IVF后卵母細胞極體形態(tài)與受精及胚胎發(fā)育的研究

【摘要】 目的：探究體外受精（IVF）后卵母細胞極體形態(tài)與受精及胚胎發(fā)育的關系。方法：將2017年7月—2022年7月宜春市婦幼保健院輔助生殖科卵母細胞受精后4～5 h去顆粒細胞后的極體情況分為A組（二極體組）、B組（碎極體組）、C組（一極體組）與D組（多極體組）。比較四組的受精情況及胚胎發(fā)育情況。結果：A組的總受精率及正常受精率均顯著高于B組、C組及D組，B組及D組則均顯著高于C組；A組的D3優(yōu)質(zhì)胚胎率顯著高于B組及C組，B組則顯著高于C組；A組的未受精率顯著低于B組、C組及D組，B組及D組則均顯著低于C組，差異均有統(tǒng)計學意義（Plt;0.05），四組的可用囊胚率比較，差異無統(tǒng)計學意義（Pgt;0.05）。結論：IVF后卵母細胞極體形態(tài)與受精及胚胎發(fā)育有密切的關系，二極體優(yōu)勢更為突出，但IVF后卵母細胞極體形態(tài)對可用囊胚率的影響不顯著，因此可行囊胚培養(yǎng)的方式選擇胚胎。

【關鍵詞】 體外受精 卵母細胞 極體形態(tài) 受精情況 胚胎發(fā)育

Study on the Polar Body Morphology of Oocyte and Fertilization， Embryonic Development after IVF/DENG Xing， DUAN Chaoqun， PENG Wei， LIU Zhen， LI Qing， HAN Yan. //Medical Innovation of China， 2023， 20（26）： 147-151

[Abstract] Objective： To investigate the correlation between polar body morphology of oocyte and fertilization， embryonic development after in vitro fertilization （IVF）. Method： From July 2017 to July 2022 in the Assisted Reproduction Department of Maternal and Child Health Hospital of Yichun City， the oocytes at 4-5 h after IVF were divided into group A （second polar body group）， group B （broken polar body group）， group C （first polar body group） and group D （multipolar body group） according to the polar bodies after degranulation after fertilization. Then the fertilization situation and embryonic development situation of four groups were compared. Result： The total fertilization rate and normal fertilization rate of group A were significantly higher than those of group B， group C and group D， the rates of group B and group D were significantly higher than those of group C; the D3 high-quality embryo rate of group A was significantly higher than those of group B and group C， the D3 high-quality embryo rate of group B was significantly higher than that of group C; the unfertilized rate of group A was significantly lower than those of group B， group C and group D， the rates of group B and group D were significantly lower than that of group C， the differences were statistically significant （Plt;0.05）， the available blastocyst rates of four groups were compared， the differences were not statistically significant （Pgt;0.05）. Conclusion： The polar morphology of oocytes after IVF is closely related to fertilization and embryo development， the advantages of second polar body is more prominent， and it is feasible to select embryos by blastocyst culture.

[Key words] In vitro fertilization Oocyte Polar body morphology Fertilization situation Embryonic development

First-author's address： Maternal and Child Health Hospital of Yichun City， Jiangxi Province， Yichun 336000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2023.26.035

體外受精（IVF）作為輔助生殖技術，其臨床應用率極高。而在此過程中，胚胎選擇是極為重要的一個環(huán)節(jié)，其最終目的是選擇最有可能發(fā)育成一個健康嬰兒的胚胎進行移植[1-2]。而胚胎的發(fā)育潛力與卵母細胞質(zhì)量密切相關，因此對卵母細胞相關方面的研究是重點，且其涉及方面較廣。而極體作為卵母細胞不均等分裂產(chǎn)生的兩種體積很小的分裂產(chǎn)物，它們含有一套多余的染色體或染色單體及一些胞質(zhì)內(nèi)細胞器[3-4]。有研究認為，卵母細胞第二極體形態(tài)可有效反映卵母細胞發(fā)育的潛能，在加精后4～6 h后如卵母細胞受精則出現(xiàn)第二極體[5-6]，但是臨床中關于極體形態(tài)與受精及胚胎發(fā)育的關系研究極為匱乏，因此本方面仍有較大的研究空間。本研究現(xiàn)探究IVF后卵母細胞極體形態(tài)與受精及胚胎發(fā)育的關系，為其臨床選擇提供參考依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性選取2017年7月—2022年7月宜春市婦幼保健院輔助生殖科卵母細胞12 498個，納入標準：受精后4～5 h卵子去顆粒細胞（短時受精）；于本科室首次行IVF治療；獲卵數(shù)≥3個。排除標準：臨床資料不完整。根據(jù)受精后4～5 h去顆粒細胞后的極體情況分為A組（二極體組）9 321個，B組（碎極體組）1 100個，C組（一極體組）1 749個與D組（多極體組）328個。研究經(jīng)本院生殖醫(yī)學倫理委員會同意。

1.2 方法

（1）控制性超促排卵（COH）：所有患者均根據(jù)B超監(jiān)測和血清雌二醇（E2）水平適當調(diào)整藥物劑量，當1個主導卵泡直徑達18 mm時肌肉注射人絨毛膜促性腺激素（hCG）10 000 U，36 h后取卵。（2）體外受精，觀察與記錄極體與原核：hCG后39～40 h受精，受精后4～5 h卵子去顆粒細胞后進行卵母細胞極體觀察與記錄。受精后18～20 h觀察受精情況，進行原核觀察與記錄。去顆粒細胞后觀察卵母細胞極體情況（圖1、2、3、4）。取卵后D3根據(jù)胚胎發(fā)育速度和形態(tài)對胚胎進行評估。并統(tǒng)計及比較四組的受精情況及胚胎發(fā)育情況，采用Pearson相關性分析IVF后卵母細胞極體形態(tài)與受精及胚胎發(fā)育的關系。

1.3 觀察指標及評價標準

（1）卵裂期胚胎評分：取卵后D3根據(jù)胚胎發(fā)育速度和形態(tài)對胚胎進行評分，卵裂球細胞數(shù)8，≤5％的碎片無其他異常為1級胚胎（Ⅰ）；卵裂球細胞數(shù)7～9，≤25％的碎片且卵裂球致密、細胞大小無異常為優(yōu)質(zhì)胚胎，為2級胚胎（Ⅱ）；25%～50%的碎片，第2天細胞數(shù)為2細胞，第3天細胞數(shù)為4細胞及以上為3級胚胎（Ⅲ）；多項指標如細胞數(shù)、卵裂球致密性、細胞大小、對稱性等出現(xiàn)異常，大于50％碎片為4級胚胎（Ⅳ）；停育、退化、死亡胚胎為5級胚胎（Ⅴ）。其中4～5級胚胎為不可用胚胎，不用于移植與囊胚培養(yǎng)[7]。（2）囊胚評分：使用Gardner評分系統(tǒng)，根據(jù)囊胚腔的大小和是否孵出將囊胚分為6個時期，對于處于3至多期的囊胚，還需對其內(nèi)細胞團（ICM）和滋養(yǎng)層（TE）進行質(zhì)量分級，以便對囊胚的狀況進行較全面的評估，其中3BB及以上的囊胚為優(yōu)質(zhì)囊胚，細胞團（ICM）和滋養(yǎng)層（TE）評級同時為C的為不可用囊胚，不予冷凍與移植。D3優(yōu)胚是指第3天的優(yōu)質(zhì)胚胎?？捎媚遗呤侵干鲜觯?）中所述的1～3級胚胎[8]。

1.4 統(tǒng)計學處理

數(shù)據(jù)檢驗軟件為SPSS 22.0，計數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗，Plt;0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 四組的受精情況比較

A組的總受精率及正常受精率均顯著高于B組、C組及D組，B組及D組則均顯著高于C組；A組的未受精率顯著低于B組、C組及D組，B組及D組則均顯著低于C組，差異均有統(tǒng)計學意義（Plt;0.05），見表1。

2.2 四組的胚胎發(fā)育情況比較

A組的D3優(yōu)質(zhì)胚胎率顯著高于B組及C組，B組則顯著高于C組，差異均有統(tǒng)計學意義（Plt;0.05），四組的可用囊胚率比較，差異無統(tǒng)計學意義（Pgt;0.05），見表2。

3 討論

輔助生殖技術在臨床的應用率較高，而關于輔助生殖技術各個方面的研究是重點與熱點。提高臨床妊娠率及降低多胎妊娠率是輔助生殖中的研究重點之一，而胚胎移植作為有效控制多胎妊娠最直接、有效的措施，其是臨床研究重點[9-10]，而胚胎的發(fā)育能力作為胚胎移植的重要步驟與環(huán)節(jié)，其是移植效果的重要評估方面。卵母細胞的質(zhì)量是對效果起決定性作用的方面[11-12]，有研究認為，卵母細胞的受精和發(fā)育潛能與多方面相關，而第一極體對其上述情況具有較好的反應價值，而受精后4～6 h，約90%的卵母細胞可出現(xiàn)第二極體，因此第二極體的出現(xiàn)可作為受精成功及卵細胞成熟與否的重要參考方面[13-15]。另外，碎極體則提示卵母細胞多倍體發(fā)生的概率相對更高，這對于卵裂情況具有反應意義，提示本類情況的胚胎發(fā)育阻滯率可能相對更高。但是極體在胚胎發(fā)育過程中并未全程參與，而是呈現(xiàn)退化的狀態(tài)，因此認為其可能為無實質(zhì)功能的小細胞[16-17]。鑒于上述研究差異的存在，對IVF后卵母細胞極體形態(tài)與受精及胚胎發(fā)育的關系研究意義與需求較高。

本研究結果顯示，二極體的總受精率及正常受精率均顯著高于碎極體、一極體及多極體，碎極體及多極體則均顯著高于一極體，二極體的D3優(yōu)質(zhì)胚胎率也相對更高，二極體的未受精率顯著低于碎極體、一極體及多極體（Plt;0.05），但二極體、碎極體、一極體及多極體的可用囊胚率無顯著差異（Pgt;0.05），因此認為二極體與胚胎發(fā)育及受精等方面密切相關，提示二極體出現(xiàn)的卵母細胞發(fā)育潛能可能相對更好，同時也有助于了解其受精與否，對于可用胚囊的選擇具有重要的參考作用，而這與既往的某些研究具有一定的一致性[18-20]。

綜上所述，筆者認為IVF后卵母細胞極體形態(tài)與受精及胚胎發(fā)育有密切的關系，二極體優(yōu)勢更為突出，但IVF后卵母細胞極體形態(tài)對可用囊胚率的影響不顯著，因此可行囊胚培養(yǎng)的方式選擇胚胎。

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