江蘇草莓二斑葉螨對(duì)5種殺螨劑的抗藥性監(jiān)測

江改青 黃孟麗 李雪銀 邢夢珂 張博文

（南京市食品藥品監(jiān)督檢驗(yàn)院，江蘇南京 211198）

二斑葉螨（TetranychusurticaeKoch） 隸屬蛛形綱（Arachnida）、蜱螨亞綱（Acari）、真螨目（Acariformes），廣泛分布于世界各溫帶、亞熱帶地區(qū)，是當(dāng)前設(shè)施草莓生產(chǎn)上的首要害蟲（Bi et al.，2016；何秉青 等，2023）。成螨和若螨在草莓葉片背面吸食汁液，導(dǎo)致葉片沿葉脈兩側(cè)出現(xiàn)白色斑點(diǎn)，危害嚴(yán)重時(shí)大量二斑葉螨聚集吐絲結(jié)網(wǎng)，葉片逐漸焦枯脫落，植株生長受到抑制，影響草莓產(chǎn)量和品質(zhì)，甚至造成絕收（Walsh et al.，2002；Wang et al.，2018；陳鵬和劉奇志，2022）。近年來，隨著江蘇省草莓種植面積的擴(kuò)大，連作年份的增加，以及普遍采用的匍匐莖苗分株育苗方法，草莓二斑葉螨發(fā)生逐年加重。

化學(xué)防治仍是防治二斑葉螨的主要手段（韓旸 等，2023）。然而，由于二斑葉螨體型小，繁殖速度快，發(fā)育周期較短，世代重疊十分嚴(yán)重，而且既能兩性生殖也可孤雌生殖，加上化學(xué)藥劑的長期、大量及不合理使用等原因，導(dǎo)致二斑葉螨對(duì)多種化學(xué)藥劑產(chǎn)生了抗藥性（劉慶娟 等，2011；Xu et al.，2018；Chen et al.，2019；李鑒鑒 等，2020；韓旸 等，2023）。鑒于用藥種類和施藥頻率等方面的差異，不同地區(qū)二斑葉螨種群抗藥性不同，同一種群不同藥劑之間抗藥性也不同（Xu et al.，2018；Chen et al.，2019）。本研究采用葉片浸漬法測定了南京溧水、棲霞、高淳、江寧，鎮(zhèn)江白兔，泰州泰興，常州嘉澤，徐州碾莊等江蘇8 個(gè)地區(qū)草莓二斑葉螨田間種群對(duì)5 種常用殺螨劑的抗藥性水平，比較了殺螨劑在不同地區(qū)間的敏感性差異，旨在明確江蘇省草莓二斑葉螨田間種群的抗藥性現(xiàn)狀，為二斑葉螨的可持續(xù)防控提供數(shù)據(jù)支撐。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源

二斑葉螨敏感種群：由江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院提供，于室內(nèi)不接觸任何藥劑情況下繼代飼養(yǎng)。

二斑葉螨抗性種群：分別于2022—2023 年，采自江蘇南京市溧水區(qū)白馬鎮(zhèn)、棲霞區(qū)八卦洲、高淳區(qū)漆橋鎮(zhèn)、江寧區(qū)江寧鎮(zhèn)，鎮(zhèn)江市白兔鎮(zhèn)，泰州市泰興鎮(zhèn)，常州市嘉澤鎮(zhèn)，徐州市碾莊鎮(zhèn)等8 個(gè)地區(qū)的草莓種植大棚（表1）。將采集到的二斑葉螨種群分別接種到盆栽草莓（品種為紅顏）葉片上飼養(yǎng)，飼養(yǎng)1 代，隨機(jī)取雌雄成螨進(jìn)行生物測定。室內(nèi)飼養(yǎng)條件：溫度（25 ± 1）℃，相對(duì)濕度60% ± 5%，光周期（晝∶夜） = 16 h∶8 h。

表1 草莓二斑葉螨田間種群采集點(diǎn)信息

1.2 供試藥劑

30%乙唑螨腈懸浮劑（沈陽科創(chuàng)化學(xué)品有限公司），43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑（愛利思達(dá)生物化學(xué)品有限公司），30%腈吡螨酯懸浮劑（日產(chǎn)化學(xué)株式會(huì)社），20%丁氟螨酯懸浮劑（江蘇省蘇州富美實(shí)植物保護(hù)劑有限公司），3%阿維菌素微乳劑（陜西上格之路生物科學(xué)有限公司）。

1.3 藥劑毒力測定方法

所有藥劑均采用改進(jìn)的葉片浸漬法進(jìn)行測定（李鑒鑒 等，2020）。在預(yù)備試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，首先將每個(gè)藥劑稀釋成5 個(gè)系列濃度藥液，并設(shè)置清水處理作為空白對(duì)照，每個(gè)濃度重復(fù)3 次。選取生理狀態(tài)一致的成螨，接種到新采集草莓葉片背面，每片復(fù)葉接30 頭成螨，待二斑葉螨在葉片上穩(wěn)定取食后（約12 h，以將有螨葉片放入水中，螨掉落數(shù)＜ 20%為標(biāo)準(zhǔn)），將有成螨的葉片浸入各濃度藥液中，輕輕搖動(dòng)，5 s 后取出，用濾紙吸去多余藥液。然后將草莓葉片葉柄放入一次性水杯（150 mL）中，加入50 mL 自來水。待藥液晾干后，統(tǒng)計(jì)葉片上的二斑葉螨數(shù)量，作為供試基數(shù)。將處理的葉螨置于溫度（25 ± 1）℃、相對(duì)濕度60% ± 5%、光周期（晝∶夜） = 16 h∶8 h 培養(yǎng)箱中飼養(yǎng)，并于48 h 后記錄死亡的螨數(shù)。用毛筆輕觸螨體，螨足不動(dòng)者視為死亡。統(tǒng)計(jì)各處理的總螨蟲數(shù)、死亡數(shù)及存活數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用DPS v7.05 數(shù)據(jù)處理軟件處理數(shù)據(jù)，根據(jù)劑量對(duì)數(shù)和校正死亡率幾率值的直線回歸法，求出毒力回歸方程、LC50值95%置信區(qū)間和相關(guān)系數(shù)r?？剐员稊?shù)（RR） = 田間種群的LC50值/室內(nèi)敏感種群的LC50值。二斑葉螨抗藥性水平的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)（Xu et al.，2018）：敏感水平（RR ＜ 3）、敏感度下降（3≤ RR ＜ 5）、低水平抗性（5 ≤ RR ＜ 10）、中水平抗性（10 ≤ RR ＜ 40）、高水平抗性（40 ≤ RR ＜160）、極高水平抗性（RR ≥ 160）。

2 結(jié)果與分析

2.1 草莓二斑葉螨對(duì)乙唑螨腈的抗藥性

不同地區(qū)草莓二斑葉螨對(duì)30%乙唑螨腈懸浮劑的抗藥性水平有明顯差異（表2）。8 個(gè)田間種群對(duì)30%乙唑螨腈懸浮劑處于敏感至中水平抗性（RR = 1.524～36.267）。其中，南京溧水、鎮(zhèn)江白兔、泰州泰興、徐州碾莊4 個(gè)地區(qū)種群均處于敏感水平；南京棲霞和常州嘉澤種群處于敏感度下降階段；南京高淳種群已有低水平抗性；南京江寧種群達(dá)到中水平抗性。

表2 草莓二斑葉螨田間種群對(duì)30%乙唑螨腈懸浮劑的抗性水平

2.2 草莓二斑葉螨對(duì)聯(lián)苯肼酯的抗藥性

不同地區(qū)草莓二斑葉螨對(duì)43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑的抗藥性水平有明顯差異（表3）。8 個(gè)田間種群對(duì)43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑處于敏感至高水平抗性（RR = 2.801～62.605）。 其中， 南京溧水、 鎮(zhèn)江白兔、徐州碾莊3 個(gè)地區(qū)種群均處于敏感水平；泰州泰興種群處于敏感度下降階段；常州嘉澤和南京棲霞種群已有低水平抗性；南京高淳種群達(dá)到中水平抗性；南京江寧種群達(dá)到高水平抗性。

表3 草莓二斑葉螨田間種群對(duì)43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑的抗性水平

2.3 草莓二斑葉螨對(duì)腈吡螨酯的抗藥性

不同地區(qū)草莓二斑葉螨對(duì)30%腈吡螨酯懸浮劑的抗藥性水平有明顯差異（表4）。8 個(gè)田間種群對(duì)30%腈吡螨酯懸浮劑處于敏感至中水平抗性（RR = 1.331～17.285）。其中，南京溧水、鎮(zhèn)江白兔、泰州泰興、徐州碾莊等4 個(gè)地區(qū)種群均處于敏感水平；南京棲霞和常州嘉澤種群處于敏感度下降階段；南京高淳種群已有低水平抗性；南京江寧種群達(dá)到中水平抗性。

表4 草莓二斑葉螨田間種群對(duì)30%腈吡螨酯懸浮劑的抗性水平

2.4 草莓二斑葉螨對(duì)丁氟螨酯的抗藥性

不同地區(qū)草莓二斑葉螨對(duì)20%丁氟螨酯懸浮劑的抗藥性水平有明顯差異（表5）。8 個(gè)田間種群對(duì)20%丁氟螨酯懸浮劑處于敏感至中水平抗性（RR = 2.233～20.518）。其中，南京溧水、鎮(zhèn)江白兔、泰州泰興3 個(gè)地區(qū)種群均處于敏感水平；南京棲霞、常州嘉澤、徐州碾莊3 個(gè)地區(qū)種群處于敏感度下降階段；南京高淳和南京江寧種群已有中水平抗性。

表5 草莓二斑葉螨田間種群對(duì)20%丁氟螨酯懸浮劑的抗性水平

2.5 草莓二斑葉螨對(duì)阿維菌素的抗藥性

不同地區(qū)草莓二斑葉螨對(duì)3%阿維菌素微乳劑的抗藥性水平也有明顯差異（表6）。8 個(gè)田間種群對(duì)3%阿維菌素微乳劑處于低水平抗性至極高水平抗性（RR = 6.599～340.995）。其中，南京溧水種群處于低水平抗性；鎮(zhèn)江白兔種群已有中水平抗性；南京棲霞、南京高淳、泰州泰興3 個(gè)地區(qū)種群處于高水平抗性；南京江寧、常州嘉澤、徐州碾莊3 個(gè)地區(qū)種群已有極高水平抗性。

表6 草莓二斑葉螨田間種群對(duì)3%阿維菌素微乳劑的抗性水平

3 結(jié)論與討論

隨著人們生活水平的提高，農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全越來越受重視，綠色生態(tài)草莓園也成為市民休閑娛樂好去處（許佳君和王盼盼，2022）。近年來，江蘇地區(qū)草莓市場需求量在不斷增加，種植面積越來越大（常向陽和葛悅，2021)，而草莓二斑葉螨發(fā)生也日益嚴(yán)重，給果農(nóng)帶來了較大的經(jīng)濟(jì)損失。目前，二斑葉螨已對(duì)多種殺螨劑產(chǎn)生了抗藥性（van Leeuwen et al.，2010；韓旸 等，2023）。宮亞軍等（2014）報(bào)道了北京地區(qū)的二斑葉螨對(duì)阿維菌素的敏感性在逐漸減低。Xu 等（2018）報(bào)道了二斑葉螨對(duì)乙唑螨腈、腈吡螨酯、聯(lián)苯肼酯等也產(chǎn)生了抗性。不同地區(qū)的二斑葉螨，由于用藥背景的不同，對(duì)殺螨劑的敏感性有差異（宮亞軍 等，2014）。本研究中，江蘇8 個(gè)地區(qū)的草莓二斑葉螨田間種群對(duì)5 種常用殺螨劑（30%乙唑螨腈懸浮劑、43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑、30%腈吡螨酯懸浮劑、20%丁氟螨酯懸浮劑、3%阿維菌素微乳劑）的抗性水平亦存在地區(qū)間差異。

地區(qū)間用藥背景會(huì)影響二斑葉螨對(duì)殺螨劑敏感性水平（宮亞軍 等，2014）。南京溧水和鎮(zhèn)江白兔草莓二斑葉螨均采自有機(jī)草莓種植大棚，生產(chǎn)上平時(shí)很少使用化學(xué)殺螨劑，更多的依靠捕食螨防治。因此，該地的二斑葉螨對(duì)測試的5 種殺螨劑均具有較高的敏感性。南京棲霞草莓二斑葉螨采自種植大戶，平時(shí)注重科學(xué)用藥和輪換用藥。該地的二斑葉螨對(duì)乙唑螨腈、腈吡螨酯、聯(lián)苯肼酯和丁氟螨酯具有較高的敏感性，但對(duì)阿維菌素敏感性較低。南京高淳草莓二斑葉螨采自當(dāng)?shù)氐霓r(nóng)戶，管理水平一般，該地二斑葉螨對(duì)乙唑螨腈、腈吡螨酯、聯(lián)苯肼酯和丁氟螨酯敏感性水平一般，但對(duì)阿維菌素敏感性較低。南京江寧草莓二斑葉螨采自種植戶的草莓秧苗田，為了保護(hù)草莓幼苗不受葉螨為害，用藥種類和用藥頻率均較高，該地二斑葉螨對(duì)測試的5 種殺螨劑敏感性均較低。泰州泰興、常州嘉澤、徐州碾莊的草莓二斑葉螨均采自草莓種植基地，種植管理水平高，也注重輪換用藥和生物防治，但因多年的重復(fù)種植，也存在一定的抗性。

本研究監(jiān)測結(jié)果顯示，江蘇8 個(gè)地區(qū)草莓二斑葉螨對(duì)乙唑螨腈、聯(lián)苯肼酯、腈吡螨酯、丁氟螨酯等4 種殺螨劑，大部分處于敏感水平，部分處于低至中等水平抗性，僅江寧種群對(duì)聯(lián)苯肼酯屬于高水平抗性。但各田間種群對(duì)阿維菌素均具有抗性，抗性倍數(shù)在6.599～340.995 之間，處于低至極高水平抗性。在生產(chǎn)上，對(duì)于存在高水平抗性的藥劑，應(yīng)暫停或減少使用，并注重藥劑的輪換使用（Bi et al.，2016）。鑒于乙唑螨腈、聯(lián)苯肼酯、腈吡螨酯、丁氟螨酯等對(duì)二斑葉螨的作用機(jī)制不同（Zhu et al.，2010；Hayashi et al.，2013；楊國璋，2014；Chen et al.，2019），可根據(jù)當(dāng)?shù)氐挠盟幈尘埃鳛榉乐尾葺呷~螨的輪換藥劑。因此，在二斑葉螨的防治中，應(yīng)密切注意抗性發(fā)展動(dòng)態(tài)，盡量與作用機(jī)制不同的有效藥劑交替使用，以延緩抗性的產(chǎn)生（Chen et al.，2019）。另外，結(jié)合當(dāng)?shù)氐挠盟幈尘昂退巹┨攸c(diǎn)，合理選擇藥劑和藥劑用量；根據(jù)作物生長期調(diào)整噴霧用水量，充分結(jié)合農(nóng)業(yè)管理、生物防治（Vacacela et al.，2010；郝建強(qiáng) 等，2015）、施肥（Abdelwines & Ahmed，2020）等綜合措施，實(shí)現(xiàn)對(duì)二斑葉螨的可持續(xù)防控，確保草莓產(chǎn)品安全。