阿爾茨海默病患者血清FGF23和ZAG水平表達與認知功能的相關(guān)性分析

李婷婷，陳 鳳，劉 然（內(nèi)江市第二人民醫(yī)院精神科，四川內(nèi)江 641000）

阿爾茲海默?。ˋlzheimer’s disease,AD）是一種導(dǎo)致大腦退化的疾病，是癡呆的主要原因，其臨床癥狀是患者思維和個人的日常獨立性能逐漸下降，輕者言語表達遲鈍、健忘，重者則喪失生活自理能力、智力下降，嚴重影響患者及其家庭的生活質(zhì)量，帶來沉重負擔[1-2]。該病目前仍無相對有效的治療方法，因此，在AD早期控制其發(fā)生的危險因素從而降低發(fā)病率是目前研究的熱點[3]。認知功能障礙的類型和病因極為復(fù)雜，包括高血壓在內(nèi)的慢性基礎(chǔ)病、反應(yīng)性神經(jīng)病等。成纖維細胞生長因子23（fibroblast growth factor 23,FGF23）是由骨細胞和成骨細胞產(chǎn)生的磷酸尿激素，參與調(diào)節(jié)鈣磷代謝，在許多罕見性、獲得性疾病或遺傳性疾病中，F(xiàn)GF23水平升高[4]。鋅-α-2-糖蛋白（zin-α-2 glycoprotein,ZAG）是由AZGP2基因編碼的一種組織相容性復(fù)合物Ⅰ分子和脂質(zhì)激活因子，有少數(shù)研究發(fā)現(xiàn)在癲癇患者及AD患者的腦脊液中有ZAG存在[5]。目前關(guān)于AD患者血清FGF23，ZAG水平分析的研究尚不明確，本研究通過檢測AD患者血清中FGF23和ZAG表達情況，探究其與患者認知功能的關(guān)系，為該類患者在早期臨床診斷、評估等方面提供參考。

1 材料與方法

1.1 研究對象 選取2021年4月～2022年4月在內(nèi)江市第二人民醫(yī)院精神科收治的90例AD患者作為研究對象，其中男性47例，女性43例，年齡55～86（72.16±5.36）歲，體質(zhì)量指數(shù)（body mass index,BMI） 22.37±1.24 kg/m2，平均受教育年限11.45±4.03年，吸煙史39例，高血壓病史25例，獨居23例，在婚67例，平均簡易精神狀態(tài)量表（MMSE）評分13.67±1.72分。同時選取90例同期在本院體檢健康人員作為對照組，其中男性44例，女性46例，年齡58～90（72.69±5.71）歲，BMI 22.75±1.46kg/m2，平均受教育年限12.18±4.32年，吸煙史35人，高血壓病史28人，獨居26人，在婚64人，平均MMSE評分29.56±2.89分。兩組在性別、年齡、BMI，受教育年限、高血壓、吸煙史、婚姻狀況等一般資料比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2/t=0.200,0.642,1.882,1.172,0.367,0.241,0.252,均P＞0.05），兩組的MMSE評分差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=44.823,P＜0.05）。納入標準：①通過檢查診斷為AD患者[6]；②經(jīng)過常規(guī)檢查顯示心、肺功能及血細胞檢測正常；③經(jīng)檢查排除中樞神經(jīng)導(dǎo)致的癡呆。排除標準：①有精神障礙病史或家族遺傳史；②并發(fā)惡性腫瘤及心腦血管疾病者；③信息缺失及無法配合研究者。該研究經(jīng)本院倫理委員會批準后實施，兩組研究對象及其家屬均簽署知情同意書。

1.2 儀器與試劑 FGF23，ZAG酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme linked immunaosorbont assay,ELISA）試劑盒（上?？瓢┥锟萍加邢薰荆?/p>

1.3 方法

1.3.1 臨床資料收集：收集所有研究對象的性別、年齡、體重、身高、受教育年限、高血壓病史、吸煙史、婚姻狀況等各項信息，計算體質(zhì)量指數(shù)（BMI）。

1.3.2 樣本采集：收集所有研究對象的空腹靜脈血5ml，室溫靜置30min后，3 000r/min離心15min，取上層血清，密封放置于-80℃冰箱保存待用。

1.3.3 血清FGF23，ZAG水平檢測：用ELISA方法檢測血清FGF23和ZAG水平，嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

1.3.4 簡易精神狀態(tài)評價量表（mini-mental state examination,MMSE）評估認知功能：用MMSE量表對AD患者進行認知功能的評估。MMSE量表總分范圍0～30分，每一項正確為1分，錯誤為0分。全表共分為5個部分：定向力、記憶力、注意力和計算力、回憶能力、語言能力。27分≤評分≤30分為認知功能正常，評分＜27分視為認知功能障礙，21分≤評分＜27分為輕度認知功能障礙，10分≤評分＜21分為中度認知功能障礙，評分＜10分為重度認知功能障礙。測試過程使用標準化用語，需要在安靜環(huán)境中進行。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 SPSS 25.0進行統(tǒng)計學(xué)分析，計數(shù)資料用率（百分比）［n（%）］表示，兩樣本之間的差異采用χ2檢驗；計量資料用均數(shù)±標準差（±s）表示，兩樣本之間的差異采用t檢驗；Pearson法分析AD組血清FGF23和ZAG表達水平與MMSE的相關(guān)性；受試者工作特征（receiver operating characteristic,ROC）曲線分析血清FGF23和ZAG對AD患者的診斷價值。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清FGF23和ZAG表達水平比較 與對照組相比，AD組患者血清FGF23（28.67±7.64 ng/ml vs 18.75±4.23 ng/ml）和ZAG（22.31±3.26 ng/ml vs 16.43±3.72 ng/ml）表達水平升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=10.776，11.278，均P＜0.05）。

2.2 血清中FGF23和ZAG水平對AD的診斷價值 見圖1。以血清FGF23和ZAG水平為檢驗變量，以是否發(fā)生AD為狀態(tài)變量（是=1，否=0）繪制ROC曲線。結(jié)果顯示，F(xiàn)GF23可輔助預(yù)測AD患者發(fā)生認知障礙，曲線下面積（area under curve,AUC）為0.870（95%CI: 0.814～0.927），根據(jù)分析結(jié)果，當截斷值為22.49ng/ml，敏感度為76.70%，特異度為86.70%，約登指數(shù)為0.634，ROC曲線見圖1；ZAG也可輔助預(yù)測AD患者發(fā)生認知障礙，AUC為0.849（95%CI: 0.793～0.906），當截斷值為19.88μg/ml，敏感度為75.60%，特異度為83.30%，約登指數(shù)為0.589；二者聯(lián)合檢測的敏感度為86.70%，特異度為88.90%，AUC為0.938（95%CI: 0.905～0.972），均顯著高于FGF23，ZAG單獨檢測（Z=2.023，2.648，均P＜0.05）。

圖1 血清FGF23和ZAG診斷ROC分析

2.3 AD患者血清FGF23和ZAG表達水平與MMSE評分的相關(guān)性分析 Pearson法分析顯示，AD患者血清中FGF23和ZAG表達水平與MMSE評分均呈負相關(guān)（r=-0.611,-0.480,均P＜0.05）。

3 討論

阿爾茲海默癥（AD）是一種神經(jīng)退行性的老年性疾病，具有復(fù)雜性、多因素性、漸進性和不可改變性[7]。AD患者的認知和記憶受到嚴重的影響，病因尚不明確，該疾病可能由多種因素的共同作用下發(fā)生，包括頭部損傷、家族遺傳史等[8]。認知功能障礙是指大腦在接受信息和處理時受到阻礙，在語言、記憶等一項或多項功能受到損傷，并對日常生活和社會能力造成影響，常發(fā)生于多種疾病后，如AD，顱腦損傷和腦卒中等均伴隨有不同程度的認知功能障礙，會降低患者生活質(zhì)量，甚至對患者的生命安全造成威脅[9]。

成纖維細胞生長因子23（FGF23）是成纖維細胞生長因子家族中成員之一，主要在骨骼、骨髓和成骨細胞中產(chǎn)生。FGF23是一種新興的血管生物標志物，相關(guān)研究顯示較高的血清FGF23水平與癡呆和AD事件風險增加有關(guān)，上調(diào)FGF23表達水平會增加癡呆風險，這表明FGF23相關(guān)的生物學(xué)途徑可能在癡呆的發(fā)展中發(fā)揮作用[10]。有研究已證實，在AD患者中觀察到FGF23蛋白濃度增加，抗衰老蛋白klotho（anti-aging protein，α-Klotho）濃度降低，并與炎性細胞因子水平有關(guān)，抑制FGF23或過表達α-Klotho會減少炎性細胞因子，說明FGF23/α-Klotho可能與AD的細胞炎癥有關(guān)[11]。也有報道顯示，上調(diào)血清FGF23表達水平會增加癡呆和AD發(fā)病的風險[12]。本研究中，AD組患者血清FGF23水平較高，說明FGF23可能參與了AD的發(fā)生發(fā)展，提示臨床中應(yīng)及時檢測其表達水平，對評估AD的發(fā)生有一定的潛在價值。相關(guān)性分析表明，AD患者血清FGF23與MMSE評分呈負相關(guān)性，F(xiàn)GF23表達水平越高，患者的認知障礙就越嚴重，F(xiàn)GF23可能影響AD的發(fā)生。此外，F(xiàn)GF23對AD的發(fā)生有一定的診斷價值。

鋅-α-2-糖蛋白（ZAG）是一種可溶性的糖蛋白，約41kDa，在葡萄糖代謝、胰島素抵抗、脂質(zhì)代謝、調(diào)節(jié)自身免疫反應(yīng)等一系列生理生化過程中發(fā)揮重要作用[13]。ZAG作為參與身體新陳代謝的脂肪因子，現(xiàn)在已被證明存在于大腦中，并在一些神經(jīng)系統(tǒng)疾病中發(fā)揮作用，如癲癇和AD[14]。ZAG在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的研究少之又少，雖然發(fā)現(xiàn)其在大腦中有表達，但其起源和分布仍存在爭議[15]。相關(guān)研究結(jié)果顯示，與對照組相比，發(fā)現(xiàn)在輕度AD患者的腦脊液中ZAG和抗凝血酶III（antithrombin III，ATIII）的水平顯著升高，并與其嚴重程度有關(guān)[16]。也有研究發(fā)現(xiàn)，在額顳葉癡呆患者的腦脊液中ZAG水平升高[17]。以上兩項研究結(jié)果與本研究中結(jié)果趨勢一致。但也有不同研究發(fā)現(xiàn)，死亡后的AD患者腦脊液中的ZAG水平要低于非AD癡呆患者和非癡呆患者[18]。因此，在AD患者中ZAG變化的作用機制尚不明確，需要更多的研究來證實。在本研究中，AD患者血清ZAG水平升高，且與MMSE評分呈負相關(guān)，ZAG可能參與了神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)生，從而影響AD；ZAG表達水平越高，造成神經(jīng)細胞減少，從而影響認知功能。ZAG對預(yù)測AD的發(fā)生有一定的診斷價值，表明ZAG可能成為評估AD發(fā)生的指標，且二者聯(lián)合檢測的AUC較高，均優(yōu)于FGF23和ZAG單獨檢測，表明聯(lián)合檢測血清FGF23和ZAG對判斷AD的發(fā)生有更高的預(yù)測水平，說明聯(lián)合檢測能更加全面反映AD患者的疾病情況，對臨床診斷AD有更好的效能。

綜上所述，AD患者血清FGF23，ZAG水平升高，且二者與認知功能障礙呈負相關(guān)，提示AD患者血清FGF23，ZAG可能與該病的發(fā)生發(fā)展相關(guān)。本研究為臨床研究AD提供了新的研究方向，有可能作為抗AD治療的潛在靶點，但FGF23，ZAG水平對AD的影響還有待研究。本研究納入病例數(shù)較少，并且未進行動態(tài)分析，結(jié)果可能存在一定的偏移，今后需增加樣本量進行研究和探討。