血清膽紅素聯(lián)合溶血三項(xiàng)試驗(yàn)在新生兒溶血病早期診斷中的應(yīng)用價(jià)值研究

周 林，林承祥，李 櫻，黃聘婷

（麻城市人民醫(yī)院輸血科，湖北 麻城 438300）

新生兒溶血?。℉DN）是指因母子血型不合，母體血型抗體和胎兒血型抗原不匹配，經(jīng)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒的抗體誘導(dǎo)胎兒或新生兒紅細(xì)胞破壞，從而引起的同族免疫性溶血疾病。常見(jiàn)類型有Rh 溶血和ABO 溶血，其中ABO 溶血約占85.3%[1]。HDN 患兒多為足月新生兒，常見(jiàn)臨床癥狀有黃疸、水腫、肝脾腫大及貧血等[2]，如不及時(shí)、有效地進(jìn)行診斷和治療，不僅會(huì)影響新生兒的神經(jīng)功能、免疫功能、腎功能及心肌細(xì)胞的發(fā)育，嚴(yán)重時(shí)還會(huì)誘發(fā)膽汁黏稠綜合征、新生兒膽紅素腦病，甚至導(dǎo)致循環(huán)、呼吸系統(tǒng)衰竭，危及新生兒生命[3]。HDN 非常容易引起新生兒高膽紅素血癥，早期及時(shí)診斷和治療對(duì)提高HDN 的治愈率及防止后遺癥出現(xiàn)具有重要意義。目前，溶血三項(xiàng)試驗(yàn)通常被臨床應(yīng)用于HDN 的檢測(cè)中，另外血清膽紅素也被視為HDN 的評(píng)價(jià)指標(biāo)[4]。為探究血清膽紅素和溶血三項(xiàng)試驗(yàn)在HDN 早期診斷中的應(yīng)用價(jià)值，本文特選取96 例母親為O 型血的HDN 患兒為研究對(duì)象，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2021 年11 月至2022 年10 月在我院出生的96例母親為O 型血的溶血病患兒，產(chǎn)婦血型均為O 型RhD陽(yáng)性血型?；純貉停築 型39 例，A 型57 例；患兒日齡3 h 至20 d，平均（6.3±1.8）d。患兒均出現(xiàn)黃疸、水腫、肝脾腫大、貧血等癥狀。其中，排除患先天性肝膽系統(tǒng)疾病患兒。醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)本研究，患兒家長(zhǎng)知情且均簽署知情同意書(shū)。

1.2 方法

（1）血清膽紅素檢測(cè)：取患兒3 mL 靜脈血，3000 r/min 轉(zhuǎn)速下離心，獲得血清后應(yīng)用全自動(dòng)生化分析儀（貝克曼，型號(hào)AU5800）測(cè)定血清膽紅素含量，血清總膽紅素正常參考范圍3.4 ～20.5 mmol/L。（2）溶血三項(xiàng)試驗(yàn)：包括直抗試驗(yàn)、游離試驗(yàn)、釋放試驗(yàn)。取患兒3 mL 靜脈血，應(yīng)用新生兒血型檢測(cè)卡、HDN 胎兒不完全抗體檢測(cè)卡進(jìn)行溶血三項(xiàng)試驗(yàn)，嚴(yán)格按照試劑要求進(jìn)行操作?；純阂罁?jù)HDN 診斷標(biāo)準(zhǔn)及溶血三項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果分為A、B、C、D四組，其中A組直抗和釋放試驗(yàn)（+）、游離試驗(yàn)（-），B 組三項(xiàng)試驗(yàn)均為（+），C 組游離和釋放試驗(yàn)（+）、直抗試驗(yàn)（-），D 組直抗試驗(yàn)（+）、游離和釋放試驗(yàn)（-）。（3）治療方法：以患兒具體情況為依據(jù)進(jìn)行對(duì)癥處理，包括藍(lán)光、換血、丙種球蛋白等治療。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察96 例HDN 患兒血型分布及不同血型患兒的溶血三項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果。比較四組HDN 患兒的溶血三項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果。對(duì)比四組HDN 患兒治療前后的膽紅素含量。分析膽紅素對(duì)HDN 的早期診斷價(jià)值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料用百分?jǐn)?shù)（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以±s表示，采用t/F檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 96 例HDN 患兒血型分布及不同血型患兒的溶血三項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果

96 例HDN 患兒中，直抗試驗(yàn)陽(yáng)性率A 型血患兒高于B 型血患兒，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.030）；釋放試驗(yàn)和游離試驗(yàn)在兩種血型患兒中的陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。詳見(jiàn)表1。

表1 96 例HDN 患兒血型分布及不同血型患兒的溶血三項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果[例（%）]

2.2 四組HDN 患兒溶血三項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果比較

96 例HDN 患兒直抗試驗(yàn)陽(yáng)性率為10.42%，釋放試驗(yàn)陽(yáng)性率為100.00%，游離試驗(yàn)陽(yáng)性率為62.50%。直抗試驗(yàn)和釋放試驗(yàn)同為陽(yáng)性者占比4.17%，直抗試驗(yàn)、釋放試驗(yàn)和游離試驗(yàn)均為陽(yáng)性者占比6.25%，釋放試驗(yàn)和游離試驗(yàn)同為陽(yáng)性者占比56.25%，僅釋放試驗(yàn)陽(yáng)性者占比33.33%。陽(yáng)性率比較C 組＞D 組＞B 組＞A 組，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見(jiàn)表2。

表2 四組HDN 患兒溶血三項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果比較[例（%）]

2.3 四組HDN 患兒治療前后膽紅素含量比較

治療前，四組HDN 患兒膽紅素含量顯著高于正常范圍，且組間比較差異不顯著（F=0.207，P=0.891）。治療后各組患兒的膽紅素水平均明顯下降，且與治療前比較差異顯著（P＜0.05）。詳見(jiàn)表3。

表3 四組HDN 患兒治療前后膽紅素含量比較（μmmol/L，±s）

表3 四組HDN 患兒治療前后膽紅素含量比較（μmmol/L，±s）

組別 例數(shù) 治療前 治療后 t 值 P 值A(chǔ) 組 4 269.4±79.21 161.3±31.24 2.539 ＜0.05 B 組 6 266.3±82.45 182.1±40.83 2.242 ＜0.05 C 組 54 252.4±87.64 185.1±48.36 4.941 ＜0.05 D 組 32 243.9±80.76 184.7±43.28 3.669 ＜0.05

2.4 膽紅素對(duì)HDN 的早期診斷價(jià)值分析

膽紅素預(yù)測(cè)HDN 陽(yáng)性的ROC 曲線下面積（AUC）為0.716，靈敏度為0.600，特異性為0.872，詳見(jiàn)圖1、表4。表明膽紅素可以作為HDN 的早期診斷指標(biāo)，但靈敏度略低，容易造成漏診。

圖1 膽紅素對(duì)新生兒溶血病早期診斷分析

表4 膽紅素對(duì)HDN 早期診斷價(jià)值的分析

3 討論

HDN 是臨床上一種危險(xiǎn)性較大的新生兒疾病，臨床主要表現(xiàn)為黃疸、貧血、血清膽紅素水平上升及水腫等。HDN 發(fā)生的主要原因是母親與胎兒之間ABO 血型或Rh血型不合[5]。其發(fā)病機(jī)理為，胎兒代表父母雙方的紅細(xì)胞抗原表型不一致，當(dāng)胎兒體內(nèi)代表父體紅細(xì)胞抗原的紅細(xì)胞經(jīng)臍帶進(jìn)入母體時(shí)，兩者相互融合產(chǎn)生相應(yīng)抗體，隨后抗體通過(guò)胎盤(pán)傳遞給胎兒，最終出現(xiàn)抗原抗體等一系列免疫反應(yīng)，發(fā)生溶血，嚴(yán)重威脅新生兒與母親的生命安全[6]。臨床研究數(shù)據(jù)顯示，HDN 在ABO 血型中的發(fā)生率要遠(yuǎn)高于Rh 血型[7]，且ABO 血型HDN 中以母親為O 型、新生兒為A、B 型為主，在ABO 血型引起的HDN 中大多數(shù)癥狀都較輕，有明顯溶血癥狀的患兒約占6%[8]。Rh 血型引起的HDN 多發(fā)生于多胎或多次輸血的孕產(chǎn)婦中，其發(fā)病率低，但大部分的溶血程度較嚴(yán)重。目前，臨床上診斷HDN 的最有效方法是溶血三項(xiàng)試驗(yàn)，包括直抗試驗(yàn)、釋放試驗(yàn)和游離試驗(yàn)，其中直抗、釋放試驗(yàn)的目的在于了解紅細(xì)胞上結(jié)合的血型抗體，二者能夠確診HDN；而游離試驗(yàn)?zāi)芊从承律鷥貉逯心阁w血型抗體水平，但不能作為診斷HDN 的依據(jù)[9]。

釋放試驗(yàn) 和游離試驗(yàn)是診斷新生兒HDN 的主要方式，胎兒血清中IgG 類抗體可采用游離試驗(yàn)檢測(cè)，IgG類抗體的檢測(cè)有利于HDN 的觀察和治療[10]。母體內(nèi)IgG抗體效價(jià)和抗體數(shù)量隨孕期的增加而增加，當(dāng)抗體數(shù)量超過(guò)母體自身抵抗范圍時(shí)，HDN 則容易被引發(fā)，此時(shí)IgG 經(jīng)由胎盤(pán)途徑進(jìn)入胎兒的血液循環(huán)系統(tǒng)。由本研究結(jié)果可知，游離試驗(yàn)的陽(yáng)性率為62.50%，提示游離試驗(yàn)的檢測(cè)敏感度稍差，這可能與母體IgG 進(jìn)入胎兒體內(nèi)量的多少有關(guān)。釋放試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性則提示母體IgG抗A、B 抗體使患兒紅細(xì)胞致敏。在本研究中，釋放試驗(yàn)的陽(yáng)性率為100.00%。對(duì)HDN 溶血三項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行組合分析，結(jié)果顯示釋放和游離試驗(yàn)均為陽(yáng)性的概率顯著高于其他組合，這表明在新生兒溶血的早期診斷中，溶血三項(xiàng)試驗(yàn)具有較高的價(jià)值。

直接膽紅素和間接膽紅素共同組成人體的血清總膽紅素，其是肝、脾等臟器及骨髓中的單核吞噬細(xì)胞吞噬紅細(xì)胞的產(chǎn)物[11]。研究表明，總膽紅素在HDN 診斷中也具有重要的參考價(jià)值。楊冬梅等[12]研究發(fā)現(xiàn)，在HDN 患兒體內(nèi)，短時(shí)間內(nèi)血清膽紅素水平能夠快速上升且顯著高于正常水平，這表明血清膽紅素在HDN的診斷中可作為關(guān)鍵性指標(biāo)。本研究中，治療前HDN患兒膽紅素含量顯著高于正常范圍，組間比較差異不顯著（F=0.207，P=0.891）。治療后各組患兒的膽紅素水平均明顯下降，且與治療前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。此外，在HDN 早期診斷中，血清膽紅素預(yù)測(cè)HDN 陽(yáng)性的AUC 為0.716，靈敏度為0.600，特異性為0.872，這表明以膽紅素對(duì)HDN 進(jìn)行早期診斷具有一定的價(jià)值。

綜上所述，血清膽紅素聯(lián)合溶血三項(xiàng)試驗(yàn)有助于HDN 的早期診斷。