血清HBP、CRP、PCT在早期毛細血管滲漏綜合征患者中的表達分析＊

畢勇志 馬 芬 宋琳琳

河南大學(xué)第一附屬醫(yī)院急診科 (河南 開封 475000)

毛細血管滲漏綜合征(CLS)臨床表現(xiàn)復(fù)雜，且通常病情危重，患者可在短期內(nèi)出現(xiàn)多器官功能障礙[1-2]。目前，臨床上常見的CLS致病因素包括嚴(yán)重感染、藥物毒性作用、體外循環(huán)術(shù)后、全身性炎癥反應(yīng)等，且大部分患者病情變化急劇，臨床救治難度較大[3]。輸注白蛋白后測定細胞外液菊粉分布容量和進行生物電阻抗分析，觀察膠體滲透濃度的改變是診斷GLS的“金標(biāo)準(zhǔn)”。但應(yīng)用該種診斷方法患者經(jīng)濟負擔(dān)較大，無法在臨床推廣應(yīng)用，急需尋找一種簡單、快捷、可靠方案進行早期診斷，對GLS患者早期干預(yù)及預(yù)后具有重要意義。血管內(nèi)皮損傷及功能失調(diào)在GLS的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮至關(guān)重要的作用，而研究表明，血清肝素結(jié)合蛋白(HBP)、C-反應(yīng)蛋白(CRP)、降鈣素原(PCT)可反映血管內(nèi)皮損傷情況[4-5]。基于此，本研究旨在探討檢測血清HBP、CRP、PCT水平在GLS患者中的表達情況，為臨床早期診斷及干預(yù)提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料回顧性收集2019年12月-2022年2月河南大學(xué)第一附屬醫(yī)院急診科收治的86例CLS患者的臨床資料，依據(jù)是否為感染情況引起分為感染組與非感染組。感染組46例，男25例，女21例；年齡20-48歲，平均年齡(36.48±5.81)歲；原發(fā)?。悍窝?4例，急性腹膜炎5例，腸炎10例，靜脈炎4例，皮膚軟組織感染3例。非感染組40例，男23例，女17例；年齡24-46歲，平均年齡(37.28±4.95)歲；原發(fā)?。耗X梗塞15例，急性心力衰竭10例，骨盆骨折8例，多發(fā)肋骨骨折4例，農(nóng)藥中毒3例。兩組性別、年齡比較(P＞0.05)，具有可對比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《毛細血管滲漏綜合征》[6]中GLS滲漏期診斷標(biāo)準(zhǔn)：患者體重增加、呼吸困難，出現(xiàn)快速的全身性水腫，在補充蛋白質(zhì)后水腫更為嚴(yán)重，同時伴有中心靜脈壓和血壓降低、少尿甚至無尿，經(jīng)實驗室檢查后明確低蛋白血癥、低血氧癥發(fā)生，且肌酐、尿素氮出現(xiàn)進行性升高；年齡在18-59歲之間；臨床資料及實驗室檢查資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：1個月內(nèi)接受過免疫抑制劑治療；合并心肺功能不全或惡性腫瘤；合并其他免疫缺陷疾病；合并腎源性水腫、慢性腎病、失血性或感染性休克接受液體復(fù)蘇；合并重要臟器疾?。恢委?d內(nèi)病死。

1.2 方法

1.2.1 基線資料收集方法 研究對象基線資料均來自河南大學(xué)第一附屬醫(yī)院電子病歷系統(tǒng)，主要收集資料包括：性別(男、女)、年齡、原發(fā)病、治療前及治療24h、48h、72h血清HBP、CRP、PCT水平等信息。

1.2.2 治療方法 所有患者入院后均接受針對性治療，首先對原發(fā)病進行積極處理，進行細菌培養(yǎng)及藥敏試驗，依據(jù)結(jié)果選擇相應(yīng)抗生素治療，減少炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生，并采用人工膠體補充血容量，同時開放靜脈通道，監(jiān)測生命體征、中心靜脈壓、血氣分析情況等，觀察補液情況及病情變化；針對發(fā)生嚴(yán)重低氧血癥的患者，為避免組織器官因缺氧誘發(fā)功能衰竭，可進行機械通氣，以延長吸氣時間，增加呼氣末正壓；依據(jù)患者個體情況給予糖皮質(zhì)激素、血必凈注射液(天津紅日藥業(yè)股份有限公司，國藥準(zhǔn)字：Z20040033，規(guī)格：10ml)或β-受體激動劑等改善患者毛細血管通透性，減輕滲漏程度；針對有氮質(zhì)血癥、少尿或無尿、器官水腫患者進行連續(xù)血液凈化治療。

1.2.3 血清HBP、CRP、PCT檢測方法 分別于患者治療前、治療24h、48h、72h用標(biāo)準(zhǔn)生化檢驗管抽取靜脈血4mL并取2份放入EP試管中，自然抗凝后以15.5cm離心半徑、3500r/min離心處理10min后分離血清，統(tǒng)一放置于-80℃冰箱待檢。于室溫內(nèi)1h解凍后，采用酶聯(lián)免疫吸附法(Enzyme-linked Immuno Sorbent Assay，ELISA)檢測血清HBP水平、免疫比濁法檢測血清CRP水平；利用降鈣素原檢測試劑盒(鄭州人福博賽生物技術(shù)有限公司，型號：48人份/盒)采用定量免疫熒光法檢測血清PCT水平。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法數(shù)據(jù)處理采用SPSS 25.0統(tǒng)計學(xué)軟件，所有資料均經(jīng)Shapiro-Wilk正態(tài)性檢驗，符合正態(tài)分布以“±s”的形式表示，組間、組內(nèi)分別用獨立、配對樣本t檢驗；計數(shù)資料以n(%)表示，行χ2檢驗；采用總體變化趨勢圖分析血清HBP、CRP、PCT變化情況；P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 血清HBP水平感染組治療前、治療24h、48h、72h時血清HBP水平均高于非感染組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 兩組患者治療前及治療24h、48h、72h時血清HBP水平對比結(jié)果(ng/L)

2.2 血清CRP水平感染組治療前、治療24h、48h、72h血清CRP水平均高于非感染組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。見表2。

表2 兩組患者治療前及治療24h、48h、72h血清CRP水平對比(mg/L)

2.3 血清PCT水平感染組治療前、治療24h、48h、72h血清PCT水平均高于非感染組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。見表3。

表3 兩組患者治療前及治療24h、48h、72h血清PCT水平對比(ng/L)

2.4 血清HBP、CRP、PCT水平總體變化趨勢治療前及治療24h、48h、72h，HBP先于CRP、PCT出現(xiàn)降低，其出現(xiàn)數(shù)值降低的順序常為HBP＞PCT＞CRP，且tHBP↓速度明顯大于tCRP↓、tPCT↓的速度。見表4和圖1。

表4 治療前及治療24h、48h、72h患者血清HBP、CRP、PCT水平

圖1 治療前及治療24h、48h、72h血清HBP、CRP、PCT水平總體變化趨勢

3 討 論

GLS為臨床非常危險且十分棘手的危重病，若無法早期識別進行干預(yù)，最終可能導(dǎo)致器官功能障礙，大大增加臨床救治難度，威脅患者生命[7]。研究表明，血管內(nèi)皮細胞損傷、壞死或間隙增大為GLS病情發(fā)生發(fā)展中主要表現(xiàn)，血清HBP、CRP、PCT水平可較為敏感反映血管內(nèi)皮細胞損壞情況[8]。

血清HBP又稱為天殺青素，是一種來源于中性粒細胞中的多功能蛋白，主要儲存于嗜天青顆粒，能夠激活中性粒細胞，并促進炎癥介質(zhì)的釋放、增加毛細血管的通透性，參與機體內(nèi)炎癥反應(yīng)，為臨床診斷感染性疾病的新型標(biāo)記物[9-10]。血清CRP是一種由肝臟分泌的急性時相蛋白，具備多種生物學(xué)功能，不僅能夠加強吞噬細胞的吞噬作用，還可激活補體，參與機體多種病理生理過程[11]。同時，CRP也是一種非特異性的炎癥指標(biāo)，在機體受到嚴(yán)重感染或組織損傷時出現(xiàn)異常表達，常見于組織損傷、炎癥、心肌梗死、手術(shù)創(chuàng)傷、放射性損傷等疾病[12]。血清PCT為一種無激素活性的糖蛋白，正常生理情況下，甲狀腺C細胞可產(chǎn)生極少量的PCT，健康人的血清PCT水平基本測不到，但當(dāng)機體受到較為嚴(yán)重的真菌、細菌感染、寄生蟲感染或多臟器功能衰竭時，PCT水平將出現(xiàn)升高現(xiàn)象，臨床常將其用于細菌性與非細菌性感染疾病的診斷及鑒別診斷中[13-14]。推測三者在GLS患者中的表達可反映不同病理生理特征，可用于早期識別診斷或干預(yù)，因此，本研究通過回顧性分析GLS患者不同治療時間點血清HBP、CRP、PCT水平變化情況，探討三者表達與GLS病情的關(guān)系，為臨床早期識別、干預(yù)提供理論依據(jù)。

本研究結(jié)果表明，感染組治療前及治療24h、48h、72h血清HBP、CRP、PCT水平均高于非感染組，表明感染因素引起的GLS可引起血清HBP、CRP、PCT水平明顯升高。分析其原因，機體感染病原微生物后，體內(nèi)中性粒細胞被激活，可促進HBP釋放，通過誘導(dǎo)血管滲漏、趨化及活化單核細胞來參與炎性反應(yīng)；當(dāng)機體發(fā)生急性細菌感染時，肝細胞會合成大量CRP入血，使其在數(shù)小時內(nèi)急劇升高，且細菌感染約嚴(yán)重，升高越明顯；同時，機體感染后炎癥因子可誘導(dǎo)I基因表達增加，促使肝臟、肺及腸道等部位的組織細胞大量合成PCT并以原形釋放入血，導(dǎo)致血清PCT水平增高[15]。

此外，繪制不同治療時點血清HBP、CRP、PCT水平變化趨勢曲線進行對比，結(jié)果表明，治療前及治療24h、48h、72h，HBP先于CRP、PCT出現(xiàn)降低，其出現(xiàn)數(shù)值降低的順序常為HBP＞PCT＞CRP，且tHBP↓速度明顯大于tCRP↓、tPCT↓的速度，表明HBP較CRP、PCT能較早的反映出GLS進展情況。分析其原因，感染或非感染因素誘發(fā)機體出現(xiàn)全身炎性反應(yīng)綜合征(Systemic Inflammatory Response Syndrome，SIRS)后，會損害血管內(nèi)皮細胞，促使機體釋放HBP。HBP為一種趨化物質(zhì)，對于體內(nèi)巨噬細胞及單核細胞具有激活作用，從而引發(fā)組織水腫及血管滲漏，進一步誘導(dǎo)單層內(nèi)皮細胞間隙形成并導(dǎo)致細胞骨架重排[16]。同時，大量失活的HBP對于中性粒細胞引發(fā)的內(nèi)皮細胞高滲透性具有阻斷作用，從而導(dǎo)致GLS的發(fā)生。因此，血清HBP在GLS病程中的表達更為靈敏。相關(guān)研究表明，血清HBP在開顱術(shù)后早期顱內(nèi)感染中具有較大的診斷價值，表明監(jiān)測血清HBP水平可有效診斷感染情況，本研究與上述研究結(jié)果一致[17]。

綜上所述，血清HBP、CRP、PCT在由感染因素引起的GLS中表達水平較高，隨著治療時間的延長，各指標(biāo)水平不斷降低，且血清HBP較血清CRP、PCT能較早的反映出GLS進展情況，臨床可通過監(jiān)測GLS患者血清HBP、CRP、PCT水平進行綜合分析，以早期識別并干預(yù)。