血清腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢驗結(jié)直腸癌的診斷效果

孫欣華，黃熠

大連大學(xué)附屬中山醫(yī)院，大連 116100

結(jié)直腸癌是較為頻發(fā)的癌癥之一，病變部位在結(jié)腸黏膜的上皮、腺體以及直腸，其發(fā)病率居于消化系統(tǒng)癌癥的第四位，且死亡率高。疾病初期，患者缺乏典型的疾病表現(xiàn)，因此早期漏診率高[1]。疾病發(fā)展至中晚期，患者可見腹脹、腹瀉等癥狀，且有明顯腹痛感和便血表現(xiàn)。此時已錯失最佳的手術(shù)時機，多采取放化療，遠(yuǎn)期預(yù)后一般，5 年內(nèi)生存率較低。因此，早期發(fā)現(xiàn)并確診結(jié)直腸癌能夠予以針對性手術(shù)治療，延緩疾病進(jìn)展，降低疾病的危害性，進(jìn)而改善患者的日后生活質(zhì)量。腫瘤標(biāo)志物是現(xiàn)階段較為常用的血清學(xué)檢驗項目，能夠反映腫瘤內(nèi)部的抗原、激素以及各類酶的分布情況，進(jìn)而評估腫瘤進(jìn)展[2]。以往研究發(fā)現(xiàn)，惡性腫瘤細(xì)胞數(shù)量大幅增多時，機體排泄物以及體液內(nèi)會大量分布腫瘤標(biāo)志物，使其水平持續(xù)性升高?；诖?，檢驗?zāi)[瘤標(biāo)志物能夠綜合判斷腫瘤特征。在此指導(dǎo)下，本研究選擇95 例結(jié)直腸癌患者，分析腫瘤標(biāo)志物單一檢驗以及聯(lián)合檢驗的診斷功效。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2020 年11 月至2023 年2 月我院收治的95 例結(jié)直腸癌患者作為研究對象。本研究不違反國家法律法規(guī)，符合醫(yī)學(xué)倫理原則。納入標(biāo)準(zhǔn)：伴有大便帶血、腹痛等癥狀，大便隱血試驗結(jié)果顯示陽性；直腸指檢、腸鏡檢查、影像學(xué)檢查等診斷為結(jié)直腸癌，必要時予以活檢病理檢查，出具明確的病理報告單；生存周期長于6 個月；患者的意識狀態(tài)良好；患者的臨床資料完整；符合腫瘤標(biāo)志物檢驗指征；書面與語言表達(dá)能力正常。排除標(biāo)準(zhǔn)為：伴有其他臟器功能異常；近1 個月曾接受藥物治療，對腫瘤標(biāo)志物水平具有影響性；合并其他惡性腫瘤；中途退出研究；合并其他重大疾?。话橛芯耦惣膊?。

1.2 方法 檢驗前12 h，告知所有受檢者嚴(yán)格禁食與禁飲，次日清晨空腹抽采靜脈血，取血標(biāo)本5 ml，使其存放于真空采血管內(nèi)，并于2 h 內(nèi)送檢。使用全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀測定腫瘤標(biāo)志物，先用離心機對血標(biāo)本進(jìn)行低速離心處理，轉(zhuǎn)速3000 r/min，離心的操作時間設(shè)定10 min。取上清液后使用分析儀測定CA199、CA125、CEA、CA50、AFP、CA72-4，方法均為酶聯(lián)免疫吸附法，測定3 次后取均值。

1.3 觀察指標(biāo)（1）腫瘤標(biāo)志物陽性值：CA199 超出37 U/ml；CA125 超出35 U/ml；CEA 超出5.0 ng/ml；CA50 超 出20 μg/L；AFP：0.89～8.78 ng/ml；CA72-4 超出6 μg/L。（2）診斷效能：以病理報告單為準(zhǔn)，①診斷準(zhǔn)確率=（真陰數(shù)＋真陽數(shù)）/本組例數(shù)；②敏感度=真陽數(shù)/（真陽數(shù)＋假陰數(shù)）；③特異度=真陰數(shù)/（真陰數(shù)＋假陽數(shù)）；④漏診率=假陰數(shù)/（真陽數(shù)＋假陰數(shù)）；⑤誤診率=假陽數(shù)/（假陽數(shù)＋真陰數(shù)）。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS 28.0 軟件處理分析，計量資料使用t檢驗，以表示，計數(shù)資料使用χ2檢驗，用例（%）表示，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

共納入95 例患者，其中男56 例，女39 例；年齡41～78 歲，均數(shù)（52.36±3.54）歲；病灶位置，結(jié)腸：直腸=40：55；腫瘤直徑，未達(dá)5 cm：不低于5 cm=59：36；分化程度，低分化：中分化：高分化=14：71：10；TNM 分期，Ⅰ期：Ⅱ期：Ⅲ期：Ⅳ期=19：45：21：10；轉(zhuǎn)移：未轉(zhuǎn)移=31:64。

2.1 單一檢驗與聯(lián)合檢驗的診斷結(jié)果分析 見表1。

表1 單一與聯(lián)合檢驗的診斷結(jié)果分析（例）

2.2 單一與聯(lián)合檢驗的診斷效能比較 以病理報告單為準(zhǔn)，單一檢驗的準(zhǔn)確率、敏感度、特異度均低于聯(lián)合檢驗，漏診率、誤診率均高于聯(lián)合檢驗（P＜0.05）。見表2。

表2 單一與聯(lián)合檢驗的診斷效能比較（%）

3 討論

結(jié)直腸癌是消化系統(tǒng)的頻發(fā)性腫瘤，主要發(fā)病于中老年人群，且逐漸顯示出年輕化趨勢。疾病早期患者無顯著癥狀，部分患者出現(xiàn)腹脹或腹部隱痛等癥狀，極易被忽略。此外，該病的發(fā)病過程較為緩慢，因此疾病的早期診斷率較低?；诖?，多數(shù)結(jié)直腸癌患者于疾病中晚期被明確診斷，此時患者伴有體重下降、貧血、便血等癥狀，同時伴有明顯腹痛癥狀。該時期患者的治療方式可選性有限，難以取得較佳預(yù)后。為提高該病患者的早期檢出率，臨床積極采取腸鏡檢查、影像學(xué)檢查等技術(shù)，能夠觀察結(jié)直腸黏膜的病變狀態(tài)，進(jìn)而檢出該病。但以上診斷方法無法檢出輕度的黏膜病變，因此漏誤診率較高。聯(lián)合腫瘤標(biāo)志物可于疾病早中期檢出腫瘤，初步判定病灶分期，并預(yù)估有無轉(zhuǎn)移等不良風(fēng)險。腫瘤標(biāo)志物衍生于分子診斷技術(shù)，具有無創(chuàng)操作、檢驗流程簡單、安全性高等診斷優(yōu)勢，可以提升結(jié)直腸癌的檢出效率。

在諸多的腫瘤標(biāo)志物中，CA199 是腺癌的常用標(biāo)志物，其特異性較強，以唾液黏蛋白等方式廣泛分布于血清內(nèi)，分子量遠(yuǎn)超出1000 kD。在健康細(xì)胞中，呈現(xiàn)二唾液酸化Lewis α，其唾液酸殘基由2 →3 鏈有效連接，GlcNAc 節(jié)段唾液酸殘基則由2 →6 鏈進(jìn)行連接。腫瘤細(xì)胞中，唾液酸殘基僅由2→3鏈所連接，而且Lewis α 能夠夠介導(dǎo)血管細(xì)胞黏附分子的多種配體，使血管內(nèi)皮與腫瘤細(xì)胞相互黏附，以此加快腫瘤血行轉(zhuǎn)移的速度?；诖?，CA199 成為多種惡性腫瘤的常見標(biāo)志物。CA199 可以高度敏感的檢出胰腺癌等惡性程度較高的腫瘤類型，敏感度超出90%[3-6]。該指標(biāo)對于結(jié)直腸癌的陽性檢出率高，可以較敏感的檢出該病。此外，CA199 能夠判斷結(jié)直腸癌的進(jìn)展情況，評估手術(shù)療效，并能預(yù)測疾病預(yù)后，及時發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)征兆。CA125 是上皮性卵巢癌的常用標(biāo)志物，其濃度隨腫瘤生長而逐漸升高，對于結(jié)直腸癌的陽性率約是30%～40%[7-8]。CA125 是胚胎發(fā)育期間，表達(dá)于體腔上皮的大分子糖蛋白，屬于卵巢癌的常見抗原，最早用于診斷或是監(jiān)測卵巢癌。由于CA125 合成于上皮細(xì)胞，而且會分布在細(xì)胞內(nèi)，所以在細(xì)胞基膜的屏障作用下，CA125 會被阻擋，難以進(jìn)入血液循環(huán)。當(dāng)結(jié)直腸癌復(fù)發(fā)或是轉(zhuǎn)移后，腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞基膜完整性被明顯破壞，會使CA125 大量進(jìn)入血液與體液內(nèi)，導(dǎo)致體內(nèi)的CA125 水平升高。CEA 是常見的酸性糖蛋白，具備較強的胚胎抗原特性，多用于該病的特異性檢驗指標(biāo)。CEA 分布在第19 號染色體，可以高效參與細(xì)胞的黏附過程，屬于機體常見的糖蛋白，而且含有癌胚抗原決定簇，會在成人消化道內(nèi)少量分布。此外，健康人群若長期吸煙，其體內(nèi)可見CEA水平輕微升高。腸癌或是胃癌患者可見體內(nèi)存在大量的癌細(xì)胞，其失去極性后，會分泌較多的CEA，使其進(jìn)入淋巴液或是血液內(nèi)，且疾病發(fā)展至中晚期，體內(nèi)的CEA 水平達(dá)到峰值。結(jié)直腸癌發(fā)展至中晚期會發(fā)生轉(zhuǎn)移，此時的腫瘤細(xì)胞需要克服細(xì)胞黏附力，分離于原發(fā)性的腫瘤細(xì)胞，并會侵襲附近組織，使癌細(xì)胞進(jìn)入淋巴管或者血液，最終分布全身。此外，CEA具有促血管生成作用，能夠降低轉(zhuǎn)移細(xì)胞的死亡率，使血竇部位的微環(huán)境發(fā)生變化，并能提升黏附分子的表達(dá)水平，使癌細(xì)胞長時間存活。CEA 具有多樣性的功能與結(jié)構(gòu)，可參與抗體結(jié)合以及細(xì)胞黏附過程，并能阻斷細(xì)胞脫離，干擾細(xì)胞的具體分化過程，進(jìn)而延緩細(xì)胞凋亡速度?；诖?，監(jiān)測CEA 能夠評價結(jié)直腸癌的進(jìn)展與轉(zhuǎn)移情況，評估復(fù)發(fā)風(fēng)險。CA50 是唾液酸蛋白以及唾液酸酯類物質(zhì)，健康機體無該類物質(zhì)，或物質(zhì)含量極少。當(dāng)腫瘤生長或進(jìn)展后，會因細(xì)胞惡性病變激活糖基化酶，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞表面所分布的糖基結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，使其水平明顯升高[9-10]。腫瘤細(xì)胞在快速增殖或者是自我更新過程中，會與附近細(xì)胞發(fā)生黏附反應(yīng)，進(jìn)而改變細(xì)胞黏附性質(zhì)，導(dǎo)致糖基化蛋白高效轉(zhuǎn)換。以上黏附過程會改變細(xì)胞膜糖基的具體序列，提升糖基化酶以及蛋白酶的具體活性，使含有碳水化合物的，與癌細(xì)胞相關(guān)的抗原明顯脫落，造成腫瘤的異常糖基化改變。結(jié)直腸癌患者的CA50陽性表達(dá)率較高，能夠預(yù)測腫瘤大小與分期，并能判斷腫瘤的具體分化程度，評估復(fù)發(fā)情況。AFP 同為糖蛋白，合成于胎兒階段的肝細(xì)胞以及卵黃囊，難以在血液中被檢出，因此血清表達(dá)值偏低。AFP 的免疫抑制性較強，對于多個生長因子具有雙向調(diào)節(jié)機制，可誘導(dǎo)T 淋巴細(xì)胞的凋亡過程，在惡性腫瘤患者中的濃度較高。CA72-4 屬于糖蛋白類物質(zhì)，其分子量較高，可以高度識別CC4 以及B72.3 物質(zhì)，是消化道腫瘤的常用檢驗指標(biāo)。CA72-4 是新型腫瘤標(biāo)志物，其高表達(dá)水平多見于腺癌，如結(jié)直腸癌或是胃癌。此外，CA72-4 能夠評估術(shù)后腫瘤細(xì)胞的殘留情況，早期發(fā)現(xiàn)腫瘤局部復(fù)發(fā)病灶，對于腫瘤預(yù)后的評估效果較佳。

本研究發(fā)現(xiàn)，以病理報告單為準(zhǔn)，單一檢驗的準(zhǔn)確率、敏感度、特異度均低于聯(lián)合檢驗，漏診率、誤診率均高于聯(lián)合檢驗。原因是不同腫瘤標(biāo)志物在具體的腫瘤病型中具有差異化的分泌水平，單一檢驗標(biāo)志物難以綜合性反映結(jié)直腸癌患者的病理狀態(tài)。此外，結(jié)直腸癌患者的腫瘤組織在診斷過程中，會發(fā)生形態(tài)改變，聯(lián)合檢驗?zāi)[瘤標(biāo)志物能夠精準(zhǔn)識別癌癥因子的多種變化，全面分析腫瘤組織的分子學(xué)特征，進(jìn)而提升診斷準(zhǔn)確率，獲得全面的診斷信息。更為重要的是，不同疾病分期、病灶有無轉(zhuǎn)移情況下，血清標(biāo)志物的表達(dá)水平有所差異，即疾病分期越高，病灶轉(zhuǎn)移時，腫瘤標(biāo)志物的水平越高，可見腫瘤標(biāo)志物可以輔助判斷腫瘤分期，評估疾病嚴(yán)重度，并能預(yù)估病灶轉(zhuǎn)移情況，進(jìn)而指導(dǎo)后續(xù)治療方案。

綜上，血清腫瘤標(biāo)志物對于結(jié)直腸癌的診斷作用顯著，可檢出該病，判斷疾病分期和病灶轉(zhuǎn)移，且具有較高的診斷精準(zhǔn)度。