★ 鞠康 夏東平 王甫成 馬健 周建理(1.安徽中醫(yī)藥科學(xué)院亳州中醫(yī)藥研究所 安徽亳州 26800;2.亳州職業(yè)技術(shù)學(xué)院 安徽 亳州 26800;.安徽中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 合肥 2001)
中藥材品種混亂一直是中藥的焦點問題[1],而微性狀鑒定方法因在中藥表面觀察細(xì)微特征清晰,適用于基層醫(yī)藥工作者。中藥烏蘞莓是中醫(yī)臨床常用中藥材,為葡萄科植物烏蘞莓的全草。主要產(chǎn)地是秦嶺以南的多個地區(qū),烏蘞莓喜濕耐旱,不耐寒,多生長在山谷、山坡、曠野、路邊、堤岸、溝旁的林中或攀附于其他物上[2]。烏蘞莓曾因生態(tài)環(huán)境相似,植物形態(tài)相像而與中藥絞股藍(lán)混淆。絞股藍(lán),是葫蘆科絞股藍(lán)屬植物,最早記載于明代《救荒本草》[3]:“絞股藍(lán),生田野中,延蔓而生,葉似小藍(lán)片,短小軟邊,邊有鋸齒形?!毙晕⒑?,味苦,微甘,有消炎解毒、止咳祛痰的功效。主要產(chǎn)地是陜西、甘肅、湖南等[4]。烏蘞莓與絞股藍(lán)雖然都有消炎解毒的作用,但是從現(xiàn)代藥理作用的角度,兩者化學(xué)成分和藥用價值大相徑庭,有著較為顯著的差異,烏蘞莓含有洋芹素、木犀草素、甾醇、黃酮類、氨基酸以及酚性物質(zhì)[5],藥理作用為防癌、抗菌、抗炎等,臨床應(yīng)用于咽喉腫痛、疥瘡、毒蛇咬傷[6]等。而絞股藍(lán)最主要的有效成分是絞股藍(lán)總皂苷,其余則含有糖類、黃酮、甾醇、氨基酸及微量元素[7]。藥理作用有降血脂、降血糖、延緩衰老、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、保護(hù)肝臟等[8]。臨床應(yīng)用于慢性氣管炎、失眠、血栓形成、血小板聚集和減少糖皮質(zhì)激素副作用等[9]。因此絞股藍(lán)有著“南方人參”的美譽(yù)[10],而市場上有烏蘞莓冒充絞股藍(lán)的現(xiàn)象。為了維護(hù)藥材質(zhì)量,保障用藥安全,筆者收集了烏蘞莓與絞股藍(lán)的鮮品與藥材進(jìn)行研究,運(yùn)用微性狀鑒定方法,為兩者的鑒別提供一些參考。
樣品采集信息見表2,烏蘞莓Cayratia japonica(Thunb.) Gagnep 由安徽中醫(yī)藥大學(xué)楊青山鑒定為正品,絞股藍(lán)Gynostemmapentaphyllum(Thunb.)Makino由安徽中醫(yī)藥高等學(xué)校劉學(xué)醫(yī)老師鑒定為正品。
表1 實驗樣品信息表
表2 烏蘞莓與絞股藍(lán)性狀鑒別
締倫光學(xué)TL2800A 生物顯微鏡;500 萬像素電子攝像目鏡(MC-D500U,鳳凰光學(xué)集團(tuán))。
清理樣品表面的灰塵、沙粒、絲絮等雜物,莖葉用刀具切開,用銼刀稍挫,保持切面平整,皺縮的藥材莖葉置于水中泡10 min,泡軟展開,用濾紙吸干水后,轉(zhuǎn)移至干凈的載玻片上。制片時需考慮角度擺放問題,以方便觀察不同微性狀特征。
將經(jīng)過處理完全的藥材制片以后放在生物顯微鏡下在4~10 倍區(qū)間物鏡觀察。因生物顯微鏡與微性狀鑒定效果較好的體視顯微鏡存在采光差距,以及單光路的緣故而缺少立體感,因此需要和電子目鏡及計算機(jī)結(jié)合來彌補(bǔ)差距。另外側(cè)面加上兩盞臺燈增強(qiáng)室內(nèi)光線,再加一張A4 紙墊在載玻片下方以達(dá)到聚光作用。觀察樣品各部位細(xì)節(jié)和微性狀特征,并用計算機(jī)拍10~20 張照片為佳,保存記錄。
微性狀與性狀沒有本質(zhì)區(qū)別,后者是前者的延伸,微性狀鑒別是在性狀鑒別基礎(chǔ)上的深入,因此筆者對烏蘞莓與絞股藍(lán)進(jìn)行了性狀鑒別。從藥材的形狀、色澤、表面特征、質(zhì)地、斷面特征等方面總結(jié)二者的差異要點。
3.1.1 鮮品性狀特征 烏蘞莓為葡萄科多年蔓生草本植物,花序為圓錐花序。分枝較多,莖具有縱溝紋,表面為綠色與紫紅色無規(guī)則相間。莖橫切面為不規(guī)則橢圓形,卷須與葉對生,卷須分叉。葉片基部楔形,葉為掌狀復(fù)葉呈鳥足狀復(fù)葉,小葉5 片。葉面質(zhì)地柔軟,無毛,容易破碎,葉緣有細(xì)細(xì)的鋸齒,小葉橢圓形。見圖1、表2。
圖1 鮮品性狀圖
絞股藍(lán)為葫蘆科多年生草質(zhì)藤本植物,花序是聚傘花序。分枝較少,莖表面嫩綠色,具有縱溝紋,莖橫切面為多邊形。卷須生長于葉腋,不分叉,與葉對生。葉片基部漸狹窄,葉為掌狀復(fù)葉,小葉5~7片,葉片較狹長,略富彈性,容易破碎,葉緣鋸齒狀,葉脈清晰,葉表面覆有細(xì)密的短硬毛。見圖1、表2。
3.1.2 藥材性狀特征 烏蘞莓藥材葉片呈褐綠色,質(zhì)脆,多為破碎狀,脈絡(luò)紋理較清晰。卷須纖細(xì),莖質(zhì)地堅硬,節(jié)膨大,顏色為黃褐色,有縱溝紋,斷面白色,具纖維性,浸水后口感微酸,氣味清香。見圖2。
圖2 藥材外觀圖
絞股藍(lán)藥材葉片呈深黃綠色,皺縮團(tuán)狀,復(fù)葉整體較完整,莖為淺黃綠色,節(jié)稍膨大,具有細(xì)縱溝紋,浸水后展開小葉,長3 cm,寬2 cm,小葉上表皮可見短絨毛密布,下表皮絨毛多分布于小葉脈上??诟形⒖?,氣味清香。見圖2。
烏蘞莓鮮品上下表皮未見腺毛,非腺毛集中于葉脈上,由單細(xì)胞或2 個細(xì)胞組成,單細(xì)胞形狀幼羊角形,頂端圓潤,部分非腺毛內(nèi)部分泌物呈黑色分布,壁極薄。見圖3、表3。
圖3 絞股藍(lán)與烏蘞莓鮮品毛狀體的微性狀鑒別
表3 烏蘞莓和絞股藍(lán)微性狀鑒別
絞股藍(lán)鮮品上下表皮均可見腺毛、非腺毛,腺毛腺頭呈球形,腺柄內(nèi)含黃棕色內(nèi)容物,由多細(xì)胞組成,直徑20 μm。非腺毛上表皮分散狀態(tài),有單細(xì)胞和多細(xì)胞兩類,非腺毛錐形,彎曲弧度較大,頂端尖銳,內(nèi)含類粉末狀分泌物。見圖3、表3。
烏蘞莓藥材上下表皮未見腺毛,非腺毛于葉脈上呈透明狀分布疏散,呈子彈狀排列,直徑10~20 μm。未見明顯內(nèi)含分泌物。見圖4、表3。
圖4 烏蘞莓與絞股藍(lán)藥材毛狀體微性狀鑒別圖
絞股藍(lán)藥材腺毛腺頭扁球形,可見幾道橫紋和豎紋零散分布,腺柄喇叭狀。非腺毛極長,4~5 個細(xì)胞圓球形排列,頂端尖長條狀,可見黑色環(huán)紋分泌物分布其中。最頂端可見黑色塊狀物體。見圖4、表3。
烏蘞莓鮮品氣孔:氣孔為不定式,副衛(wèi)細(xì)胞、表皮細(xì)胞排列緊密,輪廓分明,具有立體感。藥材氣孔:氣孔扁長狹窄,周圍細(xì)胞萎縮閉合。見圖5、表3。
圖5 烏蘞莓鮮品與絞股藍(lán)微性狀氣孔鑒別
絞股藍(lán)鮮品氣孔:氣孔為不定式,排列界線較不清晰,細(xì)胞視覺呈扁平化。藥材氣孔:氣孔不定式,寬扁圓形。見圖5、表3。
烏蘞莓鮮品葉表整體呈綠色顆粒感,葉緣外廓呈細(xì)細(xì)一層透明狀物質(zhì)或紫紅色外沿,具有無規(guī)則紋理,葉片緩尖,葉尖可見黑紅色,外黑內(nèi)紅,黑色呈塊狀,外有紅色環(huán)繞。見圖6、表3。
圖6 烏蘞莓與絞股藍(lán)葉片微性狀鑒別
絞股藍(lán)鮮品葉片急尖,葉表可見絨毛排列,特征明顯的白色透明短剛毛矗立。葉緣未見明顯異常。葉尖呈黃綠色。見圖6、表3。
本研究可知,烏蘞莓與絞股藍(lán)雖然有很多相似的外觀特征,如顏色相近,都是形態(tài)類似的鳥足狀復(fù)葉,都具有長長的卷須,容易讓人混淆。但筆者運(yùn)用微性狀鑒別法觀察烏蘞莓與絞股藍(lán),得出兩者在不同部位的微性狀特征存在明顯差異:絞股藍(lán)有腺毛及非腺毛并存,烏蘞莓只觀察到非腺毛。二者在非腺毛的形狀上也有很大區(qū)別,烏蘞莓非腺毛較圓潤短小,只有1 或2 個細(xì)胞組成,絞股藍(lán)則龐大尖銳,可見多細(xì)胞組成。葉表無絨毛,葉緣具有一圈透明的物質(zhì)包裹,葉尖有紅黑色塊狀物。葉表葉緣葉尖亦有很大區(qū)別,絞股藍(lán)葉表有絨毛及堅硬的短剛毛,葉尖呈黃色。氣孔雖都是不定式,氣孔形態(tài)和周圍細(xì)胞排列情況也不相同。烏蘞莓周圍細(xì)胞排列較緊密。絞股藍(lán)則氣孔較寬圓,絞股藍(lán)周圍細(xì)胞排列疏散。烏蘞莓氣孔較狹長。以上都是烏蘞莓與絞股藍(lán)的微性狀鑒別要點,幫助人們在微性狀角度鑒別形態(tài)相仿的兩味藥材。
筆者認(rèn)為中藥微性狀鑒定法依靠簡便的儀器、流程簡單的操作就可以對中藥材進(jìn)行較為準(zhǔn)確的鑒別,采用景深合成技術(shù)得出藥材圖像,在包括品種鑒別、真?zhèn)舞b別、摻雜、增重、霉變、非法染色等中藥材質(zhì)量問題上都有廣闊的應(yīng)用。由此窺知,微性狀鑒別法以其成本低廉、對技術(shù)操作要求低、實驗結(jié)果迅速直觀等特點,而避免分析檢驗耗時長、步驟繁瑣,儀器價格高昂、對基層檢驗人員的技術(shù)要求高等劣勢,成為基層工作中普及推廣的熱點鑒別方法。它是一種新興的、擁有巨大潛力和應(yīng)用前景的鑒定方法,對于中藥從事者的鑒別工作可以提供更進(jìn)一步的幫助。