趨化因子在不同分期糖尿病性視網(wǎng)膜病變患者中的表達(dá)水平及臨床意義

郭亞楠 王麗暉 丁文萃 常愛玲 魏靜 李新勝 錢紅霞

糖尿病性視網(wǎng)膜病變(DR)是糖尿病引起的慢性眼部疾病,可分為非增生型DR與增生型DR兩種,其中非增生型DR隨時(shí)間可進(jìn)展成增生型DR,而增生型DR會(huì)嚴(yán)重?fù)p害患者視力,增加失明風(fēng)險(xiǎn)[1-2]。因此,分析與DR患者病情有關(guān)的指標(biāo),有利于客觀地評(píng)估患者病情的嚴(yán)重程度,為增生型DR的診斷治療提供參考。趨化素(Chemerin)屬于脂肪細(xì)胞因子,可與其他炎性因子相互促進(jìn),引起局部炎癥的級(jí)聯(lián)反應(yīng),加重炎性損傷,進(jìn)而促進(jìn)DR的進(jìn)展,且Chemerin還與肥胖、胰島素抵抗有關(guān),可影響機(jī)體糖代謝,從而加重DR病情[3]。趨化因子樣受體1(CMKLR-1)為Chemerin的天然受體,可與Chemerin結(jié)合發(fā)揮趨化作用,且研究發(fā)現(xiàn),趨化因子參與新生血管形成,并引發(fā)血管纖維化,而DR的發(fā)生與視網(wǎng)膜毛細(xì)血管基底膜增厚、微循環(huán)障礙等有關(guān)[4]。目前關(guān)于趨化因子與DR關(guān)系的相關(guān)研究較少。鑒于此,本研究對(duì)趨化因子CMKLR-1、Chemerin在不同病情程度DR患者中的表達(dá)水平進(jìn)行分析,以期為DR的病情評(píng)估、治療方案制定提供可靠依據(jù)。

對(duì)象與方法

1.對(duì)象:選取2019年4月～2021年12月我院收治的DR患者120例,其中男78例、女42例,年齡50～72歲,平均年齡(61.70±6.47)歲。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)均符合《我國糖尿病視網(wǎng)膜病變臨床診療指南(2014)年》[5]及《糖尿病視網(wǎng)膜病變防治專家共識(shí)》[6]中DR的診斷標(biāo)準(zhǔn);(2)2型糖尿病。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)嚴(yán)重肝腎功能不全或心腦血管疾病;(2)炎癥性疾病;(3)合并先天性免疫系統(tǒng)缺陷,或近2個(gè)月內(nèi)接受過免疫抑制劑治療;(4)合并青光眼、白內(nèi)障等其他眼部疾病;(5)DR分期為Ⅵ期,且出現(xiàn)牽拉性視網(wǎng)膜脫離失明。按照DR不同分期將所有患者分為DR Ⅰ期組(11例)、DR Ⅱ期組(21例)、DR Ⅲ期組(28例)、DR Ⅳ期組(35例)及DR Ⅴ組(25例)。DR Ⅰ～Ⅲ期為非增生型DR,DR Ⅳ～Ⅴ期為增生型DR。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn),所有患者均簽署知情同意書。

2.方法

(1)基線資料收集:包括年齡、性別、BMI、糖尿病病程、收縮壓、舒張壓、糖尿病家族史、治療方式(口服藥物、胰島素注射)。

(2)實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)收集:①生化指標(biāo):入院當(dāng)日或次日采集患者空腹周靜脈血10 ml,使用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定空腹血糖(FPG)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、ALT、AST、血肌酐(SCr)水平;使用蛋白酶法測(cè)定糖化血紅蛋白(HbA1c),使用凝血分析儀測(cè)定纖維蛋白原(FIB)水平。采集餐后2 h血液,使用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定餐后2 h血糖(2h PG)。②細(xì)胞因子:采用酶聯(lián)免疫分析儀測(cè)定腫瘤壞死因子(TNF)-α、IL-1β、IL-6、核轉(zhuǎn)錄因子(NF)-κB、CMKLR-1、Chemerin水平。

結(jié) 果

1.5組患者基線資料比較:5組患者收縮壓比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,其中DR Ⅳ期組及Ⅴ期組患者收縮壓均高于DR Ⅰ期組、Ⅱ期組及Ⅲ期組(P<0.05)。5組患者其余資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 5組患者基線資料比較

2.5組患者實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)比較:5組患者TNF-α、IL-1β、IL-6、NF-κB、CMKLR-1及Chemerin水平比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,其中DR Ⅳ期組及Ⅴ期組患者TNF-α、IL-1β、IL-6、NF-κB、CMKLR-1、Chemerin水平均高于DR Ⅰ期組、Ⅱ期組及Ⅲ期組,DR Ⅱ期組及Ⅲ期組患者Chemerin水平均高于DR Ⅰ期組(P<0.05)。

5組患者其余指標(biāo)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 5組患者實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)比較

3.DR患者病情的影響因素分析:將DR分期作為因變量(1=Ⅰ期,2=Ⅱ期,3=Ⅲ期,4=Ⅳ期,5=Ⅴ期),將收縮壓、TNF-α、IL-1β、IL-6、NF-κB、CMKLR-1、Chemerin水平作為自變量(均為連續(xù)變量),logistic回歸分析結(jié)果顯示,收縮壓高、TNF-α、IL-1β、IL-6、NF-κB、CMKLR-1、Chemerin水平高均是影響DR患者病情的危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見表3。

表3 DR患者病情影響因素的logistic回歸分析

4.收縮壓、炎性因子及趨化因子CMKLR-1、Chemerin對(duì)DR病情的評(píng)估價(jià)值:將收縮壓、炎性因子及CMKLR-1、Chemerin作為檢驗(yàn)變量,將DR病情作為狀態(tài)變量(1=增生型DR,0=非增生型DR),繪制ROC曲線(見圖1),結(jié)果顯示收縮壓、炎性因子評(píng)估DR病情的AUC<0.70,評(píng)估價(jià)值較低,CMKLR-1、Chemerin單獨(dú)及二者聯(lián)合檢測(cè)評(píng)估增生型DR的AUC>0.70,具有一定的評(píng)估價(jià)值,見表4。

圖1 收縮壓、炎性因子水平、趨化因子CMKLR-1、Chemerin及趨化因子聯(lián)合評(píng)估增生型DR的ROC曲線

表4 收縮壓、炎性因子、趨化因子CMKLR-1、Chemerin及趨化因子聯(lián)合對(duì)DR病情的評(píng)估價(jià)值

討 論

DR的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,與周細(xì)胞凋亡、毛細(xì)血管基底膜增厚等機(jī)制有關(guān)[7]。Lupión Durán等[8]研究指出與非增生型DR相比,增生型DR可嚴(yán)重影響患者視力水平,影響患者生存質(zhì)量。收縮壓是血壓指標(biāo)之一,血壓控制不理想會(huì)增強(qiáng)DR患者氧化應(yīng)激反應(yīng),引起大量氧自由基生成,加重DR病情[9]。炎性細(xì)胞因子水平升高會(huì)引起中性粒細(xì)胞聚集,進(jìn)而產(chǎn)生金屬基質(zhì)蛋白酶,加重視網(wǎng)膜組織的慢性炎癥反應(yīng),導(dǎo)致DR向增生型進(jìn)展[10]。NF-κB是從B細(xì)胞中提取的核蛋白因子,對(duì)多種細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路具有調(diào)節(jié)效應(yīng),參與免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞增殖凋亡等過程[11]。但上述因素易受情緒、睡眠質(zhì)量、感染性疾病、手術(shù)或創(chuàng)傷等因素干擾,評(píng)估特異度不高。因此,尋找與DR病情有關(guān)的新指標(biāo),或可為預(yù)防DR疾病進(jìn)展提供新思路。

Chemerin、CMKLR-1可通過與巨噬細(xì)胞、未成熟樹突細(xì)胞表面的CMKLR-1結(jié)合,將CMKLR-1募集至視網(wǎng)膜組織,并引起視網(wǎng)膜組織損傷[12]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),DR Ⅳ期組及Ⅴ期組患者CMKLR-1、Chemerin水平均高于DR Ⅰ期組、Ⅱ期組及Ⅲ期組,DR Ⅱ期組及Ⅲ期組患者Chemerin水平均高于DR Ⅰ期組,且logistic回歸分析結(jié)果顯示,CMKLR-1、Chemerin水平與DR患者的病情程度密切相關(guān)。同時(shí),ROC曲線分析結(jié)果顯示,兩項(xiàng)指標(biāo)對(duì)于增生型DR也具有一定的評(píng)估價(jià)值。分析原因在于,Chemerin表達(dá)升高會(huì)通過破壞胰島素信號(hào),引起骨骼肌細(xì)胞對(duì)胰島素產(chǎn)生抵抗,降低靶器官對(duì)胰島素的敏感性,進(jìn)而升高DR患者血糖,加重患者視網(wǎng)膜損傷,引起疾病進(jìn)展。同時(shí)Chemerin水平升高后,可通過自分泌、旁分泌途徑釋放,與周圍的Chemerin受體結(jié)合,并募集攜帶其受體的巨噬細(xì)胞、未成熟樹突細(xì)胞聚集至視網(wǎng)膜處,加重視網(wǎng)膜損傷,進(jìn)而誘發(fā)增生型DR[13]。Jun等[14]通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),Chemerin可通過增加大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞中細(xì)胞間黏附分子的表達(dá)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子分泌,加重大鼠視網(wǎng)膜病變程度。CMKLR-1升高不僅可通過增加Chemerin的表達(dá),參與DR的發(fā)生、進(jìn)展,也會(huì)通過促進(jìn)周脂素、激素敏感脂肪酶等基因表達(dá),減弱胰島素受體底物-1酪氨酸的磷酸化,進(jìn)而抑制胰島素刺激的糖攝取,升高機(jī)體血糖水平,加重DR患者病情[15]。此外,CMKLR-1可通過p38絲裂原活化蛋白激酶信號(hào)通路誘導(dǎo)促炎因子的表達(dá),加重機(jī)體的炎癥反應(yīng),進(jìn)而引起視網(wǎng)膜炎性損傷,促進(jìn)DR進(jìn)展[16]。

因此臨床應(yīng)早期檢測(cè)DR患者趨化因子CMKLR-1、Chemerin水平,以利于評(píng)估患者病情,并針對(duì)CMKLR-1、Chemerin表達(dá)異常的患者,采取相應(yīng)的治療措施,如CMKLR-1受體抑制劑、鈉-葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抑制劑等,降低二者表達(dá),或加強(qiáng)對(duì)患者血糖水平的監(jiān)測(cè),調(diào)整降糖藥物的使用,將患者血糖水平控制在理想范圍,有利于延緩疾病進(jìn)展,改善DR患者預(yù)后。

綜上所述,趨化因子CMKLR-1、Chemerin在不同病情程度DR患者中的表達(dá)存在差異,且與DR病情有關(guān),臨床可早期檢測(cè)DR患者趨化因子CMKLR-1、Chemerin水平,針對(duì)異常表達(dá)的患者,采取相應(yīng)的治療措施,或可提高治療效果,延緩疾病進(jìn)展。