓩z測(cè)方法中，區(qū)分疫苗株和野毒株感染是病毒中和試驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)，該方法可檢測(cè)病毒的抗體效價(jià)，但其操作繁瑣且耗時(shí)長(zhǎng)；PCR方法在禽病臨床診斷中得到廣泛應(yīng)用，檢測(cè)成本低，但靈敏度有待考察；實(shí)時(shí)熒光定量PCR，靈敏度高，判讀結(jié)果直觀，但對(duì)儀器有要求，試劑、耗材相對(duì)昂貴；LAMP可應(yīng)用于臨床快速檢查，但也存在耗材、試劑昂貴、操作繁瑣等缺點(diǎn)。血清抗體檢測(cè)方法中，瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)相對(duì)成本低，操作及所需儀器簡(jiǎn)單，其缺點(diǎn)是結(jié)果易受其他因素影響且耗時(shí)長(zhǎng)。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)結(jié)果判讀直觀，其缺點(diǎn)是結(jié)果判讀依賴儀器、試劑耗材貴、重復(fù)性差[3]。

目前還沒(méi)有兼具操作簡(jiǎn)單、靈敏度高、試劑耗材成本低、特異性好等優(yōu)點(diǎn)的檢測(cè)方法，可根據(jù)實(shí)際的應(yīng)用場(chǎng)景選擇與之相適應(yīng)的檢測(cè)方法用于鵝呼腸孤病毒病的診斷。例如，某區(qū)域近年來(lái)報(bào)道該病較多，可首選成本較低的檢測(cè)方法，如PCR檢測(cè)，對(duì)檢測(cè)結(jié)果疑似陽(yáng)性的樣本可進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR復(fù)檢，某一區(qū)域未報(bào)道該病，推薦使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)，只需對(duì)疑似病例進(jìn)行檢測(cè)。

4? 防控措施

鵝呼腸孤病毒分布廣泛，且病毒對(duì)外界環(huán)境具有較高的抵抗力，隨著鵝養(yǎng)殖業(yè)的不斷發(fā)展，養(yǎng)鵝場(chǎng)規(guī)?；潭鹊玫竭M(jìn)一步提高，飼養(yǎng)密度也在不斷增大，在養(yǎng)殖的過(guò)程中特別容易出現(xiàn)病原在不同宿主間交叉感染的現(xiàn)象，加大了防控本病的難度。防控該病，首先要科學(xué)飼養(yǎng)，盡量避免應(yīng)激反應(yīng)，制定合適的防疫制度。

另外，疫苗接種是防控本病的有效措施，目前關(guān)于防控禽呼腸孤病毒病的疫苗有滅活疫苗、弱毒疫苗和基因工程疫苗。滅活疫苗的優(yōu)點(diǎn)包括生產(chǎn)便捷、易存儲(chǔ)和安全穩(wěn)定等。張秉乾[1]分離得到一株鵝源呼腸孤病毒，制備了相應(yīng)的滅活疫苗，雛鵝接種后產(chǎn)生抗體可維持?jǐn)?shù)周，能覆蓋雛鵝易感日齡并獲得較好的保護(hù)。免疫時(shí)機(jī)可在開(kāi)產(chǎn)前2～3周對(duì)種鵝進(jìn)行滅活苗免疫，使其后代獲得較高水平的母源抗體，防止早期感染。若種鵝未免疫，其后代雛鵝可在10日齡左右免疫滅活疫苗[4]。

弱毒疫苗因免疫原性較好，接種動(dòng)物后可在機(jī)體短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生抗體。1984年，國(guó)外首次研制出禽呼腸孤病毒的弱毒疫苗，后來(lái)發(fā)現(xiàn)該弱毒疫苗并非完全減毒。1989年，我國(guó)肖成蕊等首次分離到禽呼腸孤病毒株（JN-1株）；1994年唐雨德等將JN-1株傳代弱化，最終篩選出毒力較弱的克隆株。

家禽呼腸孤病毒病在基因工程疫苗的研制上包括亞單位疫苗、核酸疫苗和活載體疫苗。σC蛋白在禽呼腸孤病毒基因工程疫苗研制中起到重要作用。亞單位疫苗不但能夠降低免疫副作用，還能起到交叉免疫的保護(hù)作用。蔣慷慨制備的核酸疫苗（σC蛋白真核表達(dá)質(zhì)粒）對(duì)番鴨的免疫效果較好，活載體疫苗穩(wěn)定、免疫方法簡(jiǎn)便且效果好，具有較好的發(fā)展空間[5]。關(guān)于鵝呼腸孤病毒弱毒疫苗和基因工程疫苗的研制未見(jiàn)報(bào)道，應(yīng)加強(qiáng)相關(guān)研究。

目前沒(méi)有針對(duì)鵝呼腸孤病毒病的特效藥，免疫和控制早期感染是預(yù)防的關(guān)鍵手段。現(xiàn)在較常用的防控方案推薦為免疫和抗體監(jiān)測(cè)，種鵝開(kāi)產(chǎn)前進(jìn)行疫苗免疫，對(duì)種鵝和雛鵝進(jìn)行定期抗體監(jiān)測(cè)。做好孵化場(chǎng)日常消毒是阻斷垂直傳播和早期感染的有效手段。

參考文獻(xiàn)：

[1]? 張秉乾.鵝源呼腸孤病毒油乳劑滅活疫苗的制備[D].泰安：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，2017.

[2]? 劉創(chuàng).鵝細(xì)小病毒和鵝呼腸孤病毒的分離鑒定及其二聯(lián)滅活疫苗的初步研制[D].泰安：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，2020.

[3]? 趙梓橋，柯駿鴻，姜含雨，等.禽呼腸孤病毒檢測(cè)方法研究進(jìn)展[J].畜牧與獸醫(yī)，2022，54（11）：148-153.

[4]? 劉媛，陳云嬌，王學(xué)理.禽呼腸孤病毒基因組結(jié)構(gòu)和功能及其基因工程疫苗的研究進(jìn)展[J].中國(guó)生物制品學(xué)雜志，2022，35（08）：1017-1021.

[5]? 蔣慷慨.表達(dá)禽（番鴨）呼腸孤病毒σC、σB蛋白基因DNA疫苗的構(gòu)建及免疫效力監(jiān)測(cè)[D].福州：福建農(nóng)林大學(xué)，2007.