福建泉州石香薷萃取物的GC-MS分析

楊曉燁　李贊錦　張鴻燕　賴晨楠　茍文韜　洪鈴冰　葉明星　郭琳娟　張偉云

【摘要】目的：研究分析福建泉州產(chǎn)石香薷（ Mosla chinensis Maxim. ）超臨界萃取物的化學(xué)成分。方法：采用超臨界流體萃取法（supercritical fluid extraction，SFE）得到石香薷萃取物；使用薄層色譜法（thin-layer chromatography，TLC）進(jìn)行成分預(yù)試和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS）進(jìn)行成分分析。結(jié)果：石香薷萃取物經(jīng)TLC推測(cè)，可能含有酸性、醛類、酮類和油脂類化合物，通過GC-MS分析，提示可能含有112個(gè)化合物，其中相對(duì)含量最高的是百里香酚（CHO），為66.23％。結(jié)論：經(jīng)過TLC和GC-MS分析，初步確定了福建泉州產(chǎn)石香薷超臨界萃取物化學(xué)成分的種類和相對(duì)含量，為研究石香薷化學(xué)成分的藥理作用打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)，也為福建泉州產(chǎn)石香薷的開發(fā)利用提供文獻(xiàn)參考。

【關(guān)鍵詞】石香薷；超臨界流體萃取法；TLC；GC-MS；化學(xué)成分

【中圖分類號(hào)】R284.1【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517（2023）18-0033-07

DOI：10.3969/j.issn.1007-8517.2023.18.zgmzmjyyzz202318007

GC-MS Analysis of Extracts From Mosla chinensis Maxim. in Quanzhou of Fujian ProvinceYANG Xiaoye LI Zanjing ZHANG Hongyan LAI Chennan GOU Wentao

HONG Lingbing YE Mingxing GUO Linjuan ZHANG Weiyun

1.Department of Pharmacy，Xiamen Medical College/Xiamen Key Laboratory of Traditional Chinese

Medicine Bioengineering， Xiamen 361023，China;

2.College of Pharmacy， Fujian Medical University， Fuzhou 350122， ChinaAbstract：Objective To study the chemical composition of the extracts of Mosla chinensis Maxim. in Quanzhou of Fujian Province. Methods Supercritical Fluid Extraction （SFE） was used for extraction，The components of Mosla chinensis Maxim. were pretested by TLC， itschemical compositions were preliminarily identified by Gas Chromatography-Mass Spectrometry （GC-MS）.Results The components of Mosla chinensis Maxim. were speculated by TLC， which may contain acidic compounds， aldehydes， ketones and oil compounds， 112 compounds may becontained by GC-MS analysis， among which the highest relative content was thymol （CHO）， accounting for 66.23%.Conclusion The types and relative contents of chemical components of supercritical extracts of Mosla chinensis Maxim.in Quanzhou， Fujian Province were preliminarily identified by TLC and GC-MS， which can lay a solid foundation for future research on the pharmacological effects of the chemical components of Mosla chinensis Maxim. and provide literature references for the future development and utilization of Mosla chinensis Maxim.

Keywords：Mosla Chinensis Maxim; Supercritical Fluid Extraction; TLC; GC-MS; Chemical Components

石香薷（Mosla chinensis Maxim.）系唇形科 （Labiatae） 薺寧屬一年生草本植物，別名青香薷、土香薷、野香薷、還魂草、七星劍等［1］。石香薷作為我國特有中藥材，性味溫辛，歸肺、胃經(jīng)，常用于治療中暑發(fā)熱、感冒惡寒、頭痛無汗、腹痛吐瀉等癥［2］?，F(xiàn)代研究［3］表明，石香薷中含有揮發(fā)油類、黃酮苷類及酚酸類等多種化學(xué)成分，揮發(fā)油是石香薷發(fā)揮藥理活性的主要成分，具有抗菌抑菌［4］、抗氧化［5］、抗流感病毒［6］等生理活性。

我國石香薷資源分布廣泛，主產(chǎn)于廣西、廣東、湖南、湖北、浙江、江西、四川、福建等地，具有廣闊的應(yīng)用前景［7］。研究［8］表明，產(chǎn)地是影響石香薷藥材質(zhì)量的重要因素之一，可能與其土壤、氣候有關(guān)。目前有較多針對(duì)湖南、江西及浙江等產(chǎn)地的石香薷化學(xué)成分的研究報(bào)道，對(duì)福建泉州產(chǎn)石香薷的研究報(bào)道較少。本研究通過超臨界流體萃取法對(duì)福建泉州產(chǎn)石香薷中揮發(fā)油等化學(xué)成分進(jìn)行了提取，運(yùn)用薄層色譜法和氣質(zhì)聯(lián)用儀對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行分析，分析比對(duì)不同產(chǎn)地石香薷成分及其含量之間存在的差異，以期為研究石香薷相關(guān)藥效物質(zhì)基礎(chǔ)提供文獻(xiàn)參考，也為今后石香薷的開發(fā)研究利用打下基礎(chǔ)。

1材料與儀器

1.1藥品與試劑石香薷產(chǎn)于福建泉州，經(jīng)廈門大學(xué)藥學(xué)院陳全成副教授鑒定為石香薷Molsa chinensis Maxim.的干燥地上部分。2，4-二硝基苯肼、1%香草醛-濃硫酸試劑、0.05%溴酚藍(lán)試劑，均為分析級(jí)，購自海晟泰化工（廈門）有限公司；甲醇為色譜級(jí)，購自上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司。

1.2儀器QEY-300 g高速粉碎機(jī)，浙江屹立工貿(mào)有限公司生產(chǎn)；六號(hào)（100目）標(biāo)準(zhǔn)藥篩，浙江省紹興上虞華豐五金儀器有限公司生產(chǎn)；JCS-W5003電子天平，哈爾濱眾匯衡器有限公司生產(chǎn)；硅膠薄層板，海晟泰化工（廈門）有限公司生產(chǎn)；氣質(zhì)聯(lián)用儀，型號(hào)：7890B/7000，美國安捷倫科技有限公司生產(chǎn)；超臨界流體萃取儀，型號(hào)：*LC-2000，日本分光株式會(huì)社生產(chǎn)。

2方法與結(jié)果

2.1方法

2.1.1福建泉州石香薷SFE提取參照參考文獻(xiàn)中的方法［9-11］，將福建泉州產(chǎn)石香薷粉碎，過六號(hào)標(biāo)準(zhǔn)藥篩，稱取10.00 g石香薷用于超臨界流體萃取，萃取溫度45 ℃，壓力20 MPa，CO2流量3 mL/min，90 min后得到石香薷萃取物。吸取少量黃褐色的萃取物置于未使用且干凈的EP管中，加入適量色譜甲醇溶解，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過濾，作為石香薷萃取物GC-MS分析用樣品。

2.1.2TLC薄層檢測(cè)條件取福建泉州石香薷萃取物適量，分別點(diǎn)樣于硅膠G-CMC-Na薄層板的三處，分別用2，4-二硝基苯肼，1%香草醛-濃硫酸試劑和0.05%溴酚藍(lán)試劑進(jìn)行顯色，然后分別觀察顏色變化。

2.1.3GC-MS條件參照參考文獻(xiàn)中的方法［10，12-15］，氣相色譜的色譜柱為HP-5MS 5%苯基甲基硅氧烷毛細(xì)管柱（30 m×250 μm×0.25 μm），設(shè)置初始柱溫為50 ℃，保持5 min，程序升溫5 ℃/min，260 ℃保持5 min。柱子參數(shù)：柱內(nèi)流量為1 mL/min，氦氣作為載氣，進(jìn)樣量為1 μL，流速1 mL/min，無分流進(jìn)樣，溶劑延遲5 min。質(zhì)譜條件：選用電子轟擊離子源，電子轟擊能量70 eV，離子源溫度230 ℃，四極桿溫度150 ℃，質(zhì)量掃描范圍為40～550 m/z。

2.2結(jié)果

2.2.1SFE提取的石香薷萃取物狀態(tài)及提取率SFE提取所得萃取物呈黃褐色，液體呈濃稠狀，提取率為2.85％。

2.2.2TLC顯色結(jié)果如圖1所示，石香薷SFE萃取物分別在薄層板點(diǎn)樣三處，經(jīng)0.05%溴酚藍(lán)試劑顯色，呈現(xiàn)黃色斑點(diǎn)，提示可能含有中含有酸性化合物；經(jīng)2，4-二硝基苯肼試劑顯色，呈現(xiàn)黃色斑點(diǎn)，提示可能含有醛或酮類化合物；經(jīng)1%香草醛-濃硫酸試劑顯色，呈現(xiàn)紫色斑點(diǎn)，提示可能含有油脂類化合物。

2.2.3超臨界萃取及其GC-MS成分在上述實(shí)驗(yàn)條件的操作分析中，采用超臨界流體萃取法得到萃取物并進(jìn)行GC-MS分析，得到福建泉州產(chǎn)石香薷的GC-MS總離子流圖。譜圖如圖2所示。

使用Agilent Mass Hunter Qualitative Analysis B.06.00（AgtQual）分析軟件分析福建泉州產(chǎn)石香薷萃取物的總離子流圖（TIC），通過NIST MS譜庫進(jìn)行檢索比對(duì)，共發(fā)現(xiàn)有198個(gè)色譜峰，初步確定了112個(gè)化合物。具體見表1。

分析結(jié)果表明，福建泉州產(chǎn)石香薷所得化合物以烯烴、醇、酚、有機(jī)酸、酯類化合物為主，使用AgtQual軟件通過峰面積歸一法測(cè)定萃取物中化合物相對(duì)含量，總峰面積為140558316.30，所得鑒定峰峰面積合計(jì)為133901135.89，所得鑒定峰峰面積占總峰面積的95.26%，其中6個(gè)化合物占比>1%，從高到低依次為百里香酚（66.23%）；乙酸瑞香［草］酯（5.68%）；α-石竹烯（3.77%）；葉綠醇（3.57%）；反式角鯊烯（2.31%）；順-8，11，14-二十碳三烯酸（1.30%）。

3結(jié)果與討論

經(jīng)過與文獻(xiàn)［16］對(duì)比分析，湖南邵東產(chǎn)石香薷采用SFE得到萃取物，萃取條件為萃取壓力為20 MPa，萃取溫度為45℃，與本實(shí)驗(yàn)的萃取條件相同，因此比較兩產(chǎn)地超臨界萃取物的化學(xué)成分差異，其所得萃取物的化學(xué)成分含量由高到低依次是百里香酚、香薷酮和鄰異丙基甲苯。兩種產(chǎn)地的石香薷萃取物中含量最高的化學(xué)成分均為百里香酚。兩種產(chǎn)地的石香薷所得化合物有部分相同，僅有6種化合物為共有成分，具體為百里香酚、萜品烯、β-石竹烯、α-石竹烯、鄰異丙基甲苯和松油烯?，F(xiàn)代相關(guān)研究［17］表明，百里香酚是石香薷的主要活性成分之一，又稱麝香草酚，對(duì)常見食源性真菌、金黃色葡萄球菌、黃曲霉孢子等均有抑制作用，而上述兩個(gè)產(chǎn)地石香薷萃取物中主要活性成分含量的不同，可能對(duì)其藥理活性產(chǎn)生影響，可能是由采摘時(shí)間、儲(chǔ)存時(shí)間不同所致，尚且需要對(duì)應(yīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證和深入研究。

本實(shí)驗(yàn)通過超臨界流體萃取法萃取福建泉州產(chǎn)石香薷中揮發(fā)油等多種化學(xué)成分并進(jìn)行了GC-MS成分分析，豐富了其化學(xué)成分研究，為今后的石香薷藥用資源的開發(fā)利用提供一定的理論依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

［1］江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典（下冊(cè)）［M］.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1977：609-610.

［2］吳征鎰，李錫文.中國植物志（第66卷）［M］.北京：科學(xué)出版社，1977：289.

［3］葛冰，盧向陽，易克，等.石香薷的研究概況［J］.中藥材，2004（4）：302-305.

［4］李敏，苗明三.香薷的化學(xué)、藥理與臨床應(yīng)用特點(diǎn)分析［J］.中醫(yī)學(xué)報(bào)，2015，30（4）：578-579.

［5］劉夢(mèng)婷，羅飛亞，曾建國.石香薷精油成分分析及其抗菌抗氧化活性［J］.中成藥，2020，42（11）：3091-3095.

［6］杜江超，楊琳?qǐng)?，邵亮，?石香薷中酚酸類成分及其抗流感病毒活性研究［J］.中藥材，2021，44（11）：2584-2589.

［7］楊琳?qǐng)?東紫蘇和石香薷的化學(xué)成分及其抗流感病毒活性研究［D］.昆明：昆明理工大學(xué)，2020.

［8］江歲.石香薷生長分析與揮發(fā)油提取純化工藝研究［D］.長沙：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2015.

［9］曾虹燕，蔣麗娟，唐艷林，等.超臨界CO2萃取石香薷揮發(fā)油工藝的研究［J］.天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2003（1）：51-54.

［10］蔣紅梅，盧向陽，方俊，等.石香薷揮發(fā)油提取工藝研究［J］.中藥材，2007（9）：1135-1139.

［11］羅曉，龔海燕，陳志紅，等.石香薷精油的工藝優(yōu)化［J］.中國食品添加劑，2017（5）：124-128.

［12］林文群，劉劍秋，蘭瑞芳.閩產(chǎn)石香薷揮發(fā)油化學(xué)成分及其抑菌作用的研究［J］.福建師范大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），1999（2）：93-96.

［13］張瀟月，肖丹，白冰如，等.牛至和石香薷精油成分的GC-MS分析［J］.中草藥，2009，40（2）：208-209.

［14］毛燕，李祖光，曹江林.石香薷揮發(fā)油成分分析［J］.浙江臨學(xué)院學(xué)報(bào)，2008（2）：262-265.

［15］林崇良，蔡進(jìn)章，林觀祥.浙產(chǎn)石香薷揮發(fā)油化學(xué)成分的研究［J］.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2012，30（1）：197-198.

［16］曾虹燕，周樸華，唐艷林.石香薷揮發(fā)油提取的比較研究［J］.天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2003（2）：135-137.

［17］周輝.石香薷揮發(fā)油及其主要成分抗菌作用研究及揮發(fā)油微膠囊研制［D］.長沙：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2007.

（收稿日期：2022-10-31編輯：陶希睿）