蘿卜硫素的成藥性及其在腫瘤和神經(jīng)退行性疾病中的作用*

吳見樂 劉錫建 劉儒華 江峰1， 繆丹

（1）贛南醫(yī)學(xué)院，江西省醫(yī)用組織工程材料與生物制造重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，贛州 341000；2）贛南醫(yī)學(xué)院康復(fù)學(xué)院，贛州 341000；3）上海工程技術(shù)大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院，上海 201620；4）贛州華漢生物科技有限公司，贛州 341100）

蘿卜硫素（sulforaphane，SFN）是從十字花科類蔬菜中發(fā)現(xiàn)具有強(qiáng)生物活性的天然化合物，在西蘭花中含量最高，其誘導(dǎo)ⅠⅠ相解毒酶的活力是槲皮素的14倍，抗氧化能力是槲皮素的20倍、姜黃素的80倍，具有極高的營養(yǎng)價(jià)值和藥用潛力，因此逐漸成為研究熱點(diǎn)［1］。研究發(fā)現(xiàn)，SFN主要通過作用于核轉(zhuǎn)錄因子紅系2相關(guān)因子2（nuclear factor erythroid 2 related factor 2，Nrf2）、核因子κB（nuclear factor κB，NF-κB）、熱休克因子1（heat shock factor 1，HSF1）和表觀遺傳修飾［2］，顯示出抗腫瘤［3］、抗炎［4］、改善糖尿?。?］和心血管疾?。?］等藥理活性（圖1），可用于癌癥［3］、神經(jīng)退行性疾?。╪eurodegenerative disease，NDD）［7］、炎癥疾?。?］等的治療。本文主要對(duì)蘿卜硫素的藥代動(dòng)力學(xué)、分子靶點(diǎn)、安全性及其在腫瘤和神經(jīng)退行性疾病中的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

Fig. 1 Structural formula of sulforaphane and its pharmacological activity圖1 蘿卜硫素的結(jié)構(gòu)式及其藥理活性

1 SFN的藥代動(dòng)力學(xué)

SFN作為一種親脂性小分子很容易通過被動(dòng)擴(kuò)散被小腸吸收［9］。Clarke等［10］對(duì)小鼠灌胃5 μmol和20 μmol SFN，以比較肝臟、腎臟、小腸、結(jié)腸、肺、腦和前列腺中SFN及其代謝物在不同時(shí)刻的變化，發(fā)現(xiàn)SFN及其代謝物在小腸中的濃度最高，同時(shí)濃度在灌胃2 h后達(dá)峰，隨后迅速下降。此外，當(dāng)SFN被小腸吸收后，在谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶（glutathione S-transferase，GST）作用下，能夠快速與谷胱甘肽（glutathione，GSH）形成SFNGSH。Petri等［11］發(fā)現(xiàn)，小腸里大部分SFN-GSH是通過血液進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)，剩下的SFN-GSH則通過膜結(jié)合蛋白從腸腔排泄。Gu等［12］表明，SFNGSH是SFN在體內(nèi)運(yùn)輸?shù)闹饕x物。但由于其本身結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，加上血漿中的GSH含量很低，使SFN-GSH在血漿中易分解成SFN和GSH，游離出的SFN可與血清白蛋白結(jié)合，從而被轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟、腎臟等器官［13-14］。研究結(jié)果表明，無論是人口服還是大鼠灌胃SFN或者西蘭花提取物，SFN會(huì)在12~24 h內(nèi)通過疏基酸途徑基本全部排泄［15-16］。在肝臟和腎臟中，SFN與GSH在GST作用下生成SFN-GSH，經(jīng)疏基尿酸途徑依次代謝成蘿卜硫素-半胱氨酸-甘氨酸（SFN-Cys-Gly）、蘿卜硫素-半胱氨酸（SFN-Cys）和蘿卜硫素-N-乙酰半胱氨酸（SFN-NAC），最后經(jīng)過膽汁和尿液排泄［17］（圖2）。更多實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，SFN的代謝物主要是通過尿液排泄［12］，例如，Kassahun等［18］給大鼠灌胃50 mg/kg SFN，在24 h后檢測(cè)尿液中SFN不同代謝物的含量，發(fā)現(xiàn)在尿液中SFN-NAC占灌胃劑量的60%。Zhang等［16］也證實(shí)，當(dāng)人口服西蘭花提取物時(shí)，其尿液中SFN的代謝物以SFN-NAC為主?？傊琒FN在人體小腸部位所吸收，并迅速與GSH結(jié)合生成SFN-GSH，隨后經(jīng)疏基酸途徑代謝為SFN-NAC，且主要通過尿液排泄。

Fig. 2 Mercapturic acid pathway of sulforaphane in vivo圖2 蘿卜硫素在體內(nèi)的疏基酸代謝途徑

在生物利用度方面，Hanlon等［19］對(duì)大鼠灌胃不同劑量的SFN，發(fā)現(xiàn)SFN的絕對(duì)生物利用度與其劑量有關(guān)，在5 mg/kg下SFN的絕對(duì)生物利用度僅為20%，1 mg/kg劑量下的絕對(duì)生物利用度為25%，但0.5 mg/kg劑量下的絕對(duì)生物利用度達(dá)到了82%，推測(cè)可能是血液中與SFN結(jié)合的蛋白質(zhì)較少，游離形式的SFN更容易通過尿液排出體外，導(dǎo)致SFN的生物利用度隨著劑量的增加而下降。Son等［20］對(duì)大鼠灌胃0.1、0.2、0.5 mg/kg SFN后發(fā)現(xiàn)其半衰期分別是（41.9±7.60）min、（197.7±16）min、（320±75.4）min，推測(cè)導(dǎo)致上述差異可能是血漿結(jié)合蛋白的原因。由于SFN具有半衰期短，穩(wěn)定性差等特點(diǎn)，研究人員發(fā)現(xiàn)將SFN微膠囊化或者用納米材料包裹可以提高其生物利用度和穩(wěn)定性［21-22］。比如，Kheiri等［23］用聚己內(nèi)酯-聚乙二醇-聚己內(nèi)酯組成的納米顆粒負(fù)載SFN發(fā)現(xiàn)，SFN在大鼠體內(nèi)的半衰期由0.5 h延長到4 h，相對(duì)生物利用度則是相同劑量SFN的55.85倍。Wang等［24］也發(fā)現(xiàn)用小米和玉米提取的醇溶蛋白制作納米顆?？砂黃FN，其熱穩(wěn)定性和生物利用度得到了很大的提高，這表明在未來SFN與納米材料相結(jié)合可更好提高其療效。

2 SFN及其分子靶點(diǎn)

2.1 SFN作用于Nrf2信號(hào)通路

大量研究表明，SFN是Nrf2的天然強(qiáng)力誘導(dǎo)劑之一。Takaya等［25］發(fā)現(xiàn)，SFN主要靶向Kelch樣ECH相關(guān)蛋白（kelch liked ECH-associated protein 1，Keap1）的半胱氨酸（Cys15）殘基，通過硫醇基團(tuán)與Keap1形成硫酰復(fù)合物，從而阻止Keap1與Cul3（Cullin 3）形成的復(fù)合物對(duì)Nrf2泛素化，使Nrf2能夠進(jìn)入細(xì)胞核。當(dāng)Nrf2進(jìn)入細(xì)胞核后會(huì)與sMaf（small Musculo-aponeurotic-factor）家族成員形成異二聚體Nrf2-sMaf，再與抗氧反應(yīng)元件（antioxidant response element，ARE）結(jié)合，并調(diào)節(jié)抗氧化酶，比如醌脫氫酶1（quinone dehydrogenase 1，NAPDH）、血紅素加氧酶1（heme oxygenase-1，HO-1）、GST等的轉(zhuǎn)錄和激活［26］。此外，Eren等［27］發(fā)現(xiàn)，SFN可通過激活細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1和2（extracellular signalregulated kinase 1 and 2，ERK1/2），使Nrf2進(jìn)入核內(nèi)從而達(dá)到抗氧化和抗炎的效果。Wang等［28］研究證實(shí)，SFN可通過分別激活ERK1/2和蛋白激酶B（protein kinase B，PKB）使Nrf2進(jìn)入細(xì)胞核，從而激活ⅠⅠ相解毒酶。Banerjee等［29］的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，SFN還可以通過介導(dǎo)絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）亞族P38從而導(dǎo)致Nrf2進(jìn)入細(xì)胞核（圖3）?？傊?，SFN通過激活Nrf2信號(hào)通路可以激活一系列的ⅠⅠ相解毒酶和抗氧化蛋白酶，從而維持機(jī)體內(nèi)活性氧（ROS）的正常水平［4］。

Fig. 3 Diagram of the mechanism of sulforaphane related signaling molecular targets圖3 蘿卜硫素的相關(guān)信號(hào)分子靶點(diǎn)機(jī)制圖

2.2 SFN作用于NF-κB信號(hào)通路

當(dāng)受到外界刺激時(shí)，經(jīng)典NF-κB信號(hào)通路中的核因子κB抑制蛋白α（inhibitor alpha of NF-κB，ⅠκBα）被其激酶迅速磷酸化和泛素化，隨后NF-κB亞基（p65和p50）進(jìn)入細(xì)胞核與DNA結(jié)合，從而激活下游促炎信號(hào)分子比如腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白介素（interleukin，ⅠL）-1、ⅠL-2和ⅠL-6的表達(dá)［26］。Nallasamy等［30］在脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）誘導(dǎo)的單核細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，TNF-α是NF-κB的有效激活劑，SFN可通過介導(dǎo)TNF-α從而抑制對(duì)ⅠκBα的磷酸化導(dǎo)致NF-κB亞基進(jìn)入細(xì)胞核受到抑制。同時(shí)，Moon等［31］的研究結(jié)果也表明，SFN可完全抑制TNF-α誘導(dǎo)的ⅠκBα磷酸化，將p65和p50隔離在細(xì)胞質(zhì)中。此外，NF-κB在進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)需要高比例的還原型GSH/氧化型GSH來激活，且核內(nèi)的NF-κB與DNA結(jié)合需要大量的Cys的參與［32］。Heiss等［33］發(fā)現(xiàn)，SFN很容易與還原性GSH結(jié)合形成硫醇結(jié)合物，使還原型GSH的濃度水平降低，從而抑制NF-κB與核內(nèi)其DNA的結(jié)合。Liu等［34］也表明，SFN在短時(shí)間內(nèi)會(huì)降低GSH的濃度，從而抑制NF-κB活性。此外，研究人員發(fā)現(xiàn)Nrf2下游信號(hào)分子HO-1的濃度上升也會(huì)抑制NF-κB的活性［35］（圖3）。Bellezza等［36］發(fā)現(xiàn)，HO-1會(huì)導(dǎo)致膽綠素降解為膽紅素，從而降低NF-κB亞基在核內(nèi)與其DNA結(jié)合。Seldon等［37］也發(fā)現(xiàn)，HO-1催化血紅素裂解為Fe2+，從而抑制NF-κB亞基在核內(nèi)與DNA結(jié)合。Huang等［38］研究表明，SFN可以通過激活Nrf2/HO-1介導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞氧化從而抑制NF-κB的表達(dá)，進(jìn)而預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生。

2.3 SFN作用于HSF1-HSP信號(hào)通路

HSF1作為腫瘤和NDD的潛在藥物靶點(diǎn)，近年來被廣泛研究［39］。研究人員發(fā)現(xiàn)在非應(yīng)激條件下，HSF1與熱休克蛋白（heat shock protein，HSP）家族成員HSP40、HSP70、HSP90以及TRic復(fù)合物（tailless complex polypeptide 1 ring complex，TRic）結(jié)合在細(xì)胞質(zhì)，在應(yīng)激條件下，HSF1被磷酸化，與上述復(fù)合物分離，形成三聚體易位到細(xì)胞核中，與其DNA基序（HSF）結(jié)合，并激活HSP27、HSP70、HSP90的轉(zhuǎn)錄［40］（圖3）。HSF1通過激活HSP參與細(xì)胞凋亡、DNA修復(fù)、代謝調(diào)節(jié)等，從而影響腫瘤和NDD的發(fā)生、發(fā)展［41-42］。Gan等［43］在體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，SFN以濃度和時(shí)間依賴的方式促進(jìn)HSF1進(jìn)入細(xì)胞核，激活HSP27磷酸化，并誘導(dǎo)蛋白酶活化，修復(fù)錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)。之后，Lellahi等［44］也在體外實(shí)驗(yàn)表明SFN可通過激活HSF1誘導(dǎo)非編碼RNA NEAT1（nuclear enriched abundant transcript 1，NEAT1）的表達(dá)，激活HSP90、HSP70、HSP27，從而抑制有害蛋白質(zhì)的聚集，保護(hù)正常細(xì)胞。

2.4 SFN作用于表觀遺傳修飾

研究發(fā)現(xiàn)，導(dǎo)致癌癥的主要因素之一是表觀遺傳修飾發(fā)生改變，主要包括組蛋白去乙酰化酶（histone deacetyltransferases，HDAC）、DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（DNA methyltransferase，DNMT）的活性增加以及非編碼的RNA表達(dá)［45］。Blaheta等［46］發(fā)現(xiàn)SFN是HDAC的天然抑制劑之一，Jiang等［47］研究表明，SFN可通過抑制HDAC導(dǎo)致組蛋白H3和H4表達(dá)水平上升，使腫瘤抑制基因P21、P53和促凋亡蛋白Bax被重新激活從而導(dǎo)致肺癌細(xì)胞的凋亡。越來越多證據(jù)表明，SFN也是DNMT的潛在調(diào)節(jié)劑，許多癌癥細(xì)胞周期相關(guān)因子P21、P16、D型細(xì)胞周期蛋白和部分miRNA的啟動(dòng)子呈現(xiàn)高甲基化與DNMT激活密切相關(guān)［48］。例如，在肺癌中miRNA家族成員miR-9-3的啟動(dòng)子呈現(xiàn)高甲基化，Gao等［49］發(fā)現(xiàn)，SFN通過抑制DNMT的活性降低miR-9-3的啟動(dòng)子CpG高甲基化，從而使miR-9-3被激活。Hsu等［50］也發(fā)現(xiàn)，SFN通過介導(dǎo)DNMT降低細(xì)胞周期D2蛋白啟動(dòng)子的DNA甲基化，從而抑制前列腺癌細(xì)胞的增殖（圖3）。SFN可通過表觀遺傳修飾靶向Nrf2/Keap1，但其具體作用機(jī)制還未明確［51］。

3 SFN藥理活性研究

3.1 腫瘤

研究發(fā)現(xiàn)，SFN可以參與肺癌［52］、乳腺癌［53］、膀胱癌［54］等癌癥的發(fā)生與發(fā)展（表1）。Yan等［52］發(fā)現(xiàn)，SFN會(huì)抑制非小細(xì)胞型肺癌細(xì)胞A549和SK-1微管蛋白的活性，導(dǎo)致脂肪酸的合成減少和線粒體自噬從而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。Wang等［55］研究也表明，SFN可通過抑制Shh（sonic hedgehog）和PHC3（polycomb group molecule human polyhomeotic homolog 3）的表達(dá)，使非小細(xì)胞型肺癌細(xì)胞A549和H460活力下降同時(shí)抑制其增殖。而Ⅰida等［56］還發(fā)現(xiàn)，SFN可通過介導(dǎo)鐵死亡誘導(dǎo)小細(xì)胞肺癌細(xì)胞H69和H69AR凋亡，進(jìn)而達(dá)到抗癌的效果。

Table 1 Research results of sulforaphane in cancer within the last 3 years表1 近3年內(nèi)蘿卜硫素在癌癥的研究成果

SFN也有很好的治療乳腺癌效果。Zhang等［53］發(fā)現(xiàn)，SFN會(huì)抑制乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231和MDA-MB-157的遷移和侵襲。在7.5~30 μmol/L SFN的劑量范圍內(nèi)，隨著SFN的劑量增加，抑制效果更強(qiáng)。而且，SFN的兩種同分異構(gòu)體R-SFN和S-SFN對(duì)上述兩種乳腺癌細(xì)胞的抑制效果幾乎一樣。Palliyaguru等［57］在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，SFN可以預(yù)防經(jīng)17β-雌二醇處理的ACⅠ大鼠乳腺腫瘤的形成，并且還可通過降低ACⅠ大鼠體內(nèi)游離的脂肪酸和甘油三脂去抑制腫瘤的形成。此外，Rong等［58］在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，SFN與阿霉素協(xié)同用藥治療乳腺癌優(yōu)于單一用藥，而Sharma等［59］在體外實(shí)驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)，SFN、染料木黃酮和丁酸鈉聯(lián)合用藥治療乳腺癌效果是最好的，這些結(jié)果表明了SFN與臨床上治療乳腺癌藥物聯(lián)合用藥的前景。

SFN具有一定的治療膀胱癌的作用。Wang等［54］發(fā)現(xiàn)，在20~80 μmol/L劑量范圍內(nèi)，SFN以劑量依賴的方式抑制膀胱癌細(xì)胞T24和SW780的活力、轉(zhuǎn)移和侵襲，同時(shí)也抑制脂肪非典型鈣黏蛋白（FAT atypical cadherin 1，F(xiàn)AT1）表達(dá)使上述細(xì)胞發(fā)生凋亡。He等［60］也得到了相似的結(jié)果，SFN可通過誘導(dǎo)Nrf2進(jìn)入細(xì)胞核引起GSH消耗，從而抑制T24增殖。Justin等［61］研究表明，SFN與依維莫司聯(lián)合用藥可抑制膀胱癌細(xì)胞RT112的耐藥性。

SFN也可抑制前列腺癌、宮頸癌和胃腸道相關(guān)腫瘤細(xì)胞的增殖［3］。Rutz等［62］發(fā)現(xiàn)，與前列腺癌細(xì)胞PC-3和DU-145孵育24 h后，SFN會(huì)導(dǎo)致兩株細(xì)胞在G2/M周期的數(shù)量減少，S期細(xì)胞數(shù)量增加。Wang等［63］發(fā)現(xiàn)，SFN在5~50 μmol/L給藥范圍和24~48 h孵育時(shí)長內(nèi)能以時(shí)間和劑量依賴的方式抑制宮頸癌細(xì)胞SiHa、HeLa和C33A增殖。在胃腸道相關(guān)癌癥方面，Wang等［64］等發(fā)現(xiàn)SFN對(duì)胃癌有預(yù)防作用；Zheng等［65］通過體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)SFN在食管癌中有一定的抗癌效果；Hao等［66］發(fā)現(xiàn)SFN可以抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞HT-29和SW480的增殖。

3.2 神經(jīng)退行性疾病

NDD在全世界的患病率和死亡率不斷增加，是危害人類身體健康的重大問題之一。NDD主要包括阿爾茨海默?。ˋlzheimer’s disease，AD）、帕金森?。≒arkinson’s disease，PD）、亨廷頓?。℉untington diseases，HD）、多發(fā)性硬化癥（multiple sclerosis，MS）等［80］。NDD作為一種常見的疾病，現(xiàn)今很少或者沒有有效的治療手段。越來越多的研究人員發(fā)現(xiàn)SFN作為親脂小分子，易穿過血腦屏障，從而保護(hù)中樞神經(jīng)元，在治療NDD方面有著很大的潛力［7］（表2）。

Table 2 Research results of sulforaphane in neurodegenerative disease within the last 3 years表2 近3年內(nèi)蘿卜硫素在神經(jīng)退行性疾病的研究成果

AD的主要病理特征是β淀粉樣蛋白（β amyloid protein，Aβ）積聚形成細(xì)胞外神經(jīng)炎性斑塊和異常磷酸化的Tau蛋白錯(cuò)誤折疊、聚集形成的神經(jīng)纖維纏結(jié)，從而引起過量ROS生成和神經(jīng)元死亡，導(dǎo)致記憶力減退和認(rèn)知功能下降［81-82］。Villavicencio-Tejo等［83］的體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，SFN可以抑制異常磷酸化Tau蛋白聚集所引起的線粒體功能障礙和ROS的增加，引起（標(biāo)記GFP、GFPT4和GFP-T4C3的Tau構(gòu)建體）CN 1.4細(xì)胞線粒體產(chǎn)生的ATP增加以及ⅠⅠ相解毒酶表達(dá)的增加。Tang等［84］通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，每日注射24 μmol/L SFN的AD大鼠，在經(jīng)過7 d治療后，其認(rèn)知功能、記憶功能以及抑郁癥得到了一定的改善。導(dǎo)致上述結(jié)果的原因是SFN通過Nrf2信號(hào)通路使AD大鼠腦組織的炎癥因子ⅠL-1β和TNF-α濃度下降、ⅠⅠ相解毒酶GSH濃度的升高。

PD的主要病理特征是黑質(zhì)紋狀體中的多巴胺能（dopaminergic，DA）神經(jīng)元退化或者功能喪失［85］。研究發(fā)現(xiàn)，氧化應(yīng)激會(huì)使大腦中ROS增加，引發(fā)線粒體功能障礙和黑質(zhì)中的關(guān)鍵蛋白氧化，最終導(dǎo)致DA神經(jīng)元細(xì)胞發(fā)生死亡［86］。SFN可降低ROS的濃度，從而對(duì)PD有一定的治療效果。例如，Jazwa等［87］對(duì)DA損傷的小鼠腹腔注射240 μmol/L SFN后發(fā)現(xiàn)，SFN可以穿過血腦屏障，激活基底節(jié)的Nrf2從而抑制DA神經(jīng)元的變性和死亡。與對(duì)照組相比，DA神經(jīng)元損傷經(jīng)SFN治療3 d后減少了30%，治療6 d后減少了60%，其星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞也相應(yīng)減少。Morroni等［88］研究表明，SFN可以抑制退化DA神經(jīng)元產(chǎn)生的有毒物質(zhì)6-羥基多巴胺。他們先將6-羥基多巴胺注射到小鼠的紋狀體內(nèi)，再腹腔注射24 μmol/L SFN 4周后發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相對(duì)比，經(jīng)SFN治療的小鼠有兩個(gè)明顯改善的特征：a. 完整的DA神經(jīng)元增加，因6-羥基多巴胺導(dǎo)致小鼠大腦黑質(zhì)GSH減少的現(xiàn)象得到了逆轉(zhuǎn)；b. PD小鼠的運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)和旋轉(zhuǎn)等行為障礙有很大的改善。

SFN在治療HD、MS等疾病方面也有不錯(cuò)的療效，Jang等［89］發(fā)現(xiàn)，SFN可以抑制HD小鼠的小膠質(zhì)細(xì)胞活性、促炎因子的表達(dá)以及神經(jīng)細(xì)胞的凋亡，達(dá)到治療HD的效果。Yoo等［90］也發(fā)現(xiàn)，SFN可減少ROS和炎癥細(xì)胞的產(chǎn)生從而對(duì)MS小鼠有一定的保護(hù)功能。此外，Gillespie等［91］發(fā)現(xiàn)，SFN可以抑制LPS誘導(dǎo)的小鼠腦微血管血栓形成的時(shí)間，同時(shí)也會(huì)抑制血小板的聚集和活化，加快止血時(shí)間，防止腦血栓的形成。Li等［92］在缺血性腦卒中小鼠模型實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，在經(jīng)過SFN治療后，小鼠的學(xué)習(xí)、記憶功能顯著提高，且因腦卒中引起的神經(jīng)元細(xì)胞損傷和死亡也得到明顯改善。

4 SFN的安全性

Liu等［97］在體外實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，SFN濃度在20~80 μmol/L范圍內(nèi)，以劑量依賴方式降低人肝細(xì)胞HHL5和肝癌細(xì)胞HepG2的活力，當(dāng)SFN的濃度大于80 μmol/L時(shí)，兩種細(xì)胞活力都趨近于0。Soca?a等［98］在關(guān)于SFN的小鼠毒性實(shí)驗(yàn)中，單次腹腔注射超過200 mg/kg SFN，發(fā)現(xiàn)有一半的小鼠在24 h內(nèi)死亡，在150 mg/kg劑量下，部分小鼠會(huì)出現(xiàn)眼上瞼下垂，而在100 mg/kg劑量以下，未見小鼠不良反應(yīng)。同時(shí)，多項(xiàng)臨床研究表明，長期口服SFN在劑量范圍為9~36 mg內(nèi)，未見不良反應(yīng)［17，99］，Poulton等［100］在Ⅰ期臨床實(shí)驗(yàn)也表明，人每日口服高劑量SFN（80 mg），至少在一周內(nèi)未見任何健康問題?？傊趧?dòng)物實(shí)驗(yàn)和人體實(shí)驗(yàn)都表明了SFN具有很好的安全性。

5 展望

SFN作為一種由西蘭花提取得到具有強(qiáng)大生物活性的天然產(chǎn)物，近年來成為研究熱點(diǎn)。此前，本課題組改善了現(xiàn)有SFN的提取工藝，建立了更易工業(yè)化的高純度SFN工藝，為SFN的大量獲得奠定了基礎(chǔ)。雖然SFN易吸收，低濃度生物利用度高，但結(jié)構(gòu)不夠穩(wěn)定，易代謝排泄，使得其臨床應(yīng)用受限。為此，將SFN包裹于納米顆粒，可一定程度地改善其熱穩(wěn)定性和生物利用度。在藥效學(xué)和安全性方面，近年來關(guān)于SFN在癌癥、NDD的研究不斷增多，且都表明SFN在預(yù)防和治療上述疾病有著巨大潛力，多項(xiàng)Ⅰ/ⅠⅠ期臨床實(shí)驗(yàn)表明SFN有著良好的療效和安全性。此外，研究表明癌癥和NDD等疾病的發(fā)展與體內(nèi)ROS的濃度水平改變有著密切的聯(lián)系，SFN可誘導(dǎo)ROS的產(chǎn)生來引發(fā)癌細(xì)胞凋亡，SFN又可通過抑制ROS來預(yù)防或治療NDD，而Nrf2/Keap-1、NF-κB以及表觀遺傳修飾這3個(gè)途徑都可改變ROS的濃度，因此，有必要深入了解SFN如何作用于這3種途徑以及這3種途徑之間的相互關(guān)系，從而實(shí)現(xiàn)SFN在預(yù)防或改善NDD、腫瘤和其他疾病方面的作用。