高效液相色譜法測(cè)定25%硝磺草酮·莠去津可分散油懸浮劑

洪陳艷，顏高俊，王學(xué)林，安燕萍

(昆明農(nóng)藥有限公司，云南 昆明 650401)

硝磺草酮(英文通用名：mesotrione)屬于HPPD抑制劑，廣譜苯胺類除草劑，主要用于玉米田防除蒼耳、藜、薺菜、稗草、龍葵、繁縷、馬唐等雜草，對(duì)磺酰脲類除草劑產(chǎn)生抗性的雜草有效[1]。

莠去津(英文通用名：atrazine)又名阿特拉津，是一種三氮苯類除草劑，除草范圍廣，效果好，對(duì)植物安全，殘效期短。莠去津是選擇性內(nèi)吸傳導(dǎo)型苗前、苗后除草劑，用于玉米、高粱、甘蔗、茶樹(shù)及果園、林地防除一年生禾本科雜草和闊葉雜草[2]。

25%硝磺草酮·莠去津可分散油懸浮劑有效成分硝磺草酮和莠去津可分別采用液相色譜法和氣相色譜法進(jìn)行分析檢測(cè)。本文通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究建立了一種操作快捷、方便準(zhǔn)確的高效液相色譜分析方法，該方法在同一根C18色譜柱上能同時(shí)對(duì)25%硝磺草酮·莠去津可分散油懸浮劑樣品中的有效成分硝磺草酮和莠去津進(jìn)行同柱液相色譜分離和定量測(cè)定，分析方法的精密度和準(zhǔn)確度滿足定量分析的要求。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑

硝磺草酮標(biāo)樣(w=99.01%)；莠去津標(biāo)樣(w=99.30%)；甲醇：分析純；乙腈：色譜純；冰乙酸：分析純；水：蒸餾水(新蒸二次蒸餾水)。

1.2 儀器

高效液相色譜儀：具可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器；色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)；色譜柱：250 mm×φ4.6 mm 不銹鋼柱，內(nèi)裝C18填充物，粒徑 5 μm；過(guò)濾器；濾膜孔徑 0.45 μm；微量進(jìn)樣器：50 μL；超聲波清洗器。

1.3 高效液相色譜操作條件

柱溫：室溫(溫差變化應(yīng)不大于 2 ℃)；流動(dòng)相：乙腈+水=50+50(體積)，水用冰乙酸調(diào)試pH到3.0，經(jīng)濾膜過(guò)濾并超聲脫氣；檢測(cè)波長(zhǎng)：254 nm；流速：0.8 mL/min；進(jìn)樣體積：5 μL。

1.4 操作步驟

1.4.1 配制標(biāo)樣溶液

準(zhǔn)確稱取 0.02 g 硝磺草酮標(biāo)樣、莠去津標(biāo)樣 0.08 g(精確至 0.0002 g)于 100 mL 容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，超聲波振蕩 5 min，冷卻至室溫，搖勻備用。

1.4.2 配制試樣溶液

準(zhǔn)確稱取25%硝磺草酮·莠去津可分散油懸浮劑試樣 0.4 g(精確至 0.0002 g)于 100 mL 容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，超聲波振蕩 5 min，冷卻至室溫，搖勻備用。

1.4.3 測(cè)定

在上述色譜操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰兩針標(biāo)樣溶液中的硝磺草酮、莠去津響應(yīng)值變化小于1.5%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)樣進(jìn)行分離測(cè)定[1]。25%硝磺草酮·莠去津可分散油懸浮劑高效液相色譜圖(如圖1)。保留時(shí)間(min)：硝磺草酮約5.5，莠去津約7.0。

1.硝磺草酮(5.5 min)；2.莠去津(7.0 min)。圖1 25%硝磺草酮·莠去津可分散油懸浮劑高效液相色譜圖

1.4.4 計(jì)算

將測(cè)得的兩針試樣溶液以及試樣前后兩針標(biāo)樣溶液中硝磺草酮(莠去津)峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中硝磺草酮(莠去津)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)X1(%)按公式計(jì)算：

式中：A2為試樣溶液中硝磺草酮(莠去津)峰面積的平均比值；m1為標(biāo)樣硝磺草酮(莠去津)的質(zhì)量，g；w為標(biāo)準(zhǔn)品硝磺草酮(莠去津)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；A1為標(biāo)樣溶液中硝磺草酮(莠去津)峰面積的平均比值；m2為試樣的質(zhì)量，g；X1為試樣硝磺草酮(莠去津)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

1.4.5 允許差

硝磺草酮、莠去津兩次平行測(cè)定結(jié)果之差應(yīng)分別不大于0.1%和0.4%，取其算術(shù)平均值作為測(cè)定結(jié)果。

2 結(jié)果與討論

2.1 液相色譜操作條件的選擇

為了保證25%硝磺草酮·莠去津可分散油懸浮劑樣品中辛硝磺草酮和莠去津的峰型能夠較好地分離，分別取了不同配比的乙腈和水為流動(dòng)相進(jìn)行分析檢測(cè)，通過(guò)比較和對(duì)比分析硝磺草酮和莠去津以及雜質(zhì)峰的峰型、出峰時(shí)間、分離完全度等因素，確定使用乙腈+水=50+50(體積)為流動(dòng)相時(shí)，樣品色譜圖基線平穩(wěn)，峰型好，分離效果較好，出峰時(shí)間適宜，因此確定選用乙腈+水=50+50作為流動(dòng)相。

2.2 波長(zhǎng)的選擇

使用使用紫外可變波長(zhǎng)檢測(cè)器，在不同波長(zhǎng)下對(duì)25%硝磺草酮·莠去津可分散油懸浮劑樣品中硝磺草酮和莠去津進(jìn)行掃描，當(dāng)掃描波長(zhǎng)為 254 nm 時(shí)，硝磺草酮和莠去津的響應(yīng)值最大，并且能與雜質(zhì)峰分離徹底，因此選擇 254 nm 作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

2.3 溶劑的選擇

根據(jù)硝磺草酮和莠去津的性質(zhì)，當(dāng)選用甲醇為試樣溶劑時(shí)，能較好地溶解試樣，且峰型分離較好，滿足試劑的選擇條件。

2.4 分析方法線性關(guān)系測(cè)定

配制一系列質(zhì)量濃度梯度的硝磺草酮、莠去津混合標(biāo)樣溶液，按本文1.3、1.4中的方法進(jìn)行分析檢測(cè)，每個(gè)質(zhì)量濃度分析兩次，求其峰面積的平均值，得出了一系列色譜峰面積(表1、表2)。以硝磺草酮(莠去津)質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，以硝磺草酮(莠去津)平均峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)得硝磺草酮標(biāo)準(zhǔn)曲線線性方程為：y=1.0(107x+35341，相關(guān)系數(shù)為：R2=0.9997；莠去津標(biāo)準(zhǔn)曲線線性方程為：y=3.0(106x-1322.9，相關(guān)系數(shù)為：R2=0.9996，結(jié)果表明本方法對(duì)硝磺草酮(莠去津)的分析具有良好的線性相關(guān)性，可以滿足定量分析的要求。

表1 不同質(zhì)量濃度硝磺草酮標(biāo)樣與對(duì)應(yīng)的峰面積

表2 不同濃度莠去津標(biāo)樣與對(duì)應(yīng)的峰面積

2.5 分析方法的精密度測(cè)定

分別稱取5個(gè)平行試樣，按上述色譜條件和測(cè)定步驟進(jìn)行測(cè)定，硝磺草酮和莠去津的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.19%、0.37%；變異系數(shù)分別為3.77%、1.83%，結(jié)果(表3)。

表3 分析方法的精密度測(cè)定結(jié)果

2.6 分析方法準(zhǔn)確度測(cè)定

稱取硝磺·莠去津可分散油懸浮劑試樣配制成試樣溶液，分別稱取相同體積的上述溶液制備7份相同的樣品。其中，6份分別加入一定量的硝磺草酮(莠去津)標(biāo)樣。如此配制成6個(gè)混合樣品溶液和1個(gè)空白溶液，按本標(biāo)準(zhǔn)操作條件進(jìn)行分析，分別測(cè)定每個(gè)樣品的硝磺草酮(莠去津)總質(zhì)量，計(jì)算回收率，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)(表4)，表明該方法確確度較高。

表4 分析方法的準(zhǔn)確度測(cè)定結(jié)果

3 結(jié)論

實(shí)驗(yàn)表明，本文建立的高效液相色譜法測(cè)定25%硝磺草酮·莠去津可分散油懸浮劑中有效成分硝磺草酮、莠去津質(zhì)量分?jǐn)?shù)的分析方法，具有良好的線性關(guān)系、分離度高，操作方法方便、快捷，已滿足定量分析要求，適用于該劑型質(zhì)量分?jǐn)?shù)檢測(cè)和質(zhì)量控制。