豬流行性腹瀉病毒的研究進(jìn)展

摘" 要：豬流行性腹瀉（porcine epidemic diarrhea，PED）是一種由豬流行性腹瀉病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）引起的傳染病，具有傳染性強(qiáng)、致病性高、易傳播的特點(diǎn)。主要感染腸道上皮細(xì)胞，引起腸道上細(xì)胞損傷，從而影響腸道的吸收功能，感染后，病豬會出現(xiàn)嘔吐、腹瀉、食欲下降等癥狀，嚴(yán)重時可能導(dǎo)致脫水、死亡。本文從豬流行性腹瀉流行病學(xué)、病毒基因組及結(jié)構(gòu)、臨床癥狀及診斷進(jìn)展進(jìn)行綜述，旨在為豬流行性腹瀉的防控提供參考。

關(guān)鍵詞：PEDV；流行病學(xué)；診斷

中圖分類號：S852.61 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號：1001-0769（2024）03-0089-04

豬流行性腹瀉（porcine epidemic diarrhea，PED）是一種由豬流行性腹瀉病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）引起的接觸性傳染病，具有傳染性強(qiáng)、致病性高的特點(diǎn)，主要感染豬腸道上皮細(xì)胞，引起腸道上皮細(xì)胞的損傷，從而影響腸道的吸收功能。感染后，發(fā)病豬會出現(xiàn)食欲下降、嘔吐、腹瀉等癥狀，嚴(yán)重時可能導(dǎo)致脫水、死亡[1]。研究表明，不同年齡段的豬均會感染PEDV，但臨床癥狀有所不同，新生仔豬較易感，且發(fā)病率和死亡率較高[2]。1971年，PEDV首次被發(fā)現(xiàn)；1978年，Pensaert等[3]首次分離出PEDV的經(jīng)典毒株P(guān)EDV CV777株；1988年，Hofmann等[4]通過Vero細(xì)胞連續(xù)傳代，分離到PEDV。在過去的三十年中，PEDV的肆虐使歐洲和亞洲養(yǎng)豬業(yè)遭受了相當(dāng)嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。2013—2014年，美國、加拿大和墨西哥也相繼報(bào)道了PED[5]暴發(fā)，僅一年時間就損失了近七百萬頭仔豬，占美國養(yǎng)豬業(yè)的10％[6]。

我國早在1973年報(bào)道了PEDV[7]，1984年，Xuan等[8]通過血清中和實(shí)驗(yàn)，首次鑒定出PEDV。2010年，新型變異毒株迅速席卷中國，80％～100％的死亡率使我國養(yǎng)豬業(yè)受到很大影響[9]。PED的流行對世界養(yǎng)豬業(yè)有很大影響。一是PED發(fā)病率與死亡率很高，尤其是新生仔豬，其發(fā)病率和死亡率可達(dá)100％，給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。二是仔豬生長發(fā)育受阻。仔豬感染PEDV后，可能會出現(xiàn)生長停滯、消瘦，甚至死亡的情況。即能存活下來，也可能會成為僵豬，影響未來的生長發(fā)育和生產(chǎn)效益。三是母豬繁殖障礙。母豬感染PEDV后，可能會出現(xiàn)流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎等繁殖障礙，嚴(yán)重影響豬場的生產(chǎn)效益。四是傳染性強(qiáng)。PEDV具有很高的傳染性，可通過直接接觸、間接接觸和空氣等多種途徑進(jìn)行傳播，防控難度較大。豬場一旦暴發(fā)PED，很容易造成大規(guī)模的傳播和擴(kuò)散。五是免疫抑制。PEDV感染會導(dǎo)致豬的免疫系統(tǒng)受到抑制，免疫力下降，導(dǎo)致其他疾病的發(fā)病率增加，給養(yǎng)豬業(yè)帶來更大的生產(chǎn)壓力和損失。另外，PEDV可識別氨肽酶N（aminopeptidase N，APN）和N-乙酰神經(jīng)胺受體，這些受體普遍存在于人體細(xì)胞中，這增加了病毒感染人類的風(fēng)險[10]。目前還沒有特效藥物和疫苗可完全預(yù)防和控制PEDV的發(fā)生和傳播。

1" 流行病學(xué)

PED的流行具有一定的季節(jié)性，通常在冬季和早春季節(jié)更容易暴發(fā)，這可能與飼養(yǎng)環(huán)境、溫度和濕度等條件有關(guān)。各年齡段的豬均可感染PEDV，但哺乳仔豬、斷奶仔豬和育肥豬更容易感染，發(fā)病率和死亡率較高。PED的傳播途徑主要包括直接接觸傳播和間接傳播[11]。感染豬的嘔吐物、糞便及其他排泄物中存在大量的病毒粒子，這些病毒粒子可以通過直接接觸傳播給健康豬。PEDV也可以通過排泄物污染飼料、飲水、環(huán)境等，如果易感豬接觸了被污染的物品，可能被感染。此外，PEDV還可隨感染豬的呼吸道和消化道排出體外，并在空氣中形成氣溶膠，在一定條件下，如天氣變化、飼養(yǎng)密度高等，病毒可隨風(fēng)傳播，從而造成遠(yuǎn)距離的傳播。

1.1 國內(nèi)流行情況

20世紀(jì)80年代早期，PED在我國就有地方性暴發(fā)，1980年丘北縣首次出現(xiàn)PED[12]。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，1987—1989年，我國26個省市自治區(qū)PEDV導(dǎo)致的豬死亡率占1.74％，與此同時豬傳染性胃腸炎病毒（transmissible gastroenteritis virus，TGEV）占9.53％[13]。2004年在廣西省使用血清學(xué)診斷的一項(xiàng)調(diào)查顯示，4個規(guī)模化豬場PED總發(fā)病率42.0％，死亡率5.69％，其中中小型豬發(fā)病率46.7％，死亡率6.16％，而母豬發(fā)病率19.5％，未出現(xiàn)死亡[14]。2005—2007年中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所的一項(xiàng)調(diào)查顯示，我國養(yǎng)豬業(yè)病毒性腹瀉的主要病原為PEDV、豬輪狀病毒（porcine rotavirus，PoRV）和TGEV，病例所占比例分別為46％、8％和15％，三種病毒混合感染病例占33％[15]。王慧等使用RT-PCR和qRT-PCR檢測了2014—2017年湖南省部分地區(qū)規(guī)模化豬場發(fā)病豬組織樣本，與豬瘟病毒、高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒、偽狂犬病毒、口蹄疫病毒等病毒相比較，連續(xù)三年P(guān)EDV陽性率超過35％。2011—2014年的一項(xiàng)流行病學(xué)調(diào)查顯示，中國29個?。ㄎ鞑睾秃Ｄ铣猓㏄EDV陽性率為61.10％～78.49％，PEDV豬場陽性率為71.43％～83.47％[16]。我國大部分豬都接種了基于PEDV經(jīng)典毒株CV777株的滅活疫苗，然而仍有大規(guī)模感染、死亡的問題，說明PEDV經(jīng)典毒株CV777株疫苗對于預(yù)防一些早期的PEDV毒株有效，但對于一些新的變異毒株，保護(hù)效果較差。從這些數(shù)據(jù)可以看出，PEDV在中國養(yǎng)豬業(yè)中廣泛分布，并且已成為一種嚴(yán)重的病毒性腹瀉。

1.2 國外流行情況

20世紀(jì)70年代早期，PED首次出現(xiàn)在比利時和英國[17]。1978年P(guān)EDV由Pensaert等首次分離。在20世紀(jì)80～90年代，PED在日本和韓國多次暴發(fā)，1982年，日本首次檢測出PEDV，1993—1994年再次檢出，1996年，約8萬頭豬被PEDV感染，造成一半以上的豬死亡。在歐洲地區(qū)，PED主要呈零星狀出現(xiàn)。1989—1991年，荷蘭暴發(fā)了大規(guī)模的PED，導(dǎo)致大量的豬死亡，且病毒持續(xù)存在并不斷變異。2006—2007年，德國暴發(fā)了大規(guī)模的PED。2013—2014年，英國暴發(fā)了大規(guī)模的PED，導(dǎo)致大量的豬死亡，且病毒持續(xù)存在。2017年，法國暴發(fā)了PED，導(dǎo)致豬大量死亡。此外，歐洲其他國家也出現(xiàn)了PED，給養(yǎng)豬業(yè)造成了不同程度的經(jīng)濟(jì)損失。和歐亞不同，美國是2013年首次暴發(fā)PED，基因分析發(fā)現(xiàn)，流行毒株與中國2012年分離的PEDV China/2012/AH2012株類似，不到一年的時間，毒株發(fā)生了變異，與中國流行的PEDV分離株HBQX-2010株以及CH/ZMZDY/11株更為相似[18]?？偟膩碚f，PED是一種全球性的疾病，在許多國家都有暴發(fā)和傳播。

2" 病毒基因組及結(jié)構(gòu)

PEDV是一種典型的冠狀病毒，屬于冠狀病毒科冠狀病毒屬，其粒子呈球形或橢圓形，直徑為100～160 nm，病毒粒子表面有囊膜[19]。病毒基因5’端具有一個帽子結(jié)構(gòu)，3’端有poly A尾巴，整個基因組大小約為28 kb，基因組被分為5’非翻譯區(qū)（5’-untranslated region，5’-UTR）、7個開放閱讀框（open reading frame，ORF）和3’非翻譯區(qū)（3’-untranslated region，3’-UTR），這些區(qū)域在病毒復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過程中發(fā)揮重要的調(diào)控作用。PEDV的基因組編碼多個蛋白，其中包括3個非結(jié)構(gòu)蛋白（復(fù)制酶1a、復(fù)制酶1b和附屬蛋白ORF3）和4個結(jié)構(gòu)蛋白（刺突糖蛋白S、囊膜蛋白E、核衣殼蛋白N和膜蛋白M），這些蛋白在病毒的生命周期中發(fā)揮著重要的作用。其中高變區(qū)主要位于NSP2、S、ORF3和N基因，特別是S蛋白。S蛋白是PEDV主要膜蛋白之一，參與病毒的吸附和入侵過程，決定了病毒的毒力和細(xì)胞嗜性，同時，S蛋白也是誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生中和抗體的主要抗原，病毒變異可能會導(dǎo)致免疫逃避并產(chǎn)生新的變異株[20]。研究這些高變區(qū)對理解PEDV的遺傳變異和流行病學(xué)特征具有重要意義。

3" 臨床癥狀及診斷

PEDV可引起7～21日齡哺乳仔豬致死性腹瀉，潛伏期一般為5～8 d，人工感染潛伏期為1～2 d。該病臨床癥狀主要表現(xiàn)為水樣腹瀉，或腹瀉并伴有嘔吐，嘔吐多發(fā)生于吃食或吃奶后。隨著病情的發(fā)展，臨床癥狀也有很大差異，這與豬的免疫力以及豬場所在地區(qū)的流行特點(diǎn)息息相關(guān)。病豬經(jīng)常因腹瀉發(fā)生嚴(yán)重脫水和代謝性酸中毒等繼發(fā)癥狀，其中，哺乳仔豬會出現(xiàn)體重迅速下降、精神沉郁、食欲廢絕、嘔吐等癥狀，1～2 d死亡，死亡率100％；斷奶仔豬癥狀與哺乳仔豬相似，但病程較長，一般為8～10 d，但死亡率有所下降，病情嚴(yán)重的豬會出現(xiàn)生長遲滯；成年豬病情較輕，可能會出現(xiàn)腹瀉、精神沉郁等癥狀，但死亡率低。對感染PEDV的發(fā)病豬進(jìn)行小腸剖檢，腸管充滿黃色內(nèi)容物，腸壁變薄，腸系膜呈樹枝狀充血，腸系膜淋巴結(jié)水腫[21]。

由于PED臨床癥狀與TGE十分相似，無法通過臨床診斷或組織病理學(xué)變化準(zhǔn)確鑒別。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，現(xiàn)在主要通過實(shí)驗(yàn)室診斷確診是否為PED，主要包括病原學(xué)診斷和血清學(xué)診斷。病原學(xué)診斷方法主要為電鏡觀察法和病毒分離培養(yǎng)法。電鏡觀察法可直接觀察到病毒顆粒，但需要使用免疫電鏡法進(jìn)行鑒別診斷；病毒分離培養(yǎng)法是將疑似感染PEDV的豬病料接種到Vero細(xì)胞上，培養(yǎng)觀察細(xì)胞病變特征。該方法操作繁雜，檢測周期長，不適用于快速診斷。血清學(xué)診斷主要通過檢測抗體，推斷是否存在PEDV感染，常用的血清學(xué)診斷方法包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和間接免疫熒光試驗(yàn)。這些方法可以快速檢測血清中的抗體，以確定豬是否感染PEDV。除了以上方法，近年來還出現(xiàn)了一些新型診斷方法，如膠體金試紙條和環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增等方法，具有檢測速度快、操作簡便、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，為PED的診斷提供了新的選擇[22]。

總的來說，PEDV對養(yǎng)豬業(yè)危害嚴(yán)重，需要采取有效的措施來防止其傳播和擴(kuò)散。同時，深入研究該病毒，有助于更好地了解其特性、傳播途徑和致病機(jī)制，為未來的防治提供更科學(xué)的依據(jù)。

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作者簡介：敖清瑩（1997－ ），女，碩士研究生，預(yù)防獸醫(yī)專業(yè)，主要從事家畜傳染病研究工作；E-mail：1121095302@qq.com