生肌愈瘍膏外用干預(yù)壓力性潰瘍作用機(jī)制網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究

【摘要】 目的：本課題旨在通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)手段，對(duì)“生肌愈瘡膏”外敷治療壓力性潰瘍的機(jī)制進(jìn)行探討。方法：采用現(xiàn)代中醫(yī)藥理論與技術(shù)，以中藥為研究對(duì)象，采用DisGeNET、GeneCards、Human孟德爾基因編輯技術(shù)等技術(shù)，對(duì)其進(jìn)行深入研究，尋找其可能的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)與作用靶標(biāo)。采用Cytoscape 3.9.1軟件，建立“藥效-成分-靶點(diǎn)-病變”的藥效關(guān)系，利用STRING數(shù)據(jù)庫(kù)，建立“靶蛋白-效應(yīng)關(guān)系”的效應(yīng)關(guān)系，并利用DAVID數(shù)據(jù)，對(duì)“藥效關(guān)系”的信號(hào)途徑進(jìn)行富集分析。結(jié)果：經(jīng)網(wǎng)絡(luò)拓?fù)浞治?，木犀草素（MOL000006）、毒扁豆次堿（MOL013287）、山奈酚（MOL000422）、槲皮素（MOL000098）、黃芩素（MOL002714）、漢黃芩素（MOL000173）是生肌愈瘍膏干預(yù)壓力性潰瘍的主要有效成分。生肌愈瘍膏外用可能通過(guò)調(diào)控PTGS1、PTGS2、SCN5A、AR等基因，介導(dǎo)糖尿病并發(fā)癥AGE-RAGE信號(hào)通路、動(dòng)脈粥樣硬化通路和癌癥通路等通路干預(yù)壓力性潰瘍。結(jié)論：生肌愈瘍膏可通過(guò)調(diào)控多靶點(diǎn)、多通路發(fā)揮抗炎、抗氧化、促進(jìn)血管新生等方面促進(jìn)壓力性潰瘍創(chuàng)面的愈合。

【關(guān)鍵詞】 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué) 生肌愈瘍膏 壓力性潰瘍 信號(hào)通路 作用靶點(diǎn)

A Network Pharmacological Study on the Mechanism of Topical Intervention of Pressure Ulcers with Shengji Yuyang Ointment/XUE Tianyin， SHAO Yufang， SUN Qing. //Medical Innovation of China， 2023， 20（26）： -174

[Abstract] Objective： The aim of this project was to investigate the mechanism of the Shengji Yuyang Ointment topical treatment of pressure ulcers by means of network pharmacology. Method： Using modern Chinese medicine theories and techniques， DisGeNET， GeneCards， and Human Mendelian gene editing techniques were used to investigate the possible pharmacological bases and targets of the Chinese medicine. Cytoscape 3.9.1 software was used to establish the pharmacodynamic relationship of \"pharmacodynam-ic-component-target-lesion\"， STRING database was used to establish the effect relationship of \"target protein-effect relationship\"， and DAVID data was used to enrich the signal pathways of \"pharmacodynamic relationship\". Result： By network topology analysis， Lignan （MOL000006）， Poisonous Lentil Hypocretin （MOL013287）， Kaempferol （MOL000422）， Quercetin （MOL000098）， and Baicalein （MOL002714）， Wogonin （MOL000173） were the main active ingredients of the Shengji Yuyang Ointment to intervene in pressure ulcers. The topical application of Shengji Yuyang Ointment may interfere with pressure ulcers by regulating PTGS1， PTGS2， SCN5A， AR and other genes and mediating AGE-RAGE signaling pathway in diabetic complications， atherosclerotic pathway and cancer pathway. Conclusion： Shengji Yuyang Ointment can promote the healing of pressure ulcer wounds by modulating multiple targets and pathways， such as an-ti-inflammation， antioxidation and promotion of vascular renewal.

[Key words] Network pharmacology Shengji Yuyang Ointment Pressure ulcer Signaling pathway Target of action

First-author's address： The First Clinical School of Shandong University of Traditional Chinese Medicine， Jinan 250014， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2023.26.040

臥床患者由于身體長(zhǎng)期處于平臥位且長(zhǎng)時(shí)間無(wú)法活動(dòng)，導(dǎo)致局部皮膚和/或皮下組織因受壓而持續(xù)性缺血缺氧形成的局部損傷，即壓力性潰瘍（pressure ulcer，PU）[1]。不同程度的壓力性潰瘍有不同的特點(diǎn)，壓力性潰瘍部位及周圍組織易出現(xiàn)缺血再灌注損傷、細(xì)菌感染，治療難度極大[2]。

壓力性潰瘍?cè)卺t(yī)院中高發(fā)。壓力性潰瘍會(huì)給患者帶來(lái)痛苦，并降低生活質(zhì)量，甚至出現(xiàn)感染從而危及生命。壓力性潰瘍采用外治為主，配合內(nèi)治，積極治療全身疾病的治則治法對(duì)不同壓力性潰瘍的證型進(jìn)行治療，均取得了明顯效果，說(shuō)明中醫(yī)藥在壓力性潰瘍的治療上有著悠久的歷史和獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)[3-4]。

生肌愈瘍膏是濟(jì)南市中醫(yī)醫(yī)院自制外用劑[5-8]，由紫草、大黃、當(dāng)歸、地榆、側(cè)柏葉、黃芩、虎杖組成，壓力性潰瘍治療的效果已經(jīng)確定，但其作用機(jī)制尚未完全明了，本研究目的是通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法預(yù)測(cè)生肌愈瘍膏干預(yù)壓力性潰瘍的有效活性成分及關(guān)鍵靶點(diǎn)，并分析其潛在作用機(jī)制，為中醫(yī)藥治療壓力性潰瘍的領(lǐng)域提供新方向。

1 資料與方法

1.1 生肌愈瘍膏活性藥物成分篩選

運(yùn)用TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)，對(duì)紫草、大黃、當(dāng)歸、地榆、側(cè)柏葉、黃芩、虎杖的所有成分?jǐn)?shù)據(jù)進(jìn)行挖掘。以口服生物利用度（OB）≥30%，類藥性（DL）≥0.18為篩選條件，對(duì)收集到的成分進(jìn)行藥動(dòng)力信息檢索。

1.2 生肌愈瘍膏活性化學(xué)成分靶點(diǎn)與壓力性潰瘍潛在靶點(diǎn)的獲取及收集

登陸UniProt Knowledgebase（UniProt KB），將初步得到的蛋白質(zhì)靶點(diǎn)轉(zhuǎn)化為標(biāo)準(zhǔn)的基因名稱。在OMIM數(shù)據(jù)庫(kù)、DisGeNET數(shù)據(jù)庫(kù)、GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)中查找數(shù)據(jù)，搜集壓力性潰瘍的潛在靶點(diǎn)。使用Venny 2.1.0繪制生肌愈瘍膏和壓力性潰瘍的交集靶點(diǎn)。

1.3 生肌愈瘍膏-壓力性潰瘍靶點(diǎn)核心網(wǎng)絡(luò)的篩選

使用Cytoscape 3.9.1軟件構(gòu)建“藥物-成分-靶點(diǎn)-疾病”關(guān)系網(wǎng)絡(luò)。以網(wǎng)絡(luò)節(jié)點(diǎn)度值（degree）和中介中心度（betweenness centrality）為篩選條件，獲得生肌愈瘍膏干預(yù)壓力性潰瘍的關(guān)鍵成分和關(guān)鍵靶點(diǎn)。

1.4 生肌愈瘍膏-壓力性潰瘍蛋白互作網(wǎng)絡(luò)分析

將1.3獲得的關(guān)鍵靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫(kù)，設(shè)定“物種”為人類（homo sapiens），評(píng)分分值gt;0.9進(jìn)行篩選，構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)。

1.5 GO功能及KEGG通路富集分析

將1.3獲得的關(guān)鍵靶點(diǎn)導(dǎo)入DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行信號(hào)通路富集分析，并進(jìn)行可視化分析。

2 結(jié)果

2.1 生肌愈瘍膏活性成分分析

根據(jù)OB≥30%且DL≥0.18為條件對(duì)復(fù)方成分進(jìn)行篩選，最終確定生肌愈瘍膏中所含藥物的活性有效成分67個(gè)，結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2 生肌愈瘍膏干預(yù)壓力性潰瘍的潛在作用靶點(diǎn)預(yù)測(cè)

通過(guò)檢索TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)、UniProt數(shù)據(jù)庫(kù)及靶點(diǎn)模型預(yù)測(cè)，匯總并去重后，共得到226個(gè)得到核心藥物的作用靶點(diǎn)。從GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)獲得PU靶點(diǎn)5 894個(gè)，利用中位數(shù)進(jìn)行篩選，結(jié)合OMIM數(shù)據(jù)庫(kù)和DisGeNET數(shù)據(jù)庫(kù)檢索獲得的相關(guān)靶點(diǎn)，匯總?cè)ブ刈罱K得到2 954個(gè)壓力性潰瘍相關(guān)靶點(diǎn)。將生肌愈瘍膏有效成分相關(guān)的靶點(diǎn)和壓力性潰瘍疾病靶點(diǎn)取交集，獲得交集基因153個(gè)（圖1）。

2.3 藥物-成分-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

利用Cytoscape 3.9.1軟件對(duì)生肌愈瘍膏干預(yù)壓力性潰瘍的作用靶點(diǎn)進(jìn)行分析，得到網(wǎng)絡(luò)關(guān)系圖，見(jiàn)圖2。

2.4 藥物-疾病靶點(diǎn)PPI

把交集靶點(diǎn)上傳STRING數(shù)據(jù)庫(kù)，得到PPI網(wǎng)絡(luò)，見(jiàn)圖3。導(dǎo)入Cytoscape軟件并運(yùn)用cyto Hubba插件，以網(wǎng)絡(luò)節(jié)點(diǎn)度值為基準(zhǔn)，獲得度值排名前10的核心靶點(diǎn)，并構(gòu)建網(wǎng)絡(luò)圖，見(jiàn)圖4，篩選后木犀草素（MOL000006）、槲皮素（MOL000098）、山奈酚（MOL000422）、毒扁豆次堿（MOL013287）、漢黃芩素（MOL000173）、黃芩素（MOL002714）、前列腺素G/H合成酶1（PTGS1）、前列腺素G/H合成酶2（PTGS2）、雄激素受體（AR）、心臟鈉通道基因（SCN5A）等靶點(diǎn)度值較高。

2.5 GO功能及KEGG通路富集分析

將獲得的交集靶點(diǎn)導(dǎo)入DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行GO功能富集分析。GO注釋結(jié)果的前5個(gè)生物學(xué)功能主要為氧含量反應(yīng)、氮化合物反應(yīng)、外來(lái)事物刺激反應(yīng)、有機(jī)刺激反應(yīng)、脂多糖反應(yīng)（圖5）。KEGG通路富集結(jié)果癌癥通路、脂質(zhì)和動(dòng)脈粥樣硬化通路與糖尿病并發(fā)癥AGE-RAGE信號(hào)通路等通路是主要信號(hào)通路，見(jiàn)圖6。

3 討論

3.1 生肌愈瘍膏治療壓力性潰瘍的主要有效成分

經(jīng)網(wǎng)絡(luò)拓?fù)浞治霰砻?，生肌愈瘍膏干預(yù)壓力性潰瘍的主要有效成分可能是木犀草素（MOL000006）、槲皮素（MOL000098）、山奈酚（MOL000422）等成分。槲皮素（Quercetin）是一種具有多種生物學(xué)活性，且藥理學(xué)作用廣泛的黃酮類化合物，它不僅能夠抗氧化及清除自由基，且在抗炎、抗病毒、抗腫瘤、降糖及免疫調(diào)節(jié)等方面起重要作用[9]。研究顯示，槲皮素可抑制LPS誘導(dǎo)小鼠細(xì)胞分泌炎癥因子，從而保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)血管的修復(fù)[10]。另有研究表明，槲皮素通過(guò)清除氧自由基、鰲合金屬離子、抑制ox-LDL引起的氧化損傷及提高抗氧化酶活性來(lái)維持氧化平衡表達(dá)，改善細(xì)胞膜的過(guò)氧化損傷，維持胞內(nèi)氧化平衡，促進(jìn)細(xì)胞的存活[11]。體內(nèi)過(guò)氧化物的聚集會(huì)加快細(xì)胞凋亡，損傷機(jī)體微血管發(fā)，加重創(chuàng)面[12]。因此槲皮素抗氧化作用可以為肉芽組織生長(zhǎng)和創(chuàng)面恢復(fù)提供良好的環(huán)境。山奈酚（Kaempferol）是一種黃酮類化合物，抗炎、抗氧化作用顯著[13]。研究發(fā)現(xiàn)，核因子E2相關(guān)因子2（nuclear factor-erythroid 2-related factor 2，Nrf2）能夠保護(hù)細(xì)胞免受氧化損傷，而山奈酚能使Nrf2的表達(dá)上調(diào)，進(jìn)而減輕細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷，提高對(duì)氧化損傷的保護(hù)作用[14]。活性氧可以影響相關(guān)功能蛋白的合成從而加速細(xì)胞凋亡。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，山奈酚可以降低活性氧水平，對(duì)抗活性氧介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡作用，降低細(xì)胞凋亡率，恢復(fù)內(nèi)皮細(xì)胞的活力，有助于血管的生成[15]。木犀草素（Luteolin）是一種黃酮類化合物，具有抗氧化、神經(jīng)保護(hù)等多種藥理作用[16]。木犀草素能夠?qū)D(zhuǎn)錄激活因子3、核轉(zhuǎn)錄因子-κB和激活蛋白-1等轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)節(jié)發(fā)揮抗炎作用，并改變炎癥中涉及的各種信號(hào)通路[17]，并且木犀草素可通過(guò)調(diào)節(jié)炎癥因子的活性，從而降低炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生發(fā)揮抗炎作用[18]，壓力性潰瘍的創(chuàng)面經(jīng)久不愈，可能是產(chǎn)生的炎癥介質(zhì)會(huì)破壞組織完整性相關(guān)的酶，使創(chuàng)面細(xì)胞基質(zhì)和纖維連接蛋白降解[19]，證實(shí)木犀草素能夠降低炎性因子，促進(jìn)創(chuàng)面肉芽組織新生而加速創(chuàng)面組織修復(fù)。

3.2 生肌愈瘍膏治療壓力性潰瘍的主要作用靶點(diǎn)

經(jīng)網(wǎng)絡(luò)拓?fù)浞治?，PTGS1、PTGS2、SCN5A等可能生肌愈瘍膏有效成分作用于壓力性潰瘍的核心靶點(diǎn)。前列腺素內(nèi)過(guò)氧化物合酶（PTGS），又稱環(huán)氧合酶（COX）。COX存在兩種同工酶，即結(jié)構(gòu)型（COX-1）和誘導(dǎo)型（COX-2）[20]。COX-1為結(jié)構(gòu)型同工酶，主要表達(dá)于大多數(shù)組織和器官，如血小板、內(nèi)皮細(xì)胞，能夠調(diào)節(jié)血管張力、維持血小板正常生理功能；COX-2為可誘導(dǎo)同工酶，高表達(dá)于炎癥組織，特別是單核細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等一些與炎癥有密切關(guān)系的細(xì)胞上[21]。COX-1和COX-2的聯(lián)合表達(dá)在血小板活性增強(qiáng)、抗血小板過(guò)程中具有關(guān)鍵作用[22]。創(chuàng)面愈合與血小板的激活和生長(zhǎng)因子的釋放具有密切的聯(lián)系，血小板能持續(xù)釋放大量創(chuàng)面需要的多種因子，可以有效刺激創(chuàng)面修復(fù)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖，促進(jìn)創(chuàng)面愈合，并可以釋放一定量抗炎因子，發(fā)揮更明顯抗感染作用[23]。蔡信濤[24]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，心臟鈉通道基因（SCN5A）在垂體瘤細(xì)胞（GH3）中與和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A（vascularendothelial growth factor A，VEGFA）的表達(dá)呈現(xiàn)正相關(guān)。VEGFA參與血管生成的整個(gè)過(guò)程，在血管生成過(guò)程中，VEGFA能加速血管新生，從而為創(chuàng)面肉芽組織、細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)與氧氣，加快創(chuàng)面修復(fù)進(jìn)程[25]。

3.3 生肌愈瘍膏治療壓力性潰瘍的主要信號(hào)通路

KEGG通路富集結(jié)果表明，糖尿病并發(fā)癥AGE-RAGE信號(hào)通路為主要通路。研究發(fā)現(xiàn)，Wnt/β-catenin通路與創(chuàng)面愈合過(guò)程中關(guān)鍵的炎癥反應(yīng)、干細(xì)胞、新血管生成、毛囊再生、成纖維細(xì)胞增殖有關(guān)，糖基化終末產(chǎn)物（AGEs）與其受體（RAGE）結(jié)合表達(dá)能抑制Wnt/β-catenin通路，成纖維細(xì)胞和新生血管少，炎性細(xì)胞多，從而影響創(chuàng)面愈合進(jìn)程[26]。另有臨床研究證實(shí)，降低創(chuàng)面組織中AGEs及RAGE的表達(dá)水平后，創(chuàng)面組織中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子增多，中性粒細(xì)胞數(shù)目減少，創(chuàng)面愈合速度加快[27]。

本研究以生肌愈瘍膏為研究對(duì)象，通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法，對(duì)生肌愈瘍膏干預(yù)壓力性潰瘍的潛在作用靶點(diǎn)及作用機(jī)制進(jìn)行分析，推測(cè)生肌愈瘍膏通過(guò)木犀草素、槲皮素、山奈酚等成分發(fā)揮作用，通過(guò)前列腺素G/H合成酶1、前列腺素G/H合成酶2、心臟鈉通道基因等靶點(diǎn)影響糖尿病并發(fā)癥AGE-RAGE等信號(hào)通路進(jìn)而抗炎、抗氧化、促進(jìn)新生以促進(jìn)壓力性潰瘍的創(chuàng)面愈合。上述結(jié)果可為中醫(yī)藥治療壓力性潰瘍提供新思路，但本研究結(jié)果尚有局限，治療機(jī)制有待進(jìn)一步驗(yàn)證。

參考文獻(xiàn)

[1]高梅芳.預(yù)見(jiàn)性護(hù)理預(yù)防長(zhǎng)期臥床患者壓力性潰瘍發(fā)生的效果[J].中國(guó)農(nóng)村衛(wèi)生，2021，13（24）：50-51.

[2]朱愛(ài)萍，劉虹梅.托里消毒湯內(nèi)服外敷輔助負(fù)壓封閉引流技術(shù)治療急性壓力性潰瘍感染臨床研究[J].世界中西醫(yī)結(jié)合雜志，2019，14（8）：1167-1170，1175.

[3]張?jiān)平?中醫(yī)藥治療慢性皮膚潰瘍研究概況[J].山東中醫(yī)雜志，2014，33（12）：1040-1042.

[4]劉建華，宋奎全，孫慶.中醫(yī)外治法亦應(yīng)辨證論治之經(jīng)驗(yàn)[J].中國(guó)民間療法，2015，23（2）：69-70.

[5]張連杰，夏兆芳，張彪，等.祛腐生肌膏對(duì)慢性皮膚潰瘍創(chuàng)面修復(fù)的療效觀察[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2021，19（20）：11-13.

[6]孫慶，夏兆芳，張曉冬.創(chuàng)瘍靈治療皮膚潰瘍臨床研究[J].中國(guó)中醫(yī)急癥，2010，19（10）：1692-1693.

[7]孫慶，夏兆芳，張曉冬.創(chuàng)瘍靈治療褥瘡的臨床觀察[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2010，7（23）：54-56.

[8]孫慶，劉建華，孔平凡，等.應(yīng)用益氣活血法治療褥瘡50例臨床研究[J].甘肅中醫(yī)，2007，20（7）：50-51.

[9]劉晟文，劉建英.槲皮素藥理學(xué)作用的研究進(jìn)展[J/OL].中華肺部疾病雜志：電子版，2020，13（1）：104-106.https：//d.wanfangdata.com.cn/periodical/ChhQZXJpb2RpY2FsQ0hJTmV3MjAyMzA4MDYSFXpob25naGZiamJ6ejIwMjAwMTAyNhoIendqcTdocHY%3D.

[10]任改艷，張步有，黃劍林.槲皮素對(duì)LPS誘導(dǎo)小鼠RAW264.7細(xì)胞炎癥的保護(hù)作用[J].中成藥，2019，41（8）：1795-1799.

[11]王亞茹，袁滿，張麗，等.槲皮素抗氧化作用及相關(guān)機(jī)制研究進(jìn)展[J].營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2022，44（2）：204-208.

[12]楊曉敏，徐婷婷，段迎曉.不同負(fù)壓創(chuàng)面治療技術(shù)對(duì)糖尿病足的修復(fù)效果比較[J].中國(guó)美容醫(yī)學(xué)，2023，32（1）：38-41.

[13]郭海清，柳雅立，任鋒，等.山奈酚對(duì)HepG2細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制研究[J].北京醫(yī)學(xué)，2021，43（9）：899-904.

[14]鄒雪蓮，胡雯，雷子賢，等.山奈酚減輕人角質(zhì)形成細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷[J].基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床，2021，41（8）：1103-1108.

[15]張勝.山奈酚通過(guò)調(diào)控FoxO通路抑制氧化應(yīng)激介導(dǎo)的間充質(zhì)干細(xì)胞凋亡機(jī)制研究[D].南昌：南昌大學(xué)，2016.

[16]涂亮星，楊如月，劉佳麗，等.不同劑量木犀草素在大鼠體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)的比較[J].中成藥，2022，44（12）：3753-3757.

[17]胡澤香，佟雷，耿艷萌，等.木犀草素的藥理活性及其制劑研究進(jìn)展[J].中醫(yī)臨床研究，2022，14（10）：141-145.

[18]周靖惟，張星，李莎，等.基于“入血成分-復(fù)方功效-靶點(diǎn)通路”的四妙勇安湯潛在質(zhì)量標(biāo)志物研究[J].中草藥，2022，53（24）：7795-7807.

[19]韓鳳玉，閆鳳華，張俊飛，等.枸杞多糖促進(jìn)壓瘡大鼠皮膚創(chuàng)面愈合的作用機(jī)制研究[J].寧夏醫(yī)學(xué)雜志，2023，45（1）：5-7，2.

[20]魯成龍.基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法研究補(bǔ)陽(yáng)還五湯治療動(dòng)脈硬化閉塞癥的作用機(jī)制[D].濟(jì)南：山東中醫(yī)藥大學(xué)，2020.

[21]李冬.DVT人血中COX-1基因表達(dá)誘導(dǎo)TXA2生成致血小板聚集促血栓形成的研究[D].昆明：昆明醫(yī)科大學(xué)，2013.

[22]葉加建，吳定昌，湯忠秀，等.免疫性血小板減少癥患者血小板COX-1和COX-2的表達(dá)及意義[J].中國(guó)免疫學(xué)雜志，2019，35（15）：1891-1896.

[23]劉靜，吳順香，韓焱福，等.自體富血小板纖維蛋白治療難愈性創(chuàng)面的臨床觀察[J].首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2020，41（6）：876-881.

[24]蔡信濤.SCN5A對(duì)大鼠GH3細(xì)胞生物學(xué)特性的影響[D].蚌埠：蚌埠醫(yī)學(xué)院，2022.

[25]孔令臻，邢捷.八珍湯對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A表達(dá)的影響[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合外科雜志，2022，28（1）：17-21.

[26]王雙勛，李大勇.基于Wnt/β-catenin通路探討拔毒生肌散對(duì)糖尿病大鼠皮膚潰瘍愈合的促進(jìn)作用[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2023，41（2）：115-119，266-267.

[27]戚世玲，朱定衡，敖賢，等.微粒皮種植對(duì)糖尿病足創(chuàng)面組織中AGEs、RAGE表達(dá)水平的影響[J].中國(guó)燒傷創(chuàng)瘍雜志，2019，31（1）：5-8.