豬流行性腹瀉病毒感染機制與防控措施

王博偉

（廊坊市安次區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 河北廊坊 065000）

豬流行性腹瀉病毒（porine epidemic diarrhea virus，PEDV）可感染不同日齡、品種的豬只，其中以哺乳仔豬和育肥豬的易感性高。豬群感染后臨床主要表現(xiàn)為持續(xù)性水樣腹瀉，消瘦，嘔吐，采食量下降。種豬和育肥豬感染一周后大多能夠耐過，逐漸恢復(fù)正常，病死率極低，愈后良好，但一周齡以內(nèi)的新生仔豬感染后發(fā)病率可達100%，死亡率高達50%～100%[1]。該病自20 世紀七八十年代在歐洲豬場首次發(fā)現(xiàn)后，便迅速開始在世界范圍內(nèi)廣泛流行。期間隨著疫苗的大量使用發(fā)病率已經(jīng)逐漸趨于平穩(wěn)，直至2010 年，高毒力PEDV 毒株的發(fā)，導(dǎo)致豬流行性腹瀉（porine epidemic diarrhea，PED）在全球范圍內(nèi)又一次廣泛流行。為了有效降低豬流行性腹瀉的發(fā)生率，掌握該病科學(xué)的防控策略，世界各國的科研人員和獸醫(yī)工作者對該病的感染機制和防控措施進行了不懈的研究。本文結(jié)合近幾年來豬流行性腹瀉病毒的研究進展對該病的感染機制及綜合防治措施進行綜述。

1 豬流行性腹瀉病毒病原學(xué)概述

PEDV 屬冠狀病毒科，α 冠狀病毒屬成員。PEDV 病毒外觀多為球形，粒子直徑范圍為：50～140 nm。病毒內(nèi)部由核衣殼和核芯構(gòu)成，外部有囊膜包裹，囊膜表面分布著放射狀排列的纖突，纖突長約10 nm。PEDV 基因組全長28 kb，病毒5'UTR 有復(fù)雜的二級結(jié)構(gòu)，含病毒轉(zhuǎn)錄和復(fù)制元件；3'UTR 有特殊的RNA 結(jié)構(gòu)和復(fù)制酶結(jié)合的位點，參與調(diào)控病毒RNA 的復(fù)制和合成[2]。主要編碼4 個結(jié)構(gòu)蛋白：纖突蛋白（S），小膜蛋白（E），囊膜蛋白（M）)和衣殼蛋白（N）和一個輔助蛋白ORF3。

PEDV 對低溫有一定的抵抗力，在pH 值4～9 的環(huán)境中相對穩(wěn)定，沒有血凝活性。對消毒劑敏感，容易被2%氫氧化鈉、甲醛、氯仿、酚類等多種消毒劑滅活。

2 豬流行性腹瀉病毒的主要感染機制

豬流行性腹瀉病毒的發(fā)病機制與感染豬只日齡、病毒毒力、疫苗接種途徑和接種劑量存在相關(guān)性。通常人們認為糞-口傳播是PEDV 傳播的主要途徑。但隨著規(guī)?；i場生物安全制度的不斷完善和研究機制的不斷深入，有學(xué)者認為PEDV 可能還存在其他的感染途徑。李昱辰等[3]通過噴鼻感染試驗證明PEDV 能夠通過鼻腔感染，引起仔豬腸道發(fā)病，并對PEDV 在仔豬體內(nèi)經(jīng)鼻腔黏膜擴散至腸道的具體機制進行了研究。國外也有關(guān)于PEDV 稱能夠通過氣溶膠傳播的相關(guān)報道。

PEDV 主要感染豬腸上皮細胞，感染后造成腸上皮細胞變性，腸絨毛萎縮，脫落，腸道完整性降低，水分流失進入腸腔出現(xiàn)高滲透壓，感染后的腸細胞功能紊亂，從而導(dǎo)致消化和吸收不良性腹瀉的發(fā)生。S 蛋白作為PEDV 重要的功能蛋白之一，與其他冠狀病毒的S 蛋白一樣，具有能夠與受體分子發(fā)生相互作用的結(jié)構(gòu)區(qū)域，是病毒感染宿主細胞的第一步，病毒通過S 蛋白與宿主細胞表面的入侵受體結(jié)合后，通過網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的細胞內(nèi)吞途徑入侵宿主細胞。研究表明PEDV 與受體結(jié)合后會引起細胞的微絲骨架重排，改變細胞膜表面形態(tài)，為成功入侵宿主細胞提供了有利條件[4]。關(guān)于PEDV 的主要入侵受體，研究人員曾經(jīng)一度認為是氨肽酶N（APN），但在隨后的研究中發(fā)現(xiàn)APN 可能不是PEDV 的唯一功能受體，PEDV 是否還存在其他的入侵受體，對此尚無定論。

病毒入侵宿主細胞后釋放基因組，以基因組RNA 為模板，利用宿主細胞的酶系統(tǒng)、細胞器和原材料進行自身的復(fù)制和組裝。病毒在復(fù)制過程中會破壞宿主細胞的細胞器，影響宿主細胞的酶活性，改變宿主細胞的生命活動，誘導(dǎo)宿主細胞完全自噬，造成宿主細胞功能障礙。在PEDV 感染后期，宿主細胞的凋亡率明顯升高，并呈現(xiàn)出明顯的時間與劑量依賴性[5]。學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，PEDV 木瓜樣蛋白酶（PLP）在病毒誘導(dǎo)細胞凋亡的過程中發(fā)揮重要作用，也有學(xué)者認為PEDV 誘導(dǎo)細胞凋亡是通過線粒體中細胞凋亡誘導(dǎo)因子（AIF）介導(dǎo)而產(chǎn)生[6,7]。病毒粒子組裝完成后，以出芽的方式形成成熟的病毒粒子，然后通過胞吐作用釋放出細胞外。研究表明在病毒釋放過程中E 蛋白起著重要作用[8]。上述研究說明，PEDV 對宿主細胞的影響隨著感染時間而不斷變化的，感染初期主要通過誘導(dǎo)自噬抑制細胞凋亡，從而完成病毒自身復(fù)制，感染后期則通過誘導(dǎo)宿主細胞凋亡，而釋放出更多的病毒粒子到細胞外。

3 豬流行性腹瀉病毒的防治措施

3.1 免疫接種

疫苗接種是預(yù)防傳染病發(fā)生流行的重要措施，因地制宜制定科學(xué)合理的免疫程序是重中之重。對于豬流行腹瀉的防治可以選用豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉二聯(lián)活疫苗，或滅活苗進行免疫，通常使用活苗+活苗，或活苗+滅活苗。建議免疫程序為：后備母豬在配種前增加兩次免疫，經(jīng)產(chǎn)母豬每年進行兩次普免，分娩前30 d 免疫1 次。2010 年，隨著PEDV 變異株的出現(xiàn)，我國各地區(qū)養(yǎng)殖場出現(xiàn)大規(guī)模的PED 疫情，主要由于傳統(tǒng)的CV777 毒株的疫苗對PEDV 變異株的感染沒有保護作用[8]。但目前，市場上已經(jīng)有針對PEDV 變異株的感染的疫苗，如：豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉二聯(lián)活疫苗（SD/L 株+LW/L 株），豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉二聯(lián)活疫苗（WH-1R 株+AJ1102-R 株）等，廣大生豬養(yǎng)殖戶可以根據(jù)自身具體情況進行疫苗的選擇。

3.2 生物安全綜合防控

有效的生物安全措施是阻止傳染病和病原微生物進入豬場的重要途徑，嚴格的衛(wèi)生和生物安全措施可以有效防止豬流行性腹瀉病毒入侵。要防止豬流行性腹瀉的發(fā)生，從根源上解決豬流行性腹瀉問題困擾，就必須要優(yōu)化豬場的生物安全方案。外防輸入，內(nèi)防擴散。嚴格把關(guān)靠近養(yǎng)殖場的所有社會車輛，對飼料車、售豬車等必須進入豬場的車輛必須嚴格按照車輛三級洗消程序進行消毒、烘干；加強對豬只銷售環(huán)節(jié)的關(guān)注，售豬時采用三段趕豬模式：第一段為豬舍內(nèi)趕豬；第二段為豬舍門口到售豬臺；第三段為守住臺到裝豬車。場內(nèi)人員禁止進入售豬車內(nèi)，出場豬只不得趕回豬舍；所有進入養(yǎng)殖場的人員必須進行洗澡消毒，按照場區(qū)要求進行隔離，更換場內(nèi)衣物和鞋子后才能夠進入場區(qū)；生活物資及其其他進場物資，要在消毒間進行熏蒸、氣霧或者臭氧消毒后才能后帶入場內(nèi)。

養(yǎng)殖場內(nèi)部布局合理，生產(chǎn)區(qū)和生活區(qū)的衣物、用具、鞋靴等不可混用，各豬舍之間的物料、工具等也不得交叉使用。發(fā)病豬舍和其他健康單元之間設(shè)置隔離帶，為防止病毒擴散，人員、物資盡量要實現(xiàn)單向流通。為避免沖水污染，可將發(fā)病豬舍的下水道出口堵住，不使用水沖糞，同時盡量減少用水量。發(fā)病豬只產(chǎn)生的糞尿等統(tǒng)一進行打包，就地處理，病死豬只或胎衣等就地深埋，不得堆積到公共糞池[9]。加強對豬舍的消毒工作，對發(fā)病豬舍的墻面、地面、欄舍、器具及物料等進行徹底消毒后，使用高錳酸鉀等進行熏蒸，之后開窗通風(fēng)，再次進豬前，使用白石灰乳會產(chǎn)床進行白化，切斷傳播途徑，降低連續(xù)發(fā)病概率。

3.3 病情控制

豬場一旦發(fā)生豬流行性腹瀉感染后首先要將病情上報上級獸醫(yī)主管部門，及時隔離患病豬群，防止病毒擴散。排查致病源，選擇合理的治療方案進行綜合治療，治療期間不得隨意使用抗生素類藥物。其次，對于發(fā)病豬群進行靜默飼養(yǎng)，盡量減少人員和豬群流動，為避免豬只脫水，應(yīng)該供給充足的飲水供豬只自由飲用。對病死豬只按要求進行無害化處理，及時淘汰沒有飼養(yǎng)價值的僵豬。最后，加強對豬群的飼養(yǎng)管理工作，對隔離豬舍和病豬接觸的物品、器具、車輛等進行的嚴格消毒處理。隔離豬舍飼養(yǎng)員禁止串舍，盡量減少和其他豬舍飼養(yǎng)員的接觸機會，防止交叉感染。

另外，要做好母豬和仔豬的日常護理：豬場發(fā)生豬流行性腹瀉后對14 日齡以上的仔豬進行緊急斷奶，對于小日齡無法斷奶的仔豬，灌服IgA 抗體含量較高的初乳，10 mL/次，2 次/d。加強對緊急斷奶仔豬的護理，適當(dāng)補充水分，口服補液鹽，飼料中添加抗菌肽、電解質(zhì)、多維等提高仔豬抵抗力，大群用藥防治繼發(fā)感染。務(wù)必注意斷奶仔豬的保溫工作，必要時需增加保溫?zé)簟⒈叵涞裙┡胧?，同時加強夜間防護，減少經(jīng)濟損失?！?/p>