野山杏研究進(jìn)展

衛(wèi)丁一，戴小華*，丁 昱，何子涵，黃 磊，劉浩然，何 瑩，依斯馬依力·吾拉依木，阿衣古麗·艾力

（1.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院，新疆烏魯木齊 830052；2.新疆草食動(dòng)物新藥研究與創(chuàng)制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新疆烏魯木齊 830052）

野山杏是一種重要的果樹，主要分布在喜馬拉雅山西北部的干燥溫帶地區(qū)[1]，巴基斯坦、俾路支地區(qū)和克什米爾因野山杏種植面積大而聞名[2]。另外，俄羅斯的西伯利亞，蒙古東部、東南部以及我國(guó)內(nèi)蒙古、遼寧、北京、山西、黑龍江、吉林、新疆等地區(qū)也有分布[3]。野山杏是薔薇科（Rosaceae）李屬（Prunus）落葉喬木，高6~10 m；樹冠圓形、扁圓形或長(zhǎng)圓形；樹皮灰褐色，縱裂；枝條堅(jiān)固、曲折，小枝無毛。多年生枝淺褐色，皮孔大而橫生，一年生枝淺紅褐色，有光澤，無毛，具多數(shù)小皮孔；葉片寬卵形或圓卵形，長(zhǎng)5~9 cm，寬4~8 cm，突尖，深綠色，無毛或具腋毛，均勻排列有圓形齒；莖長(zhǎng)達(dá)2.5 cm。野山杏不僅是一種優(yōu)良的水土保持經(jīng)濟(jì)植物，也是為嫁接仁用杏和優(yōu)質(zhì)肉用杏提供理想砧木的最佳選擇[4]。野山杏的杏仁有一定的毒素，使用時(shí)要進(jìn)行解毒處理[5]。國(guó)內(nèi)對(duì)野山杏的報(bào)道多集中在抗炎、鎮(zhèn)痛、調(diào)節(jié)血脂、抗氧化等藥效的研究方面；國(guó)外的研究則主要集中在杏仁的食用價(jià)值、工業(yè)用途及其分子構(gòu)象、基因型變異等方面。

1 野山杏的成分及功效

野山杏中含有豐富的氨基酸、膳食纖維[6]、黃酮類化合物[7]、有機(jī)酸[8]。由于野山杏果肉高酸和低糖，所以不適合食用[1]。野山杏所含藥用成分主要有膳食纖維、總有機(jī)酸、總黃酮、杏仁蛋白、杏仁油等；各成分發(fā)揮的藥理作用主要有抗炎、鎮(zhèn)痛、調(diào)節(jié)血脂、抗氧化等。

1.1 膳食纖維

膳食纖維通常根據(jù)其溶解性分為可溶性膳食纖維（SDF）和不溶解膳食纖維（IDF）。已有研究證實(shí)IDF 對(duì)炎癥綜合征和肥胖有一定的緩解作用。尼格爾熱依等[9]研究發(fā)現(xiàn)，野山杏果肉IDF 能夠顯著改善和調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)大鼠的血脂，這種作用與其對(duì)腸道菌群的調(diào)節(jié)和影響腸道代謝物中短鏈脂肪酸的含量有關(guān)。彭禛菲[10]研究表明，野山杏果肉中IDF 和SDF 均對(duì)腸道菌群體外生長(zhǎng)呈現(xiàn)出良好的作用效果，有益于腸道菌群發(fā)揮其調(diào)節(jié)免疫和代謝等作用，其中IDF 發(fā)揮的作用更突出。阿依姑麗等[11]研究還發(fā)現(xiàn)野山杏IDF 對(duì)高脂血癥大鼠血脂代謝和肝臟保護(hù)有顯著影響，可明顯地降低血脂并保護(hù)肝臟，其效果呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系。

1.2 總有機(jī)酸

有機(jī)酸是指一些具有酸性的有機(jī)化合物，廣泛分布于植物的葉、根，特別是果實(shí)中。李珊等[8]發(fā)現(xiàn)，野山杏果肉總有機(jī)酸（TOAWA）成分中草酸、酒石酸、乙酸、富馬酸的含量相對(duì)較低，而奎寧酸、蘋果酸、檸檬酸的含量較高，其中檸檬酸和奎寧酸是導(dǎo)致野山杏果肉呈酸澀口感的主要原因。野山杏果肉TOAWA 的報(bào)道多見于對(duì)抗氧化能力和血脂水平影響的研究。阿依姑麗等[12]發(fā)現(xiàn)，野山杏TOAWA 對(duì)超氧陰離子自由基（DPPH）有較好的清除作用，當(dāng)質(zhì)量濃度為2、4、8 mg/mL 時(shí)，清除率均高于49%；在質(zhì)量濃度為8 mg/mL 時(shí)，清除率達(dá)到97%。阿依姑麗等[13]還研究了野山杏TOAWA 對(duì)卵黃脂蛋白過不飽和脂肪酸（PUFA）對(duì)過氧化體系中脂質(zhì)過氧化活性和小鼠脂質(zhì)過氧化活性的影響，發(fā)現(xiàn)野山杏TOAWA 顯示了較強(qiáng)的體外抗脂質(zhì)過氧化活性。有報(bào)道稱[14-16]，野山杏果肉TOAWA 通過調(diào)節(jié)血清載脂蛋白（Apo）質(zhì)量濃度、提高肝臟過氧化物酶體增殖物激活受體α（PPAR-α）和低密度脂蛋白受體（LDL-R）基因表達(dá)量以及改善肝臟功能來實(shí)現(xiàn)調(diào)節(jié)血脂水平、提高抗氧化活性、保肝等作用。李珊等[17]發(fā)現(xiàn)，野山杏TOAWA 可能通過提升高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）濃度和機(jī)體抗氧化酶類活性、降低血清中血脂水平從而降血脂并保護(hù)機(jī)體細(xì)胞不被自由基損傷。

1.3 總黃酮

黃酮類化合物是一類廣泛存在于蔬菜水果、中草藥、豆類及豆制品的多酚類代謝產(chǎn)物，目前已發(fā)現(xiàn)黃酮類化合物多達(dá)9 000 余種。植物黃酮具有抗氧化、抗菌、抗病毒以及抗腫瘤等生物活性功能[18]。Dulf 等[19]研究表明，野山杏經(jīng)過固體發(fā)酵后的甲醇提取物具有清除自由基的能力，經(jīng)測(cè)定蘆丁和槲皮素為該發(fā)酵產(chǎn)物的主要黃酮類物質(zhì)。郭元印等[20]發(fā)現(xiàn)，不同劑量的野山杏總黃酮可顯著改善三黃肉雞的屠宰性能，包括宰前體重、屠體重、半凈膛重、全凈膛重、皮下脂肪厚度、肌間脂肪寬度、腹脂重、胸肌重、腿肌重。谷虹霏等[21]發(fā)現(xiàn)，野山杏總黃酮在使用醋酸扭體法、熱板致痛法、溫浴甩尾法建立的小鼠疼痛模型當(dāng)中，均有明顯的鎮(zhèn)痛作用。阿依姑麗等[22]通過研究野山杏總黃酮對(duì)高血脂大鼠的降血脂作用和抑制肝臟脂質(zhì)過氧化的能力，發(fā)現(xiàn)野山杏總黃酮可降低高血脂大鼠的血脂，減少肝臟損傷，抑制肝臟脂質(zhì)過氧化過程，并且具有劑量依賴性。束佳敏[23]通過建立脂多糖（LPS）誘導(dǎo)三黃雞雛雞炎癥模型，對(duì)比不同劑量野山杏總黃酮對(duì)雛雞抗炎效果以及對(duì)宿主腸道菌群的影響，發(fā)現(xiàn)野山杏總黃酮具有良好的抗炎效果并可改善雛雞腸道菌群的結(jié)構(gòu)和功能。

1.4 杏仁蛋白

杏仁蛋白質(zhì)中氨基酸含量豐富，苦杏仁中蛋白質(zhì)含量為19.6%~25.7%[24]。Beenu 等[25]研究證明，野山杏杏仁經(jīng)過脫毒處理后減少了其中的抗?fàn)I養(yǎng)素，顯著提高了營(yíng)養(yǎng)質(zhì)量，因此脫毒的杏仁粉可以作為一種優(yōu)質(zhì)且經(jīng)濟(jì)的蛋白質(zhì)補(bǔ)充品用于制作高附加值的杏仁蛋白產(chǎn)品。蔣麗等[26]通過測(cè)定衰老小鼠血清、肝組織以及腦組織勻漿中的總超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性和丙二醛（MDA）含量，研究野山杏多肽各劑量組對(duì)衰老模型小鼠的體內(nèi)抗氧化作用，發(fā)現(xiàn)野山杏杏仁多肽對(duì)衰老小鼠具有良好的體內(nèi)抗氧化作用。田絲雨等[27]分析比較不同濃度野山杏杏仁多肽對(duì)自由基的清除能力，發(fā)現(xiàn)野山杏杏仁多肽表現(xiàn)出良好的清除自由基的能力，尤其是在清除DPPH 自由基方面，其清除率高達(dá)75.48%，展現(xiàn)了野山杏杏仁多肽較強(qiáng)的抗氧化能力。

1.5 杏仁油

杏仁出油率高達(dá)45.8%，是食品工業(yè)、化妝品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)的主要原料[28]。野山杏杏仁油作為一種綠色能源，也是新型而高效的生物柴油潛在來源[29]。生物柴油和傳統(tǒng)柴油相比，生物柴油具有包括十六烷值高、無毒、可生物降解、高閃點(diǎn)、低溫下發(fā)動(dòng)機(jī)啟動(dòng)性能良好等多種優(yōu)勢(shì)。Ashok 等[30]使用單級(jí)堿催化酯交換法將野山杏杏仁生產(chǎn)為山杏甲酯（PAME），作為化石燃料的替代品用于柴油發(fā)動(dòng)機(jī)，并且無需對(duì)發(fā)動(dòng)機(jī)進(jìn)行任何重大修改。Nabi 等[31]測(cè)得野山杏杏仁的含油率為38%~55.3%，油酸是其中的關(guān)鍵脂肪酸，占比60.01%~70.56%。Etminan 等[32]研究發(fā)現(xiàn)，野山杏杏仁油制備的納米乳可以抑制A549 癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖，減少癌細(xì)胞誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，并減少對(duì)血管生成的影響，故有可能用于癌癥治療。郝文杰[33]發(fā)現(xiàn)，野山杏杏仁油清除DPPH 自由基、羥自由基、超氧自由基和還原力均具有劑量依賴性，并且隨濃度的增加，清除自由基能力隨之增強(qiáng)。姚健等[34]發(fā)現(xiàn)，高中低劑量的野山杏杏仁油均對(duì)高血脂大鼠模型具有輔助降血脂的作用。

2 野山杏有效成分的提取純化和測(cè)定

野山杏各類成分的提取方式多樣，一般采用酶處理、酸堿處理等方式；純化工藝主要是大孔樹脂吸附法；測(cè)定方法多使用高效液相色譜法（HPLC）。

2.1 膳食纖維

野山杏果肉膳食纖維的主要提取方法包括酸處理法、堿處理法以及酸堿共處理法。張繼等[35]采用堿處理法，堿溶液用量11 mL/g 果肉，處理溫度30℃，處理時(shí)間60 min，獲得的膳食纖維的純度為82.60%，溶脹性為8 mL/g。阿依姑麗[36]用4 種方法對(duì)野山杏果肉膳食纖維進(jìn)行了提取，其中酸堿共處理法相比單用酸或單用堿提取的膳食纖維得率稍低，但純度較高，質(zhì)量較好，酶法處理后的膳食纖維較化學(xué)法提取的膳食纖維品質(zhì)更高。

2.2 總有機(jī)酸

有機(jī)酸的傳統(tǒng)提取方式主要有回流提取法、水蒸氣蒸餾法、連續(xù)回流滲漉法，隨著科技的進(jìn)步和學(xué)科之間的交互發(fā)展，一些新的提取方式逐漸被廣泛應(yīng)用，如超聲提取技術(shù)、超臨界流體萃取技術(shù)、微波輔助提取法等。李珊[37]對(duì)野山杏果肉TOAWA 提取工藝進(jìn)行研究，得出最佳提取工藝是采用50%~60%的乙醇超聲提取，具體操作方式為使用50%乙醇，進(jìn)行2 次1∶10 的回流提取，濃縮回收乙醇；使用717 型交換樹脂，洗脫得到洗脫液并濃縮，用正丁醇萃取得到正丁醇相并回收，最終干燥得到TOAWA 純品。有機(jī)酸的測(cè)定方式主要有酸堿滴定法、毛細(xì)管電泳法、高效液相色譜法，其中以高效液相色譜法最為普遍。在野山杏TOAWA 的測(cè)定中，Hasib 等[38]使用高效液相色譜法測(cè)定山杏中有機(jī)酸的含量，主要的有機(jī)酸是檸檬酸，其次是半乳糖醛酸、蘋果酸、奎寧酸和酒石酸，草酸、莽草酸和富馬酸則含量較少；李珊等[8]測(cè)定了野山杏中10 種有機(jī)酸的含量，奎寧酸、蘋果酸、檸檬酸含量偏高，草酸、酒石酸、乙酸、富馬酸含量較低。

2.3 總黃酮

黃酮類化合物的提取和純化技術(shù)主要包括溶劑萃取法、大孔樹脂吸附法和離心分離法等。金科旭等[39]采用D101 大孔吸附樹脂對(duì)野山杏總黃酮進(jìn)行了分離，其最佳分離純化工藝是：D-101 大孔樹脂直徑高比為1∶6，野山杏粗提液最大加樣量為6.3 BV，最佳加樣濃度0.3 mg/mL，加樣速率為1.0 mL/min，靜置時(shí)間為2 h，水洗體積為5 BV，水洗液洗脫流速為1.5 mL/min，洗脫溶劑為80%乙醇，洗脫溶劑用量為2 BV，洗脫劑流速為0.5 mL/min。

2.4 杏仁蛋白

常用的植物蛋白提取方式包括：堿溶酸沉法、酶解法、反膠束法、鹽溶提取法、膜分離法等。溫程程[40]采用超聲波輔助堿溶酸沉法提取杏仁蛋白的最佳的工藝條件為pH 8.7、料液比為1.5 g/mL、超聲提取時(shí)間是46 min、超聲溫度33℃，產(chǎn)率為85.80%。李大文[41]用超聲波輔助鹽溶法對(duì)杏仁蛋白的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，優(yōu)化后的最佳工藝為NaCl 濃度3%、料液比50∶1 g/mL、超聲時(shí)間30 min、溫度50℃、固定在超聲波功率400 W，提取次數(shù)為2 次，所得產(chǎn)率為79.60%。

2.5 杏仁多肽

生物活性肽的制備方式主要是酶解法、微生物發(fā)酵法、化學(xué)合成法、化學(xué)水解法、基因重組法等。部分學(xué)者[42-44]已經(jīng)對(duì)杏仁多肽的酶解工藝進(jìn)行了探索，而蔣麗等[26]用酶解法獲得的杏仁多肽水解度最高，該法提取野山杏杏仁多肽的最佳工藝為：酶底物比為4%，酶解時(shí)間120 min，pH 8，酶解溫度為65℃。用酶解法提取生物活性肽所含雜質(zhì)較多，還可以通過膜分離法、大孔樹脂吸附法、色譜法、毛細(xì)管電泳法進(jìn)一步純化[45]。

2.6 杏仁油的提取

杏仁油的提取方法主要有冷榨法、熱榨法、有機(jī)溶劑浸提法、超臨界CO2萃取法和超聲波提取法等。趙云霞[46]和郝文杰[33]均采用冷榨法對(duì)杏仁油進(jìn)行了提取，但后者提取得率較高。有機(jī)溶劑浸提法中，有文獻(xiàn)[47]報(bào)道，乙醇水劑法提取野山杏杏仁油的最佳提取工藝是：乙醇濃度18%，料液比1∶7 g/mL，溫度34℃，攪拌轉(zhuǎn)速120 r/min，提取時(shí)間120 min；在此條件下，油脂提取率為28.34%，亞油酸和油酸含量分別為23.72%、66.47%。王巨成[48]、范翠麗等[49]均采用超臨界CO2萃取法提取了杏仁油，但產(chǎn)率不超過50%，而郝文杰[33]用相同方法提取了野山杏杏仁油，其得率可以達(dá)到81.57%。

3 野山杏種植工藝

3.1 生長(zhǎng)特性

野山杏具有較強(qiáng)的保水能力[50]，喜光照、高溫，耐旱、耐寒，很適宜在缺水、土層較薄的荒坡地帶種植，對(duì)土壤要求不高，屬暖溫帶樹種[51]。

3.2 花期

花期是當(dāng)花的各部分發(fā)育成熟時(shí)，從花朵開放，雌、雄蕊從花被中暴露出來，至完成傳粉和受精作用，花朵凋謝的一段時(shí)期。野山杏一般在每年秋季10 月底播種，花芽一般在翌年3 月下旬開始萌動(dòng)，4 月上旬或中旬進(jìn)入初花期，始花至落花持續(xù)時(shí)間6~9 d，整個(gè)過程需26~31 d[52]。

3.3 種植工藝

野山杏秋季播種造林時(shí)間應(yīng)安排在入冬封凍之前。播種前，種子用殺蟲劑及殺菌劑消毒，一般用敵殺死、甲拌磷（3911）和甲基硫菌靈拌種，1 kg 藥劑可拌150~200 kg種子，播種后，造林地要撒防鼠害藥劑，以保證出苗率[53]。據(jù)張?chǎng)蝃52]研究，不同濃度多效唑（PP333）、矮壯素（CCC）處理均可顯著提高野山杏果實(shí)可溶性固形物含量，不同濃度果樹促控劑（PBO）和摘心處理均能使野山杏果實(shí)平均單果重較不進(jìn)行處理組明顯增加。在培育選種時(shí)，還原糖、樹干周長(zhǎng)、樹種空間多樣性、果重、果核寬度、非還原糖、葉面積、果核重量、果核長(zhǎng)度和糖酸比等幾個(gè)性狀和最終果實(shí)產(chǎn)量呈正相關(guān)關(guān)系[54]，可以將這些性狀作為野山杏品種改良的選擇指標(biāo)。

4 展望

綜上所述，野山杏的有效成分有膳食纖維、總有機(jī)酸、總黃酮和杏仁中的杏仁蛋白、杏仁油，其藥效主要體現(xiàn)在抗炎、降血脂、調(diào)節(jié)腸道菌群、保肝、抗氧化、改善肉雞屠宰性能、鎮(zhèn)痛、抗癌等方面。野山杏成分的提取方法主要有化學(xué)提取法、酶解法、超聲波輔助提取法、冷榨法、有機(jī)溶劑浸提法、超臨界CO2萃取法；一般采用大孔樹脂吸附法對(duì)有效成分進(jìn)行分離純化；常用HPLC 對(duì)野山杏成分進(jìn)行測(cè)定。國(guó)內(nèi)外缺少使用高新科技、附加值較高的綠色野山杏加工產(chǎn)品，推測(cè)其原因可能是野山杏食用、藥用相關(guān)研究欠缺，對(duì)其生理功效的報(bào)道主要局限在國(guó)內(nèi)研究，野山杏成分發(fā)揮功效的機(jī)制和同一成分對(duì)不同種屬動(dòng)物之間藥效的區(qū)別還有待進(jìn)一步探究。野山杏種植技術(shù)的報(bào)道仍局限在十幾年以前，近年來少有對(duì)種植技術(shù)改良和培育新品種的研究，野山杏的優(yōu)良性狀選擇培育仍有開發(fā)的潛力。新疆哈密葦子峽有不少85 歲以上的老人身體非常健康，該地區(qū)的人們也很少患肺結(jié)核病，這可能與長(zhǎng)期食用野山杏有關(guān)。野山杏作為新疆特色林果業(yè)資源之一，對(duì)帶動(dòng)地方經(jīng)濟(jì)的發(fā)展具有十分重要的意義，故可在探明新疆野山杏果實(shí)有效成分藥用機(jī)制的基礎(chǔ)上對(duì)野山杏相關(guān)食用、藥用產(chǎn)品進(jìn)行開發(fā)。