US-CNB免疫組化檢測用于乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移診斷中的臨床價(jià)值

王樹人,劉水（江蘇省鹽城市第一人民醫(yī)院,江蘇 鹽城 224000）

乳腺癌是多發(fā)于女性機(jī)體惡性腫瘤，發(fā)病率逐年升高。臨床統(tǒng)計(jì)顯示，在全身惡性腫瘤疾病中，乳腺癌占比為7%-10%，其發(fā)病率僅次于子宮癌[1]。有研究[2]發(fā)現(xiàn)，乳腺癌與遺傳密切相關(guān)。該疾病在發(fā)病期間，癌細(xì)胞極易向其他器官、組織轉(zhuǎn)移，可對正常器官與組織造成損傷，其中淋巴結(jié)是該疾病常見轉(zhuǎn)移部位，主要通過胸大肌外側(cè)、逆行等途徑損傷淋巴結(jié)，嚴(yán)重危及患者生命安全[3]。因此，對早期乳腺癌患者進(jìn)行診斷鑒別，可在確定病變部位的同時(shí)觀察淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況，據(jù)此對癥治療。超聲是利用聲波獲取聲能的一種技術(shù)，通過超聲波探查病灶，能夠鑒別不同疾病類型。超聲引導(dǎo)下細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)檢測（USFNAC）是一種微創(chuàng)診斷方法，由超聲輔助穿刺，可快速確定穿刺部位。報(bào)道顯示，US-FNAC可對淋巴結(jié)快速掃描，觀察是否出現(xiàn)病灶。超聲引導(dǎo)下粗針穿刺活檢（UG-CNB）可通過粗針穿刺獲取較多組織量，診斷準(zhǔn)確度相對較高。同時(shí)，粗針穿刺后可將獲取的組織使用免疫組化進(jìn)行檢測。以上兩種診斷方法雖均有較高的診斷價(jià)值，但是診斷準(zhǔn)確度依然存在差異。為此，本文以我院86例乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者為例，探究US-CNB免疫組化檢測的診斷價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院86例乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者（2020年2月-2023年8月）深入分析，依據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分成兩組，每組43例，對照組年齡48-65歲，平均（56.55±3.36）歲；病程1-4年，平均（3.51±0.23）年。觀察組年齡49-64歲，平均（56.13±3.27）歲；病程1-3年，平均（3.12±0.51）年。兩組患者基礎(chǔ)資料無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 納入、排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《中國抗癌協(xié)會乳腺癌診治指南與規(guī)范》[4]中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；②均出現(xiàn)乳房疼痛、腫塊、乳頭糜爛、乳頭溢液等臨床癥狀；③病歷資料完整；④均簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①凝血功能障礙者；②心、肝、腎嚴(yán)重功能異常者；③合并嚴(yán)重基礎(chǔ)性疾病者；④合并其他惡性腫瘤者；⑤伴有免疫性疾病者；⑥研究前30天內(nèi)服用過其他糖皮質(zhì)激素藥物者；⑦機(jī)體嚴(yán)重感染者；⑧研究期間退出者。

1.3 方法 對照組采用US-FNAC細(xì)胞學(xué)檢測：所用儀器為LEICA BOND-MAX超聲診斷儀，協(xié)助患者平躺于診斷臺，頭部放平，上肢放松后放于軀體兩側(cè)，下肢伸直，確定可疑淋巴結(jié)位置后選擇穿刺部位，使用2%鹽酸利多卡因（廠家：北京益民藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H11020322，規(guī)格：2ml:40mg）進(jìn)行表面麻醉，并進(jìn)行消毒；使用超聲輔助穿刺，對所選淋巴區(qū)進(jìn)行探查，并使用穿刺針（7號穿刺針）對該區(qū)進(jìn)行穿刺并取穿刺物，同時(shí)放入載玻片中，祛濕后進(jìn)行HE染色與鏡檢。陽性判定標(biāo)準(zhǔn)：檢出癌細(xì)胞。

觀察組采用US-CNB免疫組化檢測：①US-CNB活檢：所用儀器及體位擺放同US-FNAC，使用超聲探查穿刺部位并將其暴露，清潔需穿刺部位的皮膚，并局部麻醉，于穿刺部位做切口，以此降低穿刺難度。穿刺針方向與探頭長軸方向保持一致，以便活檢針擊發(fā)后的取樣檢測。陽性判定標(biāo)準(zhǔn)：出現(xiàn)惡性淋巴結(jié)。②免疫組化檢測：石蠟包埋：確定并固定組織標(biāo)本，石蠟包埋；脫蠟：選取載玻片后將其完全放入甲苯溶液10min。水化：將載玻片放入乙醇溶液中，選擇三種濃度（100%、95%、75%）乙醇溶液，每種溶液中各放一個(gè)載玻片，浸泡5min，再使用PBS溶液清洗?？乖迯?fù)：將載玻片放入修復(fù)液中，保持修復(fù)液恒溫，溫度與沸水溫度相同，再將載玻片取出，待溫度降至室溫后進(jìn)行清洗。滅活：將載玻片放入雙氧水中，再將其放入25℃環(huán)境中，10min后將其取出，清洗。一抗孵育：將一抗滴入載玻片并孵育，其孵育溫度為40℃，孵育時(shí)間控制在24h。增強(qiáng)：選取聚合物增強(qiáng)劑后將其放入載玻片中孵育20min。二抗孵育：對載玻片進(jìn)行沖洗，室溫孵育30min。顯色：將顯色液滴入載玻片中，使用顯微鏡進(jìn)行觀察。封片：梯度乙醇脫水后，用中性樹膠封片。

1.4 觀察指標(biāo) 分析兩組超聲引導(dǎo)下細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)檢測（USFNAC）、超聲引導(dǎo)下粗針穿刺活檢（UG-CNB）結(jié)果；分析USFNAC與UG-CNB診斷靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS25.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料（±s）用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料（n，%）用χ2檢驗(yàn)，當(dāng)P＜0.05時(shí)表示數(shù)據(jù)對比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 US-FNAC、US-CNB檢測結(jié)果 US-FNAC細(xì)胞學(xué)檢測可對淋巴結(jié)相關(guān)區(qū)域進(jìn)行檢測，顯示該區(qū)域中細(xì)胞核染色情況，快速確定癌細(xì)胞；US-CNB病理組織學(xué)檢測能發(fā)現(xiàn)細(xì)胞核深度染色的癌細(xì)胞。

2.2 對比兩組診斷效能 兩組診斷效能對比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組診斷效能比較

3 討論

研究[5]顯示，乳腺癌是女性常發(fā)疾病，與不良飲食、環(huán)境污染、不良生活習(xí)慣等密切相關(guān)。該疾病早期臨床表現(xiàn)為乳頭溢液、腋窩淋巴結(jié)腫大、乳房腫塊等，隨著疾病進(jìn)展，癌細(xì)胞極易出現(xiàn)轉(zhuǎn)移，引起其他器官、組織病變[6]。腋窩淋巴結(jié)是該疾病常見轉(zhuǎn)移部位，及時(shí)、準(zhǔn)確地診斷腋窩淋巴結(jié)狀態(tài)，可快速發(fā)現(xiàn)是否出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移[7]。研究[8]指出，對乳腺癌患者有效診斷，可及時(shí)發(fā)現(xiàn)是否出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，從而采取正確的治療方案，有助于降低病死率，延長生存時(shí)間。前哨淋巴結(jié)活檢術(shù)是診斷該疾病的金標(biāo)準(zhǔn)，具有較高靈敏度、準(zhǔn)確度，可對疑似組織進(jìn)行取樣并進(jìn)行病理學(xué)檢查[9]，但是，診斷期間易對機(jī)體造成損傷，且術(shù)后可出現(xiàn)多種并發(fā)癥，如淋巴結(jié)水腫、切口感染等，臨床應(yīng)用受限。

超聲在診斷乳腺癌疾病中的應(yīng)用較為廣泛，能夠準(zhǔn)確判斷是否出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，診斷操作流程簡單，對機(jī)體無損傷，可進(jìn)行多次重復(fù)診斷，且診斷成本低[10-11]。在正常機(jī)體中，腋窩淋巴結(jié)主要以橢圓形、長橢圓形為主，若受癌細(xì)胞侵襲后，極易損傷淋巴結(jié)被膜，導(dǎo)致形變（類圓形、圓形）[12]。因此，對乳腺癌患者淋巴結(jié)采用超聲診斷時(shí)，淋巴結(jié)形狀改變是判定是否轉(zhuǎn)移的重要依據(jù)，其主要依據(jù)成像結(jié)果確定判定結(jié)果[13]。由于主觀因素易對判斷結(jié)果造成不必要干擾，所以臨床醫(yī)生自身需具備豐富臨床經(jīng)驗(yàn)。US-CNB屬于微創(chuàng)檢測方法，主要通過超聲掃描判斷淋巴結(jié)具體情況，對可疑區(qū)域進(jìn)行穿刺取樣檢測，能夠準(zhǔn)確確定穿刺部位并取樣，有效減輕對機(jī)體的損傷，診斷準(zhǔn)確度高。與US-FNAC相比可獲取更多樣本量，具有較高的靈敏度、特異度[14]。同時(shí)，所取樣本可準(zhǔn)確評估該疾病患者相關(guān)基因表達(dá)情況，為后期治療方案的確定提供數(shù)據(jù)支持，有利于加快預(yù)后。

本研究發(fā)現(xiàn)，觀察組靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度高于對照組，主要是因在對乳腺癌疾病診斷期間，US-CNB準(zhǔn)確度高，與金標(biāo)準(zhǔn)相比，對照組所取得的組織標(biāo)本量相對較少，同時(shí)操作者操作技能易對診斷結(jié)果產(chǎn)生干擾，導(dǎo)致穿刺病理結(jié)果產(chǎn)生誤差。在對癌細(xì)胞診斷時(shí)，血流信號強(qiáng)度大，且信號豐富，尤其是中央穿入性血流信號明顯，若病情進(jìn)展時(shí)，極易出現(xiàn)新生滋養(yǎng)動(dòng)脈，確保腫瘤快速增殖代謝。US-CNB可清晰顯示腫物及周邊彩色多普勒血流信號，準(zhǔn)確反映病變程度。同時(shí)，可對淋巴結(jié)可疑區(qū)域進(jìn)行穿刺選取標(biāo)本，能夠準(zhǔn)確顯示淋巴結(jié)是否發(fā)生病變，因此比US-FNAC的靈敏度、特異度高。因US-CNB取樣量相對較多，能夠使樣本組織結(jié)構(gòu)完整，可避免樣本中出現(xiàn)壞死組織、細(xì)胞破碎等情況，以此能夠減少制片干擾，提升制片質(zhì)量，從而獲取更多病理信息，且在免疫組化的同時(shí)，有助于診斷靈敏度、準(zhǔn)確度的提升。以上兩種診斷方法均可取得一定的診斷效果，但是易受穿刺部位、樣本大小等因素的影響，導(dǎo)致誤診、漏診病例。雖然US-CNB診斷方法具有較高靈敏度、準(zhǔn)確度，但是并發(fā)癥發(fā)生率相對較高，所以可考慮與其他診斷方法聯(lián)用以降低誤診、漏診率。

本研究僅納入86例患者，樣本量偏少，且未對患者漏診、誤診情況進(jìn)行深入分析，易受相關(guān)因素影響。因此今后需通過增加樣本量進(jìn)行前瞻性研究，避免研究結(jié)果偏倚。同時(shí)增加誤診、漏診率分析，研究影響診斷的相關(guān)影響因素，以此獲取更為全面、高價(jià)值的研究結(jié)果，進(jìn)而為臨床治療提供可靠數(shù)據(jù)。全面分析治療中的危險(xiǎn)因素，避免對治療過程與療效造成干擾。

綜上所述，在對乳腺癌疾病患者診斷時(shí)，US-CNB免疫組化診斷準(zhǔn)確度較高，可清晰顯示是否向淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，對臨床鑒別診斷具有較高價(jià)值，可為選擇正確治療方案提供可靠數(shù)據(jù)支持。