程序性細(xì)胞死亡蛋白配體-1與程序性細(xì)胞死亡蛋白配體-1抑制劑在垂體腺瘤中的研究進(jìn)展

魏凱敏，胡玲

作者單位：山西醫(yī)科大學(xué)第五臨床醫(yī)學(xué)院，山西 太原030012

垂體腺瘤占所有顱內(nèi)腫瘤的15%［1］，其中侵襲性腺瘤約占40%［2］，臨床常規(guī)治療效果欠佳。免疫檢查點抑制劑的使用開啟了抗腫瘤免疫治療的新篇章，對于侵襲性垂體瘤，藥物、手術(shù)、放療等治療方法效果有限時，免疫檢查點抑制劑可能給這部分病人帶來新的方向。程序性死亡配體-1（programmed death ligand-1，PD-L1）抑制劑在垂體腺瘤動物模型上取得了良好的療效，相關(guān)臨床研究也在逐步進(jìn)行中，PD-L1 作為多種腫瘤使用免疫檢查點抑制劑前的預(yù)測因子，在不同類型垂體腺瘤中的分布可能存在差異。現(xiàn)探討PD-L1 和PD-L1 抑制劑在垂體腺瘤中的分布特點和應(yīng)用現(xiàn)狀，為侵襲性垂體腺瘤的免疫治療提供參考。

1 PD-L1與PD-L1抑制劑的通路機(jī)制

程序性死亡受體-1（programmed death-1，PD-1）及其配體程序性死亡配體-1（programmed death ligand-1，PD-L1）是介導(dǎo)T 細(xì)胞激活共抑制信號的一組免疫檢查點［3］。2012 年P(guān)ardoll 等［4］通過建立基因敲除小鼠株，揭示了PD-1 和PD-L1 的具體功能，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)PD-1/ PD-L1 信號通路的激活可導(dǎo)致免疫抑制性腫瘤微環(huán)境形成。PD-L1是一種常見的表達(dá)于抗原提呈細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞表面的跨膜蛋白［5］，腫瘤細(xì)胞上的PD-L1與腫瘤浸潤T 細(xì)胞（TILs）上的PD-1 結(jié)合激活Src 同源區(qū)域2 結(jié)構(gòu)域磷酸酶（SPH2s）［6］，從而激活下游信號傳導(dǎo)，抑制T 細(xì)胞的增殖、細(xì)胞因子的產(chǎn)生和釋放，使腫瘤細(xì)胞逃避機(jī)體免疫監(jiān)視和殺傷，導(dǎo)致腫瘤免疫逃逸［5］。免疫檢查點抑制劑正是通過糾正腫瘤進(jìn)展過程中的免疫反應(yīng)的特定缺陷或功能障礙，恢復(fù)抗腫瘤的免疫能力［7］。Barber 等［8］構(gòu)建了慢性淋巴細(xì)胞感染的小鼠模型，通過重復(fù)抗原的暴露導(dǎo)致了T 細(xì)胞衰竭和效應(yīng)T 細(xì)胞功能下降，而抗PD-L1 單抗治療逆轉(zhuǎn)了這種衰竭，恢復(fù)了效應(yīng)T 細(xì)胞的功能。PD-L1 抑制劑作為免疫抑制劑的一種，通過識別腫瘤細(xì)胞表面的PD-L1，并與其結(jié)合，阻斷腫瘤的免疫逃逸發(fā)揮抗腫瘤的作用。免疫檢查點抑制劑的使用改變了多個系統(tǒng)腫瘤的治療，PD-L1 抑制劑已在［9-10］肺部腫瘤、乳腺腫瘤等多種腫瘤的治療上取得了佳績，其在垂體腫瘤中的應(yīng)用前景值得關(guān)注。Kemeny 等［11］將體外培養(yǎng)的ACTH 瘤細(xì)胞系種植于小鼠內(nèi)建立垂體腺瘤模型，發(fā)現(xiàn)PD-L1在瘤細(xì)胞中高表達(dá)，對小鼠注射抗PD-L1抗體治療后，瘤體生長受到抑制，部分小鼠完全緩解，測定ACTH 激素水平顯著下降，生存時間也得以延長，引起了學(xué)者們對PD-L1 抑制劑治療侵襲性腺瘤的可能性的思考。

2 PD-L1在垂體腺瘤中的分布特征

2.1 PD-L1 在不同亞型垂體腺瘤中的表達(dá)2017年世界衛(wèi)生組織（WHO）發(fā)布的第4 版垂體神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的病理分類中，提出了根據(jù)垂體腺瘤的譜系來源進(jìn)行分型，在激素免疫組化的基礎(chǔ)上將垂體特異POU 類同源結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子（PIT1）、類固醇生成因子1（SF1）、T-box 家族成員TBX19（TPIT）三個轉(zhuǎn)錄因子納入垂體腺瘤的分類標(biāo)準(zhǔn)，PIT1 譜系垂體腺瘤的分類是較為復(fù)雜的，包括有GH 細(xì)胞腺瘤、PRL 細(xì)胞腺瘤和TSH 細(xì)胞腺瘤及其他與PIT1 相關(guān)有不同激素組合免疫染色的亞型［12］。目前新的病理分型在臨床已逐步開展，Mei 等［13］比較了垂體腺瘤各亞型的免疫細(xì)胞浸潤和免疫檢查點標(biāo)志物表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)PD-L1 在不同腺瘤亞型之間的表達(dá)存在差異，提示垂體細(xì)胞譜系可能影響垂體腺瘤的免疫微環(huán)境。Turchini 等［14］對接受手術(shù)切除的264 個垂體腺瘤根據(jù)第4 版病理分型進(jìn)行重新分類，發(fā)現(xiàn)有84 例PIT1 陽性腺瘤，其中共有70 例PD-L1 陽性，而在ACTH 腺瘤、促性腺激素細(xì)胞腺瘤和零細(xì)胞瘤中PD-L1 陽性占比較低（6/30，36/113，13/32），基于上述數(shù)據(jù)他們認(rèn)為PD-L1 表達(dá)在PIT1 陽性垂體腺瘤中較常見。進(jìn)一步統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)50%的GH 細(xì)胞腺瘤（5/10）和41%的PRL 細(xì)胞腺瘤（7/17）表現(xiàn)出強(qiáng)烈的PD-L1 彌漫性陽性（＞ 50%）表達(dá)，全部的GH 細(xì)胞腫瘤、70%的PRL 細(xì)胞腫瘤（12/17）和33%TSH 細(xì)胞腫瘤（2/6）呈陽性（＞1%）表達(dá)，其中稀疏顆粒型GH 細(xì)胞腺瘤與致密顆粒型PRL 細(xì)胞腺瘤彌漫性陽性染色更常見，而這兩種腫瘤相較致密顆粒型GH 細(xì)胞腺瘤［15-16］與稀疏顆粒型PRL 細(xì)胞腺瘤而言更具侵襲性。上述數(shù)據(jù)表明PD-L1 與PIT1 陽性垂體腺瘤有著密切的關(guān)系，PD-L1 陽性在侵襲性較大的腺瘤中似乎更多見，但目前相關(guān)的研究尚無統(tǒng)一定論，免疫檢查點抑制劑在PIT1 陽性的垂體腺瘤病人中治療效果如何，還有待于更多基礎(chǔ)和臨床數(shù)據(jù)的支持。

2.2 PD-L1與Ki-67的相關(guān)性侵襲性垂體腺瘤呈侵襲性生長，常常浸潤周圍臨近組織，甚至對頸內(nèi)動脈形成包繞，有腫瘤大、質(zhì)地硬、生長速度快等特征［17］。Ki-67 作為與細(xì)胞增殖密切相關(guān)的核抗原，Ki-67 指數(shù)是指所有腫瘤細(xì)胞中 免疫組織化學(xué)核染陽性的百分率［18］。在世界衛(wèi)生組織（WHO）提出的第4版神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤分類中，提出用Ki-67標(biāo)記指數(shù)與是否侵犯海綿竇來評估垂體腺瘤的增殖潛力和侵襲性［12］，Ki-67指數(shù)越大，表明增殖潛力越大，侵襲性越強(qiáng)。Wang 等［19］回顧性收集了191 例垂體腺瘤病人，在83 例Ki-67≥3.0%的垂體腺瘤中，發(fā)現(xiàn)41例PD-L1 表達(dá)陽性，在108 例Ki-67＜3.0%垂體腺瘤中，僅29 例PD-L1 陽性。 同樣在Sato 等［20］研究中，對27 例新診斷的無功能垂體腺瘤（包括17 例侵襲海綿竇，10 例未侵襲海綿竇），侵襲海綿竇的垂體腺瘤 PD-L1 陽性表達(dá)較沒有海綿竇侵襲的表達(dá)顯著增高。而 Suteau 等［21］的結(jié)果則與之相反，在納入的139 例垂體腺瘤中在有14 例Ki-67≥3%，只有1 例PD-L1 陽性，且PD-L1 陰性和陽性兩組間有絲分裂計數(shù)差異無統(tǒng)計學(xué)意義。PD-L1 與侵襲性垂體腺瘤的關(guān)系在不同的研究結(jié)果中存在差異的原因，一方面可能與侵襲性的定義標(biāo)準(zhǔn)存在差異，以及病理Ki-67 指數(shù)統(tǒng)計方法本身有一定的主觀性有關(guān)［18］，另一方面Büttner 等［22］認(rèn)為PD-L1 免疫檢測的一致性較差，由于缺乏對評估標(biāo)準(zhǔn)的共識，垂體腺瘤中PD-L1 表達(dá)的評估存在困難。因此研究PD-L1 與侵襲性垂體腺瘤的關(guān)系尚未完全明朗，需要有嚴(yán)格診斷標(biāo)準(zhǔn)及評估方法的更大樣本的統(tǒng)計量驗證，以及結(jié)合其他侵襲性的標(biāo)志物或證據(jù)。

3 PD-L1/PD-L1 抑制劑在垂體腺瘤中的臨床價值與應(yīng)用

3.1 PD-L1 在臨床療效中的預(yù)測價值在免疫檢查點抑制劑的臨床應(yīng)用中，并非所有病人都可獲益，統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)在實體腫瘤中僅對15%～30%的病例有效［23］，因此需要相關(guān)生物標(biāo)志物來識別、預(yù)測哪些病人從治療中獲益最多，預(yù)測性免疫治療生物標(biāo)志物，如PD-L1、堿基錯配系統(tǒng)（（mismatch repair，MMR） 、微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（microsatellite instability，MSI）、腫瘤突變負(fù)荷（tumor mutational burden，TMB）等已被廣泛研究［24］。在小鼠腫瘤模型中，PD-L1 陽性腫瘤細(xì)胞比其PD-L1 陰性細(xì)胞更能抵抗CD8+細(xì)胞溶解T 細(xì)胞介導(dǎo)的破壞［25-26］。Khunger等［27］薈萃分析了41例PD-1/PD-L1抑制劑臨床試驗，發(fā)現(xiàn)在腫瘤細(xì)胞和免疫細(xì)胞中PD-L1 免疫組化陽性預(yù)示了對免疫檢查點抑制劑有良好反應(yīng)，PD-L1作為預(yù)測免疫治療藥物療效的標(biāo)志物，對于免疫治療藥物的應(yīng)用具有伴隨診斷和補(bǔ)充診斷的價值［28］。在腫瘤微環(huán)境的構(gòu)成中，腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞（tumor infiltrating lymphocytes， TILs）占據(jù)重要地位，腫瘤環(huán)境中CD8+T 細(xì)胞能夠顯著增強(qiáng)抗腫瘤免疫反應(yīng)，導(dǎo)致腫瘤對免疫檢查點抑制劑更敏感［29］。Yeung 等［30］研究發(fā)現(xiàn)，在各種亞型垂體腺瘤中，ACTH 腺瘤CD8+T 細(xì)胞浸潤最多，進(jìn)一步研究其在不同垂體腫瘤中的分布差異，探討PD-L1 與不同類型的腺瘤的關(guān)系，有助于為PD-L1 抑制劑在垂體腫瘤病人中的應(yīng)用提供臨床背景資料。但由于目前PD-L1染色預(yù)測精確度低，且處于動態(tài)變化中，PD-L1尚不能準(zhǔn)確選擇對PD-1/PD-L1 通路阻斷治療有效的病人［31］，因此多種標(biāo)志物共同評估或與其他免疫相結(jié)合治療可能更有助于病情的控制。

3.2 PD-L1 抑制劑在垂體腺瘤中的應(yīng)用垂體腺瘤有藥物、手術(shù)、放射等多種治療方法，對于耐藥性或多次復(fù)發(fā)的腺瘤歐洲內(nèi)分泌學(xué)會（ESE）推薦使用替莫唑胺作為一線化療藥物［32］，替莫唑胺是第二代烷化化療藥物［33］，然而近三分之一的病人在一線替莫唑胺治療后仍然出現(xiàn)進(jìn)展，而且治療過程中存在嚴(yán)重的骨髓毒性、心臟毒性及精神障礙［34］。垂體炎是一種免疫檢查點抑制劑相關(guān)內(nèi)分泌腺體副作用，據(jù)Joshi 等［35］報道在所有接觸免疫檢查點抑制劑的病人中發(fā)生率為0～17%，這提示垂體中存在有免疫檢查點抑制劑作用的靶點［36］。Yu 等［37］發(fā)現(xiàn)在垂體腫瘤中均可見腫瘤浸潤性淋巴細(xì)胞，并與PD-L1 表達(dá)增加呈正相關(guān)，以上結(jié)論均為PD-L1 抑制劑治療垂體腫瘤提供了基礎(chǔ)和可能。

許宇彤、肖建中［38］統(tǒng)計分析目前已報道的10例應(yīng)用免疫抑制劑治療侵襲性垂體瘤/癌的病例，其中包括7 例ACTH 瘤，可以看出部分病人有著良好的效果，可使病情維持在穩(wěn)定期。其中包括1 例35 歲患有侵襲性ACTH 腺瘤女性［39］，起初接受了帕西瑞肽、酮康唑、卡麥角林等藥物治療，隨后由于腫瘤體積增大和激素水平難以控制，進(jìn)行了多次手術(shù)切除、放療和化療。由于無法耐受化療而停用，初診68 個月后出現(xiàn)肝和顱內(nèi)轉(zhuǎn)移，之后開始使用免疫抑制劑進(jìn)行治療，5 個周期后，檢查發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移癌體積減少，激素ACTH 水平明顯降低，值得注意的是，隨后的肝轉(zhuǎn)移癌分析顯示MSH6 突變和1%的PD-L1 表達(dá)，進(jìn)而推測替莫唑胺可以誘導(dǎo)基因突變點較前增加，產(chǎn)生更多的新抗原，誘導(dǎo)的高突變腫瘤可能對檢查點抑制劑更敏感［40］。由此案例可以看出免疫檢查點抑制劑可能是對耐藥性或難治性，特別是之前曾接受過替莫唑胺的治療的垂體腺瘤的最有希望的替代方案之一［41］。盡管從目前的臨床研究來看PD-L1抑制劑或許可以成為垂體腫瘤治療的新選擇，但垂體腫瘤是否適用，以及臨床效果如何尚需更多臨床數(shù)據(jù)的支持評估，最優(yōu)治療方案的選擇仍需不斷探索。

4 免疫相關(guān)不良事件及其可能機(jī)制

免疫檢查點抑制劑通過調(diào)控免疫應(yīng)答殺傷腫瘤的同時，過度活化的免疫細(xì)胞也可能導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生自身免疫損傷，即免疫相關(guān)不良反應(yīng)（immune-related adverse events，irAEs）［42］。Lanzolla 等［43］報告一例轉(zhuǎn)移性肺腺癌的男性病人在接受PD-L1抑制劑阿替利珠單抗治療時出現(xiàn)多內(nèi)分泌綜合征2 型，包括艾迪生病，1 型糖尿病，以及垂體炎。目前使用免疫檢查點抑制劑引起垂體前葉功能減退國內(nèi)及國外均有較多報道，Zhao 等［44］則發(fā)現(xiàn)了一例使用抗PDL1 單克隆抗體阿維單抗引起的垂體后葉受累，導(dǎo)致中樞性尿崩癥的病例，同時還有PD-L1 抗體治療垂體瘤的Ⅲ期臨床試驗時出現(xiàn)的較少見神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥視神經(jīng)炎等［45］。針對免疫治療發(fā)生不良反應(yīng)的機(jī)制，Bellastella 等［46］在進(jìn)行了橫斷面及縱向研究發(fā)現(xiàn)，接受抗PD-1/PD-L1 治療的腫瘤病人與健康對照相比，抗垂體和抗下丘腦抗體更常見，在13 例縱向研究中使用免疫治療后的有7例為抗垂體抗體陽性，3 例為抗下丘腦抗體陽性，抗垂體和抗下丘腦抗體似乎在抗PD-1/PD-L1 治療引起的下丘腦-垂體自身免疫和繼發(fā)性內(nèi)分泌相關(guān)改變中起關(guān)鍵作用；鄭曉娟、王興元［47］回顧性統(tǒng)計126 例使用免疫檢查點抑制劑的病人，其中62例病人初始檢測并隨訪了甲狀腺相關(guān)抗體，分析發(fā)現(xiàn)與無甲狀腺免疫相關(guān)不良反應(yīng)組（n=41）相比，發(fā)生甲狀腺免疫相關(guān)不良反應(yīng)組（n=21）的抗甲狀腺球蛋白抗體（TgAb）、抗甲狀腺過氧化物酶抗體（TPOAb）和促甲狀腺激素受體抗體（TRAb）轉(zhuǎn)陽率更高（42.9%比9.8%），二元logistic回歸也證實甲狀腺抗體轉(zhuǎn)陽是發(fā)生甲狀腺免疫相關(guān)不良反應(yīng)的獨立危險因素［0R=7.88，95%CI：（1.55，40.13），P=0.013］，更多機(jī)制需要更深入地研究。這也提醒臨床醫(yī)師在使用PD-L1抑制劑及其他免疫檢查點抑制劑時，要留心其帶來的其他組織的損傷，盡早發(fā)現(xiàn)，及時干預(yù)，在延長腫瘤病人生存時間的同時改善病人的生活質(zhì)量。

5 總結(jié)與展望

免疫檢查點抑制劑是目前腫瘤治療上的新方向，對于侵襲性垂體腺瘤是機(jī)遇，也是挑戰(zhàn)。目前來看PD-L1抑制劑對于垂體腺瘤的治療取得了可喜的進(jìn)展，并且發(fā)現(xiàn)PD-L1 在不同類型垂體腺瘤中的表達(dá)可能有差異，若PD-L1 抑制劑的使用與PD-L1分布情況的相結(jié)合，有助于PD-L1 抑制劑在垂體腺瘤中的精準(zhǔn)治療，但臨床應(yīng)用價值如何還需要更深入地探究。同時更重要的是在使用時盡早發(fā)現(xiàn)藥物相關(guān)不良事件，使病人真正獲益。