酸藤子的化學(xué)成分研究

李婉亭，李志強，曾祥昊，余惠敏，鐘國躍, 2，馮育林, 2*，何明珍, 2*

酸藤子的化學(xué)成分研究

李婉亭1，李志強1，曾祥昊1，余惠敏1，鐘國躍1, 2，馮育林1, 2*，何明珍1, 2*

1. 江西中醫(yī)藥大學(xué)，江西 南昌 330006 2. 中藥固體制劑制造技術(shù)國家工程研究中心，江西 南昌 330006

研究酸藤子的化學(xué)成分。利用硅膠、Sephadex LH-20、HP-20大孔吸附樹脂、半制備高效液相等各種方法進行分離純化，通過核磁共振波譜、質(zhì)譜等對化合物的結(jié)構(gòu)進行表征和解析。從酸藤子70%乙醇提取物的正丁醇萃取部位中分離得到19個化合物，分別鑒定為淫羊藿次苷D2（1）、山柰酚-3β葡萄糖-7α--鼠李糖苷（2）、反式對羥基桂皮酸（3）、咖啡酸（4）、槲皮素-3α--鼠李糖吡喃糖基-7β吡喃葡萄糖苷（5）、4-(β-吡喃葡萄糖基氧基)-苯甲醛（6）、1對羥基肉桂酰單甘油酯（7）、山柰酚-3β(2β呋喃糖基)-吡喃葡萄糖苷-7α--鼠李糖吡喃糖苷（8）、綠原酸（9）、反式咖啡酸（10）、對羥基肉桂酸甲酯（11）、反式-3香豆酰奎寧酸（12）、5-對反式香豆?？鼘幩峒柞ィ?3）、1-(3,4-二羥基肉桂?；?-環(huán)戊二烯二醇（14）、槲皮素-3β呋喃芹糖-(1→2)-β吡喃葡萄糖-7α--吡喃鼠李糖苷（15）、槲皮素-3吡喃葡萄糖苷（16）、檉柳黃素3β葡萄糖苷-7α--鼠李糖苷（17）、-(3-((3,4,5-三羥基-6-(羥甲基)四氫-2-吡喃-2-基)氧基)丙基)肉桂酰胺（18）、-去氫南天竹啡堿（19）。其中化合物18為新化合物，命名為酸藤子堿苷，化合物1～3、5～8、11～15、17和19首次從酸藤子植物中分離得到。

酸藤子；淫羊藿次苷D2；反式對羥基桂皮酸；槲皮素-3α--鼠李糖吡喃糖基-7β吡喃葡萄糖苷；-去氫南天竹啡堿

酸藤子(L.) Mez為紫金?？扑崽僮訉僦参铮且环N常用的民族藥材。它廣泛分布于中國、印度、越南、老撾、泰國和柬埔寨等地。酸藤子可用于治療喉嚨痛、消化不良、腸炎、月經(jīng)不調(diào)、子宮出血、睪丸炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和外傷[1-2]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，酸藤子具有多種生物活性，如抗腫瘤、抗氧化和抗炎活性。近年研究報道已從酸藤子中分離出多種類型的化合物，包括黃酮類、蒽醌類、木脂素、倍半萜類和酚酸類等[3]。

課題組對酸藤子70%乙醇提取物的正丁醇部位進行化學(xué)成分研究，共分離得到了19個化合物包括6個黃酮類化合物，11個苯丙素類化合物，1個苯丙醇類化合物，1個未見報道的生物堿類化合物，分別鑒定為淫羊藿次苷D2（icariside D2，1）、山柰酚-3β葡萄糖-7α--鼠李糖苷（kaempferol-3βglucose-7α--rhamnoside，2）、反式對羥基桂皮酸（-hydroxycinnamic acid，3）、咖啡酸（caffeic acid，4）、槲皮素-3α--鼠李糖吡喃糖基-7β吡喃葡萄糖苷（quercetin-3--α--rhamno- pyranosyl-7--β--glucopyranoside，5）、4-(β-吡喃葡萄糖基氧基)-苯甲醛[4-(β-glucopyranosyloxy)-benzaldehyde，6]、1對羥基肉桂酰單甘油酯（1-hydroxycinnamalyl monoglycerides，7）、山柰酚-3β(2β呋喃糖基)-吡喃葡萄糖苷-7α--鼠李糖吡喃糖苷（kaempferol-3β(2βapiofuranosyl)-glucopyranoside-7α--rhamnopyra- noside，8）、綠原酸（chlorogenic acid，9）、反式咖啡酸（-caffeic acid，10）、對羥基肉桂酸甲酯（methyl--coumarate，11）、反式-3香豆酰奎寧酸（-3coumaroylquinic acid，12）、5-對反式香豆?？鼘幩峒柞ィ╩ethyl 5--coumarylquinic acid，13）、1-(3,4-二羥基肉桂?；?-環(huán)戊二烯二醇[1-(3,4-dihydroxycinnamoyl)-cyclopenta-2,5-diol，14]、槲皮素-3β呋喃芹糖-(1→2)-β吡喃葡萄糖-7α--吡喃鼠李糖苷（quercetin-3βfuranocelery- (1→2)-βglucopyranos-7α--rhamnopyranoside，15）、槲皮素-3吡喃葡萄糖苷（quercetin-3glucopyranoside，16）、檉柳黃素3β葡萄糖苷- 7α--鼠李糖苷（tamarixetin 3βglucoside-7α--rhamnoside，17）、-(3-((3,4,5-三羥基-6-(羥甲基)四氫-2-吡喃-2-基)氧基)丙基)肉桂酰胺[-(3-((3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl) tetrahydro-2-pyran-2-yl)oxy)propyl)cinnamamide，18]、-去氫南天竹啡堿（-dehydronantenine，19）。其中，化合物18為新化合物，命名為酸藤子堿苷，并且化合物1～3、5～8、11～15、17和19首次從該植物中分離得到。本研究為酸藤子進一步的開發(fā)和利用提供了依據(jù)。

1 儀器與材料

Bruker avance 600型核磁共振儀（德國Bruker公司）；Triple TOF 5600型高分辨質(zhì)譜儀（美國AB Sciex公司）；LC-XR20型高效HPLC色譜儀（日本Shimadzu公司）；漢邦科技NP7005C型制備HPLC色譜儀（江蘇漢邦科技有限公司）；EYALA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（日本EYALA公司）；MS304S分析天平 [梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司]；柱色譜硅膠（100～200、200～300、300～400目）；GF254薄層色譜硅膠板（青島海洋化工有限公司）。高效液相色譜和半制備液相色譜所使用的試劑均為色譜級，其他為分析級。

酸藤子藥材于2014年9月購自安徽亳州藥材市場，由江西中醫(yī)藥大學(xué)鐘國躍教授鑒定為紫金?？浦参锼崽僮?L.) Mez的干燥成熟果實。標本（20141001）保存在江西中醫(yī)藥大學(xué)。

2 提取與分離

酸藤子干燥果實10 kg，粉碎，用體積分數(shù)70%乙醇提取3次，每次1.5 h，合并乙醇提取液，濾過，減壓濃縮溶劑至無醇味，干燥后，得粗提取物1178 g。將粗提取物加入適量水分散，依次用石油醚、二氯甲烷、醋酸乙酯、正丁醇萃取，萃取液減壓濃縮、干燥得各部位提取物，其中石油醚部位112.9 g、二氯甲烷部位162.4 g、醋酸乙酯部位78.3 g、正丁醇部位180.6 g。

將正丁醇部位溶解后經(jīng)HP-20大孔吸附樹脂分離，依次以5倍柱體積的水、20%乙醇溶液、40%乙醇溶液、60%乙醇溶液、95%乙醇溶液梯度洗脫，得水部位35.64 g、20%乙醇部位92.51 g、40%乙醇部位79.52 g、60%乙醇部位102.80 g、95%乙醇部位30.40 g。

取20%乙醇部位（92.51 g）經(jīng)MCI柱分離，依次以10%甲醇溶液、30%甲醇溶液、50%甲醇溶液、70%甲醇溶液、100%甲醇梯度洗脫，得到5個組分Fr. 1-1～1-5。組分Fr. 1-3經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱色譜分離，甲醇-水梯度洗脫，得到5個組分Fr. 1-3-1～1-3-5，組分Fr. 1-3-3經(jīng)半制備高效液相色譜分離，以甲醇-水（23∶77）為流動相，得到化合物1（7.0 mg）；組分Fr. 1-3-4經(jīng)半制備高效液相色譜分離，以甲醇-水（25∶75）為流動相，得到化合物3（8.6 mg）。組分Fr. 1-4經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱色譜分離，甲醇-水梯度洗脫，得到5個組分Fr. 1-4-1～1-4-5，組分Fr. 1-4-2經(jīng)半制備高效液相色譜分離，以甲醇-水（25∶75）為流動相，得到化合物2（317.3 mg）；組分Fr. 1-4-4經(jīng)半制備高效液相色譜分離，以甲醇-水（30∶70）為流動相，得到化合物4（15.6 mg）。組分Fr.1-5經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱色譜分離，甲醇-水梯度洗脫，得到6個組分Fr. 1-5-1～1-5-6，組分Fr. 1-5-2經(jīng)半制備高效液相色譜分離，以甲醇-水（30∶70）為流動相，得到化合物5（5.6 mg）；組分Fr. 1-5-3經(jīng)半制備高效液相色譜分離，以甲醇-水（31∶69）為流動相，得到化合物6（6.3 mg）。

取40%乙醇部位（79.52 g）經(jīng)正向硅膠柱色譜分離，以二氯甲烷-甲醇梯度洗脫，得到9個組分Fr. 2-1～2-9。組分Fr.2-1經(jīng)半制備高效液相色譜，以甲醇-水（30∶70）為流動相進行分離，得到化合物7（8.6 mg）；組分Fr.2-3經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱色譜，甲醇-水梯度洗脫，得到5個組分Fr. 2-3-1～2-3-5，組分Fr. 2-3-3經(jīng)半制備高效液相色譜，以甲醇-水（33∶67）為流動相進行分離，得到化合物8（7.3 mg）；組分Fr. 2-3-4經(jīng)半制備高效液相色譜，以甲醇-水（36∶64）為流動相進行分離，得到化合物9（6.5 mg）。組分Fr. 2-5經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱色譜，甲醇-水梯度洗脫，得到5個組分Fr. 2-5-1～2-5-5，組分Fr. 2-5-4經(jīng)半制備高效液相色譜，以甲醇: 水（35∶65）為流動相進行分離，得到化合物10（6.4 mg）。組分Fr. 2-6經(jīng)半制備高效液相色譜，以甲醇-水（34∶66）為流動相進行分離，得到化合物11（8.5 mg）。組分Fr. 2-7經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱色譜，甲醇-水梯度洗脫，得到5個組分Fr. 2-7-1～2-7-5，組分Fr. 2-7-3經(jīng)半制備高效液相色譜，以乙腈-水（15∶85）為流動相進行分離，得到化合物12（7.2 mg）。組分Fr.2-8經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱色譜，甲醇-水梯度洗脫，得到4個組分Fr. 2-8-1～2-8-4，組分Fr. 2-8-3經(jīng)半制備高效液相色譜，以乙腈-水（17∶83）為流動相進行分離，得到化合物13（11.8 mg）。組分Fr. 2-9經(jīng)半制備高效液相色譜，以乙腈-水（19∶81）為流動相進行分離，得到化合物14（6.9 mg）。

取60%乙醇部位浸膏（102.80 g）經(jīng)正向硅膠柱色譜分離，以二氯甲烷-甲醇梯度洗脫，得到8個組分Fr. 3-1～3-8。組分Fr. 3-3經(jīng)半制備高效液相色譜乙腈-水（20∶80）分離，得到化合物15（18.6 mg）；組分Fr. 3-4經(jīng)半制備高效液相色譜乙腈-水（25∶75）分離，得到化合物16（15.4 mg）；組分Fr. 3-6經(jīng)半制備高效液相色譜乙腈-水（23∶77）分離，得到化合物17（9.5 mg）；組分Fr. 3-7經(jīng)半制備高效液相色譜乙腈-水（23∶77）分離，得到化合物18（8.6 mg）；組分Fr. 3-8經(jīng)半制備高效液相色譜乙腈-水（26∶74）分離，得到化合物19（18.5 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：無色片晶（甲醇）；HR-ESI-MS/: 299.113 6 [M－H]?（理論值299.113 1 [M－H]?），分子式為C14H20O7。1H-NMR (600MHz, DMSO-6): 7.12 (2H, d,= 8.4 Hz, H-2, 6), 6.93 (2H, d,= 8.4 Hz, H-3, 5), 4.80 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1), 4.56 (2H, d,= 2.8 Hz, H-6), 3.56 (2H, t,= 7.2 Hz, H-α), 3.12～3.34 (4H, m, H-2～5), 2.67 (2H, t,= 7.2 Hz, H-β)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6):156.2 (C-4), 133.2 (C-1), 130.1 (C-2, 6), 116.5 (C-3, 5), 101.1 (C-1), 77.5 (C-3), 77.1 (C-5), 73.7 (C-2), 70.2 (C-4), 62.9 (C-α), 61.2 (C-6), 38.7 (C-β)。以上波譜數(shù)據(jù)與參考文獻報道基本一致[4]，故鑒定化合物1為淫羊藿次苷D2。

化合物2：黃色針狀晶體（甲醇）；HR-ESI-MS/: 593.151 2 [M－H]?（理論值593.150 6 [M－H]?），分子式為C27H30O15。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 12.61 (1H, s, 5-OH), 10.28 (1H, s, 4-OH), 8.10 (2H, d,= 8.9 Hz, H-2, 6), 6.91 (2H, d,= 8.9 Hz, H-3, 5), 6.84 (1H, d,= 2.2 Hz, H-8), 6.46 (1H, d,= 2.2 Hz, H-6), 5.56 (1H, d,= 1.8 Hz, Rha-H-1), 5.49 (1H, d,= 7.4 Hz, Glc-H-1), 1.12 (3H, d,= 6.2 Hz, Rha-H-6)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6): 178.1 (C-4), 162.0 (C-7), 161.3 (C-5), 160.6 (C-4), 157.2 (C-2), 156.5 (C-9), 133.9 (C-3), 131.5 (C-2, 6), 121.3 (C-1), 115.6 (C-3, 5), 106.1 (C-10), 101.2 (Glc-C-1), 99.9 (C-6), 98.8 (Rha-C-1), 95.0 (C-8), 78.8 (Glc-C-5), 76.9 (Glc-C-3), 74.7 (Glc-C-2), 72.1 (Rha-C-4), 70.7 (Glc-C-4), 70.5 (Rha-C-3), 70.4 (Rha-C-2), 70.3 (Rha-C-5), 61.3 (Glc-C-6), 20.4 (Rha-C-6)。根據(jù)以上波譜數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[5]，故鑒定化合物2為山柰酚-3β葡萄糖-7α--鼠李糖苷。

化合物3：淡黃色粉末；HR-ESI-MS/: 163.040 1 [M－H]?（理論值163.039 5 [M－H]?），分子式為C9H8O3。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.57 (1H, d,= 16.5 Hz, H-7), 7.54 (2H, d,= 8.8 Hz, H-2, 6), 6.81 (2H, d,= 8.3 Hz, H-3, 5), 6.35 (1H, d,= 16.2 Hz, H-8)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6): 166.6 (C-9), 160.1 (C-4), 144.5 (C-7), 130.6 (C-2, 6), 125.7 (C-1), 116.3 (C-3, 5), 115.7 (C-8)。根據(jù)以上波譜數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[6]，故鑒定化合物3為反式對羥基桂皮酸。

化合物4：黃色粉末；HR-ESI-MS/: 179.035 0 [M－H]?（理論值179.034 4 [M－H]?），分子式為C9H8O4。1H-NMR (600MHz, DMSO-6): 7.48 (1H, d,= 15.6 Hz, H-7), 7.03 (1H, d,= 2.1 Hz, H-2), 6.99 (1H, dd,= 2.1, 8.2 Hz, H-6), 6.77 (1H, d,= 8.1 Hz, H-5), 6.22 (1H, d,= 15.9 Hz, H-8)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6): 166.5 (C-9), 148.7 (C-4), 146.0 (C-7), 145.0 (C-9), 126.1 (C-1), 121.6 (C-6), 116.3 (C-8), 115.4 (C-5), 115.2 (C-2)。根據(jù)以上波譜數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致[7]，故鑒定化合物4為咖啡酸。

化合物5：黃色粉末；HR-ESI-MS/: 609.145 1 [M－H]?，（理論值609.145 6 [M－H]?），分子式為C27H30O16。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.64 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2), 7.61 (1H, dd,= 2.0, 8.4 Hz, H-6), 6.87 (1H, d,= 8.4 Hz, H-5), 6.80 (1H, d,= 2.2 Hz, H-8), 6.44 (1H, d,= 2.2 Hz, H-6), 5.56 (1H, d,= 1.9 Hz, Rha-H-1), 5.50 (1H, d,= 7.4 Hz, Glc-H-1)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6): 178.1 (C-4), 162.0 (C-7), 161.3 (C-5), 157.1 (C-2), 156.4 (C-9), 149.2 (C-4), 145.4 (C-3), 134.1 (C-3), 122.2 (C-6), 121.5 (C-1), 116.8 (C-2), 115.7 (C-5), 106.1 (C-10), 另外C: 101.2, 99.9, 78.1, 76.9, 74.5, 72.1, 70.7, 70.5, 70.4, 70.3, 61.4, 18.4分別為鼠李糖和葡萄糖的碳信號。根據(jù)以上波譜數(shù)據(jù)與參考文獻報道基本一致[8]，故鑒定化合物5為槲皮素-3α--鼠李糖吡喃糖基-7β吡喃葡萄糖苷。

化合物6：黃色粉末；HR-ESI-MS/: 283.081 9 [M－H]?（理論值283.081 8 [M－H]?），分子式為C13H16O7。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 9.89 (1H, s, CHO), 7.88 (2H, d,= 8.3 Hz, H-3,H-5), 7.21 (2H, d,= 8.3 Hz, H-2, H-6), 5.05 (1H, d,= 7.2 Hz, H-1), 4.80 (2H, d,= 7.6 Hz, H-6), 3.12～3.34 (4H, m, H-2～5)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6): 191.9 (C-7), 162.6 (C-1), 132.1 (C-5), 130.9 (C-3), 130.1 (C-4), 116.9 (C-6), 116.5 (C-2), 100.2 (C-1), 77.6 (C-3), 76.9 (C-5), 73.6 (C-2), 70.0 (C-4), 61.0 (C-6)。根據(jù)以上波譜數(shù)據(jù)與參考文獻報道基本一致[9]，故鑒定化合物6為4-(β-吡喃葡萄糖基氧基)-苯甲醛。

化合物7：白色無定型粉末；HR-ESI-MS/: 237.076 7 [M－H]?（理論值237.076 3 [M－H]?），分子式為C12H14O5。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 10.05 (1H, s, OH), 7.56 (1H, d,= 16.6 Hz, H-α), 7.53 (2H, d,= 8.8 Hz, H-2, 6), 6.81 (2H, d,= 8.3 Hz, H-3, 5), 6.35 (1H, d,= 16.2 Hz, H-1β), 4.12 (1H, dd,= 4.7, 11.5 Hz, glycerol H-1α), 3.98 (1H, dd,= 7.7, 11.1 Hz, glycerol H-1β), 3.66 (1H, m, glycerol H-2), 3.38 (2H, m, glycerol H-3)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6): 166.6 (C＝O), 160.1 (C-4), 144.5 (C-β), 130.6 (C-2, 6), 125.7 (C-1), 116.2 (C-3, 5), 115.7 (C-α), 69.6 (C-2), 65.5 (C-1), 62.6 (C-3)。根據(jù)以上波譜數(shù)據(jù)與參考文獻報道基本一致[10]，故鑒定化合物7為1對羥基肉桂酰單甘油酯。

化合物8：淺黃色無定型粉末；HR-ESI-MS/: 725.193 0 [M－H]?（理論值725.192 9 [M－H]?），分子式為C32H38O19。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 8.12 (2H, d,= 8.9 Hz, H-2, H-6), 6.88 (2H, d,= 8.9 Hz, H-3, 5), 6.83 (1H, d,= 2.2 Hz, H-8), 6.43 (1H, d,= 2.0 Hz, H-6), 5.63 (1H, d,= 7.6 Hz, H-1), 5.55 (1H, d,= 1.74 Hz, H-1), 5.40 (1H, d,= 1.7 Hz, H-1), 3.52～4.08 (14H, m, H-2～6, H-2, 4, 5, H-2～5), 1.28 (3H, d,= 6.0 Hz, H-6)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6): 178.1 (C-4), 163.1 (C-7), 161.9 (C-5), 161.3 (C-2), 160.0 (C-4), 156.7 (C-9), 133.7 (C-3), 131.4 (C-2, 6), 121.2 (C-1), 115.6 (C-3, 5), 109.1 (C-1), 106.1 (C-10), 101.1 (C-1), 99.8 (C-6), 98.8 (C-1), 94.9 (C-8), 79.7 (C-3), 78.0 (C-2), 77.6 (C-3), 76.6 (C-2), 76.4 (C-5), 74.3 (C-4), 72.1 (C-4), 70.7 (C-3), 70.6 (C-2), 70.6 (C-4), 70.3 (C-5), 64.6 (C-5), 61.1 (C-6), 17.4 (C-6)。根據(jù)以上波譜數(shù)據(jù)與參考文獻報道基本一致[11]，故鑒定化合物8為山柰酚-3β(2β呋喃糖基)-吡喃葡萄糖苷-7α--鼠李糖吡喃糖苷。

化合物9：白色粉末；HR-ESI-MS/: 353.087 7 [M－H]?（理論值353.08 73 [M－H]?），分子式為C16H18O9。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.48 (1H, d,= 15.8 Hz, H-7), 7.04 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2), 6.97 (1H, dd,= 2.1, 8.2 Hz, H-6), 6.77 (1H, d,= 8.1 Hz, H-5), 6.22 (1H, d,= 15.9 Hz, H-8), 5.19 (1H, m, H-3), 3.84 (1H, m, H-5), 3.59 (1H, m, H-4), 1.82～2.07 (4H, m, H-2, 6)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6): 177.0 (C-7), 166.6 (C-9), 148.7 (C-4), 146.0 (C-3), 144.9 (C-7), 126.2 (C-1), 121.6 (C-6), 116.3 (C-5), 115.5 (C-2), 115.1 (C-8), 73.4 (C-3), 71.6 (C-4), 71.4 (C-5), 68.0 (C-1), 36.1 (C-6), 35.8 (C-2)。根據(jù)以上波譜數(shù)據(jù)與參考文獻報道基本一致[12]，故鑒定化合物9為綠原酸。

化合物10：淺黃色針晶（甲醇）；HR-ESI-MS/: 311.040 6 [M－H]?（理論值311.040 3 [M－H]?），分子式為C13H12O9。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.48 (1H, d,= 15.8 Hz, H-7), 7.02 (1H, d,= 2.1 Hz, H-2), 6.98 (1H, dd,= 2.1, 8.2 Hz, H-6), 6.77 (1H, d,= 8.1 Hz, H-5), 6.22 (1H, d,= 16.0 Hz, H-8)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6): 166.5 (C-9), 148.7 (C-4), 146.0 (C-7), 144.9 (C-3), 126.2 (C-1), 121.6 (C-6), 116.3 (C-5), 115.4 (C-2), 115.1 (C-8), 75.3 (C-10), 71.3 (C-11)。根據(jù)以上波譜數(shù)據(jù)與參考文獻報道基本一致[13]，故鑒定化合物10為反式咖啡酸。

化合物11：淺黃色膠狀固體；HR-ESI-MS/: 177.055 3 [M－H]?（理論值177.055 2 [M－H]?），分子式為C10H10O3。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.54 (1H, d,= 16.0 Hz, H-1), 7.49 (2H, d,= 8.2 Hz, H-2, 6), 6.82 (2H, d,= 8.5 Hz, H-3, 5), 6.31 (1H, d,= 16.0 Hz, H-2), 3.41 (3H, s, OCH3)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6): 166.3 (C＝O), 160.3 (C-4), 145.0 (C-1), 130.7 (C-2, 6), 125.6 (C-1), 115.2 (C-3, 5), 115.0 (C-2), 49.1 (-OCH3)。根據(jù)以上波譜數(shù)據(jù)與參考文獻報道基本一致[14]，故鑒定化合物11為對羥基肉桂酸甲酯。

化合物12：白色粉末；HR-ESI-MS/: 337.092 9 [M－H]?，（理論值337.092 3 [M－H]?），分子式為C16H18O8。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.60 (1H, d,= 15.9 Hz, H-7), 7.56 (2H, d,= 8.7 Hz, H-2, 6), 6.81 (2H, d,= 8.5 Hz, H-3, 5), 6.43 (1H, d,= 15.9 Hz, H-8), 4.71 (1H, dd,= 2.9, 7.8 Hz, H-2), 4.11 (1H, m, H-1), 3.98 (1H, m, H-3), 1.80～2.10 (4H, m, H-4, 6)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6): 176.0 (C-7), 166.8 (C-9), 160.2 (C-4), 144.9 (C-7), 133.1 (C-6), 130.7 (C-2), 125.6 (C-1), 116.3 (C-3), 115.2 (C-5), 115.1 (C-8), 77.4 (C-1), 74.5 (C-5), 66.8 (C-3), 64.5 (C-4), 40.5 (C-6), 38.3 (C-2)。根據(jù)以上波譜數(shù)據(jù)與參考文獻報道基本一致[15]，故鑒定化合物12為反式-3香豆酰奎寧酸。

化合物13：白色粉末；HR-ESI-MS/: 351.108 6 [M－H]?（理論值351.108 0 [M－H]?），分子式為C17H20O8。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.60 (1H, d,= 15.8 Hz, H-7), 7.56 (2H, d,= 8.6 Hz, H-2, 6), 6.81 (2H, d,= 8.6 Hz, H-3, 5), 6.41 (1H, d,= 15.9 Hz, H-8), 4.71 (1H, m, H-1), 4.10 (1H, m, H-2), 3.61 (3H, s, OCH3), 3.94 (1H, m, H-3), 1.80～2.10 (4H, m, H-4, 6)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6): 174.3 (C-7), 166.8 (C-9), 160.3 (C-4), 145.0 (C-7), 133.1 (C-2, C-6), 125.6 (C-1), 116.3 (C-3), 115.2 (C-5), 115.1 (C-8), 76.0 (C-1), 74.0 (C-5), 65.8 (C-3), 64.9 (C-4), 40.5 (C-6), 38.5 (C-2)。根據(jù)以上波譜數(shù)據(jù)與參考文獻報道基本一致[16]，故鑒定化合物13為5-對反式香豆酰奎寧酸甲酯。

化合物14：淡黃色固體；HR-ESI-MS/: 263.092 5 [M－H]?（理論值263.091 9 [M－H]?），分子式為C14H16O5。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.56 (1H, d,= 16.0 Hz, H-7), 7.54 (2H, d,= 8.8 Hz, H-2, 6), 6.81 (2H, d,= 8.6 Hz, H-3, 5), 6.36 (1H, d,= 15.9 Hz, H-8), 5.23 (1H, m, H-1), 4.88 (1H, m, H-2), 3.80 (1H, m, H-5), 1.70～1.90 (4H, m, H-3, 4)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6): 166.6 (C-9), 160.1 (C-4), 144.5 (C-7), 133.1 (C-2), 130.6 (C-6), 125.7 (C-1), 116.3 (C-3), 115.3 (C-5), 115.1 (C-8), 73.4 (C-1), 71.3 (C-2), 68.3 (C-5), 40.5 (C-3), 35.8 (C-4)。根據(jù)以上波譜數(shù)據(jù)與參考文獻報道基本一致[17]，故鑒定化合物14為1-(3,4-二羥基肉桂酰基)-環(huán)戊二烯二醇。

化合物15：黃色粉末；HR-ESI-MS/: 741.188 4 [M－H]?（理論值741.187 8 [M－H]?），分子式為C32H38O20。1H-NMR (700 MHz, DMSO-6): 7.72 (1H, dd,= 2.2, 8.7 Hz, H-6), 7.58 (1H, d,= 2.2 Hz, H-2), 6.84 (1H, d,= 8.5 Hz, H-5), 6.79 (1H, d,= 2.2 Hz, H-8), 6.42 (1H, d,= 2.1 Hz, H-6), 5.63 (1H, d,= 7.7 Hz, Glc-H-1), 5.56 (1H, m, Rha-H-1), 5.36 (1H, d,= 1.4 Hz, Api-H-1), 1.21 (3H, d,= 6.0 Hz, Rha-CH3)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6): 177.9 (C-4), 161.9 (C-7), 161.3 (C-5), 156.7 (C-9), 156.3 (C-2), 149.3 (C-4), 145.5 (C-3), 133.9 (C-3), 122.6 (C-1), 121.4 (C-6), 116.4 (C-5), 115.7 (C-2), 109.1 (Api-C-1), 106.1 (C-10), 99.8 (Glc-C-1), 98.9 (C-6), 98.8 (Rha-C-1), 94.6 (C-8), 79.7 (Api-C-3), 78.0 (Glc-C-2), 77.6 (Api-C-2), 77.4 (Glc-C-5), 76.6 (Glc-C-3), 74.4 (Api-C-4), 72.0 (Rha-C-4), 70.7 (Rha-C-2), 70.6 (Rha-C-3), 70.5 (Rha-C-5), 70.3 (Glc-C-4), 64.7 (Api-C-5), 61.3 (Glc-C-6), 17.9 (Rha-C-6)。根據(jù)以上波譜數(shù)據(jù)與參考文獻報道基本一致[18]，故鑒定化合物15為槲皮素-3β呋喃芹糖-(1→2)-β吡喃葡萄糖-7α--吡喃鼠李糖苷。

化合物16：黃色粉末；HR-ESI-MS/: 464.088 2 [M－H]?，（理論值464.087 7 [M－H]?），分子式為C21H20O12。1H-NMR (700 MHz, DMSO-6): 12.6 (1H, s, 5-OH), 7.58 (1H, dd,= 2.0, 8.4 Hz, H-6), 7.57 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2), 6.84 (1H, d,= 9.0 Hz, H-5), 6.41 (1H, d,= 1.9 Hz, H-8), 6.20 (1H, d,= 2.0 Hz, H-6), 5.47 (1H, d,= 7.0 Hz, Glc-H-1)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6): 177.7 (C-4), 164.8 (C-7), 161.7 (C-5), 156.8 (C-2), 156.6 (C-9), 148.9 (C-4), 145.3 (C-3), 133.7 (C-3), 122.0 (C-6), 121.6 (C-1), 116.6 (C-5), 115.7 (C-2), 104.4 (C-10), 101.1 (C-1), 99.2 (C-6), 93.9 (C-8), 78.0 (C-5), 76.9 (C-3), 74.5 (C-2), 70.4 (C-4), 61.4 (C-6)。根據(jù)以上波譜數(shù)據(jù)與參考文獻報道基本一致[19]，故鑒定化合物16為槲皮素-3吡喃葡萄糖苷。

化合物17：黃色粉末；HR-ESI-MS/: 623.161 8 [M－H]?，（理論值623.161 2 [M－H]?），分子式為C28H32O16。1H-NMR (700 MHz, DMSO-6): 7.63 (1H, d,= 2.0 Hz, H-6), 7.61 (1H, dd,= 8.2, 2.2 Hz, H-2), 6.85 (1H, d,= 9.1 Hz, H-5), 6.79 (1H, d,= 2.1 Hz, H-8), 6.43 (1H, d,= 2.2 Hz, H-6), 5.55 (1H, d,= 1.8 Hz, Rha-H-1), 5.48 (1H, d,= 7.4 Hz, Glc-H-1), 3.63 (3H, s, -OCH3)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6): 178.1 (C-4), 162.0 (C-7), 161.3 (C-5), 157.1 (C-2), 156.4 (C-9), 149.1 (C-4), 145.3 (C-3), 134.1 (C-3), 122.2 (C-6), 121.5 (C-1), 116.8 (C-2), 115.7 (C-5), 106.1 (C-10), 101.2 (Glc-C-1), 99.8 (C-6), 98.9 (Rha-C-1), 94.8 (C-8), 78.1 (Glc-C-5), 76.9 (Glc-C-3), 74.5 (Glc-C-2), 72.1 (Rha-C-4), 70.7 (Glc-C-4), 70.5 (Rha-C-3), 70.4 (Rha-C-2), 70.3 (Rha-C-5), 61.4 (Glc-C-6), 49.1 (OCH3), 20.4 (Rha-C-6)。根據(jù)以上波譜數(shù)據(jù)與參考文獻報道基本一致[20]，故鑒定化合物17為檉柳黃素3β葡萄糖苷-7α--鼠李糖苷。

化合物18：黃色粉末；HR-ESI-MS/: 368.170 7 [M＋H]+，（理論值368.170 9 [M＋H]+），結(jié)合核磁波譜數(shù)據(jù)推測分子式為C18H25NO7。1H-NMR (700 MHz, DMSO-6) 中[H7.57 (2H, d,= 7.4 Hz), 7.41 (2H, d,= 7.7 Hz), 7.37 (1H, t,= 8.0 Hz)]為1組苯環(huán)單取代信號，[H7.40 (1H, d,= 16.1 Hz), 6.65(1H, d,= 15.8 Hz)] 為反式雙鍵信號。1H-NMR 中[H4.15 (1H, d,= 7.8 Hz)] 為糖端基質(zhì)子信號，13C-NMR (125 MHz, DMSO-6) 中C103.3處的信號為糖端基碳信號，并有C73.9, 77.3, 70.5, 77.2, 61.6歸屬于糖基的其他碳信號，以上證明化合物18的結(jié)構(gòu)中含有β葡萄糖取代基。化合物18的13C-NMR譜C165.4顯示有羰基碳，1H-NMR譜中H8.12 (1H, dd,= 5.7, 11.4 Hz) 處可見活潑氫信號，推測存在酰胺基團。DEPT譜顯示有3個CH2信號，分別為C36.6, 29.7, 67.1，HMBC譜（圖1）中觀察到3個CH2基團中氫信號與碳信號相互關(guān)聯(lián)，證明了丙基的存在。且H-10 (H3.25) 與C-9 (165.4) 連。綜合以上波譜數(shù)據(jù)鑒定化合物18為-(3-((3,4,5-三羥基-6-(羥甲基)四氫-2-吡喃-2-基)氧基) 丙基)肉桂酰胺，通過SciFinder檢索確定為未見報道的新化合物，命名為酸藤子堿苷。其NMR數(shù)據(jù)歸屬見表1。

圖1 化合物18的1H-1H COSY 和HMBC關(guān)鍵信號

表1 化合物18的NMR數(shù)據(jù)歸屬

化合物19：無色針狀晶體（甲醇）；HR-ESI-MS/: 338.139 1 [M＋H]+，（理論值338.139 2 [M＋H]+），分子式為C20H19NO4。1H-NMR (700 MHz, DMSO-6): 8.79 (1H, s, H-11), 7.19 (1H, s, H-8), 7.17 (1H, s, H-3), 6.60 (1H, s, H-7), 6.07 (2H, s,CH2-), 3.93 (3H, s, 1CH3), 3.76 (3H, s, 2CH3), 3.29 (4H, m, H-4, 5), 2.97 (3H, s, --CH3)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6): 150.8 (C-2), 147.3 (C-1), 144.8 (C-9), 144.3 (C-10), 142.7 (C-6a), 131.9 (C-3a), 130.0 (C-7a), 125.1 (C-1a), 118.4 (C-3b), 118.1 (C-11a), 111.7 (C-3), 105.5 (C-11), 104.3 (C-8), 102.1 (C-7), 101.2 (-CH2-O), 59.7 (1-OCH3), 56.6 (2-OCH3), 50.1 (C-5), 31.6 (-CH3), 30.9 (C-4)。根據(jù)以上波譜數(shù)據(jù)與參考文獻報道基本一致[21]，故鑒定化合物19為-去氫南天竹啡堿。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

[1] 倪紹偉, 聞程志,葉洋洋, 等. 酸藤子化學(xué)成分研究 [J]. 中藥材, 2022, 45(12): 2900-2903.

[2] 張仲敏, 周鳳玲, 陳振興. 瑤藥酸藤子的研究進展 [J]. 廣西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報, 2021, 24(1): 69-73.

[3] 楊林軍, 黃文平, 黎田兒, 等. 酸藤子屬植物的研究進展 [J]. 中藥材, 2015, 38(8): 1761-1767.

[4] 邵莉, 黃衛(wèi)華, 張朝鳳, 等. 兜唇石斛的化學(xué)成分研究 [J]. 中國中藥雜志, 2008, 33(14): 1693-1695.

[5] 昶國平, 李廣雷, 劉博譞, 等. 小花棘豆的化學(xué)成分研究 [J]. 中醫(yī)藥學(xué)報, 2014, 42(4): 15-16.

[6] 魏健, 楊小生, 朱海燕, 等. 短尾越橘化學(xué)成分研究 [J]. 廣西植物, 2008, 28(4): 558-560.

[7] 黃婉鳳, 何佳, 張琛偉, 等. 救必應(yīng)中2個新的咖啡酸半萜酯[J]. 中草藥, 2023, 54(8): 2365-2372.

[8] 孟江, 董曉萍, 姜志宏, 等. 鮮魚腥草的黃酮類化合物研究 [J]. 中國中藥雜志, 2006, 31(16): 1335-1337.

[9] Leong G, Uzio R, Derbesy M. Synthesis, identification and determination of glucosides present in greenbeans (Andrews) [J]., 1989, 4(4): 163-167.

[10] 王偉, 丁怡, 邢東明, 等. 菠蘿葉酚類成分研究 [J]. 中國中藥雜志, 2006, 31(15): 1242-1244.

[11] Hisaeda A, Matsunami K, Otsuka H,. Flavonol glycosides from the leaves of[J]., 2011, 65(2): 360-363.

[12] 李菲, 趙新亞, 趙雪梅, 等. 銀花青蒿梔子方抗A6型柯薩奇病毒活性成分的分離 [J]. 中草藥, 2022, 53(5): 1365-1371.

[13] 粟杰, 馮艷, 林炳鋒, 等. 刺五加化學(xué)成分的分離與鑒定[J]. 中草藥, 2021, 52(16): 4783-4788.

[14] 曾鵬, 張勇, 潘晨, 等. 巴東過路黃酚類化學(xué)成分研究 [J]. 藥學(xué)學(xué)報, 2013, 48(3): 377-382.

[15] 徐貞權(quán), 何明珍, 姚閩, 等. 杏香兔耳風(fēng)化學(xué)成分研究 [J]. 中草藥, 2023, 54(6): 1728-1735.

[16] 李飛飛, 柴興云, 徐正仁, 等. 爪哇腳骨脆的化學(xué)成分研究[J]. 中草藥, 2008, 39(7): 984-986.

[17] Wang H B, Muraleedharan G. Novel antioxidant compounds from() [J]., 1999, 62: 1-3.

[18] 史小平, 蘇聰, 齊博文, 等. 地桃花中黃酮苷類成分研究 [J]. 中國藥學(xué)雜志, 2017, 52(19): 1670-1674.

[19] 張普照, 鐘國躍, 謝文偉, 等. 熏倒牛中黃酮類成分研究 [J]. 中草藥, 2016, 47(20): 3565-3568.

[20] 付文婷, 胡蘭, 古麗米熱·阿不都熱依木, 等. 新疆中亞沙棘化學(xué)成分的分離和純化 [J]. 新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報, 2009, 32(5): 570-571.

[21] Jiang H Z. Chemical composition and cytotoxic activity ofvar.[J]., 2022, 56: 101-104.

Chemical constituents of

LI Wanting1, LI Zhiqiang1, ZENG Xianghao1, YU Huimin1, ZHONG Guoyue1, 2, FENG Yulin1, 2, HE Mingzhen1, 2

1. Jiangxi University of Chinese Medicine, Nanchang 330006, China 2. National Engineering Research Center for Manufacturing Technology of Chinese Medicine Solid Preparation, Nanchang 330006, China

To study the chemical constituents fromThe compounds were separated and purified by various methods such as silica gel, Sephadex LH-20, HP-20 macroporous resin adsorption, semi-preparative high-performance liquid phase, and the structure of the compounds were identified and analyzed by nuclear magnetic resonance spectrometry and mass spectrometry.A total of nineteen compounds were isolated from the n-butanol extraction site of 70% ethanol extract ofand identified as icariside D2(1), kaempferol-3--β--glucose-7--α--rhamnoside (2),-hydroxycinnamic acid (3), caffeic acid (4), quercetin-3--α--rhamnopyranosyl-7--β--glucopyranoside (5), 4-(β-glucopyranosyloxy)-benzaldehyde (6), 1---hydroxycinnamalyl monoglycerides (7), kaempferol-3--β--(2--β--apiofuranosyl)-glucopyranoside-7--α--rhamnopyranoside (8), chlorogenic acid (9),-caffeic acid (10), methyl--coumarate (11),-3--coumaroylquinic acid (12), methyl 5--coumarylquinic acid (13), 1-(3,4-dihydroxycinnamoyl)-cyclopenta-2,5-diol (14), quercetin-3--β--furano-celery-(1→2)-β--glucopyranos-7--α--rhamnopyranoside (15), quercetin-3--glucopyranoside (16), tamarixetin 3--β--glucoside-7--α--rhamnoside (17),-(3-((3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)tetrahydro-2-pyran-2-yl)oxy)propyl)cinnamamide (18),-dehydronantenine (19).Among them, compound 18 is a new compound, named embelia alkali glycoside, and compounds 1—3, 5—8, 11—15, 17 and 19 were isolated fromfor the first time.

(L.) Mez; icariside D2;-hydroxycinnamic acid; quercetin-3--α--rhamnopyranosyl-7--β--glucopyranoside;-dehydronantenine

R284.1

A

0253 - 2670(2024)09 - 2868 - 07

10.7501/j.issn.0253-2670.2024.09.002

2024-03-25

國家重點研發(fā)計劃課題（2019YFC1712302）；國家重點研發(fā)計劃課題（2019YFC1712304）；中央引導(dǎo)地方科技發(fā)展專項項目（20221ZDD02007）；江西中醫(yī)藥大學(xué)科技創(chuàng)新團隊（CXTD22001）

李婉亭（1999—），女，碩士研究生，從事中藥活性成分研究。E-email: 1556242497@qq.com

通信作者：馮育林，男，博士，教授，從事中藥藥效物質(zhì)及新藥研究。E-mail: fengyulin2003@126.com

何明珍，女，博士，副教授，從事中藥活性成分研究工作。E-mail: hmz07@163.com

[責(zé)任編輯 王文倩]