淺談豬偽狂犬病及其防治策略

楊虹，丁尚成，茍于奎，白智軻

（1.城口縣農(nóng)業(yè)綜合行政執(zhí)法支隊 重慶 405900；2.城口縣周溪鄉(xiāng)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心 重慶 405900；3.城口縣雙河鄉(xiāng)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心. 重慶 405900；4.城口縣動物疫病預防控制中心 重慶 405900）

偽狂犬病（PR）是由偽狂犬病毒（PRV）感染，引起的多種家畜和野生動物共患的一種急性、熱性傳染病。豬科以外如牛、羊、犬、貓等家養(yǎng)動物和野生動物感染后引起發(fā)熱、奇癢和腦脊髓炎，都以死亡結(jié)局，臨床以極度瘙癢為特征，故稱“瘋癢癥”。豬呈暴發(fā)性流行，妊娠母豬出現(xiàn)流產(chǎn)、死胎，公豬不育，新生仔豬發(fā)生嘔吐、顫抖、共濟失調(diào)、癱瘓、抽搐等神經(jīng)癥狀，造成大量死亡；育肥豬出現(xiàn)發(fā)熱和呼吸道癥狀，耐過后形成潛伏感染，終身排毒。本病是危害養(yǎng)豬業(yè)的重大傳染病之一，在我國被列為二類動物疫病。

1 病原

偽狂犬病毒又稱傳染性延髓麻痹病毒、奇癢癥病毒、奧耶斯基氏病病毒，在分類上屬于皰疹病毒目、皰疹病毒科、甲型皰疹病毒亞科、水痘病毒屬、豬皰疹病毒Ⅰ型，PRV 呈球形或橢球形，位于細胞核內(nèi)未成熟的病毒粒子直徑110～150 nm；位于細胞質(zhì)內(nèi)成熟的病毒粒子直徑約150～180 nm，核衣殼呈20 面體對稱，直徑110 nm，由162 個中空的殼粒組成，殼粒包括150 個六鄰體和12 個5鄰體。衣殼內(nèi)為核芯基因組，衣殼外為雙層結(jié)構(gòu)的脂蛋白囊膜，其表面有長約8～10 nm 呈放射狀排列的糖蛋白纖突。核衣殼和囊膜之間，充滿呈無定形物質(zhì)狀態(tài)的被膜蛋白，稱為“殼皮”。

基因組為線狀雙股DNA，長約143 kb，平均G+C 含量高達74%，包含70 個閱讀框(OFF)，可編碼70～100 種蛋白質(zhì)，成熟的病毒粒子含有50 種蛋白質(zhì)。PRV 基因組DNA 由獨特長區(qū)段UL、獨特短區(qū)段US 及其兩側(cè)的末端重復序列(TRS)和內(nèi)部重復序列(IRS)組成。US 兩端的重復序列可以發(fā)生重組，與UL 的方向可以相同，也可以相反，因而PRV 基因組存在兩種異構(gòu)體。糖蛋白gE 對PRV侵入神經(jīng)系統(tǒng)起關(guān)鍵性作用，去除gE，則PRV 不能侵入神經(jīng)系統(tǒng)，是最重要非必需糖蛋白，其次是gI，此特點常被用來制作基因缺失疫苗。PRV 只有一個血清型，各毒株間有一定差異，分為四種類型：基因Ⅰ型、基因Ⅱ型、基因Ⅲ型和基因Ⅳ型，歐美國家毒株主要為Ⅰ型，多數(shù)亞洲國家毒株為Ⅱ型，丹麥、瑞典等北歐國家毒株為Ⅲ型，泰國毒株為Ⅱ型和Ⅳ型，比利時、美國、日本、德國、荷蘭毒株為Ⅰ型和Ⅱ型，基因Ⅰ型和基因Ⅱ型的核苷酸差異達2.93%。我國毒株為基因Ⅱ型，而Bartha 疫苗毒株為基因Ⅰ型，這就解釋了我國很多豬場盡管注射了Bartha 疫苗，但PR 仍然有較高發(fā)病率。

PRV 能在多種組織細胞內(nèi)增殖，如兔腎和豬腎細胞、牛睪丸細胞、雞胚成纖維細胞等原代細胞以及PK-15（豬腎細胞）、Vero（非洲綠猴腎細胞）和BHK-21（倉鼠腎細胞）等傳代細胞。細胞病變（CPE）一般出現(xiàn)在攻毒后24～72 h，起初分散而后逐步擴大，最后全部細胞溶解脫落形成多核巨細胞。用蘇木-伊紅染色病變細胞，可見到核內(nèi)嗜酸性包涵體。用雞胚作絨毛尿囊膜接種、卵黃囊和尿囊腔接種，可造成雞胚死亡。

PRV 對外界環(huán)境抵抗力較強，44 ℃5 h 不能被完全滅活，55 ℃50 min、80 ℃3 min、100 ℃瞬間被滅活。在污染的豬舍內(nèi)可以存活1 個月以上，在肉中可存活5 周以上。在低溫潮濕環(huán)境，pH 6～8 時最為穩(wěn)定；在干燥陽光直射條件下，病毒很快失活。5%石炭酸經(jīng)2 min 滅活，0.5%～1%氫氧化鈉迅速使其滅活。由于病毒具有囊膜，對乙醚、氯仿等脂溶劑以及甲醛敏感。

2 流行病學

1）易感動物：家養(yǎng)動物如豬、山羊、綿羊、牛、貓、犬等，經(jīng)濟動物如狐貍、水貂、雪貂等，野生動物主要是野豬、鹿、熊、野鼠和豺等，馬屬動物和鳥類不會自然感染，人工感染需要大劑量的病毒并且感染途徑必須是腦內(nèi)注射。除豬和野豬外，其他動物感染都以死亡為結(jié)局。

2）傳染源：病豬、帶毒豬以及帶毒鼠類是豬場的傳染源，野豬是野生動物的自然傳染源，也是PRV 潛在的貯存宿主和家豬的傳染源。

3）傳播途徑：①通過鼻黏膜、自然交配、哺乳和相互啃咬等呼吸道、生殖道和皮膚黏膜途徑，直接接觸傳播；②通過食入被病豬鼻咽分泌物污染的飼料和飲水，通過消化道途徑及人工授精間接接觸傳播；③母豬妊娠后感染，通過胎盤屏障垂直傳播感染胎兒。

4）發(fā)病季節(jié)：無嚴格的季節(jié)性，一年四季均可發(fā)病，但以冬、春寒冷季節(jié)最為多見。因為低溫有利于病毒的存活，增加感染宿主的概率。

5）流行特點：各種年齡的豬均可感染，但年齡越小，其發(fā)病率和死亡率越高；耐過的成年豬及種豬則形成隱性感染，終身通過鼻咽分泌物、乳汁、精液和陰道排毒，不能從糞尿排毒，成為長期的傳染源。

3 致病機理

PRV 侵入鼻黏膜、口腔、咽部后，通過囊膜糖蛋白gC、gD、gE 和侵入部位上皮細胞表面硫酸乙酰肝素蛋白聚糖的相互作用，吸附于其表面；然后在囊膜糖蛋白gB、gD、gH、gL 的參與下，病毒囊膜與細胞膜融合，核衣殼穿入細胞膜在細胞質(zhì)內(nèi)通過微管靠近核孔，將DNA 注入細胞核內(nèi)進行首輪復制。

病毒DNA 在細胞核內(nèi)通過級聯(lián)方式，轉(zhuǎn)錄并翻譯出即刻早期蛋白，再轉(zhuǎn)錄出早期蛋白和晚期蛋白。早期蛋白繼續(xù)參與病毒的復制，晚期蛋白則成為衣殼蛋白對新復制的病毒DNA 進行組裝，在核膜處進行初級包裝，然后在胞漿內(nèi)再進行二級包裝，子代病毒粒子以出芽的方式釋放到三叉神經(jīng)節(jié)、嗅球和扁桃體等部位處于潛伏狀態(tài)。潛伏的病毒有兩種去路：①經(jīng)嗅神經(jīng)、三叉神經(jīng)和舌咽神經(jīng)的神經(jīng)鞘，快速到達腦和脊髓內(nèi)進行第二輪復制，形成化膿灶；②病毒通過血液循環(huán)到達全身各部位，但在血液中呈間歇性出現(xiàn)，滴度較低，因而血液檢測不出病毒時，不能排除PRV 感染的可能。

4 臨床癥狀

潛伏期一般為2～6 d，仔豬年齡越小，潛伏期越短，最短的為36 h，成年豬最長的可達11 d。

1）哺乳仔豬的癥狀：剛出生的仔豬第1 天精神尚好，第2 天開始發(fā)病，精神高度萎靡，被毛凌亂，拒絕吮乳，排黃色的稀薄糞便，少數(shù)嘔吐。共濟失調(diào)或原地轉(zhuǎn)圈、角弓反張、癲癇樣抽搐、發(fā)出唧唧的鼠叫聲，倒地側(cè)臥，四肢呈劃水樣運動，最終昏迷衰竭，一般在72 h 以內(nèi)整窩死亡。15 日齡以內(nèi)的仔豬，死亡率可達100%。

2）斷奶仔豬的癥狀：精神倦怠，厭食、發(fā)熱，體溫高達41～42 ℃，流漿液性鼻涕、咳嗽、打噴嚏，陣發(fā)性、強直性痙攣，后肢不協(xié)調(diào)，如劃船樣運動或呈犬坐式，頭頸部高度緊張，死亡率不超過5%。如并發(fā)多殺性巴氏桿菌、豬鏈球菌、豬副嗜血桿菌、胸膜肺炎放線桿菌等細菌感染時，則死亡率可達50%。

3）生長育肥豬的癥狀：輕度發(fā)熱，體溫在40～41 ℃左右，精神沉郁，食欲減退，打噴嚏，流黏性鼻涕，喘氣，腹式呼吸，呈犬坐姿勢。少數(shù)病例出現(xiàn)肌肉震顫甚至劇烈抽搐等神經(jīng)癥狀，無繼發(fā)感染時，死亡率不超過2%；如繼發(fā)細菌感染，則死亡率可達10%。

4）成年豬的癥狀：母豬在懷孕期前30 d 內(nèi)感染，胚胎可被吸收，母豬重新進入發(fā)情期，往往不易覺察，被認為是配種失敗；在妊娠中、后期感染，表現(xiàn)為流產(chǎn)、木乃伊胎和死胎，流產(chǎn)母豬推遲發(fā)情時間，返情率高；臨產(chǎn)前感染時，會產(chǎn)下虛弱仔豬，在出生后1 d 內(nèi)死亡。種公豬感染后睪丸腫脹，后期萎縮，喪失種用價值。其他臨床癥狀不典型，表現(xiàn)為咳嗽、發(fā)熱但增溫不高，食欲下降，少數(shù)病豬腹瀉和嘔吐。一般不發(fā)生死亡但可呈長期潛伏感染、帶毒和排毒狀態(tài)，是最危險的傳染源。

5）其他動物的癥狀：牛、羊、兔的臨床癥狀最為典型，主要表現(xiàn)為體表的任何部位，發(fā)生皮膚奇癢，病畜不停地啃咬或在墻壁、樹樁上摩擦發(fā)癢處，致使局部皮膚發(fā)紅、擦傷；后期體溫升高，出現(xiàn)狂躁、磨牙、吼叫、痙攣、咽喉麻痹和呼吸困難等神經(jīng)癥狀，在1～2 d 內(nèi)死亡。也有發(fā)病后無奇癢癥狀的，但在數(shù)小時內(nèi)死亡。

5 病理變化

1）仔豬：包括哺乳仔豬和斷奶仔豬，腦膜充血、水腫，有出血點，腦脊液明顯增多，鼻、咽、扁桃體黏膜廣泛充血、出血，肺水腫、出血并有壞死點，肝臟和脾臟有散在的白色壞死灶。

2）流產(chǎn)母豬：可見子宮內(nèi)膜炎，子宮壁增厚、水腫，陰道炎，壞疽性胎盤炎。腎臟表面有針尖大小的出血點，肺水腫、充血、出血，呈橡皮樣，腦膜有彌散性出血點。

3）種公豬：輸精管炎，睪丸鞘膜，睪丸白膜有壞死灶。

4）組織學病變：病豬腦和脊髓的灰質(zhì)、白質(zhì)發(fā)生非化膿性腦膜腦炎、神經(jīng)節(jié)炎，神經(jīng)細胞及神經(jīng)膠質(zhì)細胞壞死。腦膜和脊髓膜發(fā)生主要以單核細胞浸潤的血管套而增厚。單核細胞有明顯的核固縮和核碎裂。神經(jīng)元、星型細胞、少突膠質(zhì)細胞核內(nèi)，可見到嗜酸性包涵體，除神經(jīng)系統(tǒng)外，鼻黏膜、扁桃體、氣管和支氣管上皮細胞、結(jié)締組織細胞，也可見到核內(nèi)包涵體。

5）其他動物：牛、羊、兔等動物可見皮膚局部擦傷、裂口，皮下水腫，肺充血、水腫，心包積水，心外膜有出血點，大腦皮質(zhì)和白質(zhì)有化膿性壞死灶。

6 診斷

1）臨床診斷：根據(jù)2 周齡以內(nèi)的仔豬出現(xiàn)大批死亡，有共濟失調(diào)、后肢震顫、角弓反張，倒地后四肢呈游泳狀，發(fā)出老鼠般的唧唧叫聲等臨床癥狀，隨著豬齡的增大，其死亡率顯著降低等特征；結(jié)合橡皮樣肺，肝和脾表面有灰白色壞死灶，腦膜充血、出血等解剖特征，即可初步懷疑診斷為PRV 感染。

2）實驗室診斷：在沒有仔豬，只有育肥豬或種豬發(fā)病的情形下，臨床作出診斷較為困難，必須進行實驗室診斷。

①病毒的分離鑒定：取流產(chǎn)胎兒、患病動物的鼻咽分泌物、腦組織、扁桃體、肺臟組織等病料，經(jīng)處理后接種易感細胞如：豬腎傳代細胞（PK-15）、倉鼠腎傳代細胞（BHK-21）、雞胚成纖維細胞（CEF）等，在24～72 h 內(nèi)，出現(xiàn)細胞變圓、拉網(wǎng)、脫落等典型的細胞病變（CPE），即可確診為PRV 感染。若第一次接種無CPE，將病料反復凍融盲傳3 代仍無CPE 時，則確診為PRV 陰性。若處于潛伏感染的豬群，病料通過上述接種易感細胞無CPE 時，不能立即判斷為PRV 陰性，需經(jīng)大劑量地塞米松注射72 h 后，采集注射豬的鼻咽分泌物再行接種，于24～72 h 內(nèi)仍無CPE 時，方能確診為PRV陰性。因為類固醇糖皮質(zhì)激素能誘導PRV 的激活與排毒，是PRV的激活劑。

②動物接種試驗：無條件進行細胞培養(yǎng)時，將可疑感染PRV 的病料皮下注射家兔，在36 h 后觀察，若在家兔接種部位發(fā)生瘙癢、啃咬等典型癥狀并于2～5 d 內(nèi)死亡，則確診為PRV 感染。

③PCR 檢測：采用熒光PCR 技術(shù)，采集扁桃體、三叉神經(jīng)節(jié)組織，無需糖皮質(zhì)激素激活就可判定是否處于PRV 潛伏感染。采集病豬鼻咽分泌物，可判斷是否排毒；采集死豬腎臟、脾臟病變組織，可對PRV 感染作出確診。

④血清學診斷：采集病豬血清，用ELISA 方法檢測，如gE 蛋白血清抗體陽性率為零，非gE 蛋白血清抗體陽性率高，其檢測值離散度小，則判定為疫苗免疫達到保護效果，排除PRV 感染；如gE蛋白血清抗體陽性率高，則確診為PRV 感染。

7 鑒別診斷

PR 與豬傳染性胃腸炎、仔豬黃痢、豬流行性乙腦炎、豬細小病毒病等有許多共同之處，應(yīng)當作鑒別診斷。

8 防治策略

不同層次的豬場或區(qū)域，根據(jù)自身的實際情況，可選擇以下策略：

1）建立無PRV 養(yǎng)殖區(qū)域策略。適用于有山脈、河流、溪溝等天然隔離屏障的村落或與外界隔絕的山區(qū)，所處區(qū)域內(nèi)有足夠數(shù)量的種公豬，并且所有生豬沒有PRV 攜帶者。在該區(qū)域內(nèi)務(wù)必做到如下幾點：①各養(yǎng)殖場、戶的生豬實行圈養(yǎng)，不到野外放豬。圈舍有院墻與外界隔離，以防夜間野豬與家豬接觸甚至交配。不到野外捕殺野豬自食或銷售，更不能捕捉野豬幼崽與家豬一同飼養(yǎng)；②嚴格自繁自養(yǎng)，不到區(qū)域外購進種豬和商品生豬。不從外界購買豬肉及其下水，一律自給自足；③有從事動物診療、防疫、閹割的鄉(xiāng)村獸醫(yī)，不從域外聘請獸醫(yī)人員入境并進行相關(guān)動物診療活動。

2）凈化根除策略。適用于下列兩種情形：①有PRV 零星感染，種豬gE 抗體陽性率不超過10%，生長育肥豬陽性率為陰性的區(qū)域或豬場。群體在沒有免疫的基礎(chǔ)上，進行全面血清學檢測，淘汰gE抗體陽性個體。豬群連續(xù)2 次血清學檢測，gE 抗體全為陰性時，即可判定為PRV 陰性豬群；②豬群PRV 陽性率較高，包括種豬、生長育肥豬都有感染，但其規(guī)模和范圍仍然可控的豬場或區(qū)域，豬群可用gE 缺失疫苗如豬偽狂犬病Bartha-K61 株弱毒苗進行普免，種豬每隔4 個月免疫1 次，生長育肥豬免疫2 次，第一次在10～12 周齡進行，間隔4 周后免疫第二次。每半年進行一次血清學普查，連續(xù)3年。每次檢測種豬gE 抗體陽性的全部淘汰，非gE 抗體陽性的留著種用；生長育肥豬gE 抗體陽性的與非gE 抗體陽性的豬群分開飼養(yǎng)，直到出欄。

3）免疫策略。在廣大的山區(qū)農(nóng)村，由于近年來實現(xiàn)了水泥硬化路的村村通。因而無法杜絕散養(yǎng)戶從外地購進生豬，也就無法實施凈化和根除計劃。采用常規(guī)免疫和免疫性治療策略，較為現(xiàn)實。

①常規(guī)免疫?？蛇x用TK、gG 雙基因缺失的豬偽狂犬病活疫苗（HB-98 株）或gE 基因自然缺失的偽狂犬病活疫苗（Bartha-K61 弱毒株）對豬群進行免疫注射。

豬偽狂犬病活疫苗（HB-98 株）。注射時用滅菌生理鹽水稀釋為1 頭份/mL，豬不論大小，每次免疫均為1 mL：仔豬，無PRV 母源抗體時，出生后1 周內(nèi)滴鼻或肌肉注射1 次，斷奶后再注射1 次。有母源抗體的，45 日齡肌肉注射1 次；后備母豬，6 月齡左右肌肉注射1 次，間隔1 個月后加強免疫1 次，產(chǎn)前1 個月左右再免疫1次；經(jīng)產(chǎn)母豬，每4 個月免疫1 次；種公豬，每年春、秋兩季各免疫1次。

偽犬病活疫苗（Bartha-K61 弱毒株）。注射時用PBS 液稀釋為1 頭份/mL：仔豬，無PRV 母源抗體的，出生后7 日內(nèi)肌肉注射1次，0.5 mL；斷奶后再注射1 次，1.0 mL。有母源抗體的，28 日齡肌肉注射1 次，1.0 mL。斷奶后再注射1 次，1.0 mL；妊娠母豬，分娩前21～28 日肌肉注射1 次，2.0 mL；種公豬，每年春季肌肉注射1次，2.0 mL；生長育肥豬，從未接種過上述PRV 疫苗的，補欄7 日后肌肉注射1 次，1.0 mL。在斷奶后已接種上述PRV 疫苗的，可免于注射。

注意事項：在一個豬場，不能先后或同時使用上述兩種疫苗，更不能將上述兩種疫苗同時注射一頭豬或混合注射于豬群，以免發(fā)生基因重組。

②免疫性治療。在豬群發(fā)生本病時，可選擇下列治療措施：

哺乳仔豬：豬偽狂犬病活疫苗（HB-98 株），滴鼻，1 mL/頭；同時頸部肌肉注射，1 mL/頭；存活下來的仔豬，14 日后加強一次。另一側(cè)頸部肌肉注射黃芪多糖注射液10 mL +青霉素鉀160 IU，1 mL/頭，一套可注射10 頭仔豬，1 次/d，連續(xù)3 d，以增強免疫效果及控制細菌感染。

斷奶仔豬：豬偽狂犬病活疫苗（HB-98 株）頸部肌肉注射，2 mL/頭，14 日后加強一次。另外，按25 kg 體重計算，另側(cè)頸部肌肉注射黃芪多糖注射液10 mL +青霉素鉀160 IU 一套，1 次/d，連續(xù)3 d。

育肥豬：豬偽狂犬病活疫苗（HB-98 株）頸部肌肉注射，4 mL/頭，14 日后加強一次。另外，按50 kg 體重計算，另側(cè)頸部肌肉注射黃芪多糖注射液10 mL +青霉素鉀160 IU 二套，1 次/d，連續(xù)3 d。

種豬：免于治療，直接淘汰。

其他動物：牛羊等發(fā)生本病出現(xiàn)典型的奇癢癥狀時，可選用偽狂犬病活疫苗（Bartha-K61 弱毒株）進行緊急注射，牛5.0 mL/頭，羊3.0 mL/頭。存活下來不死的，14 日后加強一次。

注意事項：在上述緊急救治的同時，絕對不能使用地塞米松，因為糖皮質(zhì)激素是PRV 的激活劑，也是免疫抑制劑，注射后會加速病豬的死亡。

4）加強環(huán)境衛(wèi)生策略。豬舍定期清理糞便，搞好豬場及其周圍的環(huán)境衛(wèi)生，做好豬舍、工具、排泄物等的消毒。同時開展滅鼠、滅蠅、滅蚊等工作，嚴格控制犬、貓、鳥類和其他禽類進入豬場，杜絕人員往來，工作人員做好自身的消毒和防護措施?！?/p>