內蒙古地區(qū)辣椒種質資源抗病性鑒定與評價

于海龍 靳 遠 周黛媛 張正海 曹亞從 吳華茂 馮錫剛 張寶璽 王秀芝 崔聰聰* 王立浩*

（1 中國農業(yè)科學院蔬菜花卉研究所，蔬菜生物育種全國重點實驗室，北京 100081；2 赤峰市農牧科學研究所，內蒙古赤峰 024031）

中國是世界上辣椒栽培面積最大和產量最高的國家，辣椒已成為中國最大的蔬菜產業(yè)（王立浩 等，2019；鄒學校 等，2022；鄒學校和朱凡，2022）。隨著辣椒種植規(guī)模的逐步擴大，種植區(qū)域逐年固定化，辣椒病害已成為制約辣椒產業(yè)持續(xù)發(fā)展的首要因素，給農民造成了巨大的經濟損失，特別是辣椒病毒病、辣椒細菌性瘡痂病、辣椒炭疽病、辣椒疫病等（王立浩 等，2016）。

病毒病是辣椒生產中發(fā)生最為普遍、種類最為繁多的病害，我國報道的辣椒病毒種類達30 種以上（劉勇 等，2019）。其中以辣椒輕斑駁病毒（pepper mild mottle virus，PMMoV）和番茄斑點萎蔫病毒（tomato spotted wilt virus，TSWV）為代表的新型病毒病近年來在中國多地均有發(fā)現，檢出比例不斷增高，危害日趨嚴重（高葦 等，2016；Li et al.，2016；李廷芳 等，2017；劉湘寧 等，2017；孫淼 等，2017；王少立 等，2017；湯亞飛 等，2018；嚴丹侃 等，2018；劉勇 等，2019；王昆 等，2019；于海龍 等，2020）。

PMMoV 屬于煙草花葉病毒屬（Tobamovirus），L系列等位基因是煙草花葉病毒屬的主要抗性基因（Boukema，1980；Genda et al.，2007；Tomita et al.，2011），L3和L4基因是目前辣椒中已發(fā)現的2 個主要的PMMoV 抗性基因，利用AFLP、遺傳連鎖分析及BAC 文庫測序等技術已開發(fā)出與抗病位點L3和L4連鎖的各類型分子標記（Sugita et al.，2004；Kim et al.，2008；Tomita et al.，2008；Yang et al.，2009），并應用于抗病材料篩選和轉育（Yang et al.，2012；李寧 等，2020；張寶璽 等，2020）。

TSWV 是布尼亞病毒科（Bunyaviridae）番茄斑萎病毒屬（Tospovirus）典型成員（http：//www.ictv.global/），目前報道的辣椒TSWV 抗病材料都來自中國辣椒種（Capsicumchinense），如PI152225、PI159234 和PI159236 等（Black et al.，1991；Boiteux，1995）。研究表明TSWV 抗性位點Tsw已成功克隆，該基因為顯性單基因，編碼CC-NB-LRR 蛋白，被TSWV 的Nss RNA 沉默抑制子誘導，出現過敏性反應，導致植物抗性（Kim et al.，2017），其連鎖CAPS 標記SCAC568也被開發(fā)并得到廣泛應用（Moury et al.，2000；Hoang et al.，2013；李寧 等，2020）。

辣椒炭疽病是由半知菌亞門炭疽菌屬（Colletotrichum）的幾個種引起的全球范圍內的真菌類病害（Than et al.，2008），主要危害辣椒果實，出現凹狀壞死病斑。在中國，辣椒炭疽病在多省發(fā)生且危害嚴重，特別在高濕地區(qū)，發(fā)病較重的地塊甚至會造成絕收（王瑩瑩 等，2014；周黛媛 等，2022）。針對炭疽菌不同致病菌株，國內外學者在辣椒不同連鎖群或染色體上都鑒定到多個QTL 位點（Mahasuk et al.，2009；Lee et al.，2010；Sun et al.，2015），但迄今為止尚未克隆到目標基因。

辣椒細菌性瘡痂病（bacterial spot disease）由黃單胞桿菌屬細菌（Xanthomonascampestrispv.vesicatori，Xcv）引起，是辣椒生產中常見的病害之一。我國20 世紀80 年代開始發(fā)現，孫福在等（1999）報道了該病在東北三省、內蒙古、山西和北京等地區(qū)不斷發(fā)生和蔓延，造成了很大的損失。辣椒細菌性瘡痂病發(fā)生在幼苗、葉片、葉柄、莖、果實和果柄等部位，尤其在葉片上發(fā)生普遍（姚明華 等，2013）。目前已報道的辣椒瘡痂病抗性位點主要有6 個，即Bs1～Bs6，分別對瘡痂病原菌P0～P10 生理小種具有不同抗性（Sahin & Miller，1998；Jones et al.，2002），其中Bs2位點研究較為深入，應用最為廣泛。Tai 等（1999a）利用遺傳連鎖分析將Bs2位點定位在標記S45 和S2 之間，其中S45 與Bs2位點緊密連鎖，遺傳距離為0.6 cM，在此基礎上Tai 等（1999b）利用酵母文庫和圖位克隆法將Bs2基因克隆，并在番茄上進行了異源轉基因驗證?；诳垢胁牧螧s2基因3’-UTR 端差異，Truong 等（2011）開發(fā)了Bs2位點連鎖標記14F/14R，并利用該標記在80 份不同背景的辣椒種質中進行驗證，發(fā)現與瘡痂病抗性表現完全吻合。

近年來，內蒙古自治區(qū)由于其得天獨厚的氣候環(huán)境，設施蔬菜產業(yè)發(fā)展迅猛。隨著辣椒產業(yè)在內蒙古地區(qū)的不斷發(fā)展，辣椒病害發(fā)生呈逐年上升趨勢（席先梅 等，2012；張曉梅 等，2019），選育和利用抗病品種是防治病害最經濟有效的措施。因此，開展辣椒抗病種質鑒定，培育抗病品種是當前辣椒育種面臨的緊迫任務。本試驗利用分子標記結合人工接種鑒定對內蒙古地區(qū)98 份辣椒種質資源進行PMMoV、TSWV、瘡痂病和炭疽病鑒定，以期發(fā)掘抗性較好的優(yōu)異種質資源，為今后抗病新品種選育和辣椒多抗聚合育種奠定材料基礎。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試辣椒材料共98 份，編號CF1～CF98（表1），為赤峰市農牧科學研究所辣椒課題組提供的高代自交系材料，多為前期從地方品種、國內外引進的自交系及F1品種經過多代分離、純化獲得，經田間試驗鑒定，其配合力和農藝表型均較好。

表1 供試辣椒材料的編號、名稱及類型

1.2 試驗方法

1.2.1 抗性基因的分子標記檢測 2021 年春季將辣椒播種于內蒙古赤峰市農牧科學研究所農場，苗期取幼嫩葉片，采用改良CTAB 方法提取DNA，利用1%瓊脂糖凝膠檢測DNA 的質量，Nanodrop ND-100 分光光度計（Thermo Fisher Scientific，Wilmington，DE，USA） 統(tǒng)一調整DNA 濃度為50～100 ng · μL-1，保存于-20 ℃?zhèn)溆?。利用PMMoV 抗病基因L3位點連鎖SCAR 標記IH1-04（Tomita et al.，2008）、CAPS 標記087H3T7（Yang et al.，2009）、TSWV 抗病基因Tsw連鎖CAPS 標記SCAC568（Moury et al.，2000）、瘡痂病抗病基因Bs2位點連鎖SCAR 標記Bs2-L1/R1（Tai et al.，1999a）、Bs2-S45（Tai et al.，1999b）和Bs2-14F/R（Truong et al.，2011）對98 份辣椒資源進行檢測。引物序列見表2。PCR 反應體系總體積為20 μL：2 ×TaqMaster Mix 10 μL（P111-01），購于南京諾唯贊生物科技股份有限公司，上下游引物（10 μmol ·L-1）各1 μL，模板DNA 2 μL，其余用ddH2O 補齊，擴增程序參考PCR Mix 說明書，退火溫度和延伸時間根據引物及片段大小略有調整。PCR 產物利用1.5%瓊脂糖凝膠電泳分離，恒壓180 V、30 min。其中標記087H3T7 和SCAC568 均為CAPS 類型標記，擴增后PCR 產物分別利用SspⅠ和XbaⅠ內切酶進行酶切，酶切體系和時間參考所購內切酶說明書。PCR 產物酶切后利用2%瓊脂糖凝膠進行電泳檢測，恒壓160 V，50 min。依據PCR 產物片段有無和大小來鑒定植株是否含抗病基因。PI152225 為L3和Tsw位點陽性對照，ECW20R 為Bs2位點陽性對照，茄門為陰性對照。

表2 用于抗病基因檢測的引物信息

1.2.2 PMMoV 苗期人工接種鑒定 根據分子鑒定結果，將鑒定含有L3位點陽性材料、4 份不含有L3位點的材料、抗病對照材料PI152225（CK 抗）、感病對照材料茄門（CK 感）進行播種，用于苗期人工接種鑒定，每個處理接種8 株，3 次重復。

PMMoV 苗期人工接種參考?a?lar 等（2013）的方法。接種前將自主分離的PMMoV 毒原PMMoV-caas（P1，2）在本氏煙上進行繁殖，取1 g 新鮮病葉加10 mL 的0.01 mol · L-1磷酸緩沖液（pH7.0），在冰浴條件下充分研磨，其勻漿作為接種液。辣椒幼苗3～4 片真葉時采用人工摩擦的方法對第1～2 片真葉進行接種。接種前在葉面上噴灑400 目金剛砂，接種后15～30 min 用自來水沖凈葉面多余接種液。以磷酸緩沖液磨擦接種健康辣椒幼苗為無病對照。5～7 d后在第3～4片真葉處復接。

接種完成后將辣椒幼苗放置于人工氣候室，溫度控制在25～30 ℃，2 d 后觀察有無過敏反應出現，14、21 d 后調查整體植株發(fā)病情況。結合有無過敏反應及植株整體發(fā)病情況確定材料抗感表型，具體標準為：若該材料超過80%的植株接種后出現過敏反應，且接種14 d 后植株整體健康，無花葉、黃化、畸形等PMMoV 典型發(fā)病癥狀，則該材料表型為抗病；若該材料超過80%的植株接種后無過敏反應出現，且接種14 d 后植株整體出現PMMoV典型發(fā)病癥狀，則該材料表型為感?。蝗粼摬牧铣霈FPMMoV 典型發(fā)病癥狀的植株比例低于80%，則認為該材料表型為抗感分離。

1.2.3 TSWV 苗期人工接種鑒定 根據前期分子鑒定結果，將含有Tsw位點陽性材料、2 份不含有Tsw位點材料及抗病對照材料PI152225（CK 抗）、感病對照材料茄門（CK 感）進行播種，用于苗期人工接種鑒定，每個處理接種8 株，3 次重復。

TSWV 苗期人工接種參考Hoang 等（2013）的方法。接種前將自主分離的TSWV 毒原TSWVcaas（61）在黃花煙（Nicotianarustica）上進行繁殖，取1 g 新鮮病葉加5 mL 的0.01 mol · L-1磷酸緩沖液（pH 7.0），在冰浴條件下充分研磨，其勻漿作為接種液。辣椒子葉期采用人工摩擦的方法進行接種。接種前在葉面噴灑400 目金剛砂，接種后15～20 min 用自來水沖凈葉面多余接種液。以磷酸緩沖液磨擦接種健康辣椒幼苗為無病對照，5～7 d后（辣椒幼苗兩葉一心至四葉一心時）進行復接。接種完成后將辣椒幼苗放置于人工氣候室，溫度控制在22～26 ℃。3～5 d 后觀察有無過敏反應出現，10 d 后開始統(tǒng)計發(fā)病情況。根據植株是否出現TSWV 發(fā)病癥狀來確定材料抗感表型。

1.2.4 辣椒炭疽病人工接種鑒定 在98 份辣椒材料中，根據資源類型選取45 份露地類型的辣椒資源進行炭疽病接種鑒定，接種方法為針刺法（Yoon &Park，2001）。接種菌株為Colletotrichumscovillei（編號Coll-153，序列信息已提交GeneBank，登錄號為 KC936995），將前期保存的菌株在固體PDA 培養(yǎng)基上28 ℃避光培養(yǎng)7～10 d，將炭疽菌轉接到液體PDA 培養(yǎng)基中，在28 ℃、200 r · min-1的避光搖床上振蕩3～5 d，使其產生大量的孢子。然后把液體PDA 用4 層無菌紗布過濾，除去菌絲以獲取孢子懸浮液，在顯微鏡下用血球計數板將孢子懸浮液的濃度調整為5×105個 · mL-1，用于接種鑒定。

在辣椒結果期采摘轉色期果實，先用自來水沖洗以去除果實表面的灰塵等雜物，再用75%的酒精浸泡果實1 min，晾干后用微注射器在果實表面刺出一個深1 mm、直徑0.4 mm 的傷口并注射1 μL的孢子懸浮液。每個材料接種8～10 個果實，每個果實根據果實的大小接種2～3 個點。

接種后，在透明的塑料整理箱底部平鋪4 層充分濕潤的滅菌濾紙，將接種后的果實接種點朝上置于其中，整理箱放在26 ℃的培養(yǎng)箱中，蓋上整理箱的蓋子，7 d 后調查發(fā)病情況，根據病斑直徑確定抗性水平。抗性評價標準（Ro et al.，2021）：抗?。≧），平均病斑直徑 ≤ 2 mm；中抗（MR），2 mm ＜平均病斑直徑 ≤ 4 mm；感?。⊿），4 mm ＜平均病斑直徑 ≤ 10 mm；高感（HS），平均病斑直徑 ＞ 10 mm。

2 結果與分析

2.1 抗病基因連鎖分子標記檢測結果

利用與PMMoV 抗病基因位點緊密連鎖的SCAR 標記IH1-04 和CAPS 標記087H3T7 對98 份材料進行檢測，其中標記IH1-04 為顯性標記，可在含有L3位點的材料中擴增出大小約150 bp 的片段，CAPS 標記087H3T7 在含有PMMoV 抗病基因L3和L4的材料中可擴增出440 bp 的條帶且無法被SspⅠ內切酶切開，不含L3和L4的材料也可擴增出440 bp 的條帶，但可以被SspⅠ內切酶切為300 bp 和140 bp 兩條片段。

檢測結果表明：98 份材料中，標記IH1-04 檢測出6 份材料，即CF26（1109-1）、CF28（11-135）、CF49（18-1607A）、CF53（25-1614A）、CF69（406C）和CF72（484-12C）可擴增出相應的目的條帶（表3，圖1-A）；而標記087H3T7 檢測發(fā)現，除上述6份材料為陽性外，CF1（02-41）和CF48（16-50A）2 份材料也為陽性（表3，圖1-B），均可擴增出440 bp 的條帶且無法被SspⅠ內切酶切開，表明這8 份材料在該抗性位點上均為純合基因型。

圖1 PMMoV 抗病位點連鎖標記IH1-04（A）和087H3T7（B）在部分辣椒種質中的檢測結果

表3 98 份辣椒種質的分子標記鑒定結果

TSWV 抗病位點Tsw連鎖標記SCAC568為酶切標記，抗感材料均可擴增出568 bp 的PCR 產物，抗病材料能被XbaⅠ內切酶酶切為494 bp 和74 bp兩條片段，而感病材料不能被酶切開，檢測結果表明：98 份辣椒材料中4 份材料CF6（03-152）、CF43（16029-1）、CF44（16029-2）和CF96（C1304）為陽性，且均為純合基因型（表3、圖2）。

圖2 TSWV 抗病位點連鎖標記SCAC568 在部分辣椒種質中的檢測結果

辣椒細菌性瘡痂病抗病位點Bs2連鎖標記Bs2-L1/R1 和Bs2-S45 為SCAR 類型特異標記，在含有Bs2位點的抗性材料中可分別擴增出約為500 bp 和900 bp 的條帶；Bs2-14F/R 為共顯性標記，抗病材料可擴增出約為500 bp 的條帶，感病材料可擴增出600 bp 的條帶。3 對標記檢測結果均表明：98 份辣椒材料中有10 份材料為陽性，分別為CF13（08-16A）、CF39（15-1604A）、CF46（16-40A）、CF59（32-1549C）、CF62（34-1547A）、CF64（34-90 黃 ）、CF70（422-6）、CF79（762-6）、CF84（9204-8）和CF95（C112），可能含有Bs2位點（表3、圖3）。

圖3 瘡痂病抗病位點連鎖標記Bs2 -L1/R1（A）、Bs2 -14F/R（B）和Bs2 -S45（C）在部分辣椒種質中的檢測結果

2.2 PMMoV 人工接種鑒定結果

根據前期分子鑒定結果，對2 個標記鑒定出的8 份PMMoV 陽性材料及4 份不含抗病標記目的條帶的材料CF57（306-2A）、CF64（34-90 黃）、CF97（W-01-07）和CF98（保2）接種PMMoV（P1，2）病原，以含有L3基因的抗性資源PI152225為抗病對照，茄門為感病對照。接種3～6 d 后觀察發(fā)現，抗病對照PI152225 和8 份陽性材料均出現明顯的過敏反應（HR），接種葉片上產生枯斑。接種21 d 后，8 份陽性材料和抗病對照植株均較健康，無發(fā)病癥狀（圖4-A、C），4 份不含L3位點的材料和感病對照均在接種10～15 d 后開始出現系統(tǒng)性花葉、畸形、卷葉和黃化等PMMoV 典型癥狀（圖4-B、D）。

圖4 辣椒苗期接種PMMoV 后發(fā)病情況

2.3 TSWV 人工接種鑒定結果

根據前期分子鑒定結果，對 4 份含有Tsw基因的材料CF6（03-152）、CF43（16029-1）、CF44（16029-2）、CF96（C1304），2 份不含Tsw抗性基因的材料CF57（306-2A）和CF64（34-90 黃）及抗病對照PI152225、感病對照茄門接種TSWV病原。

接種5 d 后觀察發(fā)現，Tsw分子標記檢測陰性的材料和感病對照均出現TSWV 發(fā)病癥狀，如黃化、斑駁、畸形；對照PI152225 和4 份陽性材料均出現明顯的過敏反應（HR），在接種葉上產生枯斑。接種10～15 d 后，4 份陽性材料植株生長發(fā)育均正常，接種葉上部的葉片也出現HR 反應，Tsw分子標記檢測陰性的材料和感病對照植株多數出現矮化，生長發(fā)育停止，葉片出現壞死斑點（圖5）。

圖5 辣椒苗期接種TSWV 14 d 后發(fā)病情況

2.4 炭疽病人工接種鑒定結果

采用離體果實接種法對45 份辣椒種質資源進行抗病性鑒定，結果表明（表4），辣椒果實炭疽病病斑直徑介于7.33～14.94 mm 之間，45 份材料均為感病或高感，未發(fā)現炭疽病抗病種質資源。其中感病材料12 份，占26.67%；其余表型均為高感。抗病對照PBC932 平均病斑直徑為1.95 mm，CF39、CF78、CF18 和CF62 病斑直徑較小，小于8 mm（圖6）。

圖6 不同辣椒種質接種炭疽病病原菌7 d 后果實發(fā)病情況

表4 45 份辣椒種質資源接種炭疽菌后病斑直徑

3 討論

PMMoV 最早在美國發(fā)現，我國于1994 年首次在新疆地區(qū)發(fā)現（向本春 等，1994），其傳播途徑多樣，帶毒種子、感病植株和土壤均可傳播，防治極為困難。隨著溫室、大棚等設施在我國的普及和規(guī)?；l(fā)展，由于設施內蔬菜種類相對單一，又不易輪作，PMMoV 在我國辣椒主產區(qū)檢出比例持續(xù)上升，部分地區(qū)檢出率超過60%，已逐漸成為危害我國設施辣椒生產的第一大優(yōu)勢病毒（王少立等，2017；劉勇 等，2019；王立浩 等，2021）。

利用抗病基因培育抗病品種是防治病害最經濟且有效的方法之一。目前，國外育種公司在我國推廣的主栽甜、辣椒新品種基本都含有PMMoV 抗病基因，導致國外品種在我國市場中長期占有主導地位（王立浩 等，2021）。因此，亟須培育具有自主知識產權的抗PMMoV 的國產辣椒品種。

本試驗利用分子標記篩選結合PMMoV 人工苗期接種鑒定，最終獲得了8 份PMMoV 抗病材料。此外，還篩選出4 份抗TSWV 和10 份攜帶瘡痂病抗病位點Bs2的辣椒種質。通過對材料來源進行追溯發(fā)現，試驗所用材料多為前期育種工作中從國內各地區(qū)搜集到的地方種、農家種和商業(yè)F1品種經過自主分離純化，或是與課題早期親本雜交后分離純化而篩選出的農藝性狀優(yōu)良、配合力高的核心自交系，部分材料則采集自農家生產田或從國內其他育種單位引進，并沒有記載詳細原始材料名稱。

調查發(fā)現，本試驗篩選出的抗病種質資源全部由商業(yè)F1品種分離純化，或與課題早期親本材料雜交后分離純化獲得。其中4 份TSWV 抗病資源中，CF6（03-152）和CF96（C1304）分別為采集于山東和遼寧地區(qū)的瑞克斯旺公司方燈籠甜椒品種（品種名稱未記載）與課題早期親本雜交后分離獲得；CF43（16029-1）和CF44（16029-2）為先正達甜椒品種紅羅丹與課題早期親本雜交后，經過6 代自交分離，根據田間表現，篩選出的農藝性狀較好的2 個自交系。這也反映出國外育種企業(yè)在辣椒抗病育種方面的相關研究開展較早，因此，國內辣椒育種科研單位和企業(yè)應加快辣椒抗病自交系的轉育和相應辣椒抗病品種的培育。本試驗中辣椒抗病種質的挖掘，為今后新品種的培育奠定了材料基礎，有助于提高國內辣椒品種競爭力。

抗病基因連鎖分子標記的開發(fā)可以加速抗病資源的鑒定過程，提高抗病基因轉育的效率。前人針對辣椒PMMoV 抗病位點L3和L4開發(fā)了各類型分子標記，如RAPD 標記E18272和E18286，與L3位點遺傳距離4.0 cM（Sugita et al.，2004）；SCAR 標記IH1-04 和189D23M，與L3位點遺傳距離小于0.1 cM（Tomita et al.，2008）；SCAR 標記L4SC340，與L4位點遺傳距離小于1.8 cM（Kim et al.，2008）；CAPS 標記087H03T7，與L4位點遺傳距離1.2 cM（Yang et al.，2009）；SNP 標記L4 segF & R，與L4位點遺傳距離0.3 cM（Yang et al.，2012）。Yang 等（2009）研究發(fā)現基于L4位點的連鎖標記087H03T7 也與L3位點緊密連鎖，可用于L3位點的輔助篩選，而基于L3位點開發(fā)的標記189D23M與L4位點也緊密連鎖，遺傳距離僅為0.8 cM，推測L3和L4位點可能是分別位于C.chinense和C.chacoense2 個辣椒種上同一位點的不同等位基因或是2 個緊密連鎖的不同抗病位點。

前期工作中，中國農業(yè)科學院蔬菜花卉研究所辣椒育種團隊對上述PMMoV 連鎖分子標記的適用性在不同基因型辣椒自交系中進行了驗證，發(fā)現標記IH1-04 和087H3T7 較其他標記更為準確，但標記087H3T7 無法區(qū)分L3和L4基因型，這與Yang等（2009）研究結果一致。目前，我國辣椒生產區(qū)域中PMMoV 致病型多以P1，2株系為主（張強 等，2014），L3和L4位點都對PMMoV 致病型P1，2具備抗性。本試驗利用分子標記IH1-04 和087H3T7 對辣椒種質資源進行篩選，分別鑒定出6 份和8 份陽性材料，其中自交系CF1（02-41）和CF48（16-50A）僅在087H3T7 標記下檢測為陽性，接種鑒定發(fā)現2份材料均為抗病表型，推測CF1（02-41）和CF48（16-50A）可能含有L4抗病位點，而標記IH1-04僅與L3位點連鎖并不適用，該結果有待進一步利用P1，2，3株系通過人工接種鑒定來驗證。

辣椒炭疽病在世界范圍內均有發(fā)生，且危害日益嚴重，本試驗對來自內蒙古地區(qū)的辣椒種質資源進行鑒定后并未發(fā)現抗病種質，這與前人認為一年生辣椒栽培種（C.annuum）中抗炭疽病種質資源極度匱乏的結論相一致（Yoon et al.，2004；周黛媛 等，2022）。雖然也有少數研究學者在栽培種C.annuum中鑒定發(fā)現多份抗病甚至高抗種質（馬榮群 等，2008；吳慶麗和秦剛，2013；彭澤 等，2022），但由于不同研究中所使用的接種方法、炭疽菌孢子懸浮液濃度、接種后培養(yǎng)條件、抗病等級劃分標準均不相同，因此無法相互比較。此外，本試驗中用于炭疽病抗性鑒定的辣椒種質均為羊角椒或甜椒類型，而張世才等（2022）研究表明，對炭疽病抗性較好的材料多為小果類型辣椒，馬榮群等（2008）研究發(fā)現抗炭疽病或耐炭疽病的辣椒種質農藝性狀多數較差。本試驗未篩選到抗炭疽病的種質，這一結果是否與選擇的辣椒材料類型有關，仍有待進一步研究。目前普遍研究表明，辣椒抗炭疽病種質資源多存在C.baccatum和C.chinense2 個種中（Lee et al.，2010；Ro et al.，2021），如C.baccatum中的PBC81、PBC80 和C.chinense中的PBC932 對炭疽菌具有良好的抗性（Kim et al.，2007；Mahasuk et al.，2009），但它們與常見栽培種C.annuum存在一定的雜交障礙，很難直接應用。因此，迄今為止商業(yè)化抗炭疽病辣椒品種十分稀缺，亟需加大抗炭疽病辣椒種質挖掘工作，特別是一年生辣椒的抗病資源，為抗炭疽病基因克隆、實用分子標記開發(fā)和抗病品種培育奠定材料基礎。