水楊酸處理對采后西蘭花褪綠轉(zhuǎn)黃及營養(yǎng)品質(zhì)的影響

楊慶喜，羅曼莉，周 倩，紀(jì)淑娟

（沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院，遼寧 沈陽 110866）

西蘭花（BrassicaoleraceaL.var.Italica）食用部分主要為脆嫩的花莖、短縮肥嫩的花薹及緊密群集成球狀的綠色花蕾。西蘭花營養(yǎng)豐富，除了含有蛋白質(zhì)、碳水化合物、VA、VC、VB1和VB2以及磷、鐵、鈣等無機(jī)質(zhì)外，還富含硫代葡萄糖苷和蘿卜硫素（sulforaphane，SFN）等生物活性物質(zhì)，深受消費者青睞。然而，采后西蘭花生理代謝旺盛，貯運過程和貨架期間花蕾極易褪綠轉(zhuǎn)黃[1-2]。Luo Feng等[2]研究發(fā)現(xiàn)，隨貨架溫度的升高，西蘭花褪綠轉(zhuǎn)黃時間急劇縮短，室溫條件下第3天便出現(xiàn)轉(zhuǎn)黃現(xiàn)象。而且伴隨褪綠轉(zhuǎn)黃過程，西蘭花中硫代葡萄糖苷等特征營養(yǎng)物質(zhì)大量損失[2]。西蘭花中主要有7 種硫代葡萄糖苷，其中，蘿卜硫苷（glucoraphanin，GRA）、蕓薹葡糖硫苷（glucobrassicin，GBS）和新蕓薹葡糖硫苷（neoglucobrassicin，NGBS）含量最豐富，超過硫代葡萄糖苷總含量的90%[2-3]。先前的研究發(fā)現(xiàn)，黃化的西蘭花樣品中3 種硫代葡萄糖苷的含量急劇下降，下降率分別為85%、89%和23%[2]。類似的結(jié)果在Miao Huiying[4]和Kang Moku[5]等的研究中也被發(fā)現(xiàn)。此外，黃化西蘭花中如抗壞血酸（ascorbic acid，AsA）、硫代葡萄糖苷的水解產(chǎn)物SFN及吲哚-3-甲醇（indole-3-methanol，I3C）等生物活性物質(zhì)含量也明顯減少[2,6-7]。褪綠轉(zhuǎn)黃不僅使西蘭花喪失應(yīng)有的表觀品質(zhì)，其營養(yǎng)價值也大幅下降，使西蘭花失去商品價值。因此，探索適宜的調(diào)控技術(shù)對于延長西蘭花的保鮮期、降低其產(chǎn)后損失具有重要意義。

水楊酸（salicylic acid，SA），又稱鄰羥基苯甲酸，為一種酚類植物激素，在植物生長發(fā)育，響應(yīng)冷、干旱、高鹽等逆境脅迫中發(fā)揮重要的調(diào)控作用[8]。近年來，其在維持果蔬品質(zhì)方面的作用已引起人們的關(guān)注。SA參與果蔬后熟衰老進(jìn)程的調(diào)控。Yuan Ruimin等[9]發(fā)現(xiàn)，SA處理可以抑制蘋果內(nèi)源乙烯的合成，延緩果實的后熟衰老進(jìn)程。Li Yaling等[10]指出，外源SA處理能夠抑制杏果實乙烯合成關(guān)鍵酶的活性，介導(dǎo)乙烯的合成，抑制果實的軟化。類似的結(jié)論在關(guān)于芒果[11]和番茄[12]的研究中也有報道。SA處理誘導(dǎo)果蔬抗氧化能力的提高在一些果蔬中已有報道。Zhang Huaiyu等[13]發(fā)現(xiàn)經(jīng)SA處理的枸杞果實H2O2含量明顯降低，抗氧化能力顯著提升，抑制了枸杞果實的腐爛。在對芒果[14]、冬棗[15]、甜櫻桃[16]和鮮切青花菜[17]的研究中也有類似報道。外源SA處理對采后西蘭花的褪綠轉(zhuǎn)黃進(jìn)程以及營養(yǎng)品質(zhì)的調(diào)控作用值得探討。

鑒于SA具有保護(hù)采后果蔬品質(zhì)的潛力，本實驗通過觀察西蘭花外觀顏色，測定其色差值、葉綠素（chlorophyll，chl）含量以及chl熒光的變化量，評估SA處理對采后西蘭花褪綠轉(zhuǎn)黃的調(diào)控作用。同時，通過分析硫代葡萄糖苷、SFN、I3C等西蘭花活性營養(yǎng)物質(zhì)含量以及抗氧化能力的變化，評估SA處理對采后西蘭花營養(yǎng)品質(zhì)的保護(hù)效果，旨在為提高西蘭花采后貯運保鮮效果提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

西蘭花（品種為‘耐寒優(yōu)秀’）購自遼寧省沈陽市的西蘭花商業(yè)種植農(nóng)場。

石英砂、碳酸鈣、亞硝酸鈉、氯化鋁、氫氧化鈉、鉬酸銨、沒食子酸、甲醇（色譜純和分析純）、乙腈（色譜純和分析純）、黑芥子硫苷標(biāo)準(zhǔn)品、SFN標(biāo)準(zhǔn)品、I3C標(biāo)準(zhǔn)品 北京鼎國昌盛生物技術(shù)有限公司；總抗氧化能力（total antioxidant capacity，T-AOC）檢測試劑盒 北京索萊寶生物科技有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

CR-400色差儀（光源D65）日本Molta公司；CP緊密電子天平 美國Ohaus公司；UV762紫外-可見分光光度計上海鼎科科學(xué)儀器有限公司；LC-30A高效液相色譜系統(tǒng)（配備UPLC BEH C18色譜柱（2.1 mm×0.1 m，1.7 μm））、8050液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀 日本島津公司；H1650R冷凍離心機(jī) 上海天美科學(xué)儀器有限公司；CCD-695型數(shù)碼相機(jī)、FluorCam熒光成像系統(tǒng)北京易科泰生態(tài)技術(shù)有限公司。

1.3 方法

1.3.1 樣品處理

挑選成熟度一致（平均鮮質(zhì)量0.35～0.4 kg）、無機(jī)械傷、無染病的西蘭花進(jìn)行實驗。將預(yù)冷（4 ℃，18 h）后的西蘭花隨機(jī)分為兩組，每組30 個花球，其中一組用SA溶液（含2%乙醇（體積分?jǐn)?shù)，下同））浸泡2 min，作為處理組；另外一組用蒸餾水（含2%乙醇）進(jìn)行相同的處理，作為對照組（CK），設(shè)置3 次重復(fù)。參考Luo Manli[18]、El-Beltagi[19]和何俊瑜[20]等的研究設(shè)定SA處理濃度為2 mmol/L。自然晾干花球表面水分，然后用聚乙烯袋（50 cm×80 cm，0.04 mm）包裝，每袋6 個花球，挽口存放在溫度為（4.0±0.5）℃、相對濕度為78%～80%的環(huán)境中，貯存20 d。貯藏期間，每5 d取樣觀察，同時，按五點取樣法采集花蕾組織，于液氮中快速冷凍，-80 ℃保存待測。

1.3.2 黃化指數(shù)（yellowing index，YI）和色度值的測定

通過對花球表面黃化區(qū)域的觀測，參考Fang Huixin等[21]的方法對西蘭花的外觀進(jìn)行評估。黃化的分級標(biāo)準(zhǔn)為I級：花球表現(xiàn)為深綠色，花蕾緊密不開花；II級：花球表現(xiàn)為淺綠色，無綻放的花蕾；III級：花球表現(xiàn)為黃綠色，花蕾稍微泛黃，且黃化面積小于30%；IV級：花球表現(xiàn)為綠黃色，花蕾黃化面積為30%～50%；V級：花球表現(xiàn)為黃色，花蕾黃化面積大于50%。YI計算參考式（1）：

借助色差儀測定樣本在貯藏期間的色差值。儀器使用前利用黑白板進(jìn)行校準(zhǔn)。在正式測定時，色差儀自動生成L*（反映樣品顏色的亮度）、a*（正值表示紅色，負(fù)值表示綠色）和b*（正值表示黃色，負(fù)值表示藍(lán)色）值。每個采樣點從每組樣品中取6 個花球，在固定的五點處測定樣本的色差值，重復(fù)3 次。

1.3.3 chl熒光和chl含量測定

1.3.3.1 chl熒光測定

使用配有MC190高清數(shù)字電荷耦合相機(jī)的開放熒光相機(jī)測量樣品的chl熒光。將樣品放置在控制臺上，使用黑色窗簾創(chuàng)建黑暗反應(yīng)環(huán)境，以防止外界光干擾。暗處理15 min后，樣品被用于測定最大PS II量子產(chǎn)量（maximum quantum yield，F(xiàn)v/Fm）和熒光下降比（fluorescence decline ratio，Rfd）。

1.3.3.2 chl含量測定

參考Zhang Xue等[22]的方法。

1.3.4 硫代葡萄糖苷含量的測定

前期研究發(fā)現(xiàn)，GRA、GBS和NGBS為西蘭花中主要的硫代葡萄糖苷組分，分別占硫代葡萄糖苷總量的64%、21%和7%[2]。因此，通過測定上述物質(zhì)占比評估西蘭花中硫代葡萄糖苷水平。

1.3.4.1 硫代葡萄糖苷的提取

參考Paulsen等[23]的方法。將0.5 g樣品與4 mL體積分?jǐn)?shù)70%甲醇溶液和內(nèi)標(biāo)物黑芥子硫苷（5 mmol/L，0.2 mL）混合，渦旋1min后置于70 ℃水浴鍋中孵育30 min。隨后，依次將樣品進(jìn)行超聲提取15 min和3 000×g離心15 min，收集上清液，35 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)近干，并用1 mL蒸餾水重新懸浮。樣品溶液過0.22 μm濾膜后上機(jī)檢測。

1.3.4.2 硫代葡萄糖苷含量的檢測

色譜分離利用高效液相色譜系統(tǒng)。以體積分?jǐn)?shù)0.2%甲酸溶液為流動相A，色譜級乙腈為流動相B，洗脫程序如下：0～0.5 min，95% A、5% B；0.5～3 min，95%～60% A、5%～40% B；3～3.5 min，60%～5% A、40%～95% B；3.5～4 min，5% A、95% B；4～4.5 min，5%～95% A、95%～5% B；4.5～6 min，95% A、5% B。流速0.2 mL/min；進(jìn)樣量2 μL。

采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，設(shè)定電噴霧離子源，負(fù)離子掃描多反應(yīng)監(jiān)測模式量化目標(biāo)化合物。電噴霧源溫度和去溶劑化溫度分別為110 ℃和350 ℃，在3 000 V條件下進(jìn)行電離。GRA、GBS和NGBS具體的質(zhì)譜參數(shù)見表1。根據(jù)相對響應(yīng)因子，采用內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量[2]，硫代葡萄糖苷含量計算參考式（2）：

表1 硫代葡萄糖苷的質(zhì)譜參數(shù)及相對響應(yīng)因子Table 1 Mass spectrometric parameters and relative response factors fordetection of glucosinolates

式中：X為目標(biāo)硫代葡萄糖苷含量/（mmol/kg）；C為目標(biāo)硫代葡萄糖苷與內(nèi)標(biāo)物的峰面積之比；n為內(nèi)標(biāo)物的添加量/mmol；m為樣品質(zhì)量/kg；f為相對響應(yīng)因子。

1.3.5 SFN和I3C含量的測定

1.3.5.1 SFN和I3C的提取[1]

準(zhǔn)確稱取0.5 g樣品，加入5 mL 0.2 mol/L磷酸緩沖液（pH 7）。將混合物渦旋1 min后在37 ℃水浴鍋中水解3 h。然后加入20 mL二氯甲烷，超聲提取1 h。向混合體系中加入2.5 g無水硫酸鎂和1 g氯化鈉充分混勻，3 000×g離心5 min，收集上清液，35 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)近干，并用1 mL乙腈重新懸浮。樣品溶液過0.22 μm濾膜后上機(jī)檢測。

1.3.5.2 SFN和I3C的檢測

高效液相色譜體系、色譜柱、流動相、檢測條件和質(zhì)譜參數(shù)與1.3.4節(jié)所述相同。洗脫程序如下：0～1 min，95% A、5% B；1～2 min，95%～10% A、5%～90% B；2～2.5 min，10%～5% A、90%～95% B；2.5～3.5 min，5% A、9 5% B；3.5～4 min，5%～95% A、95%～5% B；4～5 min，95% A、5% B。流速0.2 mL/min；進(jìn)樣量5 μL，主要質(zhì)譜參數(shù)見表2。實驗采用外標(biāo)法進(jìn)行定量分析，最終含量單位為mg/kg。

表2 SFN和I3C的質(zhì)譜參數(shù)Table 2 Mass spectrometric parameters for detection of SFN and I3C

1.3.6 總酚（total phenols，TP）含量測定

參考Sun Yangyang等[24]的方法。

1.3.7 總黃酮（total flavonoids，TF）含量測定

參考魏世錦[25]的方法。

1.3.8 AsA含量的測定

參考GB 5009.86—2016《食品中抗壞血酸的測定》[26]的方法，采用2,6-二氯靛酚法測定AsA的含量，單位為g/kg。

1.3.9 T-AOC測定

利用2,2’-聯(lián)氮-雙-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸陽離子自由基法測定抗氧化能力。具體測定方法參考T-AOC檢測試劑盒說明書進(jìn)行，T-AOC最終單位為mmol/kg。

1.3.10 丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量的測定

參考陳雙穎等[17]的方法進(jìn)行MDA含量的測定，單位為μmol/kg。

1.4 數(shù)據(jù)分析

每組實驗重復(fù)3 次，利用SPSS26.0軟件和Tutools平臺（https://www.cloudtutu.com）進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，實驗結(jié)果表示為±s。使用SPSS 26.0軟件對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析（One-way ANOVA），并使用最小顯著性差異法進(jìn)行檢驗，P＜0.05表示差異顯著；P＜0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 SA處理對采后西蘭花表觀變化的影響

如圖1所示，4 ℃條件下隨著貯藏期的延長，西蘭花出現(xiàn)了褪綠轉(zhuǎn)黃現(xiàn)象，CK樣品于第10天出現(xiàn)轉(zhuǎn)黃癥狀，隨后逐漸加重，而SA處理明顯推遲了西蘭花褪綠轉(zhuǎn)黃進(jìn)程，于第20天表現(xiàn)出輕微的黃化癥狀。-a*/b*值持續(xù)下降，L*值逐漸升高，表明西蘭花的綠色逐漸褪去。與CK樣品相比，經(jīng)SA處理的樣品-a*/b*值和L*值的變化幅度明顯減小，進(jìn)一步驗證了上述結(jié)果。YI可以反映樣品的黃化程度，至貯藏末期SA處理樣品的YI僅為CK組的47%。綜上分析可以看出，SA處理有效緩解了采后西蘭花的褪綠轉(zhuǎn)黃問題。

圖1 SA處理對西蘭花外觀變化的影響Fig.1 Effect of SA treatment on the appearance changes of broccoli

2.2 SA處理對采后西蘭花chl含量和chl熒光的影響

chl含量降低是西蘭花褪綠轉(zhuǎn)黃的主要原因[2]。由圖2可見，隨著貯藏期的延長，西蘭花中chla和chlb含量均明顯減少，至第20天時，CK樣品的chla和chlb含量分別為鮮樣的27%和19%。而經(jīng)SA處理的樣品，chl含量下降速率明顯減緩，貯藏末期chla和chlb含量的下降率分別為CK組的55%和50%。chl熒光成像系統(tǒng)可以用來監(jiān)測西蘭花chl熒光參數(shù)的變化，衡量植物的健康狀況。根據(jù)西蘭花的Fv/Fm值對chl熒光圖像進(jìn)行顏色編碼，生理條件良好的西蘭花顏色編碼區(qū)域與淺藍(lán)色編碼區(qū)域?qū)?yīng)，而嚴(yán)重發(fā)黃的西蘭花呈深藍(lán)色，圖像顯示CK組與處理組之間存在明顯的差異。植物中Fv/Fm值的降低表明光合作用被抑制，而Rfd值越高，說明植物的健康狀況越好。如圖2所示，F(xiàn)v/Fm和Rfd值的變化趨勢相似，均隨著黃化過程的發(fā)生而逐漸降低，而SA處理明顯減緩了上述參數(shù)的變化，至第20天時，其下降幅度僅分別為CK組的41%和74%。這進(jìn)一步驗證了SA處理對采后西蘭花褪綠轉(zhuǎn)黃的調(diào)控作用。

圖2 SA處理對西蘭光合作用能力及chl含量的影響Fig.2 Effect of SA treatment on the photosynthetic ability and chlorophyll content of broccoli

2.3 SA處理對采后西蘭花中硫代葡萄糖苷、SFN和I3C含量的影響

硫代葡萄糖苷是西蘭花中標(biāo)志性的生物活性物質(zhì)，是西蘭花特殊營養(yǎng)價值的體現(xiàn)。其中，GRA、GBS和NGBS為西蘭花中主要的硫代葡萄糖苷組分，占硫代葡萄糖苷總量的90%以上。如圖3所示，CK組中GRA、GBS和NGBS含量以及總硫代葡萄糖苷（total glucosinolate，TGL）含量均隨著貯藏期的延長而呈下降趨勢，尤其是GRA和GBS，至貯藏末期其含量分別減少了58%和64%。SA處理有效抑制了這種下降趨勢，在整個貯藏期，GRA、GBS和NGBS含量以及TGL含量始終顯著高于同期CK樣品。SFN和I3C含量在整個貯藏期間均呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢。但值得注意的是，SA處理組中兩種物質(zhì)含量均顯著高于CK組，尤其是SFN，其損失率不足CK組的1/10。上述結(jié)果表明，SA處理明顯抑制了西蘭花中特征營養(yǎng)物質(zhì)的損失。

圖3 SA處理對西蘭花中硫代葡萄糖苷、SFN及I3C含量的影響Fig.3 Effect of SA treatment on glucosinolates,SFN,and I3C contents of broccoli

2.4 SA處理對采后西蘭花中AsA、TP和TF含量的影響

由圖4可知，兩組樣品在貯藏第5天后，AsA含量均呈下降趨勢，但SA處理組樣品AsA含量的下降速率明顯減緩，至貯藏末期其下降率僅為CK組的62%。與AsA的變化趨勢不同，TF和TP含量均隨貯藏期的延長而呈逐漸上升趨勢，而SA處理樣品上升幅度更大。綜上，SA處理抑制了AsA的損失，促進(jìn)了TP和TF營養(yǎng)物質(zhì)的積累。

圖4 SA處理對西蘭花中AsA、TP及TF含量的影響Fig.4 Effect of SA treatment on the contents of AsA,TP,and TF in broccoli

2.5 SA處理對采后西蘭花抗氧化能力的影響

如圖5所示，SA處理有效誘導(dǎo)了西蘭花樣品T-AOC的提高，貯藏前期，樣品T-AOC快速升高，至第10天達(dá)到峰值，為同期CK組的1.8 倍，而且整個貯藏期，其水平始終顯著高于CK組。MDA是膜脂過氧化的產(chǎn)物，其含量可以反映膜脂過氧化的程度。CK組中MDA含量隨著貯藏期的延長呈快速升高趨勢，至貯藏末期其含量達(dá)到鮮樣的3.8 倍，而SA處理明顯減緩了MDA含量的變化，第20天時，其含量僅為CK組的62%，進(jìn)一步說明SA處理對西蘭花抗氧化能力的誘導(dǎo)作用。

圖5 SA處理對西蘭花T-AOC及MAD含量的影響Fig.5 Effect of SA treatment on T-AOC and MDA content in broccoli

2.6 多變量統(tǒng)計分析

多變量統(tǒng)計分析可以進(jìn)一步解析SA處理對西蘭花采后品質(zhì)的保護(hù)作用。熱圖作為可視化手段，能夠直觀地顯示兩個樣本中各種變量的變化。如圖6A所示，每一行表示不同的變量，列表示不同時期的樣本；網(wǎng)格的顏色越紅，樣本中目標(biāo)變量的豐度越高；網(wǎng)格越藍(lán)則相反。處理組樣品中AsA、-a*/b*、GRA、Rfd、chla、chlb、Fv/Fm、TGL和GBS等變量豐度較高。相反，L*、MDA和YI等變量在CK樣本中豐度較高。此外，TP、TF及T-AOC等變量在SA10、SA15和SA20樣本中顯著富集。上述結(jié)果表明，SA處理有效提高西蘭花的抗氧化能力，同時延緩了感官品質(zhì)及特殊營養(yǎng)品質(zhì)劣變。

圖6 熱圖分析及PCAFig.6 Heatmap analysis and PCA

同時，選擇chla、chlb、GRA、GBS、NGBS、TGL、SFN、I3C、AsA、TP、TF、T-AOC和MDA等變量進(jìn)行主成分分析（principal component analysis，PCA）。由圖6B可知，處理組和CK組樣本分列對角線兩側(cè)，有明顯分離，表明SA處理介導(dǎo)上述變量的顯著變化。進(jìn)一步通過圖6C識別導(dǎo)致兩組樣本存在差異的關(guān)鍵變量，探究SA處理對上述變量的保護(hù)作用。變量由從圓心出發(fā)的箭頭表示，其投影越長，顏色越紅，說明該變量對PC的貢獻(xiàn)率更大，同時也表明該變量是導(dǎo)致兩組樣本分離的差異變量。PC1對模型的解釋率為69.6%，對該PC解釋率較高的變量是GRA、TGL和AsA，隨后依次為MDA、chlb、chla、SFN等；PC2對模型的解釋率較低，為20.6%，對此PC解釋率最高的變量為T-AOC，隨后依次是TP和TF等。由此可見，SA處理對GRA、TGL和AsA的保護(hù)作用更強(qiáng)，且可有效誘導(dǎo)抗氧化能力的提高。

3 討論

褪綠轉(zhuǎn)黃誘發(fā)的西蘭花品質(zhì)劣變嚴(yán)重影響了其商品價值，造成產(chǎn)后損失。4 ℃條件下，花球于第10天表現(xiàn)出黃化癥狀，并隨貯藏期的延長而加劇。伴隨黃化的發(fā)生，西蘭花中chl含量也急劇減少。黃化是采后西蘭花快速后熟衰老的視覺表征[27]，其也可從Fv/Fm和Rfd值的降低中得到證明。外源SA處理明顯推遲了衰老進(jìn)程，黃化癥狀延晚10 d出現(xiàn)，同時緩解了chl的損失及Fv/Fm和Rfd值的降低，有效保護(hù)了產(chǎn)品品質(zhì)。SA對于采后果蔬品質(zhì)的保護(hù)作用在蘋果、杏、番茄等果實中也有所體現(xiàn)[9-10,12]，因此，SA有被開發(fā)成為果蔬保鮮劑的潛力。

西蘭花的褪綠轉(zhuǎn)黃與其成熟及衰老過程密切相關(guān)，乙烯在此過程中發(fā)揮著重要作用。課題組前期研究證實，外源乙烯處理加快西蘭花的黃化進(jìn)程，而乙烯吸收劑或1-甲基環(huán)丙烯處理能夠明顯推遲黃化癥狀的出現(xiàn)[28]。SA作為一種酚類植物激素，在植物生長發(fā)育的調(diào)控作用已見報道[29]，Yuan Ruimin[9]和Li Yaling[10]等研究發(fā)現(xiàn)，外源SA處理通過調(diào)控采后蘋果和杏果實內(nèi)源乙烯的合成，延緩采后成熟及衰老過程，維持果實的品質(zhì)。同樣，外源SA處理對于果實乙烯合成的抑制作用在芒果和番茄中也有報道[11-12]，由此可以推測，SA對采后西蘭花褪綠轉(zhuǎn)黃的緩解作用可能歸因于其對內(nèi)源乙烯的調(diào)控?？寡趸芰Φ乃ネ艘彩遣珊笪魈m花黃化的重要誘因。伴隨采后果蔬后熟衰老進(jìn)程的加劇，活性氧（reactive oxygen species，ROS）的產(chǎn)生和清除間平衡體系被打破，導(dǎo)致ROS過度積累。而ROS的過量積累也會促進(jìn)果蔬衰老，同時表現(xiàn)出chl的快速流失。先前的研究和本實驗均發(fā)現(xiàn)，貯藏期間西蘭花黃化進(jìn)程與MDA水平的快速上升呈顯著正相關(guān)[30]，這表明采后西蘭花黃化過程中ROS過量積累，加重了膜脂過氧化引發(fā)的膜損傷。本研究發(fā)現(xiàn)，CK組中chla和chlb含量顯著減少，T-AOC急劇降低，而SA處理則提高了西蘭花的T-AOC，維持了較高的chl水平。同時，處理組中MDA含量變化相對穩(wěn)定。這些結(jié)果表明SA處理延緩西蘭花褪綠轉(zhuǎn)黃可能與其在減輕脂質(zhì)過氧化方面扮演積極角色有關(guān)。此外，Zhang Huaiyu[13]和Sang Yueying[15]等研究發(fā)現(xiàn)經(jīng)SA處理的枸杞和大棗果實其抗氧化能力顯著增加。本研究發(fā)現(xiàn)處理組樣本積累了更高水平的AsA、TP及TF等抗氧化物質(zhì)，證明SA處理對于果蔬抗氧化能力具有誘導(dǎo)作用。因此，上述結(jié)果表明，SA處理可延緩采后西蘭花衰老進(jìn)程，更好的維持西蘭花的品質(zhì)。

西蘭花褪綠轉(zhuǎn)黃的同時伴隨營養(yǎng)品質(zhì)的急劇降低，特別是其特征營養(yǎng)物質(zhì)GRA、GBS、SFN和I3C，其變化趨勢與黃化進(jìn)程呈正相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，CK組中GRA和GBS含量大幅下降，損失率均超過50%，這與先前的研究結(jié)果[4-5]類似。SFN和I3C均可調(diào)控細(xì)胞防御系統(tǒng)，提高機(jī)體解毒和抗氧化能力[1]，其在黃化過程中損失率約為60%。類似的結(jié)果在Pintos等[31]的研究中也被發(fā)現(xiàn)。值得注意的是，外源SA處理明顯減緩了上述營養(yǎng)成分的流失速率，在整個貯藏期，上述物質(zhì)損失率均不足35%，尤其是SFN（損失率小于5%）。同時，SA處理對于西蘭花營養(yǎng)品質(zhì)的保護(hù)作用還體現(xiàn)在CK組中積累了更多的AsA、TP和TF。這些結(jié)果表明，SA處理有效阻止了采后西蘭花營養(yǎng)品質(zhì)的下降。通過PCA發(fā)現(xiàn)，SA處理對于GRA的保護(hù)作用更強(qiáng)。然而，關(guān)于外源SA處理調(diào)控采后果蔬營養(yǎng)品質(zhì)的研究相對較少。目前研究發(fā)現(xiàn)，ROS脅迫可能促使植物細(xì)胞合成更多的初級硫代謝物，進(jìn)而限制GRA（次級硫代謝物）的合成，甚至誘導(dǎo)GRA的降解[32-33]。此外，細(xì)胞內(nèi)高氧化水平亦可直接抑制硫代葡萄糖苷的生物合成，表現(xiàn)為ROS信號通過絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）途徑調(diào)控R2R3-MYB（myeloblastosis）家族轉(zhuǎn)錄因子（MYB28/29/34/51）的轉(zhuǎn)錄，其中MYB28為調(diào)控GRA合成的關(guān)鍵因子[34]。因此，SA處理對于GRA的保護(hù)作用可能歸因于對抗氧化能力的增強(qiáng)，具體的證據(jù)仍需進(jìn)一步探究。

4 結(jié)論

SA處理明顯推遲了西蘭花褪綠轉(zhuǎn)黃進(jìn)程，延緩了營養(yǎng)品質(zhì)劣變。結(jié)果表明，用SA處理的樣品保持了更高的chl含量，表現(xiàn)出更高的Fv/Fm和Rfd值及較低的YI。此外，處理組樣本中GRA、GBS、SFN、I3C、AsA、TP和TF豐度更高，表明SA處理保護(hù)了采后西蘭花的營養(yǎng)品質(zhì)。同時，SA處理提高了采后西蘭花的抗氧化能力，抑制了MDA含量的快速上升。因此，對采后西蘭花進(jìn)行SA處理可能是改善其品質(zhì)劣變的有效策略。