金花白茶對(duì)高脂飲食小鼠的減肥作用

摘要：為探究金花白茶對(duì)高脂飲食小鼠的減肥作用，選用金花白茶為材料，以未發(fā)花白茶為對(duì)照，進(jìn)行茶葉主要理化成分含量檢測，并建立小鼠肥胖模型，給予400 mg·kg-1金花白茶及白茶水提取物灌胃干預(yù)，定期記錄小鼠體重，進(jìn)行肥胖相關(guān)指標(biāo)的測定及組織病理學(xué)分析。結(jié)果顯示，白茶發(fā)花后黃酮和茶褐素含量明顯上升，茶多酚、游離氨基酸、可溶性糖、茶黃素及茶紅素含量顯著下降，兒茶素組分中僅表兒茶素含量出現(xiàn)顯著的上升。金花白茶能有效抑制高脂飲食小鼠的體質(zhì)量增長，降低其肝臟和白色脂肪指數(shù)，減輕炎癥及氧化應(yīng)激，保護(hù)肝臟及腸道的結(jié)構(gòu)完整性及功能。與未發(fā)花白茶相比，金花白茶在降低小鼠血脂含量及炎癥因子水平上效果更佳，推測是由于冠突散囊菌的大量繁殖及黃酮、表兒茶素、茶褐素等物質(zhì)含量上升所致；而在緩解肝臟氧化應(yīng)激方面效果不如白茶，推測是發(fā)花后表沒食子兒茶素沒食子酸酯含量大量減少所致。試驗(yàn)結(jié)果表明，金花白茶對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖模型小鼠有明顯的減肥效果，發(fā)花工藝可在一定程度上提升白茶的降脂減肥功效。

關(guān)鍵詞：金花白茶；白茶；發(fā)花工藝；降脂減肥

中圖分類號(hào)：S571.1；R972+.6 " " " " " " " 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A " " " " " " "文章編號(hào)：1000-369X（2024）02-350-13

Effect of Jinhua White Tea on Weight Loss of

High Fat Diet Mice

LIU Zhenyun1，2， KE Wanping1，2， ZHOU Xirui1，2， LI Menghua1，2， BO Jiahui1，2， YE Xingmei3，

LIU Zhonghua1，2， XIAO Lizheng1，2*， LIN Yong1，2*

1. Key Laboratory of Tea Science of Ministry of Education， Hunan Agricultural University， Changsha 410128， China;

2. National Research Center of Engineering and Technology for Utilization of Botanical Functional Ingredients， Changsha 410128， China; 3. Shouning Jinhua White Tea Technology Co. Ltd.， Ningde 352000， China

Abstract： The aim of this study was to investigate the effect of Jinhua white tea （JWT） on weight loss of high fat diet mice. In this study， JWT was selected as the material and compared with the white tea without fungal fermentation method. The determination of major chemical components in the tea was conducted. An obesity mouse model was established， and the mice were administered orally with 400 mg·kg-1 of JWT water extract as an intervention. The body weight of the mice was regularly recorded， and obesity-related indicators were measured， followed by histopathological analysis of the tissues. The results indicate that after fungal fermentation， the contents of flavonoids and theabrownin increased significantly， while the contents of tea polyphenols， free amino acids， soluble sugars， theaflavins and thearubigins decreased significantly. Meanwhile， among the catechin components， only epicatechin content increased significantly. JWT effectively inhibited the body weight gain in high fat diet mice， reduced their liver and white adipose tissue indices， alleviated inflammation and oxidative stress， and protected the structural integrity and function of the liver and intestines. Compared to white tea without fungal fermentation method， JWT significantly reduced the levels of TC， TG and inflammatory factors in mice， which were speculated to be related to the mass reproduction of Eurotium cristatum and the increase of flavonoids， epicatechin， theabrownin and other substances. While white tea shows a more pronounced effect on relieving liver oxidative stress， which was speculated to be due to the significant decrease in the content of epigallocatechin gallate after fungal fermentation. These findings suggest that JWT has a significant weight loss effect on mice with diet-induced obesity， while fungal fermentation method can improve the lipid-lowering and weight-reducing effects of white tea to a certain extent.

Keywords： Jinhua white tea， white tea， fungal fermentation method， anti-obesity

肥胖，通常被定義為脂肪組織的過度堆積，已成為影響所有年齡和性別的全球健康問題[1]。肥胖進(jìn)一步發(fā)展將導(dǎo)致多種代謝性疾病[2]。為了控制肥胖，通常會(huì)使用生活方式干預(yù)，在效果不佳時(shí)會(huì)使用藥物治療方式，而長期藥物依賴治療通常會(huì)伴隨一定程度的毒副作用，如腹瀉、腎毒性等[3-5]，因此，尋求能防治肥胖的植物資源及其有效成分逐漸成為科學(xué)家們研究的熱點(diǎn)。

白茶（White tea，WT）是我國傳統(tǒng)的六大茶類之一，其制作工藝獨(dú)特，僅有萎凋與干燥兩道工序。大量的細(xì)胞學(xué)研究和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已證實(shí)，白茶具有抗氧化、降血糖血脂、減輕代謝紊亂、保護(hù)肝臟、降低膽固醇吸收等保健功能[5-6]。但由于白茶香氣不顯著，滋味清淡，低等級(jí)白茶如壽眉和白牡丹原料粗老、售價(jià)較低、附加值低，以及儲(chǔ)存運(yùn)輸難度大等因素，白茶市場受到極大的限制。大量研究指出，茯磚茶具有良好的降脂減肥效果[7-8]。發(fā)花是茯磚茶在發(fā)酵階段產(chǎn)生冠突散囊菌的過程[9]，也是形成茯磚茶獨(dú)特品質(zhì)風(fēng)味和藥理功效的關(guān)鍵。冠突散囊菌即“金花菌”，屬于益生菌，廣泛分布于自然界中，具有改善苦澀味、提高抗氧化活性、抑菌、降脂減肥、調(diào)節(jié)腸道菌群等功效[10]。

金花白茶（Jinhua white tea，JWT）是以白茶為原料，按照茯磚茶的制作工藝，經(jīng)過精制整理、半成品拼配、渥堆、汽蒸壓制、發(fā)花、烘干等工序制成的具有獨(dú)特“金花香”品質(zhì)的白茶新產(chǎn)品[11]。已有研究指出，金花白茶的出現(xiàn)豐富了現(xiàn)有白茶產(chǎn)品的種類，“發(fā)花”過程通過降低草腥味化合物和苦澀兒茶素的含量，增加木質(zhì)香氣化合物和氨基酸的含量，改善了中低檔壽眉白茶的質(zhì)量[12]。既往研究大多從金花白茶的品質(zhì)出發(fā)，在其保健效果方面研究較少，金花白茶是否具有較好的降脂減肥效果也有待探究。壽眉是白茶中產(chǎn)量最高的一個(gè)品類[13]，本研究以壽眉為原料加工而成的金花壽眉為試驗(yàn)材料，以高脂模型小鼠為試驗(yàn)對(duì)象，首次探究金花白茶的降脂減肥作用，并與制作金花白茶的白茶原料進(jìn)行比較研究，以評(píng)價(jià)金花白茶對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)小鼠肥胖的改善效果。研究結(jié)果有助于了解金花白茶的潛在保健作用，為促進(jìn)白茶的利用及金花白茶產(chǎn)品的生產(chǎn)消費(fèi)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所用壽眉白茶購自福建白芽銀倉茶業(yè)有限公司，金花白茶是以上述壽眉白茶為原料，于2022年在益陽市冠隆譽(yù)茶廠加工制作。金花白茶的加工參照之前的研究進(jìn)行[11]，具體加工工藝及參數(shù)如下：

壽眉散茶（20 kg）→渥堆（24 h）→汽蒸（145 ℃，10 s）→手筑壓制（選用500 g手筑茶磚模具）→發(fā)花（恒溫恒濕烘房，歷時(shí)12 d）→干燥（8 d）→成品金花白茶。

1.2 儀器與試劑

1.2.1 儀器與設(shè)備

多功能酶標(biāo)儀，賽默飛世爾上海儀器有限公司；自動(dòng)平衡離心機(jī)（L530），湖南湘儀離心機(jī)儀器有限公司；紫外可見分光光度計(jì)（UV-1750）、高效液相色譜儀（LC-20A），日本島津有限公司；冷凍離心機(jī)（MIKRO22R），德國Hettich公司；冷凍干燥機(jī)，廣州三元科技有限公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，上海亞榮生化儀器廠。

1.2.2 試劑

總膽固醇（Total cholesterol，TC）、甘油三酯（Triglyceride，TG）、低密度脂蛋白膽固醇（Low density lipoprotein cholesterol，LDL-c）、高密度脂蛋白膽固醇（High density lipoprotein cholesterol，HDL-c）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（Alanine aminotransferase，ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（Aspartate transaminase，AST）、谷胱甘肽（Glutathione，GSH）、超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（Malondialdehyde，MDA）、活性氧（Reactive oxygen species，ROS）檢測試劑盒購自南京建成生物工程研究所；腫瘤壞死因子α（Tumor necrosis factor α，TNF-α）試劑盒、白介素6（Interleukin-6，IL-6）試劑盒購自武漢華美生物工程有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及飼料

40只C57BL/6J雄性小鼠，無特定病原體（Specific pathogen free，SPF）級(jí)，體質(zhì)量（18±2） g，購自湖南斯萊克景達(dá)試驗(yàn)動(dòng)物有限公司，生產(chǎn)許可證編號(hào)：SCXK（湘）2019-0004。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)按照湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)生物醫(yī)學(xué)研究倫理委員會(huì)的倫理法規(guī)和規(guī)程實(shí)施，批準(zhǔn)號(hào)：倫審科2023第（75）號(hào)。小鼠普通飼料（蛋白質(zhì)19.2%、碳水化合物67.3%、脂肪4.3%）及高脂飼料（蛋白質(zhì)26%、碳水化合物26%、脂肪35%）購自北京華阜康生物科技股份有限公司。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 茶樣水提物凍干粉的制備

將金花壽眉和壽眉分別以茶水比1∶10（m∶V）混合，在沸水中浸提兩次，每次30 min，過濾后合并濾液。55 ℃下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮茶湯，﹣20 ℃預(yù)凍8 h，冷凍干燥24 h后將濃縮茶湯真空凍干成粉，密封并在﹣20 ℃下保存，用于后續(xù)試驗(yàn)。

1.4.2 理化成分檢測

茶多酚按福林酚比色法《GB/T 8313—2018》測定，游離氨基酸按茚三酮比色法《GB/T 8314—2013》測定，水浸出物按《GB/T 8305—2013》測定，可溶性糖按蒽酮硫酸比色法測定，黃酮按三氯化鋁法測定，茶紅素、茶黃素及茶褐素按萃取比色法測定。生物堿組分及兒茶素組分采用高效液相色譜法進(jìn)行測定，色譜條件為C18色譜柱（4.6 mm×250 mm×5 μm），流動(dòng)相A為超純水，流動(dòng)相B為N，N-二甲基甲酰胺、甲醇、冰醋酸的混合液，相應(yīng)體積比為39.5∶2∶1.5，流速1 mL·min-1，柱溫35 ℃，進(jìn)樣體積20 μL，檢測波長278 nm。

1.4.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及模型建立

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在室溫（22±4） ℃、相對(duì)濕度（60±10）%、12 h/12 h光暗循環(huán)的環(huán)境下飼養(yǎng)。適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，將小鼠隨機(jī)平均分為4組（n=10），包括正常飲食組（ND，普通飼料+蒸餾水灌胃）、高脂飲食組（HFD，高脂飼料+蒸餾水灌胃）、白茶組（WT，高脂飼料+壽眉提取物灌胃）和金花白茶組（JWT，高脂飼料+金花壽眉提取物灌胃）。茶葉人體推薦劑量為60 kg成人每天宜飲10 g干茶，即166.7 mg·kg-1，小鼠推薦劑量約為人的12.3倍，本研究茶樣提取率約為20%，選擇400 mg·kg-1的茶提取物作為安全、耐受性良好的灌胃用量。實(shí)驗(yàn)小鼠每隔24 h灌胃一次茶提取物，持續(xù)9周。

最后一次灌胃后禁食不禁水24 h，將小鼠麻醉后眼球取血，脫頸處死，解剖取肝臟、結(jié)腸、白色脂肪（附睪脂肪、腎周脂肪、腸系膜脂肪）組織，同時(shí)無菌收集盲腸內(nèi)容物。部分肝臟、結(jié)腸和附睪脂肪組織用固定液固定，其余組織均液氮速凍后﹣80 ℃儲(chǔ)存。

1.4.4 小鼠基礎(chǔ)指標(biāo)測定

試驗(yàn)過程中每2 d稱量1次小鼠體重，并每天記錄各組攝食量。解剖時(shí)，取小鼠肝臟和白色脂肪，4 ℃生理鹽水洗凈后迅速稱取其質(zhì)量以計(jì)算器官指數(shù)。器官指數(shù)=器官濕質(zhì)量/小鼠體質(zhì)量×100%

1.4.5 生化指標(biāo)測定

眼球取血后放入EP管中，靜置2 h，于4 ℃下3 500 r·min-1離心15 min，取上清液待測。肝臟及結(jié)腸分別與生理鹽水按質(zhì)量比1∶9制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%的勻漿，3 000 r·min-1離心10 min，取上清液待測。嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作步驟檢測血清TC、TG、LDL-c、HDL-c、ALT、AST、TNF-α、IL-6水平，肝臟TC、TG、GSH、SOD、MDA、ROS水平，以及結(jié)腸TNF-α、IL-6水平。

1.4.6 組織病理學(xué)觀察

用生理鹽水洗滌后，將肝臟和結(jié)腸組織在4%多聚甲醛溶液中固定24 h，脂肪在脂肪固定液中固定24 h。分別取每只小鼠肝臟、結(jié)腸、附睪脂肪組織的相同部位，蘇木精-伊紅（Hematoxylin-eosin，Hamp;E）染色，另將肝臟進(jìn)行油紅O染色，顯微鏡下進(jìn)行觀察。參照已有研究[14]，根據(jù)結(jié)腸組織病理切片形態(tài)情況進(jìn)行病理學(xué)評(píng)分（0～4分）：正常形態(tài)，沒有損傷，無炎癥跡象為0分；很少白細(xì)胞浸潤為1分；些許白細(xì)胞浸潤為2分；大面積白細(xì)胞浸潤，輕微水腫，血管密度增大，結(jié)腸壁增厚為3分；白細(xì)胞充分浸潤，嚴(yán)重水腫，杯狀細(xì)胞消失，血管密度增大，結(jié)腸壁增厚為4分。

1.4.7 數(shù)據(jù)處理

采用GraphPad Prism 9.5軟件作圖，使用CaseViewer軟件進(jìn)行切片圖像分析，獲取附睪脂肪切片圖像后使用ImageJ軟件對(duì)同視野下不同個(gè)體的脂肪細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，采用SPSS 26.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，統(tǒng)計(jì)結(jié)果以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ ±SD）表示，使用單因素方差分析進(jìn)行多組比較，Tukey檢驗(yàn)用于事后兩組比較，*P＜0.05表示差異顯著，**P＜0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 理化成分含量差異分析

金花壽眉與壽眉干茶中常規(guī)理化成分含量如表1所示，壽眉發(fā)花后，水浸出物的含量由36.14%下降至34.71%，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；茶多酚、游離氨基酸、可溶性糖含量顯著下降（P＜0.05）。薄佳慧等[11]研究指出，茶多酚含量與金花白茶的苦味、青澀感呈顯著正相關(guān)，與醇度、濃度和厚度呈顯著負(fù)相關(guān)，提示白茶發(fā)花后茶多酚含量的下降有助于茶湯口感的提升。此外，作為茶葉中重要的功能成分之一，黃酮類物質(zhì)已被證明具有良好的抗炎及緩解代謝綜合征效果[15]。本研究測得黃酮類化合物含量在發(fā)花后顯著上升（P＜0.05），黃酮含量變化與普洱茶發(fā)花過程一致[16]，推測是發(fā)花和濕熱反應(yīng)導(dǎo)致茶葉中酶類反應(yīng)增強(qiáng)，加速多酚類物質(zhì)的氧化所致。同時(shí)，茶褐素含量在壽眉發(fā)花后極顯著上升，茶黃素和茶紅素含量極顯著下降（P＜0.01），推測是由于隨著茶多酚氧化程度的加深，茶紅素和茶黃素不斷聚合成茶褐素。

金花壽眉和壽眉的生物堿組分及兒茶素組分含量如表2所示。壽眉發(fā)花后，可可堿（Theobromine，TB）、茶堿（Theophylline，TP）及咖啡堿（Caffeine，CAF）含量均上升，但未出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；發(fā)花后茶多酚含量明顯下降（表1），作為茶多酚的重要組成部分，兒茶素組分中僅表兒茶素（Epicatechin，EC）含量顯著上升（P＜0.05），沒食子兒茶素（Gallocatechin，GC）及兒茶素（Catechin，C）含量上升但差異不顯著，而表沒食子兒茶素（Epigallocatechin，EGC）、表沒食子兒茶素沒食子酸酯（Epigallocatechin gallate，EGCG）、沒食子兒茶素沒食子酸酯（Gallocatechin gallate，GCG）及表兒茶素沒食子酸酯（Epicatechin gallate，ECG）含量都出現(xiàn)不同程度的下降（P＜0.05）。

2.2 金花白茶對(duì)高脂飲食小鼠體重及器官的影響

超重和脂肪量過多是肥胖的主要特征[17]。喂養(yǎng)期間，各組小鼠保持正常攝食及飲水，精神狀態(tài)良好，毛發(fā)有光澤，反應(yīng)靈敏，未見行為改變及中毒表現(xiàn)，其體重呈現(xiàn)的不同變化趨勢如圖1A所示。在試驗(yàn)開始時(shí)（W0），各組間的初始體重差異不顯著，試驗(yàn)過程中ND組小鼠體重增長趨勢較為平緩，而HFD組體重增長迅速，灌胃金花壽眉及壽眉可以減緩其體重增速，其中JWT組體重增長趨勢與ND組更接近。HFD組小鼠的體質(zhì)量增量明顯高于其他組（圖1B），金花壽眉的灌胃有效減少了高脂飲食小鼠的體質(zhì)量增量（P＜0.05），而與ND組相比，JWT組及WT組均未表現(xiàn)出顯著差異，表明金花壽眉的灌胃可以抑制高脂飲食帶來的體重增加，使體重趨近正常水平。此外，高脂飲食顯著增加了小鼠白色脂肪組織的器官系數(shù)（圖1C），但在灌胃茶提取物后，高脂飲食小鼠白色脂肪系數(shù)顯著降低（P＜0.05）。HFD組的肝臟指數(shù)與ND組相比顯著升高（P＜0.05），灌胃茶提取物后小鼠肝臟指數(shù)下降（圖1D），表明高脂飲食可能引起小鼠肝臟的脂肪堆積，金花壽眉的灌胃可以使小鼠肝臟指數(shù)趨近正常水平。在腎臟指數(shù)方面（圖1E），各組小鼠均未出現(xiàn)明顯差異。

肥胖小鼠的體重增加通常與脂肪重量及脂肪細(xì)胞大小相關(guān)。為進(jìn)一步探究小鼠脂肪組織的形態(tài)變化，對(duì)各組小鼠的附睪脂肪組織進(jìn)行了Hamp;E染色（圖2A），并對(duì)同視野下脂肪細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)（圖2B）。結(jié)果表明，ND組小鼠附睪脂肪組織細(xì)胞排列整齊，形狀規(guī)則，HFD組小鼠脂肪組織切片中脂肪細(xì)胞體積明顯增加，且排列較松散。金花壽眉及壽眉灌胃后，同視野下能觀察到細(xì)胞數(shù)目更多（P＜0.05），且排列緊密，表明脂肪細(xì)胞體積更小，其中JWT組效果更明顯。

在攝食量方面，和HFD組相比，茶提取物灌胃的兩組在攝食量方面沒有明顯差異（圖1F）。表明高脂飲食增加了小鼠體重，引起脂肪組織細(xì)胞病變，而金花壽眉能在不干擾小鼠正常飲食的情況下改善高脂飲食對(duì)小鼠脂肪組織細(xì)胞的影響，抑制小鼠的體質(zhì)量增長，降低其肝臟和白色脂肪指數(shù)。

2.3 金花白茶對(duì)高脂飲食小鼠血清生化指標(biāo)的影響

高脂血癥是肥胖的常見并發(fā)癥，常表現(xiàn)為TG、TC、LDL-C水平升高及HDL-C水平降

低。由圖3可知，與ND組相比，HFD組血清中TG、TC和LDL-C水平較高，HDL-C水平較低，灌胃金花壽眉和壽眉提取物均顯著降低了TG、TC和LDL-C水平，并提高了HDL-C水平（P＜0.05）。與未發(fā)花壽眉相比，金花壽眉顯著降低了血清TG水平（P＜0.05），與王蝶等[18]研究結(jié)果相似。同時(shí)，本研究檢測了血清中炎癥因子TNF-α（圖3E）和IL-6（圖3F）水平，HFD組的TNF-α及IL-6水平均顯著高于ND組，出現(xiàn)較明顯的炎癥反應(yīng)，而JWT組和WT組血清TNF-α和IL-6濃度也顯著下降（P＜0.05），其中JWT組效果更明顯（P＜0.01），表明金花壽眉能改善高脂飲食誘導(dǎo)的血脂異常，并減輕炎癥。

2.4 金花白茶對(duì)高脂飲食小鼠肝臟損傷的影響

肝臟是公認(rèn)的脂質(zhì)代謝中樞，肥胖通常會(huì)導(dǎo)致肝臟中的脂質(zhì)積累和促炎因子的升高，并

伴有特定形式的脂肪變性和脂肪性肝炎[19-20]。本研究發(fā)現(xiàn)（圖4），高脂飲食使小鼠肝臟TG和TC含量出現(xiàn)明顯上升，而金花壽眉與壽眉相比，能更有效預(yù)防其上升（P＜0.05）。小鼠肝臟的油紅O染色結(jié)果也證實(shí)了這一結(jié)果（圖4C），ND組小鼠肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰，幾乎未見脂滴分布，HFD組小鼠肝臟出現(xiàn)大量脂滴聚集，擠壓細(xì)胞核，影響肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)。而茶提取物干預(yù)后可見切片中的脂滴聚集現(xiàn)象明顯受到抑制。WT組出現(xiàn)少量脂滴分布，而JWT組的肝臟細(xì)胞結(jié)構(gòu)幾乎與ND組無異，說明金花壽眉能有效修復(fù)肝臟受損，且效果優(yōu)于壽眉。

肝臟中含有豐富的酶類，如負(fù)責(zé)氨基酸合成與代謝分解的ALT和AST，當(dāng)肝細(xì)胞損傷或細(xì)胞膜通透性增高時(shí)，這些酶會(huì)滲入血液，使其在血液中的含量升高[21]。ALT和AST檢測結(jié)果表明（圖5A和圖5B），HFD組的ALT、AST水平均極顯著高于ND組（P＜0.01），出現(xiàn)較明顯的炎癥反應(yīng)；而與HFD組相比，JWT組ALT、AST水平顯著降低（P＜0.05），表明金花壽眉干預(yù)有效修復(fù)了小鼠肝損傷。

同時(shí)，本研究檢測了小鼠肝臟中ROS（圖5C）和MDA（圖5D）含量，以及GSH（圖5E）和SOD（圖5F）的活性，發(fā)現(xiàn)與ND組相比，HFD組小鼠肝臟GSH及SOD的活性明顯下降，同時(shí)ROS和MDA的水平顯著上升，提示肝臟出現(xiàn)明顯的氧化應(yīng)激反應(yīng)。金花壽眉的干預(yù)增強(qiáng)了GSH及SOD的活性，降低了ROS和MDA水平（P＜0.05），但WT組效果更明顯，表明金花壽眉能有效調(diào)控高脂飲食小鼠體內(nèi)的氧化應(yīng)激反應(yīng)，但調(diào)控效果不如壽眉。

綜上所述，金花壽眉可減輕高脂飲食引起的小鼠肝臟損傷及氧化應(yīng)激反應(yīng)，緩解肝臟脂質(zhì)積累和脂肪細(xì)胞變性，為正常的機(jī)體代謝提供基礎(chǔ)保障。

2.5 金花白茶對(duì)高脂飲食小鼠結(jié)腸炎癥的影響

高脂飲食可通過破壞腸黏膜，分泌促炎細(xì)胞因子，引起炎癥細(xì)胞浸潤，破壞腸道屏障，進(jìn)而導(dǎo)致腸道內(nèi)有害細(xì)菌及代謝產(chǎn)物進(jìn)入血液循環(huán)，觸發(fā)慢性低級(jí)炎癥反應(yīng)，干擾正常的代謝過程，造成體內(nèi)脂肪的存儲(chǔ)增加，導(dǎo)致肥胖發(fā)生或加重[22]。小鼠結(jié)腸的Hamp;E染色結(jié)果（圖6A）及HPS評(píng)分（圖6B）顯示，ND組小鼠結(jié)腸結(jié)構(gòu)完整，無炎癥改變，HFD組小鼠出現(xiàn)明顯炎癥細(xì)胞浸潤現(xiàn)象，結(jié)腸組織病理學(xué)評(píng)分升高，而金花壽眉和壽眉的灌胃不同程度緩解了以上現(xiàn)象。WT組小鼠結(jié)腸結(jié)構(gòu)完整，出現(xiàn)少量炎癥細(xì)胞浸潤，組織病理學(xué)評(píng)分降低，JWT組與ND組無顯著性差異。由圖6C和圖6D可知，HFD組結(jié)腸中IL-6和TNF-α含量均顯著高于ND組；與HFD組相比，WT和JWT組結(jié)腸中IL-6和TNF-α含量顯著降低，提示結(jié)腸出現(xiàn)炎癥反應(yīng)，灌胃茶提取物后炎癥反應(yīng)得以緩解，說明金花壽眉具有改善高脂飲食導(dǎo)致的腸道炎癥的作用，且效果優(yōu)于壽眉。

3 討論

肥胖是一個(gè)世界性的公共衛(wèi)生問題，與非酒精性脂肪肝病、糖尿病、癌癥等多種疾病的發(fā)生有關(guān)，越來越多研究表明，喝茶可能是一種潛在的預(yù)防肥胖的營養(yǎng)策略[23-24]。近年來，茯磚茶因其獨(dú)特口感和保健功效而成為研究熱點(diǎn)，大量研究證明其具有顯著的降脂減肥功效。而作為茯磚茶功效形成的關(guān)鍵菌種，冠突散囊菌對(duì)生長條件并無特殊需求，適宜溫濕度條件下，多種植物材料中均可獲得良好的發(fā)花效果[25]。有研究指出在白茶發(fā)花的過程中，冠突散囊菌可通過降低澀味物質(zhì)含量，緩解茶葉粗老味，提高中低檔茶葉品質(zhì)[26]。基于此，本研究將發(fā)花工藝應(yīng)用到白茶的加工中，使用以茯磚茶加工工藝制成的金花壽眉為試驗(yàn)材料，將其與發(fā)花前的壽眉原料進(jìn)行減肥功效的比較研究，結(jié)合理化檢測結(jié)果，評(píng)估金花白茶的降脂減肥功效及物質(zhì)基礎(chǔ)。

研究結(jié)果表明，金花壽眉減輕了高脂飲食小鼠的體重增長，緩解其炎癥及氧化應(yīng)激，表現(xiàn)出明顯的降脂減肥效果，結(jié)果與茯磚茶的研究具有相似性[4]。氧化應(yīng)激是由于ROS家族在細(xì)胞內(nèi)累積而引起的氧化損傷過程，與高脂血癥的發(fā)生及發(fā)展密切相關(guān)；高脂飲食會(huì)導(dǎo)致肝臟中ROS的大量產(chǎn)生，降低 GSH和SOD等抗氧化酶的活性[27]，而上述抗氧化酶可通過清除氧自由基來減少脂質(zhì)過氧化，其水平反映了機(jī)體清除氧自由基的能力，當(dāng)氧自由基過多時(shí)，脂質(zhì)過氧化反應(yīng)增強(qiáng)，導(dǎo)致MDA的生成，當(dāng)MDA水平過高，機(jī)體抗氧化酶的活性將受到抑制，進(jìn)一步加重氧化應(yīng)激[28]。本研究發(fā)現(xiàn)HFD組小鼠ROS和MDA水平明顯升高，與周遵明等[27]的研究結(jié)果相似。金花壽眉灌胃顯著降低了小鼠肝臟中ROS及MDA水平，提高了GSH和SOD的活性（P＜0.05），提示金花壽眉可通過減少ROS累積，增加抗氧化酶活性，抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，從而緩解高脂飲食小鼠肝臟的氧化應(yīng)激。此外，有研究指出，茯磚茶可通過降低與脂肪代謝相關(guān)的SREBP-1c、FAS等基因的表達(dá)下調(diào)血清TG、TC和LDL-C水平，抑制高脂飼料飼喂肥胖大鼠的體重增加和脂肪組織積累，抑制脂肪生成[29]，這為今后的研究提供了思路。

本研究對(duì)金花壽眉與其發(fā)花前壽眉原料的降脂減肥效果進(jìn)行了比較，結(jié)果表明，與未發(fā)花壽眉相比，金花壽眉在降低血清和肝臟的TC、TG含量，及降低血清炎癥因子IL-6和TNF-α水平上效果更好（P＜0.05），JWT組的體重增長趨勢也與ND組更接近，證明金花壽眉在改善脂質(zhì)代謝和抗炎方面效果優(yōu)于壽眉，推測是由冠突散囊菌的大量繁殖及茶褐素等物質(zhì)的合成導(dǎo)致：一方面，冠突散囊菌可以通過調(diào)節(jié)腸道微生物、脂質(zhì)和能量代謝來預(yù)防高脂飲食誘導(dǎo)的脂質(zhì)積累及并發(fā)癥[30]；另一方面，試驗(yàn)結(jié)果表明壽眉發(fā)花后茶褐素的含量明顯增加，而茶褐素已被證明可通過參與免疫細(xì)胞的增殖分化來調(diào)節(jié)炎癥因子的水平，發(fā)揮抗炎作用[31-32]；同時(shí)，發(fā)花后壽眉中的黃酮和EC含量也顯著的升高，已有研究表明黃酮可通過調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞和腸道微生物等方面來抑制肥胖[33]，而EC能顯著抑制TNF-α和IL-6的釋放及炎癥反應(yīng)的發(fā)生[34]；在本研究中也觀察到了JWT組小鼠TNF-α和IL-6含量的降低。推測在上述物質(zhì)的共同作用下，金花壽眉表現(xiàn)出顯著地改善脂質(zhì)代謝及抗炎效果。在緩解肝臟氧化應(yīng)激方面，WT組效果更明顯，WT組小鼠具有更低的MDA含量，更高的GSH含量及SOD活性（P＜0.05）。推測是由EGCG等物質(zhì)含量的變化導(dǎo)致，作為兒茶素中含量最豐富的成分之一，EGCG在大量研究中都被證明具有良好的抗氧化效果[4，35]，試驗(yàn)結(jié)果表明壽眉發(fā)花后EGCG含量出現(xiàn)了大幅度減少，這可能導(dǎo)致其抵抗氧化應(yīng)激能力的下降。后續(xù)可通過對(duì)腸道微生物和脂質(zhì)代謝通路等方面的研究，進(jìn)一步探究金花白茶降脂減肥的具體機(jī)制。

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