益心健腦膏方的制備工藝研究 *

宣志紅 李小芳 宣碧霞 梁衛(wèi)青 浦錦寶

（1.諸暨市中醫(yī)醫(yī)院中藥房，浙江 諸暨 311800；2.浙江省中醫(yī)藥研究院藥用資源研究中心，浙江 杭州 310007）

心腦血管疾?。–VD）是包括冠狀動脈粥樣硬化性心臟?。–HD）、腦血管病、外周動脈疾病和心力衰竭在內(nèi)的一類疾病，具有高患病率、高致殘率和高病死率的特點［1］。近年來心腦血管疾病在我國居民死亡原因中始終位列第一，其發(fā)病率逐年遞增，且愈加年輕化。研究［2］顯示，2005 年我國死于心腦血管疾病的居民為309.11 萬，2010 年為347.93 萬，2015 年為384.33 萬；2020年則增加至457.66萬；與2005相比，總病死率增加了48.06%?！吨袊难芙】蹬c疾病報告2021：英文版》［3］數(shù)據(jù)顯示，目前心血管病現(xiàn)患人數(shù)約3.3億，其中腦卒中1300萬、冠狀動脈粥樣硬化性心臟病1139萬、心力衰竭890萬、肺源性心臟病500萬、房顫487萬、風(fēng)濕性心臟病250萬、下肢動脈疾病4530萬、高血壓病2.45億?！吨袊星嗄晷哪X血管健康白皮書》顯示，20歲～39歲的患病/高風(fēng)險人群占比為44.3%，其中20～29歲的患病/高風(fēng)險人群占比已經(jīng)達到15.3%，且患病/高風(fēng)險的中青年治療狀況并不理想，心腦血管疾病風(fēng)險正在逼近年輕人［4］。Moran A等［5］預(yù)計2010年—2030年，我國人群中心肌梗死和腦卒中等心血管事件的發(fā)生還將迅猛上升，其所占比重在所有慢性病負擔(dān)中將超過50%。心腦血管疾病無疑會成為實現(xiàn)《“健康中國2030”規(guī)劃綱要》目標(biāo)的主要障礙。

益心健腦膏方來源于諸暨市中醫(yī)醫(yī)院名老中醫(yī)的經(jīng)驗方，臨床使用多年，本方以黃芪生脈飲合四物湯為基礎(chǔ)方，全方由黨參、川芎、丹參、麥冬、五味子、黃芪、當(dāng)歸、白芍、熟地黃、靈芝、石菖蒲、益智仁、陳皮、炙甘草、大棗等藥組成，方中黨參健脾益肺、養(yǎng)血生津，川芎活血止痛、燥濕開郁，丹參活血祛瘀、通絡(luò)止痛，麥冬養(yǎng)陰生津、潤肺清心，五味子收斂固澀、益氣生津、補腎寧心，黃芪補氣固表、扶正固本，當(dāng)歸補血活血、調(diào)經(jīng)止痛、潤腸通便，白芍養(yǎng)血調(diào)經(jīng)、斂陰止汗、柔肝止痛、平抑肝陽，熟地黃補血滋陰、益精填髓，靈芝補氣安神、止咳平喘，石菖蒲開竅豁痰、醒神益智、化濕開胃，益智仁暖腎固精縮尿、溫脾止瀉攝唾，陳皮行氣健脾，炙甘草補脾和中、調(diào)和諸藥，大棗補中益氣、養(yǎng)血安神。本方具有益氣養(yǎng)陰、養(yǎng)血活血、益心健腦的作用，經(jīng)臨床實踐證實，對多種心腦血管病證有較好的治療效果［6，7］。

膏方屬于中華傳統(tǒng)八大藥劑之一，以其“陰平陽秘，以衡為補”的理論，兼具補虛和治病兩大特點，廣泛應(yīng)用于老年人群，市場前景廣泛［8］。膏方是將中藥處方藥材加水煎煮、濃縮，再加輔料制成的半流體制劑，用于預(yù)防和治療疾病，臨床療效顯著。然而膏方的制作工藝良莠不齊，其成分控制的缺失嚴重影響了膏方質(zhì)量的客觀評價［9］。而原料藥種類、浸泡、煎煮工藝也是影響膏方質(zhì)量的重要因素［10］。通過分析諸暨市中醫(yī)醫(yī)院數(shù)十年加工膏方的經(jīng)驗，我們發(fā)現(xiàn)一些共性指標(biāo)可作為膏方成分質(zhì)控的評價依據(jù)，如得膏率、相對密度、含水量等。而建立膏方成分指標(biāo)含量檢測方法，使膏方生產(chǎn)工藝更有據(jù)可依，可進一步提高膏方制備工藝的科學(xué)合理性，同時使膏方質(zhì)量更加穩(wěn)定可控。

1 儀器與材料

高效液相色譜儀（1260，Agilent）；電子天平（BP211D，Sartorius）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（R-210，BUCHI）；粘度計（NDJ-1，上海精密科學(xué)儀器有限公司）；電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（DHG-9240A型，上海一恒科學(xué)儀器有限公司）；超聲波清洗器（KQ3200DB，昆山超聲波儀器有限公司）；超純水儀（611UV，Sartorius）。

所用藥材飲片黨參、川芎、丹參、麥冬、五味子、黃芪、當(dāng)歸、白芍、熟地黃、靈芝、石菖蒲、益智仁均購自浙江省諸暨市天壽中藥材有限公司，各味中藥飲片均符合2020年版《中華人民共和國藥典：一部》［7］項下規(guī)定。阿魏酸（批號：110773-201915）購自中國食品藥品檢定研究院。甲醇為色譜純（Merck），水為自制超純水，磷酸、乙酸乙酯均為分析純（杭州高晶精細化工有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 益心健腦膏方處方組成黨參250 g，川芎150 g，丹參180 g，麥冬200 g，五味子90 g，黃芪250 g，當(dāng)歸200 g，白芍250 g，熟地黃300 g，靈芝250 g，石菖蒲150 g，益智仁150 g。

2.2 工藝路線設(shè)計膏方制作過程：如根據(jù)處方中藥材的性質(zhì)，確定本品工藝路線：將黨參、川芎、丹參等藥材加水煎煮并濃縮為稠膏，加入阿膠，收膏，包裝即得益心健腦膏方。

2.3 提取工藝優(yōu)化采用正交實驗設(shè)計對水提取工藝進行優(yōu)化，其中加水倍數(shù)（A）、提取時間（B）、提取次數(shù)（C）是對提取效果影響較大的因素，故本實驗針對這3個因素進行考察，采用L9（34）正交實驗進行實驗，每個實驗設(shè)3 水平。見表1。按正交實驗設(shè)計表進行提取，濾過，合并提取液，濃縮并定容至400 mL。

表1 正交實驗因素水平

2.4 評價指標(biāo)的測定

2.4.1 阿魏酸的含量測定方中川芎和當(dāng)歸的主要有效成分為阿魏酸，具有消炎止痛之功效。

2.4.1.1 色譜條件色譜柱為YMC C18柱（250 mm×46 mm，5 μm），流動相：甲醇-0.5%磷酸（38∶62）為流動相，檢測波長320 nm，流速1.0 mL/min，柱溫：35 ℃。色譜圖見圖1。

圖1 阿魏酸對照品溶液（A）和供試品溶液（B）色譜圖

2.4.1.2 對照品溶液的制備取阿魏酸對照品適量，加甲醇制成36 μg/mL的溶液，搖勻，即得。

2.4.1.3 供試品溶液的制備取2.3 項下各提取液適量，12 000 r/min 離心10 min（離心半徑6 cm），上清液作為供試品溶液。

2.4.1.4 測定精細吸取對照品溶液10 μL 和供試品溶液5～10 μL，注入液相色譜儀，進樣檢測，以峰面積計算阿魏酸含量。見表2。

表2 L9（34）正交實驗設(shè)計與結(jié)果

2.4.2 干膏得率測定取各提取液20 mL，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，水浴揮干后，于105 ℃干燥5 h，取出，置干燥器中冷卻30 min，稱重，計算干膏得率。結(jié)果見表2。干膏得率（%）=干膏質(zhì)量/飲片總質(zhì)量×100%。

2.5 正交實驗結(jié)果干膏得率雖是提取效率的重要參數(shù)，但與其藥效強度不構(gòu)成量效關(guān)系，故權(quán)重設(shè)定為0.4，阿魏酸含量作為水提取工藝篩選的主要指標(biāo)，設(shè)定權(quán)重為0.6。

以阿魏酸含量和出膏率為評價指標(biāo)，進行加權(quán)評分， 公式如下：正交實驗結(jié)果見表2，方差分析結(jié)果見表3。

表3 方差分析

結(jié)果表明，加水量、提取次數(shù)、提取時間均無顯著性差異，影響因素分別是加水量＞提取次數(shù)＞提取時間。直觀分析，加水量為8 倍量、提取次數(shù)為3 次、提取時間為60 min時提取效率最佳。

2.6 驗證實驗稱取3 份處方量藥材，按照上述篩選的最優(yōu)提取工藝條件進行3 次平行驗證實驗，結(jié)果見表4。驗證實驗結(jié)果表明，3 次平行實驗所得干膏率、阿魏酸含量相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）值分別為1.49%和1.86%，說明該水提取工藝穩(wěn)定可行。

表4 驗證實驗結(jié)果

2.7 收膏工藝考察

2.7.1 收膏工藝按優(yōu)選的提取工藝提取、過濾，得到提取液，加熱濃縮，待藥液轉(zhuǎn)濃稠時，改用小火加熱，不斷攪拌，避免焦糊，并加入8%～10%經(jīng)粉碎后的阿膠，邊加邊攪拌，取適量檢測相對密度，濃縮至相對密度1.38～1.40（80 ℃測定），停止加熱，收膏完成。

2.7.2 相對密度測定取適量2.7.1 項下得到的成品膏，精密稱定，加入2倍量超純水，攪勻稀釋，作為供試液，按2020 年版《中華人民共和國國藥典：四部》［11］相對密度測定法項下比重瓶法進行測定，計算相對密度。結(jié)果見表5。

表5 收膏工藝考察結(jié)果

2.7.3 得膏率測定將冷至室溫的成品膏稱重，按下式計算相應(yīng)得膏率，得膏率=成品膏質(zhì)量/膏方飲片總質(zhì)量×100%。見表5。

2.7.4 含水量測定取5 g 成品膏置稱量瓶內(nèi)，精密稱定，置恒溫干燥箱內(nèi)105 ℃干燥至恒重，蓋上瓶蓋。移至干燥器中，冷卻至室溫后精密稱定質(zhì)量。按下式計算其含水量：膏方含水量=（烘干前質(zhì)量-烘干后質(zhì)量）/烘干前質(zhì)量×100%。見表5。

2.7.5 動力黏度測定在膏方即將出鍋時（≥85 ℃），用旋轉(zhuǎn)式粘度計進行測定。具體方法：選擇4 號轉(zhuǎn)子浸入成品膏中，選擇轉(zhuǎn)速為60 r/min 時直接讀出膏方的動力黏度值。見表5。

2.7.6 實驗結(jié)果分析隨著膏方相對密度的增大，膏方的得膏率和含水量均降低，黏度增大。當(dāng)膏方相對密度為1.36 時，膏方的含水量較大，成品膏方較稀；當(dāng)膏方相對密度為1.45 時，膏方開始出現(xiàn)焦煳味。因此膏方相對密度應(yīng)該控制在1.38～1.42為宜。

3 討論

3.1 膏方提取工藝考察指標(biāo)的選擇阿魏酸是當(dāng)歸、川芎等中藥材水溶性提取物中的主要單體活性成分之一，具有明確的藥理活性，故以阿魏酸含量作為膏方提取工藝的質(zhì)控指標(biāo)［7］。采用高效液相色譜法對阿魏酸含量進行測定，該方法準(zhǔn)確、可靠［12］，為益心健腦膏方的質(zhì)量控制提供了科學(xué)的評價方法。

3.2 膏方質(zhì)量的判斷膏方的外觀質(zhì)量一般通過眼看、鼻聞進行直接判斷，大多數(shù)的醫(yī)療機構(gòu)對成品膏方的質(zhì)量控制也主要是從外觀性狀來判斷。收膏過程中往往通過觀察“掛旗”“滴水成珠”“牛眼泡”等現(xiàn)象來判斷收膏最佳時機，雖不失為一種快速、簡單的方法，但僅憑主觀意識和經(jīng)驗操作，缺乏重復(fù)性和標(biāo)準(zhǔn)性［12，13］。本研究通過膏方相對密度、出膏率、膏方含水量、膏方動力黏度等多指標(biāo)設(shè)計實驗，綜合評價益心健腦膏方成型性，保障膏方質(zhì)量穩(wěn)定性和均一性。

3.3 膏方的應(yīng)用前景膏方并非單純補劑，有治病糾偏、固本清源、調(diào)節(jié)臟腑氣血陰陽的功能，而且在干預(yù)多種慢性和復(fù)雜性疾病方面有著獨特優(yōu)勢［14-16］。目前膏方應(yīng)用廣泛，市場前景較好，受廣大患者的青睞，而在膏方未來的發(fā)展中，其質(zhì)量評價體系的構(gòu)建勢必也會越來越完善［17］。