血清白細(xì)胞介素-35在腦梗死合并肺部感染患者中的動(dòng)態(tài)變化及意義

田杰 沈蓉 馮倩 周華

作者簡介：田杰，女，本科，主治醫(yī)師。

通信作者：周華

【摘要】 目的 研究腦梗死及腦梗死合并肺部感染患者血清白細(xì)胞介素-35（interleukinIL-35）動(dòng)態(tài)演變，為臨床研究提供依據(jù)。方法 回顧性選取蘇州市立醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科2019年12月—2020年12月住院的腦梗死患者60例，其中30例合并肺部感染者為A組，另30例未合并肺部感染者為B組，再隨機(jī)抽取同期健康人員30名為C組；A、B組患者分別于發(fā)病后24 h、48 h、7 d抽取靜脈血清IL-35，C組健康人員于入組當(dāng)天空腹抽取靜脈血清IL-35；比較A+B、C組IL-35指標(biāo)的差異及A、B組24 h、48 h、7 d的變化規(guī)律。結(jié)果 A、B組發(fā)病后24 h血清IL-35濃度低于C組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），隨后呈動(dòng)態(tài)上升的趨勢，至發(fā)病后7 d接近正常水平；A、B組各時(shí)間點(diǎn)比較發(fā)現(xiàn)，A組血清IL-35濃度發(fā)病后24 h、發(fā)病后48 h及發(fā)病后7 d均比B組低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 腦梗死發(fā)生后，患者血清中IL-35的濃度在發(fā)病后24 h最低，隨后逐漸上升，至發(fā)病后7 d升高到接近正常水平，且合并肺部感染者，血清IL-35濃度降低更明顯。

【關(guān)鍵詞】 腦梗死；白細(xì)胞介素-35；肺部感染

中圖分類號：R743.32? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號：1672-1721（2023）31-0053-03

DOI：10.19435/j.1672-1721.2023.31.018

流行病學(xué)調(diào)查研究顯示，腦卒中已超過缺血性心臟病、肺癌等，居于我國致死疾病之首[1-3]，而急性腦梗死是我國腦卒中的常見類型，占腦卒中的69.6%[4]，且致殘率及致死率高，給居民造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[3，5]。中風(fēng)誘發(fā)的免疫抑制綜合征（stroke-induced immunodepression syndrome ，SIDS）不止能減輕炎癥反應(yīng)，保護(hù)腦組織，還能削弱人體抵抗力，導(dǎo)致感染[6]。肺部感染是急性腦梗死的常見感染并發(fā)癥，不僅延長了住院時(shí)間及增加住院費(fèi)用，給患者造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，還增加了腦梗死患者的病死率[7]。IL-35為抑制性細(xì)胞因子，是IL-12家族中的一員，由EBI3和IL-12P35亞基非共價(jià)結(jié)合組成，由調(diào)節(jié)T細(xì)胞和B細(xì)胞分泌[8-9]，在促炎細(xì)胞因子（腫瘤壞死因子-α、干擾素-γ、IL-1β）引起炎癥后，IL-35可以在人非T細(xì)胞中上調(diào)[10-11]。而相關(guān)研究證實(shí)，TNF-α、IL-6的水平與腦動(dòng)脈狹窄程度相關(guān)[12]；小鼠動(dòng)物模型研究顯示，IL-35在腦缺血再灌注損傷早期呈下降趨勢，損傷后12 h達(dá)最低，12 h～7 d呈緩慢恢復(fù)趨勢[13]。故根據(jù)上述研究結(jié)論，進(jìn)一步研究IL-35在腦梗死及腦梗死合并肺部感染患者血清中的變化規(guī)律，為卒中后腦保護(hù)臨床藥物開發(fā)提供新的依據(jù)。

1? ?對象與方法

1.1 一般資料 回顧性選取2019年12月—2020年12月蘇州市立醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的腦梗死患者60例，30例合并肺部感染者為A組，30例未合并肺部感染者為B組，另選取同期健康人群30名為C組。3組研究對象的一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）（見表1），具有可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)患者臨床表現(xiàn)和有新發(fā)神經(jīng)系統(tǒng)缺損體征，結(jié)合頭顱CT排除外腦出血及顱內(nèi)占位，診斷為腦梗死，且后期經(jīng)頭顱磁共振成像（MRI）確診為腦梗死（診斷標(biāo)準(zhǔn)參考《中國急性缺血性腦卒中診治指南2018》）；患者腦梗死發(fā)病到入院時(shí)間小于24 h，且能在發(fā)病24 h內(nèi)完成首次IL-35抽血化驗(yàn)；向患者及家屬講解本次研究的目的和方法，并獲得患者及家屬的同意并簽署同意書；A組患者除符合上述標(biāo)準(zhǔn)外，需合并咳嗽、咳痰癥狀，經(jīng)胸部CT證實(shí)合并肺部感染。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并嚴(yán)重心肺肝腎功能不全者；合并其他部位感染者；合并惡性腫瘤者；合并系統(tǒng)性紅斑狼瘡、多發(fā)性硬化及其他自身免疫性疾病者。所有研究對象均知曉本研究情況并簽署知情同意書。本研究經(jīng)該院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)（編號：KL901191）。

1.2 方法 A、B組患者于發(fā)病后24 h、發(fā)病48 h、發(fā)病后7 d分別抽取靜脈血清檢測IL-35，C組健康人員于入組當(dāng)天空腹抽取靜脈血清檢測IL-35。測定血液收集及IL-35，抽取靜脈血2 mL，用肝素抗凝，

1 500 r/min，離心半徑15 cm，離心10 min，完全分離血漿，按照統(tǒng)一要求標(biāo)準(zhǔn)編號，保存于-80 ℃冰箱中待檢測，所有標(biāo)本收集完成后，采用美國Adlitteram daignostic Laboratories 提供的雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）試劑盒檢測血漿IL-35濃度，檢測方法嚴(yán)格按照試驗(yàn)設(shè)計(jì)的步驟進(jìn)行。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察A、B組24 h與C組血漿IL-35濃度是否有差異，A、B組24 h、48 h及7 d血漿IL-35濃度變化規(guī)律及有無差異。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用x±s表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，重復(fù)測量資料采用重復(fù)測量方差分析；計(jì)數(shù)資料用百分比表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

意義。

2? ?結(jié)果

2.1 腦梗死患者（24 h）與非腦梗死患者IL-35質(zhì)量濃度比較 腦梗死組（A+B組）發(fā)病后24 h的血清IL-35質(zhì)量濃度為（69.75±12.67）pg/mL，低于C組的（106.97±11.56）pg/mL，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=9.85，P＜0.001）。

2.2 A、B? ?2組患者3個(gè)時(shí)間點(diǎn)IL-35濃度比較 整體分析發(fā)現(xiàn)，2組患者時(shí)間、組間、交互作用比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。組內(nèi)比較，2組患者發(fā)病后24 h、48 h、7 d的IL-35水平逐漸升高；組間比較，A組患者發(fā)病后24 h、48 h、7 d的IL-35水平均低于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

3? ?討論

腦梗死是目前我國居民主要死亡原因之一，特別是對于合并肺部感染的患者，有較高的致殘率，給國民經(jīng)濟(jì)造成嚴(yán)重的負(fù)擔(dān)。腦組織發(fā)生缺血后，死亡和損傷的細(xì)胞通過釋放DAMPs激活小膠質(zhì)細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等，導(dǎo)致一系列的炎癥細(xì)胞因子釋放[14-15]，其中以IL-1、IL-6和TNF-α升高最為明顯[16]，在腦組織缺血后12～24 h達(dá)高峰[17]。IL-35是2007年新提出的細(xì)胞因子，為一種抑制性細(xì)胞因子，屬IL-12細(xì)胞因子家族中的一員，與IL-12同享IL-12p35亞基，與IL-27同享EBI3亞基[11]。研究表明，IL-35在多發(fā)性硬化、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等自身免疫性疾病中分泌減少[18]，而在許多惡性腫瘤疾病中表達(dá)升高，并被證實(shí)和胃癌進(jìn)展及肺部轉(zhuǎn)移相關(guān)[19-20]。目前IL-35與腦血管病的研究尚少，部分研究認(rèn)為，IL-35的表達(dá)與頸部血管斑塊的穩(wěn)定性相關(guān)，IL-35高表達(dá)提示頸部血管斑塊穩(wěn)定性更差[21-22]。動(dòng)物模型研究顯示，腦組織灌注損傷后，腦組織中IL-35 mRNA及蛋白表達(dá)呈先降低后升高的趨勢[23]。但是，腦梗死患者對IL-35表達(dá)如何，是否與動(dòng)物模型表達(dá)相似，目前未見類似研究。本研究以動(dòng)物模型為基礎(chǔ)，開展了腦梗死患者發(fā)病后各時(shí)間點(diǎn)對IL-35表達(dá)的研究，結(jié)果顯示，與動(dòng)物模型相似，腦梗死患者對IL-35表達(dá)亦呈先降低后升高的趨勢，發(fā)病后24 h最低，隨后逐漸升高，至發(fā)病后7 d腦梗死未合并肺部感染組血清IL-35接近正常水平，而腦梗死合并肺部感染組亦呈先降低后升高趨勢，但比腦梗死未合并感染組降低更為明顯，至發(fā)病7 d仍低于正常水平。感染后，炎癥細(xì)胞因子釋放增加，可促進(jìn)B細(xì)胞分化，使IL-35表達(dá)增加。本研究提示，腦梗死合并肺部感染組發(fā)病早期IL-35降低更為明顯，考慮可能與使用抗生素治療導(dǎo)致B細(xì)胞數(shù)量下降相關(guān)[23]。

腦梗死后患者的IL-35表達(dá)減低，且腦梗死合并肺部感染組IL-35降低更明顯，是否提示腦梗死早期IL-35表達(dá)越低，越易并發(fā)肺部感染呢？IL-35在腦梗死中扮演什么樣的角色？是否可以像治療自身免疫性疾病那樣，通過rIL-35干預(yù)來改善腦梗死患者的預(yù)后及降低肺部感染并發(fā)癥的發(fā)生率呢？進(jìn)一步動(dòng)物模型研究中采用rIL-35對腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ瓦M(jìn)行干預(yù)，結(jié)果顯示，于預(yù)后減小了梗死面積及改善了神經(jīng)功能恢復(fù)，提示rIL-35在缺血腦組織中有保護(hù)作用，且干預(yù)后可使炎癥因子IL-1、IL-6表達(dá)減少，提示rIL-35對腦組織的保護(hù)作用可能是通過減少炎癥因子來實(shí)現(xiàn)的[23]。這為臨床研究提供依據(jù)。在腦梗死患者中，rIL-35是否具有保護(hù)缺血腦組織，減小梗死面積及改善神經(jīng)功能恢復(fù)的作用，需待進(jìn)一步的臨床研究證實(shí)。

綜上所述，IL-35作為一種抑制性細(xì)胞因子，在腦梗死發(fā)病后早期呈下降趨勢，隨后逐漸上升，至發(fā)病后7 d接近正常水平，且血清IL-35水平與腦梗死患者并發(fā)肺部感染密切相關(guān)，這一發(fā)現(xiàn)有助于探討腦梗死患者并發(fā)肺部感染的發(fā)生機(jī)制及開發(fā)防治肺部感染的藥物。本研究樣本量偏少，在今后研究中可進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量，延長隨訪時(shí)間，并探索可升高IL-35的藥物，從而降低腦梗死患者肺部感染的發(fā)生率，促進(jìn)腦梗死患者早日恢復(fù)，降低死亡率及致殘率。

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（收稿日期：2023-08-04）