中藥活性成分通過(guò)調(diào)節(jié)m6A 甲基化修飾抗腫瘤的研究進(jìn)展

韓 笑，王夢(mèng)斐，蒲位凌，劉 博，于海洋*

1.天津中醫(yī)藥大學(xué)組分中藥國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 天津 301617

2.四川大學(xué)生物治療國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 四川 成都 610041

隨著醫(yī)學(xué)的進(jìn)步和對(duì)腫瘤認(rèn)識(shí)的加深，腫瘤治療可以選用多種不同的方式，包括放療、化療、手術(shù)和免疫治療等。目前癌癥治療中手術(shù)仍不失為一線治療方案，但癌癥手術(shù)治療存在風(fēng)險(xiǎn)性，尤其是對(duì)于部位敏感的腫瘤，如腦腫瘤，手術(shù)危險(xiǎn)性大，成功率低。另外，癌癥手術(shù)對(duì)人體創(chuàng)傷大，使患者免疫力降低，對(duì)疾病抵抗能力下降，術(shù)后易產(chǎn)生一系列手術(shù)并發(fā)癥。此外，化療和放療治療后易引起患者抑郁、食欲不振等副作用的發(fā)生。近年來(lái)，來(lái)自傳統(tǒng)中藥（traditional Chinese medicine，TCM）中活性成分在腫瘤治療中的潛力已被西方國(guó)家所認(rèn)可。已有多種天然產(chǎn)物及其衍生物被納入癌癥化療的標(biāo)準(zhǔn)庫(kù)，例如長(zhǎng)春花生物堿、紫杉醇和喜樹(shù)堿等[1]。目前，傳統(tǒng)中藥對(duì)腫瘤的治療效果得到證實(shí)，但其治療癌癥的機(jī)制仍有許多尚不明確，限制了其臨床使用。因此，作為癌癥的新型或替代療法需對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行深入研究[2]。

表觀遺傳學(xué)是指在不改變DNA 序列的基礎(chǔ)上調(diào)節(jié)基因發(fā)生可遺傳變化的一門(mén)學(xué)科，包括DNA 甲基化、RNA 甲基化、組蛋白修飾和非編碼RNA 調(diào)控等[3-6]。其中，DNA 和RNA 的甲基化修飾普遍影響多種疾病進(jìn)程，在近期研究中被廣泛關(guān)注[7]。N6-腺苷酸甲基化（N6-methyladenosine，m6A）是迄今為止最普遍最豐富的RNA 甲基化修飾，是指RNA腺苷酸的第6 位氮被甲基化，隨著特異性抗體的研發(fā)及高通量測(cè)序的快速發(fā)展，幾乎所有類(lèi)型的RNA上均發(fā)現(xiàn)m6A 修飾[8]。1997 年第1 個(gè)m6A 甲基轉(zhuǎn)移酶樣蛋白3（methyltransferase like 3，METTL3）的成功克隆[9]以及2011 年第1 個(gè)m6A 去甲基化酶肥胖相關(guān)蛋白（fat mass and obesity-associated protein，F(xiàn)TO）的確定，表明m6A 甲基化修飾是動(dòng)態(tài)可逆的，這為表觀遺傳學(xué)的研究注入了新的生機(jī)[10]。已有研究表明，m6A 修飾相關(guān)蛋白及m6A修飾的失調(diào)在腫瘤發(fā)生發(fā)展中起著至關(guān)重要的作用。本文旨在介紹m6A 修飾相關(guān)蛋白的分類(lèi)及功能，并總結(jié)中藥活性成分通過(guò)調(diào)節(jié)m6A 甲基化修飾發(fā)揮抗腫瘤作用的研究進(jìn)展。

1 m6A 甲基化酶的分類(lèi)及功能

1.1 m6A 甲基轉(zhuǎn)移酶

甲基化轉(zhuǎn)移酶（methyltransferase）也稱(chēng)“Writers”，是指催化 RNA 上的特定堿基序列（RRACH，其中R = G/A，H = A/C/U）發(fā)生m6A甲基化修飾的酶。由核心蛋白METTL3、METTL14、WTAP、RBM15、RBM15B、HAKAI、VIRMA（KIAA1429）和ZC3H13 組成的甲基轉(zhuǎn)移酶復(fù)合物催化[11]。METTL3 和METTL14 在核斑點(diǎn)中共定位形成異二聚體復(fù)合物（MTC）。其中METTL3 是通過(guò)S-腺苷甲硫氨酸（S-adenosylmethionine，SAM）作為甲基供體催化甲基化的發(fā)生，選擇性誘導(dǎo)RNA的GAC 和AAC 堿基序列發(fā)生甲基化。越來(lái)越多的研究表明，METTL3 參與腫瘤的生長(zhǎng)、侵襲、遷移等多個(gè)方面[12]。例如，METTL3 可通過(guò)m6A/YTHDF2 依賴(lài)的方式抑制肝細(xì)胞癌中細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)抑制因子 2（suppressor of cytokine signaling 2，SOCS2）的表達(dá)，使其在功能上被沉默，從而促進(jìn)HCC 細(xì)胞的增殖與遷移[13]；METTL3 還可通過(guò)調(diào)節(jié)靶基因和通路介導(dǎo)結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展，從而引發(fā)結(jié)直腸癌細(xì)胞的自我更新、增殖和遷移等[14]。與METTL3 相比，METTL14 在大多數(shù)的癌種中起到抑癌作用，包括肝癌、膀胱癌、子宮內(nèi)膜癌、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、腎細(xì)胞癌、胃癌、結(jié)直腸癌等[15]。功能上METTL14 選擇性誘導(dǎo)RNA 的GAC堿基序列甲基化[16]。除此之外，其他蛋白缺乏RNA甲基化酶活性。WTAP 作為m6A 甲基轉(zhuǎn)移酶的調(diào)節(jié)亞基，與METTL3 和METTL14 相互作用并將其募集到核斑點(diǎn)[17]。最近的研究表明，WTAP 的異常表達(dá)與癌癥中的多種現(xiàn)象密切相關(guān)，包括細(xì)胞周期、代謝、自噬、免疫、鐵死亡、上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-to-mesenchymal transition，EMT）和耐藥性等[18]。RBM15 和RBM15B 結(jié)合METTL3 和WTAP，并將其精準(zhǔn)定向到m6A 修飾后的RNA 位點(diǎn)上[19]，目前已在多項(xiàng)腫瘤研究中檢測(cè)到RBM15的異常突變，包括間質(zhì)性甲狀腺癌[20]、急性髓系白血病[21]及肺癌[22]等。VIRMA 通過(guò)募集MTC 來(lái)調(diào)節(jié)區(qū)域選擇性甲基化的發(fā)生，主要在3’UTR 和終止密碼子附近介導(dǎo)m6A 修飾[23]，VIRMA 以m6A 依賴(lài)的方式，通過(guò)靶向DNA 結(jié)合抑制因子2（inhibitor of DNA binding 2，ID2）、GATA 結(jié)合蛋白3（GATA binding protein 3，GATA3）、細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶1（cyclin-dependent kinase 1，CDK1）等調(diào)節(jié)不同通路發(fā)揮促癌作用[24]。ZC3H13、WTAP 及CBLL1等多種輔助因子的共同作用，可有效地調(diào)控核內(nèi)m6A 甲基化修飾[19,23]。此外，最近研究人員提出，存在獨(dú)立的RNA 甲基轉(zhuǎn)移酶METTL16，可調(diào)控細(xì)胞內(nèi)SAM水平并參與U6核內(nèi)小RNA（small nuclear RNA，snRNA）中的m6A 修飾[25]。

1.2 m6A 去甲基化酶

去甲基化酶（demethylases）也稱(chēng)“Erasers”，m6A去甲基化酶FTO[10]及alkB同系物5（ALKBH5）的發(fā)現(xiàn)，表明m6A 修飾過(guò)程的可逆性。ALKBH5 與FTO 均為Alkb 家族的同源蛋白，以α-酮戊二酸和二價(jià)鐵離子依賴(lài)的方式催化m6A 修飾的腺苷去甲基化[26]，F(xiàn)TO 或ALKBH5 的表達(dá)與細(xì)胞中的m6A整體含量密切相關(guān)。其去甲基化的過(guò)程大致為氧化m6A 形成N6- 羥甲基腺苷（N6-hydroxymethyladenosine，hm6A），然后將hm6A 轉(zhuǎn)化為中間體N6-甲酰腺苷（N6-formyladenosine，f6A），最后f6A 水解為腺苷（A）。FTO 主要表達(dá)在大腦，可以調(diào)節(jié)脂肪產(chǎn)生和機(jī)體能量穩(wěn)態(tài)[27]。FTO 在癌癥中的作用在黑色素瘤中首次得到證實(shí)[28]。除此之外，F(xiàn)TO在不同癌種中功能及對(duì)腫瘤進(jìn)展的影響也相繼被證實(shí)。ALKBH5 在睪丸中的表達(dá)最高，在心臟和大腦中的表達(dá)相對(duì)較低，主要影響核RNA 的轉(zhuǎn)運(yùn)及基因表達(dá)[29]。研究表明ALKBH5 可通過(guò)調(diào)節(jié)FOXM1 的表達(dá)，增強(qiáng)了膠質(zhì)母細(xì)胞瘤干細(xì)胞的自我更新和增殖，并促進(jìn)腫瘤的發(fā)生[30]。此外，ALKBH5 是多種癌癥的預(yù)后指標(biāo)，其可以調(diào)節(jié)腫瘤生物過(guò)程，如細(xì)胞增殖、侵襲、遷移、轉(zhuǎn)移和腫瘤微環(huán)境等[31]。最近的研究確定了另一種m6A 去甲基化酶AlkB 同系物3（ALKBH3），且發(fā)現(xiàn)其多選擇性介導(dǎo)tRNA 而非mRNA 或rRNA 中的m6A 修飾，同樣可以通過(guò)上述機(jī)制完成去甲基化過(guò)程[32]。

1.3 m6A 甲基化閱讀蛋白

甲基化閱讀蛋白（RNA N6-methyladenosine reader）又稱(chēng)“Readers”。m6A 閱讀蛋白可以通過(guò)識(shí)別并結(jié)合甲基轉(zhuǎn)移酶修飾的RNA 序列來(lái)調(diào)節(jié)該基因的表達(dá)，進(jìn)而影響其下游生物學(xué)功能。不同的閱讀蛋白具有不同的m6A 定位功能，包括YTH 結(jié)構(gòu)域蛋白家族 YTHDF1、YTHDF2、YTHDF3、YTHDC1 和YTHDC2，其具有保守的m6A 結(jié)合結(jié)構(gòu)域，可以與含有m6A 修飾的RNA 結(jié)合[33]。其中，YTHDC1 位于細(xì)胞核，主要參與編碼RNA 的剪接和非編碼RNA 介導(dǎo)的基因沉默，影響RNA 出核等功能[34]，其在癌細(xì)胞增殖、血管生成、轉(zhuǎn)移等多種細(xì)胞功能中至關(guān)重要[35]。其他4 個(gè)蛋白均在細(xì)胞質(zhì)中發(fā)揮功能，YTHDC2 結(jié)合于甲基化修飾的mRNA序列上提高其翻譯效率[36]，在腫瘤發(fā)生發(fā)展中YTHDC2 是誘導(dǎo)惡性表型的蛋白質(zhì)翻譯所必需的。YTHDF1 與終止密碼子周?chē)膍6A 位點(diǎn)結(jié)合，提高被修飾RNA 的翻譯效率[37]；YTHDF2 能夠特異性識(shí)別經(jīng)m6A 修飾的mRNA，招募相應(yīng)的酶破壞靶RNA 穩(wěn)定性、促進(jìn)其降解[38]；YTHDF3 既可與YTHDF1 協(xié)同作用促進(jìn)靶RNA 翻譯，同時(shí)還可以通過(guò)直接與YTHDF2 相互作用來(lái)加速mRNA 降解[39]。YTHDF 蛋白可以作為致癌因子促進(jìn)癌癥的發(fā)生發(fā)展，同時(shí)也可以作為腫瘤抑制因子來(lái)抑制某些癌癥發(fā)生[40]。除了YTH 結(jié)構(gòu)域家族的成員外，還有其他的m6A 甲基化閱讀蛋白，包括核內(nèi)不均一性核糖核蛋白（HNRNP）家族成員HNRNPA2/B1、HNRNPC 和HNRNPG，胰島素樣生長(zhǎng)因子2 mRNA結(jié)合蛋白（IGF2BP）家族成員IGF2BP1/2/3 以及真核起始因子3（eukaryotic initiation factor 3，eIF3）。HNRNPA2/B1 可以識(shí)別前體 microRNA（primiRNA）上的m6A 修飾位點(diǎn)，促進(jìn)pri-miRNA 加工[41]；HNRNPC 和HNRNPG 在識(shí)別m6A 后可通過(guò)調(diào)節(jié)mRNA 豐度和剪接進(jìn)而影響RNA 的二級(jí)結(jié)構(gòu)[42]。IGF2BP1/2/3 可識(shí)別并以m6A 依賴(lài)方式促進(jìn)mRNA 穩(wěn)定性和翻譯并參與mRNA 的剪切[43]。elF3在甲基化修飾過(guò)程中可與YTHDF1 相互作用，與RNA 5’UTR 上被修飾的堿基序列結(jié)合促進(jìn)mRNA的翻譯[44]。由于不同組織的腫瘤基因表達(dá)譜有一定差異，m6A 修飾相關(guān)蛋白在不同腫瘤中的作用和機(jī)制也大不相同。近年來(lái)的研究表明，m6A 修飾在腫瘤發(fā)生發(fā)展中起著關(guān)鍵作用，m6A 修飾相關(guān)蛋白已被驗(yàn)證為多種癌癥的潛在生物標(biāo)志物。以調(diào)控腫瘤中RNA 的m6A 修飾水平為靶點(diǎn)，研發(fā)天然、低毒及高效的靶向抗腫瘤藥物，可能為腫瘤的預(yù)防和治療提供新的研究方向。

2 中藥活性成分通過(guò)調(diào)節(jié)m6A 甲基化修飾發(fā)揮抗腫瘤的作用

2.1 中藥活性成分通過(guò)調(diào)節(jié)m6A 甲基轉(zhuǎn)移酶抗腫瘤

METTL3 作為m6A 甲基轉(zhuǎn)移酶，通過(guò)與SAM結(jié)合將甲基基團(tuán)轉(zhuǎn)移到被修飾的RNA 上形成甲基化RNA。已有研究表明METTL3 在不同類(lèi)型的癌癥中表達(dá)水平各異且發(fā)揮不同的功能。金雀異黃酮可通過(guò)直接抑制METTL3 的表達(dá)影響其催化活性，進(jìn)而下調(diào)整合素 Β1（integrin beta-1，ITGB1）mRNA 上m6A 水平，抑制ITGB1 表達(dá)，進(jìn)而在抑制細(xì)胞遷移、侵襲等過(guò)程中發(fā)揮作用，達(dá)到抑制肺腺癌進(jìn)展的目的[45]；槲皮素作為一種多功能抗氧化劑，可降低心血管疾病、代謝紊亂和各種癌癥帶來(lái)的危害[46]，現(xiàn)有研究表明槲皮素可通過(guò)下調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶 2 （ matrix metalloproteinase-2，MMP2）、埃茲蛋白（Ezrin）、P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）和METTL3 表達(dá)增強(qiáng)宮頸癌細(xì)胞的化學(xué)敏感性進(jìn)而達(dá)到加強(qiáng)順鉑抗腫瘤作用的目的，最終促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞凋亡[47]；此外，虛擬篩選研究結(jié)果表明槲皮素可以與METTL3蛋白結(jié)合，形成穩(wěn)定的蛋白質(zhì)-配體復(fù)合物，作為METTL3 抑制劑抑制腫瘤細(xì)胞增殖[48]。龍血竭作為一種傳統(tǒng)草藥，傳統(tǒng)用于治療心血管、胃腸道、婦科等疾病，近年在癌癥研究中取得一定的進(jìn)展。研究表明龍血竭乙醇提取物能通過(guò)下調(diào)METTL3 表達(dá)并降低METTL3 和凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis，IAP）家族的成員生存素（survivin）mRNA的結(jié)合，來(lái)降低survivin mRNA 中的m6A 修飾以減少其表達(dá)，最終通過(guò)促進(jìn)細(xì)胞凋亡發(fā)揮抗肝癌作用，且龍血竭能有效抑制裸鼠肝癌異種移植的生長(zhǎng)，呈現(xiàn)出毒性低，不良反應(yīng)小的特點(diǎn)[49]。黃芩苷是一種黃酮類(lèi)化合物，主要來(lái)源于黃芩。研究表明黃芩苷通過(guò)作用于METTL3，下調(diào)己糖激酶結(jié)構(gòu)域蛋白1（hexokinase domain component 1，HKDC1）的甲基化含量使 HKDC1 表達(dá)下調(diào)，最終通過(guò)影響HKDC1/JAK2/STAT1/caspase-3 通路誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡，抑制2 型糖尿病誘發(fā)的肝癌發(fā)生發(fā)展，這為黃芩苷用于預(yù)防和治療二型糖尿病誘導(dǎo)的肝癌臨床應(yīng)用提供了理論依據(jù)[50]。

METTL14 作為“Writers”的另一重要成員，是許多癌癥的腫瘤抑制因子，包括結(jié)直腸癌[51]，膀胱癌[52]和乳腺癌[53]等。異丹葉大黃素（isorhapontigenin，ISO）是從少苞買(mǎi)麻藤中提取得來(lái)，被證明具有抗癌特性。研究發(fā)現(xiàn)ISO 可通過(guò)下調(diào)波形蛋白（vimentin，Vim）的表達(dá)來(lái)抑制膀胱癌細(xì)胞的侵襲，作用機(jī)制為ISO 處理后上調(diào)轉(zhuǎn)錄因子FOXO3a 的表達(dá)并激活METTL14，METTL14 下調(diào)EMT 家族中的關(guān)鍵成員Vim 的表達(dá)進(jìn)而抑制膀胱癌細(xì)胞的侵襲[54]。Delicaflavone（DLL）是主要來(lái)源于中藥石上柏的雙黃酮類(lèi)化合物，研究表明其具有抗腫瘤活性。最新研究表明DLL 通過(guò)抑制肺癌細(xì)胞中的METTL3 和METTL14 來(lái)上調(diào)STAT1 和干擾素調(diào)節(jié)因子1（interferon regulatory factor 1，IRF1）的表達(dá)以及細(xì)胞因子的分泌，激活抗腫瘤免疫來(lái)抑制肺癌細(xì)胞生長(zhǎng)[55]。

2.2 中藥活性成分通過(guò)調(diào)節(jié)m6A 去甲基化酶抗腫瘤

FTO 作為一種m6A 去甲基轉(zhuǎn)移酶，最初發(fā)現(xiàn)在肥胖相關(guān)疾病中發(fā)揮作用，近年研究表明FTO 也以m6A 依賴(lài)的方式影響腫瘤的發(fā)展，且在多數(shù)癌種中均表達(dá)升高[56-57]。研究發(fā)現(xiàn)，溫郁金提取物欖香烯對(duì)結(jié)直腸癌5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil，5-FU）耐藥性有一定程度的改善作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明FTO通過(guò)p53/GPX4 通路調(diào)控鐵死亡，并參與β-欖香烯逆轉(zhuǎn)結(jié)直腸癌5-FU 耐藥的過(guò)程[58]。FTO 作為關(guān)鍵蛋白在白血病的發(fā)生以及白血病細(xì)胞分化中同樣起著重要作用[59]，天然的蒽醌衍生物大黃酸，作為FTO 的抑制劑可以降低其細(xì)胞內(nèi)FTO 蛋白的表達(dá)水平，誘導(dǎo)M3 型急性髓系白血病細(xì)胞HL-60、NB4及急性淋巴細(xì)胞Nalm6 發(fā)生凋亡[60]。檳榔堿是檳榔中的主要活性生物堿，是口腔黏膜下纖維化和口腔癌發(fā)展的強(qiáng)效致癌物，研究表明這可能與檳榔堿上調(diào)FTO 的表達(dá)促進(jìn)體內(nèi)外口腔癌細(xì)胞的增殖與遷移能力有關(guān)[61]。從柴胡中提取的一種三萜皂苷化合物柴胡皂苷-D 可通過(guò)直接靶向FTO，參與FTO介導(dǎo)的m6A 甲基化修飾調(diào)控其下游靶標(biāo)MYC、CEBPA、ASB2、RARA 的表達(dá)抑制白血病細(xì)胞增殖[62]。另有研究表明，中藥黃連中提取的異喹啉類(lèi)生物堿小檗堿，可通過(guò)降低FTO 負(fù)調(diào)節(jié)因子β 連環(huán)蛋白的表達(dá)而上調(diào)FTO 的蛋白表達(dá)水平，降低m6A 的總RNA 修飾達(dá)到調(diào)節(jié)腫瘤干細(xì)胞干性的目的，該研究結(jié)果表明小檗堿可能作為一種新型m6A 甲基化調(diào)節(jié)劑在結(jié)腸癌的治療中發(fā)揮作用[63]。賴(lài)巍巍等[64]秉持著“老藥新機(jī)制”的原則從表觀遺傳調(diào)控方面揭示黃芩苷抗腫瘤效應(yīng)的表觀干預(yù)機(jī)制，發(fā)現(xiàn)黃芩苷能夠上調(diào)m6A 甲基轉(zhuǎn)移酶METTL3 和METTL14 的表達(dá)且下調(diào)去甲基轉(zhuǎn)移酶FTO 和ALKBH5 的表達(dá)，上調(diào)m6A 甲基化修飾進(jìn)而調(diào)控Suv39H1基因的選擇性剪切發(fā)揮抗鼻咽癌的作用。

2.3 中藥活性成分通過(guò)調(diào)節(jié)m6A 甲基化閱讀蛋白發(fā)揮抗腫瘤作用

m6A 甲基化閱讀蛋白主要功能為識(shí)別并結(jié)合甲基轉(zhuǎn)移酶修飾后RNA 的m6A 位點(diǎn)，進(jìn)而決定靶RNA 的不同去向及生物學(xué)功能。最近研究表明，漆黃素可通過(guò)下調(diào)甲基轉(zhuǎn)移酶ZC3H13 的表達(dá)，降低參與DNA 損傷的PHD 指蛋白10（PHD finger protein 10，PHF10）的m6A 修飾，使YTHDF1 識(shí)別修飾后的PHF10 并穩(wěn)定其表達(dá)的功能被抑制，誘導(dǎo)DNA 損傷進(jìn)而發(fā)揮抗胰腺癌的作用[65]。白藜蘆醇作為一種含芪類(lèi)結(jié)構(gòu)的多酚類(lèi)非黃酮天然活性物質(zhì)，來(lái)源廣泛且具有多種生物學(xué)功能。研究表明白藜蘆醇可通過(guò)降低YTHDF2 表達(dá)水平和m6A整體含量進(jìn)而調(diào)控人肝癌細(xì)胞HepG2 的脂質(zhì)代謝和能量代謝，抑制肝癌細(xì)胞的增殖能力[66]。中藥雷公藤中存在的一種重要的天然生物活性物質(zhì)雷公藤紅素，可通過(guò)下調(diào)胰腺癌細(xì)胞中的METTL3 而降低細(xì)胞中總體RNA m6A 修飾水平，尤其是下調(diào)扣環(huán)基因（claspin，CLSPN）和B 細(xì)胞淋巴瘤-2（Bcell lymphoma-2，Bcl-2）的mRNA m6A 的修飾水平；同時(shí)可通過(guò)下調(diào)細(xì)胞中YTHDF3，降低Claspin和Bcl-2的mRNA 的穩(wěn)定性而影響其表達(dá)水平，抑制胰腺癌細(xì)胞的增殖和細(xì)胞周期進(jìn)程、促進(jìn)細(xì)胞凋亡[67]。人參皂苷Rh2是紅參中特有的皂苷成分，具有廣泛的抗腫瘤效果，研究表明人參皂苷Rh2可通過(guò)下調(diào)驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員KIF26B（kinesin family member 26B，KIF26B）表達(dá)進(jìn)而影響甲基轉(zhuǎn)移酶ZC3H13/CBLL1 的核定位，降低其對(duì)致癌因子SRF的m6A 修飾，使m6A 甲基化閱讀蛋白IGFBP1 與m6A 修飾后SRF mRNA 上3’UTR 結(jié)合減少，最終通過(guò)破壞SRF 的穩(wěn)定性、減少其表達(dá)達(dá)到抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的目的[68]；此外，黃連中黃連堿被證明可通過(guò)促進(jìn)IGF2BP1 泛素化抑制肝細(xì)胞癌增殖和轉(zhuǎn)移[69]。鉤吻中主要毒性成分胡蔓藤堿乙，可顯著下調(diào)m6A 識(shí)別蛋白IGF2BP3 的表達(dá)，導(dǎo)致其靶向的細(xì)胞骨架、緊密連接和粘附連接相關(guān)基因的存儲(chǔ)、翻譯和降解發(fā)生紊亂，揭示了胡蔓藤堿乙誘導(dǎo)人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116 細(xì)胞毒性的潛在分子機(jī)制[70]。

3 結(jié)語(yǔ)與展望

m6A 甲基化作為最普遍的RNA 修飾在腫瘤發(fā)展中具有兩面性，某些基因的m6A 修飾增多可能調(diào)節(jié)該基因的表達(dá)水平、介導(dǎo)其功能的改變進(jìn)而影響腫瘤發(fā)展，而一些基因缺乏m6A 修飾也可能促進(jìn)或抑制腫瘤的發(fā)展。同時(shí)m6A 修飾相關(guān)蛋白作為多種生理過(guò)程和疾病進(jìn)展的關(guān)鍵蛋白，在腫瘤的發(fā)展中同樣發(fā)揮著重要作用?？傊?，m6A RNA 甲基化研究方法的快速發(fā)展及m6A 與癌癥之間機(jī)制的深入挖掘有助于揭示癌癥發(fā)展的潛在機(jī)制[71]。

中藥是自然界的饋贈(zèng)，與化學(xué)藥物的臨床治療療效相比，這些來(lái)自草藥的活性成分在具有療效的基礎(chǔ)上擁有相對(duì)較低的毒性。有證據(jù)表明，中醫(yī)藥聯(lián)合化療或放療能夠在增強(qiáng)其療效的同時(shí)減少由放、化療引起的不良反應(yīng)。已有大量研究闡明了中藥在癌癥治療中的作用機(jī)制[72]。本文綜述了m6A 修飾相關(guān)蛋白的分類(lèi)和功能，以及中藥有效成分如金雀異黃酮、槲皮素、龍血竭提取物、黃芩苷、白藜蘆醇、人參皂苷Rh2等直接調(diào)節(jié)m6A 修飾相關(guān)蛋白或以m6A 依賴(lài)的方式調(diào)節(jié)相關(guān)通路發(fā)揮抗腫瘤作用的研究進(jìn)展（表1、圖1）。本文旨在更清楚地闡述中藥活性成分用于癌癥治療的分子機(jī)制，為拓寬中藥應(yīng)用范圍、開(kāi)發(fā)其抗癌潛力，以及為傳統(tǒng)中藥臨床轉(zhuǎn)化提供理論基礎(chǔ)。為挖掘更多的中藥活性成分及其抗癌的潛在機(jī)制提供思路。

圖1 不同中藥活性成分對(duì)m6A 甲基化修飾的調(diào)節(jié)機(jī)制Fig.1 Regulatory mechanism of m6A methylation modification by different active ingredients of traditional Chinese medicine

表1 抗腫瘤的中藥有效成分及其作用的酶Table 1 Anti-tumor active ingredients of traditional Chinese medicine and their effects on enzymes

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突