張維秋,鄭孟加,蔣文奪,韓曉珺,張 月,蘭鄒然
(1. 萊州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,山東萊州 261400;2. 山東省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心,山東濟(jì)南 250100)
布魯氏菌?。ㄒ韵潞喎Q“布病”)是由布魯氏菌屬細(xì)菌感染引起的人獸共患傳染病,是當(dāng)前我國重點(diǎn)防控的人獸共患傳染病之一[1-2]。近年來,我國人間布病發(fā)病率一直處于歷史高位[3-4]。為強(qiáng)化畜間布病防控,降低流行和傳播風(fēng)險(xiǎn),維護(hù)人民群眾身體健康,2022 年農(nóng)業(yè)農(nóng)村部制定印發(fā)《畜間布魯氏菌病防控五年行動(dòng)方案(2022—2026年)》[5],全面開展布病源頭防控工作。山東省畜間布病實(shí)行分區(qū)防控策略:牛羊布病非免疫區(qū)采取監(jiān)測凈化防控措施,按照“檢測-撲殺”的技術(shù)路線開展布病防控工作;牛羊布病免疫區(qū)按照“強(qiáng)制免疫-穩(wěn)定控制-退出免疫-監(jiān)測凈化”的技術(shù)路線,實(shí)現(xiàn)和維持布病控制與凈化。為切實(shí)做好布病源頭防控工作,2023 年山東省畜牧獸醫(yī)局部署開展布病防控試點(diǎn)縣創(chuàng)建工作,在A 市成立試點(diǎn)縣創(chuàng)建工作領(lǐng)導(dǎo)小組,全面推進(jìn)牛羊布病防控工作。
為掌握A 市牛羊布病群體流行率、不同規(guī)模場群布病流行情況以及陽性場群持續(xù)性監(jiān)測情況,2023 年3—6 月開展了牛羊布病橫斷面調(diào)查,以期為布病非免疫試點(diǎn)縣創(chuàng)建工作提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù),為制定布病防控策略提供參考。
目標(biāo)群為2023 年3—6 月A 市轄區(qū)內(nèi)所有牛羊養(yǎng)殖場戶。采用普查抽樣方法,以A 市牛羊養(yǎng)殖場戶存欄牛羊(包含在此期間新出生和超出免疫期調(diào)入的牛羊)為研究對(duì)象。
對(duì)全市未免疫布病疫苗和超出免疫期的牛羊進(jìn)行采樣。采集的牛羊全血置于一次性真空采血管中,待血清自然析出后,取出備用。
利用虎紅平板凝集試驗(yàn)和試管凝集試驗(yàn)對(duì)收集的牛羊血清進(jìn)行檢測,兩種方法均按照GB/T 18646—2018 規(guī)程[6]操作?;⒓t平板凝集試驗(yàn)敏感性為95%,特異性為80%;試管凝集試驗(yàn)敏感性為85%,特異性為90%;垂直試驗(yàn)敏感性為81%,特異性為98%[7]。
經(jīng)虎紅平板凝集試驗(yàn)初篩為陽性,試管凝集試驗(yàn)復(fù)核仍為陽性的定義為陽性個(gè)體。場群內(nèi)有1個(gè)以上陽性個(gè)體的定義為陽性場群(本次研究中的場群以行政村為單位進(jìn)行劃分)。
撲殺在橫斷面調(diào)查中檢出的陽性動(dòng)物,1 個(gè)月后采集陽性場群中剩余存欄動(dòng)物的血清樣本,用虎紅平板凝集試驗(yàn)和試管凝集試驗(yàn)再次進(jìn)行抗體檢測。
使用Excel 軟件計(jì)算牛羊布病個(gè)體表觀流行率和場群表觀流行率。表觀流行率(AP)= 陽性數(shù)/所有檢測數(shù);真實(shí)流行率(TP)=(AP + Sp - 1)/(Se + Sp - 1);95%置信區(qū)間:95%CI =p±Z[p(1 -p)/n]1/2。式中,Sp 為試驗(yàn)特異性,Se 為試驗(yàn)敏感性,p為流行率,Z為標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)分布中概率0.05 對(duì)應(yīng)的值,n為抽樣數(shù)量[8]。應(yīng)用IBM SPSS Statistics 26 對(duì)收集的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,應(yīng)用卡方檢驗(yàn)比較不同流行率的差異顯著性,P<0.05 代表差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
A 市牛羊養(yǎng)殖以散養(yǎng)模式為主,全市共有879家養(yǎng)牛戶,2 204 家養(yǎng)羊戶。存欄≥500 頭(只)的場群有13 個(gè),其存欄牛羊9 271 頭(只);存欄100~499 頭(只)的場群有191 個(gè),其存欄牛羊36 184 頭(只);存欄50~99 頭(只)的場群有167 個(gè),其存欄牛羊11 647 頭(只);存欄<50頭(只)的場群有422個(gè),其存欄牛羊7 666頭(只)。
共采集793 個(gè)牛羊場群64 768 份樣品進(jìn)行布病檢測,檢出陽性場群27 個(gè)、陽性樣品218 份。 場群表觀流行率為3.40%(95%CI:2.14%~4.67%), 場群真實(shí)流行率為1.78%(95%CI:0.86%~2.70%),個(gè)體表觀流行率為0.34%(95%CI:0.29%~0.38%)。
2.2.1 牛群布病流行率 共采集314 個(gè)牛場群9 641 份牛血清樣品進(jìn)行檢測,檢出陽性場群2 個(gè)、陽性樣品3 份。牛布病場群表觀流行率為0.64%(95%CI:0~1.52%),個(gè)體表觀流行率為0.03%(95%CI:0~0.07%)。
2.2.2 羊群布病流行率 共采集741 個(gè)羊場群55 127份羊血清樣品進(jìn)行檢測,檢出陽性場群25 個(gè)、陽性樣品215 份。羊布病場群表觀流行率為3.37%(95%CI:2.07%~4.67%),場群真實(shí)流行率為1.74%(95%CI:0.80%~2.68%),個(gè)體表觀流行率為0.39%(95%CI:0.34%~0.44%)。
結(jié)果(表1)顯示,存欄100~499 頭(只)場群的布病場群表觀流行率最高,為8.38%(95%CI:4.45%~12.31%),存欄<50 頭(只)場群的布病場群表觀流行率最低,為0.71%(95%CI:0~1.51%),與存欄50~99 和100~499 頭(只)場群的場群表觀流行率差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
表1 不同規(guī)模場群布病流行情況
對(duì)于檢測到的陽性場群,撲殺病畜后仍有剩余動(dòng)物繼續(xù)飼養(yǎng)的,1 個(gè)月后對(duì)剩余動(dòng)物開展布病持續(xù)性檢測,共檢測16 個(gè)場群630 份樣品,檢出陽性場群4 個(gè)、陽性樣品5 份。陽性場群復(fù)檢的場群表觀流行率為25.00%(95%CI:3.78%~46.22%),真實(shí)流行率為29.11%(95%CI:6.85%~51.37%), 個(gè)體表觀流行率為0.79%(95%CI:0.10%~1.49%)。陽性場群復(fù)檢的場群表觀流行率高于全市牛羊布病場群表觀流行率(3.40%,27/793),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=19.848,P<0.05)。
普查即全面調(diào)查,是對(duì)總體中的每個(gè)單元進(jìn)行調(diào)查,計(jì)算總體特征,能夠減少抽樣誤差,但因費(fèi)時(shí)、費(fèi)力、成本高,故而在獸醫(yī)流行病學(xué)研究中開展困難較大,應(yīng)用較少。本次牛羊布病橫斷面調(diào)查研究中創(chuàng)新性采用普查抽樣策略,得到了政府的大力支持。調(diào)查發(fā)現(xiàn):A 市牛布病場群表觀流行率為0.64%,個(gè)體表觀流行率為0.03%;羊布病場群表觀流行率為3.37%,個(gè)體表觀流行率為0.39%。結(jié)果表明:A 市牛布病流行率較低,處于穩(wěn)定控制狀態(tài);羊布病流行率稍高,但仍在國家控制標(biāo)準(zhǔn)以內(nèi)[5],后續(xù)在監(jiān)測凈化工作中應(yīng)對(duì)羊群重點(diǎn)關(guān)注,持續(xù)做好布病綜合防控工作。
不同規(guī)模場群的布病場群流行率結(jié)果顯示:存欄100~499 頭(只)的場群流行率最高,存欄<50 頭(只)的場群流行率最低,這可能與規(guī)模較大的行政村養(yǎng)殖密度較大、散養(yǎng)戶多、動(dòng)物調(diào)入調(diào)出頻繁有關(guān)。后續(xù)將會(huì)對(duì)這兩個(gè)場群之間的差異和風(fēng)險(xiǎn)因素進(jìn)行深入探究。以上結(jié)果提示,應(yīng)以養(yǎng)殖規(guī)模較大的場群為重點(diǎn),開展布病防控工作。
陽性場群持續(xù)性檢測結(jié)果顯示,25.00%的陽性場群出現(xiàn)了存欄陰性動(dòng)物感染情況,陽性場群復(fù)檢的場群表觀流行率高于全市整體場群表觀流行率,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。分析原因可能有以下幾點(diǎn):一是部分存欄牛羊在檢測時(shí)處于潛伏期,未被檢測到;二是陽性動(dòng)物被撲殺后,消毒滅源工作不徹底,環(huán)境中持續(xù)存在布魯氏菌,導(dǎo)致動(dòng)物被感染。建議加強(qiáng)陽性場群的持續(xù)性監(jiān)測,對(duì)圈舍進(jìn)行徹底清洗消毒,消滅傳染源,降低布病傳播風(fēng)險(xiǎn)。