• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于SSR熒光標(biāo)記的新疆甜瓜種質(zhì)資源遺傳多樣性與群體結(jié)構(gòu)分析

    2024-02-22 00:00:00李超楊英鄭賀云楊建麗陳偉楊咪孫玉萍
    新疆農(nóng)業(yè)科學(xué) 2024年11期
    關(guān)鍵詞:遺傳多樣性

    摘"要:【目的】""分析新疆甜瓜種質(zhì)資源的遺傳多樣性與群體結(jié)構(gòu),為甜瓜種質(zhì)資源收集、遺傳改良和高效利用提供理論基礎(chǔ)。

    【方法】""選取甜瓜種質(zhì)182份,利用152對SSR引物對其進(jìn)行檢測。篩選出19對多態(tài)性較高的引物,利用TP-M13-SSR分子標(biāo)記分析182份新疆甜瓜種質(zhì)材料的遺傳多樣性,并根據(jù)Nei's遺傳距離(D)進(jìn)行聚類分析,以Structure軟件的混合模型聚類法分析其群體遺傳結(jié)構(gòu)。

    【結(jié)果】""SSR標(biāo)記共檢測到160個等位基因,等位基因數(shù)(Na)的變化幅度為3~16個,平均每對引物8.421 1個,有效等位基因數(shù)(Ne)的變化幅度為1.092 0~6.087 9,平均為3.077 0;觀測雜合度(Ho)為0.011 0~1.000 0,平均0.309 7;期望雜合度(He)為0.084 5~0.838 0,平均為0.599 1;香農(nóng)信息指數(shù)(I)范圍為0.190 6~2.061 3,平均為1.239 9;各位點(diǎn)的多態(tài)性信息含量(PIC)為0.081 1~0.815 8,平均為0.555 8,大多數(shù)位點(diǎn)表現(xiàn)為高度多態(tài)性。182份甜瓜種質(zhì)材料被分為兩大亞群,亞群Ⅰ為88份甜瓜種質(zhì)材料,亞群Ⅱ?yàn)?4份甜瓜材料。當(dāng)K=2時,ΔK出現(xiàn)明顯的峰值,182份甜瓜種質(zhì)材料分為2個亞群較為合適,且存在過度的純合性。

    【結(jié)論】""新疆甜瓜種質(zhì)資源遺傳多樣性較為豐富,但與傳統(tǒng)4個變種的品種群分類結(jié)果不同。新疆甜瓜種質(zhì)資源可分為兩大亞群,群體中純合個體較多,但其他雜合個體間存在一定的基因交流。

    關(guān)鍵詞:""甜瓜種質(zhì);遺傳多樣性;SSR;熒光標(biāo)記;群體結(jié)構(gòu)

    中圖分類號:"S652;S603.2""""文獻(xiàn)標(biāo)志碼:"A""""文章編號:"1001-4330(2024)11-2614-12

    0"引 言

    【研究意義】甜瓜(Cucumis melo L., 2n=2x=24)屬葫蘆科黃瓜屬1年生草本植物,具有高度多樣化和多態(tài)化的特點(diǎn)[1-2]。甜瓜可分為長毛亞種C.melon L.subsp.melo和短毛亞種C.melo subsp.agrestis (Naudin) Pangalo)及其若干變種[3-6] 。分析新疆甜瓜種質(zhì)資源的多樣性,對于甜瓜新品種選育、物種進(jìn)化及分類具有重要意義[7-8]。【前人研究進(jìn)展】形態(tài)學(xué)方法可用于甜瓜種質(zhì)資源類群劃分和馴化聚類結(jié)構(gòu)分析[7,9,10],中國新疆甜瓜地方品種與塔吉克斯坦甜瓜遺傳關(guān)系較近,可分為3個類群[11-13]。但分子標(biāo)記技術(shù)穩(wěn)定,較傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)方法更能正確反映材料的遺傳背景和親緣關(guān)系[14]。SSR(Single nucleotide polymorphism,單核苷酸多態(tài)性)因其良好的再現(xiàn)性、多等位性和共顯性等優(yōu)點(diǎn)[15]被應(yīng)用于不同作物的遺傳圖譜[16,17]、指紋圖譜構(gòu)建[18]、遺傳多樣性和群體結(jié)構(gòu)分析等研究[19,20]。在甜瓜種質(zhì)資源研究方面,SSR分子標(biāo)記更多地被應(yīng)用于指紋圖譜的構(gòu)建[21]和遺傳多樣性分析[2,5,6,22-24]。TP-M13-SSR分子標(biāo)記(Tailed primer M13 microsatellite markers)技術(shù)結(jié)合了SSR分子標(biāo)記和熒光測序技術(shù)的優(yōu)點(diǎn),具有分辨率高、重復(fù)性強(qiáng)、結(jié)果準(zhǔn)確、數(shù)據(jù)記錄工作量小等優(yōu)點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于不同作物種質(zhì)資源的遺傳多樣性[24-27]、指紋圖譜構(gòu)建[28,29]和品種鑒定等[30]。【本研究切入點(diǎn)】新疆是厚皮甜瓜的主產(chǎn)區(qū),種質(zhì)資源多樣復(fù)雜。目前利用TP-M13-SSR技術(shù)對新疆甜瓜種質(zhì)資源遺傳多樣性及群體結(jié)構(gòu)的研究分析鮮見報道。需基于SSR熒光標(biāo)記分析新疆甜瓜種質(zhì)資源遺傳多樣性與群體結(jié)構(gòu)?!緮M解決的關(guān)鍵問題】以收集保存的182份新疆甜瓜種質(zhì)資源為研究對象,應(yīng)用TP-M13-SSR分子標(biāo)記分析其遺傳多樣性和群體結(jié)構(gòu),研究厚皮甜瓜種質(zhì)之間的遺傳關(guān)系,為甜瓜種質(zhì)資源的收集、引進(jìn)以及品種改良提供科學(xué)依據(jù)。"

    1"材料與方法

    1.1"材 料

    以收集的182份新疆地方厚皮甜瓜種質(zhì)(其中南疆97份,東疆58份,北疆24份,不確定的3份)為材料,目前均保存于種質(zhì)庫中。所有試驗(yàn)材料均種植于新疆維吾爾自治區(qū)葡萄瓜果研究所西甜瓜基地溫室中。表1

    1.2"方 法

    1.2.1"基因組DNA的提取與檢測

    采集供試材料幼嫩葉片,采用改良CTAB法[31]提取其基因組DNA。用美國Thermo Scientific NanoDrop One 超微量分光光度計(jì)和1%瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA濃度、純度和質(zhì)量,并用ddH2O將母液質(zhì)量濃度稀釋至50 ng/μL,-20℃保存,備用。

    1.2.2"引物合成與篩選

    普通引物由北京華大基因科技有限公司合成。從報道的152對SSR引物中,通過8%非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳、銀染檢測,初步篩選出條帶清晰、多態(tài)性高、穩(wěn)定性強(qiáng)的引物。

    TP-M13-SSR引物由5′端帶M13接頭序列(5′-TGTAAAACGACGGCCAGT-3′)的上下游引物和具有熒光標(biāo)記(HEX-green、TAMRA-yellow、6-FAM-blue)的M13引物組成。所用引物由上海派森諾生物科技有限公司合成。

    1.2.3"PCR擴(kuò)增及其產(chǎn)物檢測

    20 μL的SSR反應(yīng)體系包括DNA模板1 μL,正向熒光引物(10 μmol/L)1 μL,反向普通引物(10 μmol/L)1 μL,10×buffer 2 μL,dNTP 0.5 μL,Taq酶0.5 μL,ddH2O 14 μL。PCR反應(yīng)在PCR儀ABI-2720上進(jìn)行,PCR反應(yīng)條件為:95℃預(yù)變性5 min;95℃變性30 s,52~62℃退火30 s,72℃延伸30 s,10個循環(huán);95℃變性30 s,52℃退火30 s,72℃延伸30 s,25個循環(huán);72℃延伸7 min。

    取1 μL 的PCR產(chǎn)物加入LIZ500分子量內(nèi)標(biāo)0.1 μL和去離子甲酰胺8.9 μL,混合加入PCR儀,95℃變性5 min,迅速冷卻到 4℃后離心,在ABI3730XL DNA遺傳分析儀上進(jìn)行自動熒光檢測。

    1.3"數(shù)據(jù)處理

    用GeneMapper4.0軟件對ABI3730XL Date collection軟件收集的182份甜瓜種質(zhì)資源的原始數(shù)據(jù)進(jìn)行初步處理,分析擴(kuò)增片段峰值,讀取擴(kuò)增片段大小;運(yùn)用PoPGen32軟件統(tǒng)計(jì)觀測等位基因數(shù)(Na)、有效等位基因數(shù)(Ne)、Shannon's 信息指數(shù)(I)、觀測雜合度(Ho)、期望雜合度(He)、Nei's遺傳距離值(D)、多態(tài)性信息含量指數(shù)(PIC)(由PIC_CALC計(jì)算)等遺傳學(xué)參數(shù)。在 MEGA5.1中構(gòu)建遺傳聚類圖,用Origin軟件進(jìn)行PCoA分析,用 STRUCTURE軟件(由structure2.3.4、CLUMPP_Windows.1.1.2、distrut1.1計(jì)算)進(jìn)行群體結(jié)構(gòu)分析,burnin period和MCMC iterations參數(shù)分別為10 000 和100 000,亞群數(shù)目(K)設(shè)置為1-20個,每個K值獨(dú)立運(yùn)算10次,根據(jù)ΔK法確定最佳亞群數(shù)。根據(jù)最大遺傳比例進(jìn)行亞群歸類。

    2"結(jié)果與分析

    2.1"SSR引物的篩選

    研究表明,利用156對SSR引物對21份果實(shí)差異性大的甜瓜品種進(jìn)行PCR擴(kuò)增,并對PCR產(chǎn)物進(jìn)行8%非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測,篩選出19對條帶清晰、多態(tài)性高、擴(kuò)增穩(wěn)定的SSR引物,并用于182份甜瓜種質(zhì)材料的熒光毛細(xì)管電泳試驗(yàn)。其中19對SSR引物的峰圖簡單、等位變異合理,可用于試驗(yàn)材料的遺傳多樣性分析。以引物SSR12083為例,毛細(xì)管電泳檢測結(jié)果能準(zhǔn)確地讀取具體的片段大小。供試材料多為純合。表2,圖1

    2.2"SSR分子標(biāo)記多態(tài)性

    研究表明,19個SSR位點(diǎn)在182份新疆甜瓜種質(zhì)資源中檢測到160個等位基因,Na的變化幅度為3~16個,平均為8.42個,這些引物可適于182份新疆甜瓜種質(zhì)資源的遺傳多樣檢測。Ne是反映群體遺傳變異大小的指標(biāo),Ne和Na差異越大,等位基因在群體中分布越不均勻。Ne的變化幅度為1.092 0~6.087 9,平均為3.077 0,其中最高的是CMATN89,為6.087 9,其次為PM4和CMCTN71,該3對引物有較高的檢測效率。多態(tài)性信息含量(PIC)值大于 0.50 的位點(diǎn)為高度多態(tài)位點(diǎn),處于0.25~0.50 的為中度多態(tài)位點(diǎn),小于0.25 時為低度多態(tài)位。182份甜瓜種質(zhì)資源材料的PIC值的變化范圍為 0.081 1~0.815 8,平均為0.555 8,其中12對引物的PIC值大于0.50,大部分屬于高度多態(tài)性SSR標(biāo)記。表1

    2.3"群體遺傳多樣性

    研究表明,觀測雜合度(Ho)是指隨機(jī)抽取的2個樣本等位基因不同的概率;期望雜合度(He)是指理論計(jì)算得出的雜合度。He可以衡量群體的遺傳多樣性高低,He值越高,反映群體的遺傳一致性就越低,其遺傳多樣性就越豐富。Ho值范圍在0.011 0~1.000 0,平均為0.309 7;He值范圍在0.084 5~0.838 0,平均為0.599 1,且19對引物中,有13對的He均大于平均值,182份資源的遺傳多樣性豐富;Ho平均值明顯小于He平均值,且有15對引物的Ho低于He,絕大多數(shù)位點(diǎn)均出現(xiàn)了純合子偏多的現(xiàn)象。 Shannon's 指數(shù)(I)較He相比,更能反映遺傳多樣性程度的,I越大,群體離散度越高,遺傳多樣性越豐富。19對SSR引物的I值變化幅度為0.190 6~2.061 3,平均為1.239 9,研究群體遺傳多樣性比較豐富。SSR引物CMATN89、CMGAN21、CMTCN6對應(yīng)的Nei's遺傳距離值(D)較高,分別為0.835 7、0.813 4、0.814,群體間這些基因位點(diǎn)的遺傳多樣性高。19對SSR引物鑒定計(jì)算的遺傳分化系數(shù)(Fst)值范圍在0.334 5~0.983 0,平均為0.783 9,大于0.25,種群間的遺傳分化水平處于較高水平,有78.39%的變異存在于甜瓜種質(zhì)群體間,21.61%的變異存在于甜瓜種質(zhì)群體內(nèi)的個體間,182份新疆甜瓜種質(zhì)資源的遺傳變異主要來源于種質(zhì)群體間?;蛄鳎∟m)值為0.004 3~0.497 4,平均為0.113 5且均小于1,種群間某些基因交流受到影響。表3

    2.4"SSR分子標(biāo)記的甜瓜種質(zhì)聚類

    研究表明,南疆(97份)、東疆(吐魯番市、哈密市58份)、北疆(24份)及其他(3份)的182份甜瓜種質(zhì)資源進(jìn)行聚類可分為2個亞群。Ⅰ 類分別包含東疆甜瓜種質(zhì)41份、南疆甜瓜種質(zhì)29份、北疆甜瓜種質(zhì)15份及其他甜瓜種質(zhì)3份,共計(jì)88份,占總供試材料的48.35%,包括瓜旦甜瓜變種3份、夏甜瓜變種37份、冬甜瓜變種22份及未明確分類種質(zhì)26份。其中來自皮山縣的努拉伊與其他種質(zhì)遺傳距離較遠(yuǎn),單獨(dú)成一支,屬于夏甜瓜變種納西甘品種群;白巴登也單獨(dú)成一支;圓球密極甘(編號36)、阿比那瓦提(編號38)、一窩旦(編號47)和賽熱克吐木休克(編號96)聚為一支,其中編號38屬于夏甜瓜變種可口奇夏甜瓜品種群,編號96屬于冬甜瓜變種可口奇冬瓜品種群;Ⅱ 類分別包含南疆甜瓜種質(zhì)69份、東疆甜瓜種質(zhì)17份以及北疆甜瓜種質(zhì)8份,共94份,占總供試材料的51.65%。Ⅱ類又可分為3個小群A、B和C。小群A包括41份甜瓜種質(zhì),其中南疆35份,東疆6份,含有夏甜瓜變種23份、冬甜瓜變種5份、未確定分類種質(zhì)12份和瓜旦甜瓜變種1份;小群B包括24份甜瓜種質(zhì),其中南疆18份,東疆4份,北疆2份,包含夏甜瓜變種15份、冬甜瓜變種4份、未確定分類種質(zhì)5份;小群C包括29份甜瓜種質(zhì),其中南疆16份,東疆7份,北疆6份,含有夏甜瓜變種8份、冬甜瓜變種5份、瓜旦甜瓜變種2份、卡沙巴甜瓜變種1份和未確定分類種質(zhì)13份。供試材料中不同地方收集到的同名種質(zhì)并未聚在1類,存在同名異物現(xiàn)象,如編碼1、21、72、85、92、145和159同為賽熱克可口奇,編碼67、77和176同為伯謝克辛,卻未能聚為一類。也存在疑似同名同物的,如編號93和129、編號15和136,聚類位置相同。圖2"

    2.5"群體結(jié)構(gòu)與主坐標(biāo)

    研究表明,當(dāng)K=2時,ΔK出現(xiàn)峰值,將全部調(diào)查資源分為2個亞群。圖中每一種顏色代表一個亞群,每個小柱狀堆疊圖代表一個個體,亞群I(綠色所示)由份(48.35%)種質(zhì)組成,亞群II(紅色所示)由份(51.65%)種質(zhì)組成,與聚類結(jié)果一致。如果個體至少有20%的血統(tǒng)來自其他不同群體,則被認(rèn)為是混合個體,亞群I中純合個體和混合個體的數(shù)量分別為66個(75.00%)和22個(25.00%)。亞群體II中則分別為66(70.21%)和28(29.79%)。對182份新疆甜瓜種質(zhì)的SSR標(biāo)記數(shù)據(jù)進(jìn)行主坐標(biāo)分析(PCoA),南疆(紅色)、東疆(綠色)和北疆(藍(lán)色)聚為兩大亞群,與群體結(jié)構(gòu)分析相互驗(yàn)證,結(jié)果一致。圖3,圖4,圖5

    3"討 論

    3.1

    進(jìn)行品種遺傳改良必須了解種質(zhì)資源的遺傳信息與特點(diǎn),遺傳多樣性作為生物所攜帶遺傳信息的總和,對分析重要性狀和輔助育種具有無可替代的作用[32]。

    研究利用19個多態(tài)性SSR標(biāo)記對中國新疆"的182份甜瓜種質(zhì)進(jìn)行檢測,平均等位基因數(shù)"(Na)為8.421 1,平均多態(tài)信息含量(PIC)為0.555 8,均大于Ansari等[33]研究的印度甜瓜、Carvalho等[34]研究的巴西商品甜瓜、Chikh-Rouhou等[35]研究的突尼斯甜瓜以及Kaar等[36]研究的土耳其甜瓜相應(yīng)參數(shù),說明新疆的甜瓜種質(zhì)資源遺傳多樣性較為豐富,支持新疆為厚皮甜瓜的次級起源中心的假說[37]。期望雜合度值越高,反映群體的遺傳一致性就越低,其遺傳多樣性就越豐富。觀測雜合度(Ho)小于期望雜合度(He),純合子偏多。研究中觀測雜合度(Ho)值平均為0.309 7,期望雜合度(He)值平均為0.599 1,除SSR標(biāo)記CMCTN7、CMGAN21、CMTCN6、PM4外其余的期望雜合度均高于觀測雜合度,大部分表現(xiàn)出純合子偏多的現(xiàn)象,可能由于早期交通閉塞形成小群體的分布模式,容易引起近交,從而導(dǎo)致群體內(nèi)純合個體增加。基因流(Nm)表示基因在種群之間交換的多少?;蛄鲾?shù)值大說明群體之間遺傳關(guān)系較近,反之亦然[38]。研究遺傳分化研究結(jié)果表明,基因流(Nm)為0.113 5,相對較低,說明群體間基因交流受到一定限制,可能是由于新疆地理?xiàng)l件影響,空間相對隔離,形成“島式”分布,導(dǎo)致群體間遺傳分化增大。遺傳分化系數(shù)(Fst)為0.783 9,大于0.25,新疆甜瓜群體間有很大遺傳分化。此結(jié)果與zhang等[23]研究結(jié)果一致。

    3.2

    試驗(yàn)研究收集的各地域甜瓜種質(zhì)數(shù)量分別為97份、24份、58份及3份未確定種質(zhì)。利用19對SSR標(biāo)記可將供試種質(zhì)材料聚為2大亞群,Ⅰ類主要為新疆東疆和北疆收集的88份甜瓜種質(zhì)資源,Ⅱ 類主要為南疆的94份甜瓜種質(zhì)資源,Ⅱ類又可分為3個小群A、B和C,并未嚴(yán)格按地理位置區(qū)分,主坐標(biāo)分析(PCoA)結(jié)果也說明這一點(diǎn)。張永兵等[13]利用表型數(shù)據(jù)對新疆121份甜瓜種質(zhì)進(jìn)行聚類分析表明,除哈密野瓜和炮彈瓜外,其余材料被聚為兩類,與研究結(jié)果一致。同時也顯示研究收集的甜瓜種質(zhì)可能存在同名異物的現(xiàn)象,如卡拉尕西(編號49和153)、卡拉可口奇(編號49、170和178)、卡拉麥蓋(編號88、89和122)、波斯皮牙子(編號86、169、180和181)等。

    群體結(jié)構(gòu)分析可以揭示出種質(zhì)材料的內(nèi)在遺傳結(jié)構(gòu),有助于闡明其遺傳組成[39]。研究利用Structure軟件對182份新疆甜瓜種質(zhì)進(jìn)行分析,以確定研究群體的最佳亞群數(shù)目。參照Evanno等[40]的方法將甜瓜種質(zhì)分為2個亞群,并且與張永兵等[13]利用表型分析對121份新疆甜瓜進(jìn)行分類的結(jié)果相一致。類似地,Saha等[2]將印度46份甜瓜材料分為2個亞群,Andrade等[41]將巴西46份甜瓜分為2個亞群,說明中國新疆甜瓜和印度、巴西的甜瓜具有相似的遺傳馴化進(jìn)程或遺傳背景或有某種聯(lián)系。陳蕓等[42]利用SRAP對61份甜瓜種質(zhì)進(jìn)行遺傳多樣性分析,結(jié)果顯示中國新疆甜瓜與土耳其、伊朗、阿富汗的厚皮甜瓜有共同的起源。楊永等[14]研究結(jié)果表明中國新疆甜瓜與印度、西班牙的甜瓜親緣關(guān)系較近。研究群體結(jié)構(gòu)分析結(jié)果表明,供試的一些甜瓜種質(zhì)存在較高的純合性,說明新疆地方甜瓜品種之間缺乏雜交或與其他群體異交[23],從而形成了獨(dú)特的基因庫。"

    4"結(jié) 論

    供試甜瓜種質(zhì)的SSR分子標(biāo)記分析揭示了新疆甜瓜種質(zhì)資源存在較為豐富的遺傳多樣性。甜瓜種質(zhì)聚類和PCoA分析未按照地域區(qū)分,且與傳統(tǒng)4個變種的品種群分類結(jié)果不同。新疆甜瓜種質(zhì)資源可分為2大亞群,群體中純合個體較多,但其他混合個體間存在一定的基因交流。

    參考文獻(xiàn)"(References)

    [1]"王建玉, 鄧志斌, 張愛萍, 等.甜瓜種質(zhì)資源遺傳多樣性的SSR分析[J].中國蔬菜, 2013, 1(18): 42-47.

    WANG Jianyu, DENG Zhibin, ZHANG Aiping, et al.Analysis of melon germplasms genetic diversity by SSR markers [J].China Vegetables, 2013, 1(18): 42-47.

    [2] Saha K, Choudhary H, Munshi A D, et al.Genetic characterization and population structure analysis among different horticultural groups of muskmelon (Cucumis melo L.) using microsatellite markers [J].Plant Genetic Resources: Characterization and Utilization, 2022, 20(2): 116-123.

    [3] Liu S, Gao P, Zhu Q L, et al.Resequencing of 297 melon accessions reveals the genomic history of improvement and loci related to fruit traits in melon [J].Plant Biotechnology Journal, 2020, 18(12): 2545-2558.

    [4] 崔浩楠.甜瓜白粉病抗性基因Cmpmr 2F的精細(xì)定位及候選基因分析[D].哈爾濱:東北農(nóng)業(yè)大學(xué), 2021.

    CUI Haonan.Fine mapping and candidate gene analysis of powdery mildew resistance gene Cmpmr 2F in melon [D].Haerbin: Northeast Agricultural

    University, 2021.

    [5] 張凱歌, 胡倩梅, 靳志恒, 等.219份甜瓜種質(zhì)資源的遺傳多樣性分析[J].河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報, 2020, 54 (2): 216-230.

    ZHANG Kaige, HU Qianmei, JIN Zhiheng, et al.Genetic diversity analysis of 219 melon germplasms [J].Journal of Henan Agricultural University, 2020,

    54(2): 216-230.

    [6] 徐小軍, 劉海英, 梁長志, 等.不同類型甜瓜種質(zhì)SSR遺傳多樣性及耐冷性評價[J].植物遺傳資源學(xué)報, 2020, 21(3): 568-578.

    XU Xiaojun, LU Haiying, LIANG Changzhi, et al.Genetic diversity analysis of melon germplasms using SSR markers and tests for chilling tolerance [J]. Journal of Plant Genetic Resources, 2020, 21(3): 568-578.

    [7] 卿東山, 江鴻, 張露瑤, 等.甜瓜種質(zhì)資源形態(tài)學(xué)性狀遺傳多樣性分析[J].中國蔬菜, 2023,(4): 39-49.

    QING Dongshan, JIANG Hong, ZHANG Luyao, et al.Analysis of genetic diversity of melon(Cucumis melo L.)germplasm resources based on mor phological characters [J].China Vegetables, 2023,(4): 39-49.

    [8] 王志強(qiáng), 杜慧瑩, 李程, 等.甜瓜親本資源果實(shí)性狀的遺傳多樣性分析[J].內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版), 2022, 43(6): 7-13.

    WANG Zhiqiang, DU Huiying, LI Cheng, et al.Genetic diversity analysis of fruit characters of melon parents [J]. Journal of Inner Mongolia Agricultural University(Natural Science Edition), 2022, 43(6): 7-13.

    [9] 王吉明, 尚建立, 李娜, 等.引進(jìn)國外的野生甜瓜種質(zhì)資源果實(shí)形態(tài)多樣性分析[J].果樹學(xué)報, 2017, 34(3): 295-302.

    WANG Jiming, SHANG Jianli, LI Na, et al.Genetic diversity analysis in imported wild melon (Cucumis melo L.) germplasm resources based on morphological characters [J].Journal of Fruit Science, 2017, 34(3): 295-302.

    [10] 胡建斌, 馬雙武, 簡在海, 等.中國甜瓜種質(zhì)資源形態(tài)性狀遺傳多樣性分析[J].植物遺傳資源學(xué)報, 2013, 14(4): 612-619.

    HU Jianbin, MA Shuangwu, JIAN Zaihai, et al.Analysis of genetic diversity of Chinese melon(Cucumis melo L.)germplasm resources based on morphological characters [J].Journal of Plant Genetic Resources, 2013, 14(4): 612-619.

    [11] 張永兵, 伊鴻平, 馬新力, 等.新疆甜瓜地方品種資源核心種質(zhì)構(gòu)建[J].植物遺傳資源學(xué)報, 2013, 14(1): 52-57.

    ZHANG Yongbing, YI Hongping, MA Xinli, et al.Construction of core collection of melon landraces in Xinjiang [J].Journal of Plant Genetic Resources, 2013, 14(1): 52-57.

    [12] 郭麗霞, 李寐華, 王豪杰, 等.塔吉克斯坦甜瓜地方品種資源表型遺傳多樣性[J].新疆農(nóng)業(yè)科學(xué), 2015, 52 (5): 837-842.

    GUO Lixia, LI Meihua, WANG Haojie, et al.Genetic diversity of melon landraces (Cucumis melo L.) in Tajikistan based on phenotypic characters [J].Xinjiang Agricultural Science, 2015, 52(5): 837-842.

    [13] 張永兵, 李寐華, 吳海波, 等.新疆甜瓜地方品種資源的表型遺傳多樣性[J].園藝學(xué)報, 2012, 39(2): 305-314.

    ZHANG Yongbing, LI Meihua, WU Haibo, et al.Genetic diversity of melon landraces(Cucumis melo L.)in Xinjiang based on phenotypic characters [J]. Acta Horticulturae Sinica, 2012, 39(2): 305-314.

    [14] 楊永, 王豪杰, 張學(xué)軍, 等.新疆甜瓜地方種質(zhì)資源遺傳多樣性的SRAP分析[J].植物遺傳資源學(xué)報, 2017, 18(3): 436-448.

    YANG Yong, WANG Haojie, ZHANG Xuejun, et al.Genetic diversity analysis of melon landraces (Cucumis melo) in Xinjiang based on SRAP markers [J].Journal of Plant Genetic Resources, 2017, 18(3): 436-448.

    [15] Zhu H Y, Guo L Q, Song P Y, et al.Development of genome-wide SSR markers in melon with their cross-species transferability analysis and utilization in genetic diversity study [J].Molecular Breeding2016, 36(11): 153-167.

    [16] 張金鵬.遺傳作圖群體中SSR基因型分型軟件開發(fā)及楊樹SSR遺傳圖譜構(gòu)建[D].南京: 南京林業(yè)大學(xué), 2022.

    ZHANG Jinpeng.Software development of SSR genotyping across a genetic mapping population and construction of SSR genetic maps in Populus [D].Nanjing: Nanjing Forestry University, 2022.

    [17] Wang X L, Yang X Q, Yao J T, et al.Genetic linkage map construction and QTL mapping of blade length and width in Saccharina japonica using SSR and SNP markers [J].Frontiers in Marine Science, 2023, 10: 1116412.

    [18] 冉昆, 隋靜, 王宏偉, 等.利用SSR熒光標(biāo)記構(gòu)建山東地方梨種質(zhì)資源分子身份證.果樹學(xué)報[J], 2018, 35(增刊): 71-78.

    RAN Kun, SUI Jing, WANG Hongwei, et al.Using the fluorescent labeled SSR markers to establish the molecular ID of pear germplasm resources in Shandong [JJournal of Fruit Science.2018, 35(S): 71-78.

    [19] Alhariri A, Behera T K, Jat G S, et al.Analysis of ge- netic diversity and population structure in bitter gourd (Momordica charantia L.) using morphological and SSR markers [J].Plants, 2021(9): 1860.

    [20] Zhang Q H, Zang X X, Yang Y C, et al.Genetic diversity of Juglans mandshurica populations in northeast china based on SSR markers [J].Frontiers in Plant Science, 2022, 13: 931578.

    [21] 李超, 楊英, 陳偉, 等.西州密系列甜瓜 SSR 指紋圖譜構(gòu)建及聚類分析[J].園藝學(xué)報, 2022, 49(3): 622-632.

    LI Chao, YANG Ying, CHEN Wei, et al.Construction of DNA fingerprinting and clustering analysis with SSR markers for the muskmelon of Xizhoumi Series [J].Acta Horticulturae Sinica, 2022, 49(3): 622-632.

    [22] 翟文強(qiáng), 王豪杰, 李俊華, 等.喀什地區(qū)厚皮甜瓜品種資源遺傳多樣性分析[J].新疆農(nóng)業(yè)科學(xué), 2011, 48(1): 64-69.

    ZHAI Weiqiang, WANG Haojie, LI Junhua, et al.Analysis of genetic diversity in melon variety resources in Kashgar region [J].Xinjiang Agricultural Sciences, 2011, 48(1): 64-69.

    [23] Zhang Y B, Fan X B, Aierken Y, et al.Genetic diversity of melon landraces (Cucumis melo L.) in the Xinjiang "Autonomous Region on the basis of simple sequence repeat markers [J].Genetic Resources and CropEvolution, 2017, 64: 1023-1035.

    [24] 王璐偉, 沈志軍, 李賀歡, 等.基于SSR 熒光標(biāo)記的79份桃種質(zhì)遺傳多樣性分析[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué), 2022, 55(15): 3002-3017.

    Wang Luwei, SHEN Zhijun, LI Hehuan, et al.Analysis of genetic diversity of 79 cultivars based on SSR fluorescence markers for peach [J].Scientia Agricultura Sinica, 2022, 55(15): 3002-3017.

    [25] 劉松, 聶興華, 李伊然, 等.基于SSR熒光標(biāo)記構(gòu)建板栗品種(系)核心種質(zhì)群[J].果樹學(xué)報, 2023, 40(2): 230-241.

    LIU Song, NIE Xinghua, LI Yiran, et al.Construction of core germplasm collection of Chinese chestnut cultivars (lines) based on SSR fluorescence markrs [J].Journal of Fruit Science, 2023, 40(2): 230-241.

    [26] 侯麗媛, 董艷輝, 聶園軍, 等.蘋果屬種質(zhì) TP-M13-SSR 親緣關(guān)系及遺傳多樣性分析[J].山西農(nóng)業(yè)科學(xué), 2020, 48(9): 1371- 1378, 1522.

    HOU Liyuan, DONG Yanhui, NIE Yuanjun, et al.Analysis of phylogenetic relationship and genetic diversity of TP-M13-SSR technique for some malus germplasm[J].Journal of Shanxi Agricultural Sciences, 2020, 48(9): 1371-1378, 1522.

    [27] 解華云, 高崇敏, 葉云峰, 等.基于TP-M13-SSR分子標(biāo)記技術(shù)的133份薄皮甜瓜種質(zhì)資源遺傳多樣性分析[J].南方農(nóng)業(yè)學(xué)報.2022, 53(9): 2547-2556.

    XIE Huayun, GAO Chongmin, YE Yunfeng, et al.Genetic diversity analysis of 133 pellicle melon germplasm resources based on TP-M13-SSR molecular marker technology[J].Journal of Southern Agriculture, 2022, 53(9): 2547-2556.

    [28] 吳仕蔓, 婁兵海, 陳傳武, 等.應(yīng)用SSR熒光標(biāo)記法構(gòu)建22個柚類品種的分子身份證[J].果樹學(xué)報, 2023, 40(4): 605-614.

    WU Shiman, LOU Binghai, CHEN Chuanwu, et al.Establishment of molecular identity of 22 pomelo varieties using fluorescent labeled SSR markers [J].

    Journal of Fruit Science, 2023, 40(4): 605-614.

    [29] 位明明, 黃肖, 李維國, 等.利用 SSR 熒光標(biāo)記構(gòu)建 37 個中國橡膠樹栽培品種指紋圖譜[J].熱帶作物學(xué)報, 2022, 43(8): 1565-1576.

    WEI Mingming, HUANG Xiao, LI Weiguo, et al.Using the SSR fluorescent labeling to establish SSR fingerprints for 37 cultivars in rubber tree (Hevea brasiliensis) [J].Chinese Journal of Tropical Crops, 2022, 43(8): 1565-1576.

    [30] 張志軍, 黃克興, 岳杰, 等.TP-M13-SSR技術(shù)在麥芽品種鑒定中的應(yīng)用[J].食品科學(xué).2018, 39(24): 183-188.

    ZHANG Zhijun, HUANG Kexing, YUE Jie, et al.DNA fingerprinting of malt varieties using tailed primer M13 mi crosatellite (TP-M13-SSR) markers [J].Food Science, 2018, 39(24): 183-188.

    [31] 李超, 孫玉萍, 楊英, 等.應(yīng)用 SSR 標(biāo)記鑒定甜瓜新品種純度與真實(shí)性研究[J].分子植物育種, 2017, 15(8): 3088- 3096.

    LI Chao, SUN Yuping, YANG Ying, et al.Application of SSR markers in purity and authenticity identification for melon new hybrid [J]. Molecular Plant Breeding, 2017, 15(8): 3088-3096.

    [32] 穆小婷, 廖偵成, 凌彩金, 等.基于SSR標(biāo)記的55份清遠(yuǎn)野生茶樹種質(zhì)資源遺傳多樣性和親緣關(guān)系分析[J].中國茶葉, 2023, 45(2): 36-43.

    MU Xiaoting, LIAO Zhicheng, LING Caijin, et al.Genetic Diversity and Relationship Analysis of 55 Wild Tea Germplasm from Qingyuan based on SSR Markers [J]. China Tea, 2023, 45(2): 36-43.

    [33] Ansari W A, Atri N, Yang L, et al.Genetic diversity in muskmelon based on SSR markers and morphological traits under well-watered and water-deficit [J]. Biocatalysis and Agricultural Biotechnology, 2020, 26(4): 101630.

    [34] Carvalho N, Canela F M, Leite P H S, et al.Research Article Analysis of genetic variability of commercial melon cultivars using SSR molecular markers [J].Genetics and Molecular Research, 2017.16(3): 16039739.

    [35] Chikh-rouhou H, Mezghani N, Mnasri S, et al.Assessing the Genetic Diversity and Population Structure of a Tunisian Melon (Cucumis melo L.) Collection Using Phenotypic Traits and SSR Molecular Markers [J].Agronomy, 2021, 11(6): 11061121.

    [36] Kacar Y A, Simsek O, Solmaz I, et al.Genetic diversity among melon accessions (Cucumis melo) from Turkey based on SSR markers [J].Genetics and Molecular Research.2012, 11(4): 4622.

    [37] Luan F S, Delannay I, Staub J E.Chinese melon(Cucumis melo L.)diversity analyses provide strategies for germplasm curation, genetic improvement, and evidentiary support of domestication patterns [J].Euphytica2008, 164(2): 445-461.

    [38] 吳嫻, 徐海峰, 張志斌, 等.基于KASP標(biāo)記的貴州禾群體遺傳多樣性與結(jié)構(gòu)分析[J].分子植物育種, 2021, 19(4): 1345-1353.

    WU Xian, XU Haifeng, ZHANG Zhibin, et al.Genetic Diversity and Population Structure Study of Guizhou He Based on KASP Marker [J].Molecular Plant Breeding, 2021, 19(4): 1345-1353.

    [39] 王美榮, 許勇, 詹永樂, 等.甜瓜育種親本材料遺傳多樣性及群體結(jié)構(gòu)的SSR標(biāo)記分析[J], 華北農(nóng)學(xué)報, 2010, 25(增刊): 41-46.

    WANG Meirong, XU Yong, ZHAN Yongle, et al.Analysis of Genentic Diversity and Population Structure in Melon (Cucumis melo L.) Breeding Materials by SSR Markers [J], Acta Agriculture Boreali-Sinica, 2010, 25(S): 41-46.

    [40] Evanno G, Regnaut S, Goudet J.Detecting the number of clusters of individuals using the software structure: a simulation study [J].Molecular Ecology, 2005, 14(8): 2611-2620.

    [41] Andrade I S, de Melo C A F, de Sousa Nunes G H, et al.Phenotypic variability, diversity and genet ic population structure in melon (Cucumis melo L.) Associated with total soluble solids [J].Scientia Horticulturae, 2021, 278 (1): 109844.

    [42] 陳蕓, 李冠, 王賢磊.甜瓜種質(zhì)資源遺傳多樣性的SRAP分析[J].遺傳, 2010, 32(7): 744-751.

    CHEN Yun, LI Guan, WANG Xianlei.Genetic diversity of a germplasm collection of Cucumis melo L.using SRAP markers [J].Hereditas (Beijing), 2010, 32(7): 744-751.

    Genetic diversity and population structure analysis of melon"""germplasm resources in Xinjiang based on SSR fluorescence markers

    LI Chao, YANG Ying, ZHENG Heyun, YANG Jianli, CHEN Wei, YANG Mi, SUN Yuping

    (Research Institute of Grape and Melon of Xinjiang Uighur Autonomous Region, Shanshan Xinjiang 838200, China)

    Abstract:【Objective】 ""To analyze the genetic diversity and population structure of Xinjiang melon germplasm resources in the hope of providing a theoretical basis for future collection, genetic improvement, and efficient utilization of melon germplasm resources.

    【Methods】 """182 melon germplasms were selected, and 19 pairs of primers with high polymorphism were selected from 152 pairs of SSR primers.The genetic diversity of 182 Xinjiang melon germplasms was analyzed using TP-M13-SSR molecular markers, and the cluster analysis was conducted according to Nei's genetic distance (D), and the population genetic structure was analyzed using the hybrid model cluster method of Structure software.

    【Results】 """The results showed that a total of 160 alleles were detected using SSR markers, with a variation range of 3-16 allele numbers (Na), an average of 8.421,1 per primer pair, and a variation range of 1.092,0-6.087,9 effective allele numbers (Ne), an average of 3.077,0; The observed heterozygosity (Ho) ranges from 0.011,0 to 1.000,0, with an average of 0.309,7; The expected heterozygosity (He) is 0.084,5-0.838,0, with an average of 0.599,1; The Shannon’ S Diversity Index (I) from 0.190,6 to 2.061,3, with an average of 1.239,9; The polymorphism information content (PIC) of each site from 0.081,1 to 0.815,8, with an average of 0.555,8.Most sites exhibit high polymorphism.The cluster analysis results showed that 182 melon germplasm materials were divided into two major subgroups, with subgroup I consisting of 88 melon germplasm materials and subgroup II consisting of 94 melon materials.The analysis of population genetic structure showed that when K=2, ΔK showed a significant peak, indicating that 182 melon germplasm materials were more suitable to be divided into two subgroups and there was excessive homozygosity.

    【Conclusion】 """The genetic diversity of Xinjiang melon germplasm resources is relatively rich, but the classification results are different from the four traditional varieties.It can be seen that Xinjiang melon germplasm resources can be divided into two major subgroups from the analysis of population structure.There are more homozygous individuals in the population, but there is some gene exchange between other heterozygous individuals, which may be due to variety improvement or germplasm innovation by breeders.

    Key words:""melon germplasm; genetic diversity; SSR; fluorescence markers; population structure analysis

    Fund projects:""Tianshan Youth Program Project (2020Q140);Key Ramp;D Projects in Turpan City (2023003) ; Tianshan Innovation Team Plan (2021D14009) ; Basic Scientific R amp;D Program of Public Welfare Research Institutions of Xinjiang Uygur Autonomous Region (KY2022109); National Consortium Research Project on Muskmelons Breeding of Characteristic Species; Tianshan Talent Plan Phase III of Xinjiang Uygur Autonomous Region

    Correspondence author:"""SUN Yuping (1979-) , female, from Gansu,research associate,research direction:breeding of watermelon and melon, (E-mail) 1501218842@qq.com

    猜你喜歡
    遺傳多樣性
    從葉綠體DNA角度分析云南省砂梨地方品種遺傳多樣性
    寧夏外引水稻種質(zhì)資源表型性狀遺傳多樣性分析
    寧夏外引水稻種質(zhì)資源表型性狀遺傳多樣性分析
    茄子種質(zhì)資源農(nóng)藝性狀遺傳多樣性分析
    淺析田間水稻紋枯病抗性鑒定體系的確立與完善
    西藏野核桃的表型特征及其保育措施
    金魚起源及遺傳多樣性研究進(jìn)展
    水稻紋枯病抗性鑒定體系的確立與遺傳多樣性研究
    楊梅種質(zhì)資源遺傳多樣性研究進(jìn)展
    金銀花SSR指紋圖譜的構(gòu)建及遺傳多樣性分析
    纯流量卡能插随身wifi吗| 女性生殖器流出的白浆| 国产精品.久久久| 亚洲精品aⅴ在线观看| 国产精品偷伦视频观看了| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 免费av不卡在线播放| 十八禁网站网址无遮挡| 夜夜爽夜夜爽视频| 久久精品国产a三级三级三级| av视频免费观看在线观看| 成人亚洲欧美一区二区av| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 成人国产av品久久久| 欧美另类一区| 女性被躁到高潮视频| 欧美 日韩 精品 国产| 考比视频在线观看| 交换朋友夫妻互换小说| av在线观看视频网站免费| 亚洲精品,欧美精品| 哪个播放器可以免费观看大片| 各种免费的搞黄视频| 亚洲内射少妇av| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 国产精品免费大片| 日本欧美国产在线视频| 老司机亚洲免费影院| 久久精品国产亚洲av天美| 91精品一卡2卡3卡4卡| 丝瓜视频免费看黄片| 亚洲三级黄色毛片| 免费观看av网站的网址| 我的女老师完整版在线观看| 中文字幕最新亚洲高清| 欧美3d第一页| 日韩成人伦理影院| 国产永久视频网站| 美女国产视频在线观看| 亚洲国产av新网站| 青春草国产在线视频| 男人爽女人下面视频在线观看| 最近2019中文字幕mv第一页| 97精品久久久久久久久久精品| 下体分泌物呈黄色| 99久国产av精品国产电影| 在现免费观看毛片| 国产在视频线精品| 免费观看性生交大片5| 丰满乱子伦码专区| 亚洲高清免费不卡视频| 中文字幕制服av| 午夜免费男女啪啪视频观看| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 各种免费的搞黄视频| 成人影院久久| 日韩亚洲欧美综合| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 一个人看视频在线观看www免费| 国产永久视频网站| 男女国产视频网站| 最近2019中文字幕mv第一页| 亚洲图色成人| 夫妻性生交免费视频一级片| 亚洲伊人久久精品综合| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 18禁动态无遮挡网站| 18+在线观看网站| h视频一区二区三区| kizo精华| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 久久免费观看电影| 国产亚洲欧美精品永久| 女性被躁到高潮视频| 三上悠亚av全集在线观看| 亚洲色图综合在线观看| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 亚洲欧美色中文字幕在线| 久久精品夜色国产| 少妇人妻精品综合一区二区| 最近手机中文字幕大全| av网站免费在线观看视频| 22中文网久久字幕| 国产一区二区三区av在线| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 人人妻人人澡人人看| 久久久久视频综合| 亚洲综合色惰| 99久久中文字幕三级久久日本| 日本午夜av视频| 少妇丰满av| 成人国语在线视频| av福利片在线| 夜夜爽夜夜爽视频| 中国美白少妇内射xxxbb| 国产探花极品一区二区| 99re6热这里在线精品视频| 蜜桃在线观看..| 一区二区三区免费毛片| 日韩三级伦理在线观看| 丰满乱子伦码专区| 热re99久久国产66热| 黄色毛片三级朝国网站| 综合色丁香网| 国产精品嫩草影院av在线观看| 九色亚洲精品在线播放| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国产av一区二区精品久久| 久久久国产精品麻豆| 日韩av在线免费看完整版不卡| 一区二区av电影网| 色哟哟·www| 久久影院123| 精品午夜福利在线看| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 综合色丁香网| 日本欧美国产在线视频| 在线免费观看不下载黄p国产| 水蜜桃什么品种好| 2021少妇久久久久久久久久久| 亚洲国产色片| 久久久久国产精品人妻一区二区| 久久人人爽人人片av| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 美女脱内裤让男人舔精品视频| 亚洲av国产av综合av卡| 精品久久久久久电影网| 青春草亚洲视频在线观看| 女性被躁到高潮视频| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕 | 麻豆成人av视频| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 国产免费又黄又爽又色| 久久鲁丝午夜福利片| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 亚洲精品,欧美精品| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 黄片播放在线免费| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 十八禁高潮呻吟视频| 欧美激情国产日韩精品一区| 人成视频在线观看免费观看| 亚洲av.av天堂| 天美传媒精品一区二区| 五月天丁香电影| 久久精品国产亚洲av天美| 黄色配什么色好看| 亚洲精品,欧美精品| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| videossex国产| 少妇熟女欧美另类| 国产高清三级在线| 黄色配什么色好看| 免费高清在线观看视频在线观看| 日本vs欧美在线观看视频| 亚洲情色 制服丝袜| av女优亚洲男人天堂| 如何舔出高潮| 精品视频人人做人人爽| 欧美人与善性xxx| videosex国产| 免费高清在线观看日韩| 久久免费观看电影| 少妇人妻 视频| 国产精品一区二区在线不卡| 校园人妻丝袜中文字幕| a级毛片黄视频| 国产深夜福利视频在线观看| 国产伦理片在线播放av一区| 亚洲第一区二区三区不卡| 精品国产乱码久久久久久小说| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 久久99蜜桃精品久久| 久久精品人人爽人人爽视色| 亚洲av中文av极速乱| 七月丁香在线播放| 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲精品日本国产第一区| 18禁观看日本| 考比视频在线观看| av.在线天堂| 欧美日韩在线观看h| 大片电影免费在线观看免费| 黄色毛片三级朝国网站| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 熟女人妻精品中文字幕| 九九爱精品视频在线观看| 岛国毛片在线播放| 久久久午夜欧美精品| 日日撸夜夜添| 久久青草综合色| 久久99热6这里只有精品| 少妇的逼水好多| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 国产精品成人在线| av又黄又爽大尺度在线免费看| 成人无遮挡网站| 亚洲不卡免费看| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 只有这里有精品99| 亚洲av福利一区| 成人无遮挡网站| 国产精品国产三级国产专区5o| 日韩视频在线欧美| videosex国产| 国产极品粉嫩免费观看在线 | 成人亚洲欧美一区二区av| 精品国产露脸久久av麻豆| 国产黄色免费在线视频| 日韩大片免费观看网站| 卡戴珊不雅视频在线播放| 秋霞在线观看毛片| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 成人综合一区亚洲| 久久久久国产网址| 成人毛片a级毛片在线播放| 3wmmmm亚洲av在线观看| av一本久久久久| 黄色怎么调成土黄色| 免费日韩欧美在线观看| 日韩一区二区三区影片| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | 最近手机中文字幕大全| 国内精品宾馆在线| 国产精品国产三级国产专区5o| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国产精品一区二区在线观看99| 日本av免费视频播放| av一本久久久久| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| a级毛色黄片| 熟女av电影| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 午夜久久久在线观看| 老司机亚洲免费影院| 日本欧美视频一区| 全区人妻精品视频| 一区二区av电影网| 男男h啪啪无遮挡| 国产精品久久久久久久久免| 97超碰精品成人国产| 日韩av在线免费看完整版不卡| 夫妻午夜视频| 男人爽女人下面视频在线观看| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 老司机亚洲免费影院| 亚洲少妇的诱惑av| 波野结衣二区三区在线| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 日本免费在线观看一区| 日韩一区二区视频免费看| 国产69精品久久久久777片| 国产免费视频播放在线视频| 日韩三级伦理在线观看| 这个男人来自地球电影免费观看 | 国产免费福利视频在线观看| 欧美变态另类bdsm刘玥| 飞空精品影院首页| 美女cb高潮喷水在线观看| 久久综合国产亚洲精品| 三上悠亚av全集在线观看| 亚洲成色77777| 街头女战士在线观看网站| 黄片播放在线免费| 中文字幕免费在线视频6| kizo精华| 欧美日韩成人在线一区二区| 成人漫画全彩无遮挡| 欧美亚洲日本最大视频资源| 中国美白少妇内射xxxbb| 欧美精品一区二区大全| 夫妻午夜视频| 午夜激情av网站| 午夜免费观看性视频| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 午夜福利影视在线免费观看| 在线免费观看不下载黄p国产| 纯流量卡能插随身wifi吗| 97在线人人人人妻| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 黑人猛操日本美女一级片| 久久人人爽人人片av| 国产色婷婷99| 伊人久久国产一区二区| 韩国高清视频一区二区三区| 日本av手机在线免费观看| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 免费观看a级毛片全部| 夫妻性生交免费视频一级片| 亚洲无线观看免费| 天天影视国产精品| 欧美亚洲日本最大视频资源| av不卡在线播放| 国国产精品蜜臀av免费| 日韩制服骚丝袜av| 精品少妇内射三级| 久久久久久久国产电影| 伦理电影大哥的女人| 日本wwww免费看| 亚洲高清免费不卡视频| 三级国产精品片| 欧美亚洲日本最大视频资源| 在线观看人妻少妇| kizo精华| 尾随美女入室| 男女边摸边吃奶| 日韩强制内射视频| 丰满乱子伦码专区| 午夜激情久久久久久久| 亚洲国产av影院在线观看| 一区在线观看完整版| 亚洲综合精品二区| av视频免费观看在线观看| 精品亚洲成a人片在线观看| 天堂俺去俺来也www色官网| 国产精品一区www在线观看| 在线 av 中文字幕| 热re99久久国产66热| 在线观看美女被高潮喷水网站| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 亚洲av.av天堂| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国产成人精品在线电影| 伊人久久精品亚洲午夜| 另类亚洲欧美激情| 亚洲欧美色中文字幕在线| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 在线 av 中文字幕| 午夜福利影视在线免费观看| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 亚洲国产精品一区三区| 欧美另类一区| 亚洲欧洲日产国产| 国产精品久久久久久久电影| 中文字幕人妻丝袜制服| 天天操日日干夜夜撸| 久久热精品热| 国产黄频视频在线观看| 26uuu在线亚洲综合色| 国产伦精品一区二区三区视频9| 日韩制服骚丝袜av| 日韩中文字幕视频在线看片| 男女边吃奶边做爰视频| 18禁在线播放成人免费| 视频中文字幕在线观看| 搡老乐熟女国产| 国产片内射在线| 久久人人爽人人爽人人片va| 边亲边吃奶的免费视频| 亚洲在久久综合| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 午夜免费男女啪啪视频观看| 国产男人的电影天堂91| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 久久久久精品久久久久真实原创| 久久久久久久久久久久大奶| 91久久精品电影网| 男女免费视频国产| 午夜福利网站1000一区二区三区| 大陆偷拍与自拍| 国产精品.久久久| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 少妇被粗大的猛进出69影院 | av在线老鸭窝| 高清在线视频一区二区三区| av黄色大香蕉| 久久久a久久爽久久v久久| 丝袜在线中文字幕| 婷婷成人精品国产| 纯流量卡能插随身wifi吗| 免费黄网站久久成人精品| 亚洲精品国产av蜜桃| 蜜桃国产av成人99| 18禁动态无遮挡网站| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 十八禁高潮呻吟视频| 国产高清三级在线| 精品一区二区三卡| 国产午夜精品一二区理论片| 午夜福利,免费看| 另类亚洲欧美激情| 亚洲性久久影院| 女性生殖器流出的白浆| 99国产综合亚洲精品| 三级国产精品欧美在线观看| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 国产成人精品无人区| 母亲3免费完整高清在线观看 | 狠狠精品人妻久久久久久综合| 亚洲不卡免费看| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 亚洲精品久久成人aⅴ小说 | 女的被弄到高潮叫床怎么办| 国产爽快片一区二区三区| 欧美激情国产日韩精品一区| 国产极品粉嫩免费观看在线 | 日日摸夜夜添夜夜爱| 国产69精品久久久久777片| 欧美变态另类bdsm刘玥| 交换朋友夫妻互换小说| 久久久久久伊人网av| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 丰满少妇做爰视频| 我要看黄色一级片免费的| 午夜激情福利司机影院| 欧美 日韩 精品 国产| tube8黄色片| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 观看av在线不卡| 亚洲综合色惰| 激情五月婷婷亚洲| 大片免费播放器 马上看| 色婷婷久久久亚洲欧美| 性色avwww在线观看| 中文字幕久久专区| 69精品国产乱码久久久| 曰老女人黄片| 久久久久久久久久人人人人人人| 精品久久国产蜜桃| 亚洲国产成人一精品久久久| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 久久久久网色| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 男男h啪啪无遮挡| 九草在线视频观看| 青青草视频在线视频观看| 国产免费又黄又爽又色| av福利片在线| 能在线免费看毛片的网站| 国产成人午夜福利电影在线观看| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 久久久久国产网址| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 亚洲精品成人av观看孕妇| 欧美最新免费一区二区三区| 国产黄片视频在线免费观看| 另类亚洲欧美激情| 亚洲精品乱久久久久久| 免费黄色在线免费观看| 欧美人与善性xxx| 在线观看三级黄色| 亚洲精品国产av蜜桃| 精品人妻偷拍中文字幕| 最近中文字幕高清免费大全6| 欧美精品高潮呻吟av久久| 国产免费一级a男人的天堂| 亚洲,一卡二卡三卡| 国产成人精品一,二区| 精品国产乱码久久久久久小说| 九色亚洲精品在线播放| 亚洲第一区二区三区不卡| 99九九线精品视频在线观看视频| tube8黄色片| 少妇被粗大猛烈的视频| 亚洲精品成人av观看孕妇| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 91精品伊人久久大香线蕉| 黄色一级大片看看| 91精品三级在线观看| 大话2 男鬼变身卡| 在线 av 中文字幕| 我的老师免费观看完整版| 亚洲国产色片| 国产精品人妻久久久影院| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕 | xxxhd国产人妻xxx| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 狂野欧美激情性bbbbbb| 亚洲av国产av综合av卡| 日韩一区二区三区影片| 成人手机av| 久久久精品区二区三区| 亚洲精品aⅴ在线观看| 男人爽女人下面视频在线观看| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 丝袜脚勾引网站| 高清黄色对白视频在线免费看| 国产精品久久久久成人av| av.在线天堂| 国模一区二区三区四区视频| 老司机影院毛片| 在线观看免费高清a一片| 岛国毛片在线播放| 毛片一级片免费看久久久久| 亚洲经典国产精华液单| av国产精品久久久久影院| 99国产精品免费福利视频| 欧美性感艳星| 欧美激情国产日韩精品一区| 亚洲精品久久午夜乱码| 精品酒店卫生间| 精品国产国语对白av| 99视频精品全部免费 在线| 亚洲精品国产av成人精品| 国产免费一级a男人的天堂| 97精品久久久久久久久久精品| 亚洲一区二区三区欧美精品| 水蜜桃什么品种好| 亚洲精品自拍成人| 午夜激情福利司机影院| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 蜜桃国产av成人99| 亚洲av福利一区| 99国产精品免费福利视频| 美女cb高潮喷水在线观看| 大香蕉久久成人网| 极品少妇高潮喷水抽搐| 久久影院123| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 免费黄色在线免费观看| 亚洲伊人久久精品综合| 考比视频在线观看| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 婷婷色麻豆天堂久久| 久久久久久久久久久丰满| 丰满乱子伦码专区| 夫妻性生交免费视频一级片| 久久人人爽人人片av| 色婷婷av一区二区三区视频| 免费看不卡的av| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 搡老乐熟女国产| 99视频精品全部免费 在线| 男人爽女人下面视频在线观看| 交换朋友夫妻互换小说| 丝袜美足系列| 国产精品一二三区在线看| 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲国产精品成人久久小说| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 简卡轻食公司| 久久热精品热| 欧美丝袜亚洲另类| av免费观看日本| 久久久久久久大尺度免费视频| 18在线观看网站| 国产精品一二三区在线看| 国产精品无大码| 亚洲少妇的诱惑av| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 亚洲av综合色区一区| 国产精品人妻久久久影院| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 男人爽女人下面视频在线观看| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 久久这里有精品视频免费| 日日摸夜夜添夜夜爱| 寂寞人妻少妇视频99o| 日本黄色片子视频| 97超视频在线观看视频| 尾随美女入室| 日韩亚洲欧美综合| 成人国产麻豆网| 国产不卡av网站在线观看| 亚洲精品国产av成人精品| 午夜av观看不卡| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 久久午夜综合久久蜜桃| 插逼视频在线观看| 999精品在线视频| 精品久久久久久久久av| 亚洲av二区三区四区| a级毛色黄片| 国产一区亚洲一区在线观看| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 国产片特级美女逼逼视频| 精品国产一区二区久久| 国产不卡av网站在线观看| 国产精品久久久久成人av| av福利片在线| 国产不卡av网站在线观看| 久久国内精品自在自线图片| 一区在线观看完整版| 精品人妻在线不人妻| 一区二区三区乱码不卡18| 男人操女人黄网站| 精品视频人人做人人爽| av国产久精品久网站免费入址| 欧美精品一区二区免费开放| 免费人成在线观看视频色| 卡戴珊不雅视频在线播放| 亚洲一区二区三区欧美精品| 涩涩av久久男人的天堂| 中国国产av一级| 人妻夜夜爽99麻豆av| 亚洲不卡免费看| 人人澡人人妻人| 伊人亚洲综合成人网| 涩涩av久久男人的天堂| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 美女大奶头黄色视频| 日日啪夜夜爽| 校园人妻丝袜中文字幕| 亚洲精品aⅴ在线观看| 极品少妇高潮喷水抽搐| 国产黄片视频在线免费观看| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 一级爰片在线观看| 亚洲高清免费不卡视频| 制服诱惑二区| 国产午夜精品一二区理论片| 国内精品宾馆在线| 国产伦精品一区二区三区视频9|