中性粒細(xì)胞載脂蛋白、D-二聚體在兒童重癥細(xì)菌性膿毒癥早期診斷中的臨床應(yīng)用價(jià)值研究

黃鉅振 廖友明 利漢其 白翠芬

膿毒癥屬于機(jī)體器官功能性障礙綜合征, 按照病情的嚴(yán)重程度可分為膿毒癥、嚴(yán)重膿毒癥、膿毒性休克,是兒童常見的危險(xiǎn)系數(shù)較高的疾病［1］。有學(xué)者研究表明, 膿毒癥患兒病死率在4%～50%, 而對(duì)于嚴(yán)重膿毒癥、膿毒性休克患兒病死率＞30%, 且死亡患兒多發(fā)生于治療早期［2］。另一方面, 膿毒癥的感染病原體主要包含細(xì)菌與病毒, 不同病原體感染的治療方法存在差異, 早期的干預(yù)治療與患兒最終結(jié)局密切相關(guān)［3］。因此, 膿毒癥的早期鑒別診斷極為重要, 可降低患兒病死率, 減輕患兒器官功能損傷。目前臨床膿毒癥的早期鑒別診斷主要以3 個(gè)炎癥指標(biāo)CRP、PCT、WBC 為主, 其中CRP 敏感度較高, 但特異度較低, PCT 敏感度、特異度均不高, CRP 反應(yīng)較慢［4］。HNL 是近年新興的炎癥指標(biāo), 在正常人體中呈現(xiàn)出低表達(dá), 經(jīng)病毒感染后呈小幅度上升, 經(jīng)細(xì)菌感染后呈大幅度上升［5］。D-D 是交聯(lián)纖維蛋白經(jīng)纖溶酶溶解而形成的降解產(chǎn)物, 可反映繼發(fā)性纖維蛋白溶解功能［6］。目前, 我國對(duì)于HNL 的應(yīng)用研究較少, D-D 在臨床中主要用于肺栓塞等纖溶系統(tǒng)疾病, 基于此, 本院探討了HNL、D-D 在兒童重癥細(xì)菌性膿毒癥早期診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2023 年1～9 月本院收治的30 例重癥細(xì)菌性膿毒癥患兒作為研究組, 另選同期30 例普通細(xì)菌性膿毒癥患兒作為對(duì)照A 組, 30 例普通細(xì)菌感染患兒作為對(duì)照B 組。研究組、對(duì)照A 組納入標(biāo)準(zhǔn)：①根據(jù)2020 版兒童膿毒性休克和膿毒癥相關(guān)器官功能性障礙管理指南［7］診斷為重癥細(xì)菌性膿毒癥或普通細(xì)菌感染患兒。研究組、對(duì)照A 組排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并惡性腫瘤患兒；②有嚴(yán)重心肝腎功能不全、自身免疫系統(tǒng)疾患及結(jié)締組織病；③14 d 內(nèi)有手術(shù)史患兒；④嚴(yán)重創(chuàng)傷及應(yīng)激狀態(tài)患兒及因各種因素不能配合研究患兒；⑤合并先天畸形患兒。對(duì)照B 組納入標(biāo)準(zhǔn)：①患兒性別、年齡等一般資料與研究組患兒比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；②隨機(jī)選取呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)等常見普通細(xì)菌感染患兒。對(duì)照B 組排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并膿毒癥、重癥膿毒癥患兒。其中研究組男性18 例, 女性12 例；年齡最小8 個(gè)月, 最大6 歲, 平均年齡(3.15±0.71)歲。對(duì)照A 組男性16 例, 女性14 例；年齡最小6 個(gè)月,最大6 歲, 平均年齡(3.01±0.67)歲。對(duì)照B 組男性17 例, 女性13 例；年齡最小6 個(gè)月, 最大6 歲, 平均年齡(3.23±0.78)歲。經(jīng)比較, 三組患兒一般資料無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 方法 所有患兒入院后收集其靜脈血、適量, 靜置30 min, 2000 r/min 離心15 min, 如上層渾濁繼續(xù)離心10 min, 取上層清液保存于-80℃冰箱中。使用邁銳流水線M6000(免疫透射比濁法)檢測(cè)研究對(duì)象的CRP、PCT 水平, 使用邁瑞血球流水線CAL-8000(量子點(diǎn)免疫熒光層析法)檢測(cè)研究對(duì)象的WBC 水平, 使用邁銳流水線M6000(IFCC法)檢測(cè)研究對(duì)象的AST、ALT水平,使用邁銳流水線M6000(紫外-谷氨酸脫氧酶法)檢測(cè)研究對(duì)象的BUN 水平, 使用邁銳流水線M6000(脫氧酸氧化酶法)檢測(cè)研究對(duì)象的血清Cr 水平, 使用安圖實(shí)驗(yàn)儀器PHOMO 型酶標(biāo)儀(酶免疫分析法)檢測(cè)研究對(duì)象的HNL 水平, 使用德國CS-5100 型自動(dòng)凝固分析儀及其配套試劑(免疫比濁法)檢測(cè)研究對(duì)象的D-D水平。

1.3 觀察指標(biāo) 比較三組患兒的HNL、D-D、CRP、PCT、WBC、AST、ALT、BUN、Cr 水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS23.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示, 兩組間比較采用t 檢驗(yàn), 多組間比較采用方差分析(F 檢驗(yàn))；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組患兒的HNL、D-D、CRP、PCT、WBC 比較三組患兒的WBC 水平比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)；對(duì)照A 組患兒的CRP 水平與對(duì)照B 組患兒比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)；研究組患兒的HNL、D-D、CRP、PCT 水平均高于對(duì)照A 組與對(duì)照B 組, 對(duì)照A 組患兒的HNL、D-D、PCT 水平均高于對(duì)照B 組, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 三組患兒的HNL、D-D、CRP、PCT、WBC 比較( x-±s)

2.2 三組患兒的AST、ALT、BUN、Cr 比較 研究組患兒的AST、ALT、BUN、Cr 水平均高于對(duì)照A 組與對(duì)照B 組, 對(duì)照A 組患兒的AST 水平高于對(duì)照B 組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；對(duì)照A 組患兒的ALT、BUN、Cr 水平與對(duì)照B 組患兒比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。見表2。

表2 三組患兒的AST、ALT、BUN、Cr 比較( ±s)

表2 三組患兒的AST、ALT、BUN、Cr 比較( ±s)

注：與研究組比較, aP＜0.05；與對(duì)照A 組比較, bP＜0.05

組別例數(shù)AST(U/L)ALT(U/L)BUN(mmol/L)Cr(μmol/L)研究組3093.82±8.56193.67±11.5015.75±4.06179.26±16.35對(duì)照A 組30 42.58±6.91a 34.78±4.13a 4.48±1.47a 77.40±11.76a對(duì)照B 組30 29.77±3.72ab 32.39±4.89a 3.71±1.28a 75.57±6.24a F 766.5674439.148201.5741575.232 P 0.0000.0000.0000.000

3 討論

膿毒癥是常見的兒童危重癥疾病, 絕大多數(shù)為細(xì)菌病原體感染, 其中重癥膿毒癥患兒死亡率較高, 早期診斷、治療是病情進(jìn)展至嚴(yán)重膿毒癥、膿毒癥休克并導(dǎo)致死亡的重要因素之一［8］。有學(xué)者研究表明, 血清HNL 可作為輔助診斷兒童細(xì)菌感染生物標(biāo)志物, HNL鑒別細(xì)菌感染的靈敏度、特異度均優(yōu)于CRP、PCT 等傳統(tǒng)指標(biāo)［9］。D-D 對(duì)普通感染的靈敏度、特異度較低,但當(dāng)發(fā)生膿毒癥等嚴(yán)重感染時(shí)D-D 會(huì)升高, 且與患者的病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān), 但對(duì)于細(xì)菌感染鑒別的靈敏度、特異度較低?；诖? 本研究探討了重癥膿毒癥、普通膿毒癥以及普通感染非膿毒癥患者的HNL、D-D水平, 以探討HNL、D-D 對(duì)于鑒別細(xì)菌性膿毒癥及病情嚴(yán)重程度的應(yīng)用。

本研究結(jié)果顯示, 三組患兒HNL、D-D 比較有顯著差異(P＜0.05), 且病情越嚴(yán)重, HNL、D-D 水平越高, 這提示了HNL、D-D 對(duì)于鑒別細(xì)菌性膿毒癥及病情嚴(yán)重程度有一定輔助作用。HNL 主要在人體中性粒細(xì)胞中表達(dá), 屬于鐵載體結(jié)合蛋白, 而細(xì)菌進(jìn)入人體后需要鐵離子維持, 因此細(xì)菌進(jìn)入人體后免疫系統(tǒng)會(huì)刺激HNL 分泌, 從而減少鐵載體, 抑制細(xì)菌在人體中生長(zhǎng)［10］。Leticia 等［11］學(xué)者研究表明, 在人類與非人類的樣本中, 細(xì)菌和非細(xì)菌感染宿主HNL 均存在較大差異, HNL 對(duì)于細(xì)菌診斷鑒別具有較高性能。目前,臨床缺乏公認(rèn)的HNL 正常范圍, 在一份126 例健康兒童的研究中, 1～8 歲兒童的HNL 平均水平為(40.8±13.6)ng/ml, 這一數(shù)據(jù)顯著低于本研究中三組患兒, 再次證實(shí)機(jī)體遭受細(xì)菌入侵后, HNL 會(huì)異常升高［12］。D-D是纖維蛋白纖溶產(chǎn)物, 主要反映凝血狀態(tài), D-D 升高表明機(jī)體凝血系統(tǒng)被激活, 循環(huán)血液中成分淤積, 因此D-D 常用于評(píng)估心血管類疾病［13］。但在嚴(yán)重感染情況下, 人體凝血、纖溶紊亂, 亦可能導(dǎo)致血液循環(huán)受阻。對(duì)于膿毒癥患兒, 機(jī)體的炎癥反應(yīng)機(jī)制會(huì)對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞造成損傷, 引起組織因子釋放, 導(dǎo)致人體凝血、纖溶紊亂, 因而D-D 升高［14］。周利娟等［15］學(xué)者研究表明, 隨著膿毒癥病情嚴(yán)重程度的增加, 微循環(huán)受阻現(xiàn)象逐漸加劇, D-D 隨之升高, 與本研究結(jié)果(研究組患兒的D-D 水平顯著高于對(duì)照A 組)相同。

綜上所述, HNL、D-D 有助于重癥細(xì)菌性膿毒癥、普通細(xì)菌性膿毒癥、普通細(xì)菌感染患兒的早期鑒別診斷。另一方面本次研究也存在不足之處：①本次研究涉及的樣本量太少, 研究結(jié)果可能具有偶然性；②本究?jī)H涉及患兒入院后的指標(biāo)考察, 未涉及患兒預(yù)后指標(biāo)考察。后續(xù)應(yīng)擴(kuò)大樣本量并進(jìn)一步探討HNL、D-D 與膿毒癥患兒預(yù)后的關(guān)系。