血清Beclin1、SIRT6水平與ST段抬高型心肌梗死患者PCI術(shù)后缺血再灌注損傷的關(guān)系

陳作強(qiáng)，李洲劍，衣帕爾古力·阿布拉，鞏麗華，張慧敏

1 巴州人民醫(yī)院心血管內(nèi)科，新疆 庫爾勒 841000；2 巴州人民醫(yī)院高血壓病科

近年來隨著人均壽命的延長和生活飲食習(xí)慣的改變，ST 段抬高型心肌梗死（STEMI）發(fā)病率和病死率逐年增加［1］。經(jīng)皮冠脈介入治療（PCI）術(shù)是有效的梗死罪犯血管開通方法，但仍有部分STEMI 患者因PCI術(shù)后心肌血液重新灌注導(dǎo)致缺血再灌注損傷（IRI），嚴(yán)重影響患者預(yù)后［2-3］。準(zhǔn)確預(yù)測STEMI 患者術(shù)后IRI對促進(jìn)預(yù)后改善尤其重要。研究表明，心肌細(xì)胞自噬、炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激參與心肌IRI發(fā)生發(fā)展［4］。芐氯素1（BECN1）是一種自噬相關(guān)蛋白，能與多種因子相互作用促進(jìn)自噬進(jìn)程，其濃度與自噬強(qiáng)度密切相關(guān)［5］。沉默信息調(diào)節(jié)因子6（SIRT6）是一種去乙?；?，具有抗炎、抗氧化和促進(jìn)自噬等多種作用［6］。既往實(shí)驗(yàn)報道，BECN1、SIRT6在心肌IRI組織中低表達(dá)［7-8］。2021年6月—2023年3月，我們探討了血清BECN1、SIRT6 水平與STEMI 患者PCI 術(shù)后IRI的關(guān)系，以期為改善STEMI患者預(yù)后提供參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2021 年6 月—2023 年3 月巴州人民醫(yī)院收治的150 例STEMI 患者為STEMI 組，男117 例、女33 例，年齡37～78（60.52 ± 8.45）歲；體質(zhì)量指數(shù)18.84～29.27（23.30 ± 1.91）kg/m2。STEMI 組納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《急性ST 段抬高型心肌梗死診斷和治療指南（2019）》［9］標(biāo)準(zhǔn)；②臨床資料完整；③患者家屬知情并簽署同意書；④接受PCI 治療［10］。排除標(biāo)準(zhǔn)：①PCI 術(shù)中或術(shù)后2 h 死亡；②年齡＜18 歲；③合并其他心臟??；④既往冠心病史；⑤近3 個月內(nèi)抗凝、抗炎治療；⑥合并免疫系統(tǒng)損害；⑦惡性腫瘤；⑧合并神經(jīng)系統(tǒng)疾病。另選取同期68例健康體檢無STEMI志愿者為對照組，男52例、女16 例，年齡19～77（58.31 ± 10.86）歲；體質(zhì)量指數(shù)18.96～27.06（22.84 ± 1.93）kg/m2；兩組性別、年齡和體質(zhì)量指數(shù)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05）。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)（2023-01-32）。

1.2 血清BECN1、SIRT6水平檢測 采集對照組體檢時和STEMI患者PCI術(shù)前靜脈血（3 mL），3 000 r/min離心15 min（離心半徑10 cm），留取上層血清，酶聯(lián)免疫吸附法檢測BECN1（試劑盒購自北京伊塔生物科技有限公司，貨號：YK-04628）、SIRT6（試劑盒購自武漢華爾納生物科技有限公司，貨號：WN-12037）水平。

1.3 PCI 術(shù)后IRI 判定 STEMI 患者均接受PCI 治療，根據(jù)PCI 術(shù)后是否發(fā)生心肌IRI 分為IRI 和非IRI。參考“第三版心肌梗死通用定義”［11］標(biāo)準(zhǔn)診斷心肌IRI：①開通閉塞血管后出現(xiàn)心動過緩、嚴(yán)重低血壓或頻發(fā)室性期前收縮；②經(jīng)藥物和（或）電復(fù)律、電除顫后，仍然存在嚴(yán)重的室性心律失常；③冠狀動脈造影顯示心肌梗死溶栓治療（TIMI）血流分級≤2 級。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS28.0 統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料符合正態(tài)分布以±s表示，比較采用t檢驗(yàn)；不符合正態(tài)分布以M（P25，P75）表示，比較采用U檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)。STEMI 患者術(shù)后IRI 的影響因素采用多因素Logistic 回歸分析；采用受試者工作特征（ROC）曲線分析血清BECN1、SIRT6 水平對STEMI 患者術(shù)后IRI 的預(yù)測價值，DeLong 檢驗(yàn)比較曲線下面積（AUC）。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清BECN1、SIRT6 水平比較 STEMI 組與對照組血清BECN1分別為25.22（18.10，33.57）、42.20（35.75，46.43）pg/mL，SIRT6 分別為2.71（1.73，3.88）、4.96（4.28，6.11）pg/mL，與對照組比較，STEMI 組血清BECN1、SIRT6 水平降低（P均＜0.05）。

2.2 IRI 與非IRI 患者血漿CHOP、Neu5Ac 水平比較 150例STEMI患者PCI術(shù)后57例發(fā)生IRI，IRI發(fā)生率為38.00%（57/150）。不同臨床資料IRI 與非IRI患者血漿CHOP、Neu5Ac水平比較見表1。以表1差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的項(xiàng)目為自變量，是否發(fā)生IRI（是/否=1/0）為因變量。多因素Logistic 回歸分析顯示，年齡增加（OR=1.094，95%CI：1.019～1.174）與白蛋白（OR=0.826，95%CI：0.723～0.943）、BECN1（OR=0.880，95%CI：0.830～0.933）和SIRT6（OR=0.338，95%CI：0.204～0.558）升高為STEMI 患者術(shù)后IRI的獨(dú)立危險因素（P均＜0.05）。見表2。

表1 不同臨床資料IRI與非IRI患者血漿CHOP、Neu5Ac水平比較

表2 影響STEMI患者術(shù)后發(fā)生IRI的多因素Logistic回歸分析

2.3 血清BECN1、SIRT6 水平對STEMI 患者術(shù)后IRI 的預(yù)測價值 ROC 曲線分析顯示，血清BECN1、SIRT6 水平聯(lián)合（AUC=0.872，95%CI：0.808～0.921）預(yù)測STEMI 患者術(shù)后發(fā)生IRI 的AUC大于BECN1（AUC=0.782，95%CI：0.707～0.845）、SIRT6（AUC=0.783，95%CI：0.708～0.846）單獨(dú)預(yù)測（Z分別為3.065、3.045，P均＜0.05）。見表3。

表3 血清BECN1、SIRT6水平對STEMI患者術(shù)后發(fā)生IRI的預(yù)測價值

3 討論

STEMI是冠狀動脈易破裂或糜爛所致急性血栓形成和/或冠狀動脈嚴(yán)重狹窄導(dǎo)致的心肌缺血、壞死，并伴有心電圖ST 段弓背向上的抬高，盡早進(jìn)行PCI 是STEMI 患者首選梗死相關(guān)血管血運(yùn)重建的方法，但有部分患者在缺血心肌重新獲得血流灌注時誘發(fā)心肌損傷，即IRI，IRI 可引起微血管阻塞、慢血流/無復(fù)流等冠狀動脈微循環(huán)功能障礙，加重心肌損傷，并增加心力衰竭和死亡風(fēng)險［12-13］。本研究中150例STEMI 患者PCI 術(shù)后IRI 發(fā)生率為38.00%，這與國內(nèi)學(xué)者報道的41.03%～62.50%相近［14-15］。分析STEMI 患者PCI 術(shù)后IRI 相關(guān)因素，對降低PCI 術(shù)后IRI發(fā)生和改善預(yù)后意義重大。

IRI病理機(jī)制復(fù)雜，涉及炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、細(xì)胞自噬、鈣離子超載、線粒體損傷等多種機(jī)制［4，16］。自噬是真核細(xì)胞在自噬相關(guān)基因調(diào)控下，利用溶酶體降解自身受損細(xì)胞器的過程，能防止細(xì)胞損傷以促進(jìn)其在不利條件下存活，對維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要［17］。心肌缺血階段，心肌細(xì)胞能激活自噬以清除死亡細(xì)胞的壞死線粒體、錯誤折疊蛋白等物質(zhì)以發(fā)揮心肌保護(hù)作用，當(dāng)自噬功能受損則會影響上述物質(zhì)清除，引起過量廢棄物質(zhì)堆積導(dǎo)致心肌細(xì)胞大量死亡［18］。BECN1是酵母自噬相關(guān)基因6的一種同源物，介導(dǎo)自噬蛋白定位于前體結(jié)構(gòu)以發(fā)揮自噬作用，因此BECN1 在自噬過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用［5］。LIU 等［19］通過建立大鼠IRI 模型研究發(fā)現(xiàn)，BECN1 蛋白在IRI 心肌中呈低表達(dá)狀態(tài)，與心肌細(xì)胞凋亡密切相關(guān)，上調(diào)BECN1 蛋白后能激活自噬，減少大鼠IRI。SUN 等［20］研究報道，上調(diào)心肌組織BECN1 表達(dá)，能促進(jìn)心肌細(xì)胞自噬，進(jìn)而抑制心肌炎癥反應(yīng)和心肌細(xì)胞凋亡，縮小IRI 后心肌梗死面積。上述研究表明，BECN1 對維持心肌細(xì)胞自噬功能、改善IRI 具有重要作用。但關(guān)于血清BECN1 水平與STEMI 患者術(shù)后IRI 的關(guān)系鮮見報道。本研究結(jié)果顯示，與對照組比較，STEMI 組血清BECN1 水平降低，其升高為STEMI 患者術(shù)后IRI 的獨(dú)立保護(hù)因素，說明血清BECN1 水平升高與IRI 風(fēng)險降低有關(guān)。分析原因可能是BECN1 升高能促進(jìn)心肌細(xì)胞自噬功能發(fā)揮，在心肌缺血再灌注階段清除誘發(fā)心肌細(xì)胞損傷和凋亡的壞死線粒體、錯誤折疊蛋白等物質(zhì)，維持心肌細(xì)胞功能，降低IRI發(fā)生風(fēng)險［21］。

心肌缺血再灌注期間因部分細(xì)胞功能代謝和結(jié)構(gòu)破壞，可激活炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激導(dǎo)致心肌損傷［4］。SIRT6是一種組蛋白去乙?；D(zhuǎn)移酶，具有高度保守的NAD+結(jié)合催化結(jié)構(gòu)域，不僅具備乙?；富钚?，還在炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、細(xì)胞自噬、能量代謝、DNA修復(fù)、衰老等多種病理生理過程中發(fā)揮重要作用［6］。YU等［22］研究報道，上調(diào)SIRT6能激活腺苷酸激活蛋白激酶/過氧化物酶體增殖物激活受體γ共激活因子-1α/蛋白激酶B信號通路，增強(qiáng)心肌自噬，進(jìn)而減輕心肌IRI。WANG等［23］研究報道，上調(diào)SIRT6能激活內(nèi)皮型一氧合酶/一氧化氮信號通路，抑制心肌氧化應(yīng)激，進(jìn)而減輕心肌IRI。MONTECUCCO 等［24］研究報道，上調(diào)SIRT6 能減少心肌梗死后再灌注期間中性粒細(xì)胞炎癥和氧化應(yīng)激，減少心肌IRI。上述研究表明，SIRT6 有助于維持心肌細(xì)胞功能，減輕IRI。但關(guān)于血清SIRT6 水平與STEMI 患者術(shù)后IRI 的關(guān)系尚不清楚。本研究結(jié)果顯示，與對照組比較，STEMI 組血清SIRT6 水平降低，其升高為STEMI 患者術(shù)后IRI的獨(dú)立保護(hù)因素，說明血清SIRT6水平升高與IRI 風(fēng)險降低有關(guān)。分析原因可能是SIRT6 升高能通過抗炎、抗氧化和促進(jìn)自噬等作用保護(hù)心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能，使其在再灌注期間不受到炎癥、氧化應(yīng)激等機(jī)制損傷，進(jìn)而降低IRI發(fā)生風(fēng)險［25］。

本研究結(jié)果還顯示，年齡和白蛋白能獨(dú)立影響STEMI 患者術(shù)后IRI，分析原因可能是年齡越大的STEMI 患者身體機(jī)能更差，心肌應(yīng)對血流再灌注應(yīng)激能力不足，因此IRI 風(fēng)險更高；白蛋白作為一種抗炎、抗氧化蛋白，可能通過抗炎、抗氧化作用發(fā)揮心肌保護(hù)作用，進(jìn)而降低IRI 風(fēng)險［15］。目前臨床尚缺乏能準(zhǔn)確預(yù)測STEMI 患者術(shù)后IRI 的方法或指標(biāo)。本研究ROC 曲線分析顯示，血清BECN1 水平為19.01 pg/mL，預(yù)測STEMI 患者術(shù)后IRI 的AUC為0.782；血清BECN1水平為2.94 ng/mL，預(yù)測AUC為0.783；血清BECN1、SIRT6 水平聯(lián)合預(yù)測AUC為0.872，聯(lián)合預(yù)測的AUC高于BECN1、SIRT6 單獨(dú)預(yù)測。說明血清BECN1、SIRT6 水平可能成為STEMI患者術(shù)后IRI 的輔助預(yù)測指標(biāo)，且聯(lián)合檢測血清BECN1、SIRT6 水平能提升其預(yù)測價值，有利于更好地指導(dǎo)臨床預(yù)防和降低心肌IRI，促進(jìn)STEMI 患者PCI術(shù)后康復(fù)。

綜上所述，STEMI 患者血清BECN1、SIRT6 水平降低，其降低與患者PCI 術(shù)后IRI 發(fā)生獨(dú)立相關(guān)，血清BECN1、SIRT6水平對STEMI患者術(shù)后IRI具有一定預(yù)測價值，且二者聯(lián)合的預(yù)測價值更高。但本研究結(jié)果還需前瞻性多中心研究驗(yàn)證。