茶葉中三氯殺螨醇?xì)埩袅縂C 測定的方法驗(yàn)證分析

◎ 肖 偉 ，符秋玉

（1.湖南中益食品化工檢測院， 湖南 益陽 413000；2.湖南口味王實(shí)業(yè)有限公司，湖南 益陽 413000）

本研究依據(jù)GB/T 5009.176—2003 標(biāo)準(zhǔn)要求及GB/T 32465—2015《化學(xué)分析方法驗(yàn)證確認(rèn)和內(nèi)部質(zhì)量控制要求》，旨在驗(yàn)證該分析方法的系統(tǒng)適用性、標(biāo)準(zhǔn)曲線線性、精密度、回收率、檢出限和定量限?？山邮艿膮⒖紭?biāo)準(zhǔn)如下：①系統(tǒng)適用性，各組分之間分離度不低于1.5，溶劑無干擾。②線性R2≥0.995。③加標(biāo)回收率在80%～110%內(nèi)。④精密度，在重復(fù)性條件下獲得的2 次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值≤算術(shù)平均值×10%或RSD ≤10%。⑤定量限與檢測限LOD ≤0.016 mg/kg，LOQ ≤0.092 mg/kg。

1 試驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

儀器：Agilent 氣相色譜儀（CN1933A029， 配ECD 檢測器）；OHAUS 電子天平（AR224CN）。標(biāo)準(zhǔn)品信息：正己烷中三氯殺螨醇（100 μg/mL，批號A1905311）；苯；石油醚：沸程30～60 ℃；丙酮、硫酸、無水硫酸鈉，以上試劑均為分析純。

1.2 原理

試樣中的三氯殺螨醇經(jīng)提取，其提取液與標(biāo)準(zhǔn)系列同時用酸凈化后，用配有電子捕獲檢測器的氣相色譜儀測定，根據(jù)色譜峰的保留時間定性，與標(biāo)準(zhǔn)比較定量[4]。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 氣相色譜條件

毛細(xì)管柱Agilent HP-5，30 m×0.32 mm（內(nèi)徑）0.25 μm；柱溫240 ℃；進(jìn)樣口溫度280 ℃；檢測器溫度300 ℃；流速1.0 mL/min；分流比10 ∶1；進(jìn)樣量1.0 μL。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配置

三氯殺螨醇標(biāo)準(zhǔn)使用液：量取正己烷中三氯殺螨醇溶液（100 μg/mL）標(biāo)準(zhǔn)溶液1.0 mL 至20 mL 容量瓶中，以石油醚稀釋至刻度，濃度為5.0 μg/mL。再按照上述標(biāo)準(zhǔn)使用液用石油醚稀釋成0.05～1.0 μg/mL的系列溶液，配制三氯殺螨醇標(biāo)準(zhǔn)系列0.05、0.10、0.20、0.50、1.0 μg/mL 分別各取5 mL，加0.5 mL 濃硫酸酸化，振搖1 min，于1 600 r/min 離心15 min，用吸管把上清液分別移入進(jìn)樣瓶中，供氣相色譜法測定。

1.3.3 樣品檢測

①預(yù)處理：取具有代表性的茶葉試樣100 g，粉碎后混勻稱取約5 g 的試樣（精確至0.01 g），置于125 mL具塞錐形瓶中，加20 mL 石油醚，于超聲波清洗器上振蕩30 min，濾入50 mL 具有刻度比色管中，以15 mL 石油醚分3 次洗滌殘渣，洗液并入比色管中，將石油醚濃縮，最后以石油醚定容至10.0 mL。②凈化：吸取試樣提取液5.0 mL 至10 mL 離心管中，加0.5 mL 濃硫酸，蓋上蓋子。振搖數(shù)次后，打開蓋子放氣，然后振搖1 min，于1 600 r/min 離心15 min，用吸管把上清液分別移入干凈具塞試管中(油試樣需將上清液濃縮至1.00 mL）。③測定：取上述標(biāo)準(zhǔn)系列溶液及樣品濃縮待測液，根據(jù)預(yù)先設(shè)定的方法及標(biāo)準(zhǔn)曲線，依據(jù)GB/T 5009.176—2003，采用ECD 檢測器進(jìn)行GC 測定[5]。

2 試驗(yàn)結(jié)果與討論

2.1 系統(tǒng)適用性

選取空白試驗(yàn)（按照樣品處理流程處理，不稱樣）及標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣，以保留時間定性、峰面積定量，通過色譜圖分析計算。其中，空白試驗(yàn)應(yīng)無干擾，三氯殺螨醇的理論塔板數(shù)應(yīng)＞8 000，結(jié)果見表1。

表1 三氯殺螨醇GC-ECD 專屬性試驗(yàn)結(jié)果表

結(jié)果表明，空白試驗(yàn)對待測組分沒有干擾，單組分分離度不要求，三氯殺螨醇的理論塔板數(shù)符合要求。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性

移取1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)系列溶液分別自動進(jìn)樣測定，記錄三氯殺螨醇色譜峰面積，以峰面積為縱坐標(biāo)，以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，外標(biāo)法峰面積定量繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果見表2。

表2 三氯殺螨醇GC-ECD 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性結(jié)果表

結(jié)果表明，三氯殺螨醇回歸方程：Y=1 134.336 8X+44.468 2，R2=0.996 2；三氯殺螨醇在0.05～1.0 μg/mL 范圍內(nèi)，呈良好的線性關(guān)系。

2.3 精密度試驗(yàn)

對本試驗(yàn)室采用空白基底樣品加標(biāo)做待測樣的方式測定以確定精密度，取同一批號樣品，稱取7 份，每份加入相同體積的標(biāo)液進(jìn)行提取測定，測得含量見表3。

表3 三氯殺螨醇GC-ECD 精密度試驗(yàn)結(jié)果表

以上數(shù)據(jù)表明，該條件下待測樣品的測量精密度符合要求。

2.4 加標(biāo)回收試驗(yàn)

采用標(biāo)準(zhǔn)回收的試驗(yàn)來確定方法的回收率。準(zhǔn)備8 個50 mL 離心管，編號1-12，其中，1-2 號不加標(biāo)；3-4 號加各標(biāo)準(zhǔn)使用液0.18 mL；5-6 號加標(biāo)準(zhǔn)使用液0.60 mL；7-8 號加各標(biāo)準(zhǔn)使用液1.2 mL。照樣品處理制備并測定，計算回收率，結(jié)果見表4。

表4 三氯殺螨醇GC-ECD 回收率結(jié)果表

以上數(shù)據(jù)表明， 待測加標(biāo)樣品回收率為82.7%～97.3%，符合要求。

2.5 檢出限

方法檢出限: 即某方法可檢測的最小濃度，通常用外推法可以求得。本試驗(yàn)依據(jù)GB/T 27417—2017《合格評定 化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南》，采用信噪比法評估LOD。一般來說，利用已知低濃度的分析物樣品與空白樣品的測量信號進(jìn)行比較，確定可檢出的最小濃度，典型的可接受的信噪比是2 ∶1或3 ∶1，即檢出限（LOD）：S/N=3±1，定量限（LOQ）：S/N=10±1。在本試驗(yàn)中，依次稀釋標(biāo)準(zhǔn)溶液，采用信噪比法來測定儀器的檢出限。吸取三氯殺螨醇標(biāo)準(zhǔn)使用液0.10 mL 到25 mL 作為檢出限待測液1；吸取三氯殺螨醇標(biāo)準(zhǔn)使用液0.03 mL 到25 mL，作為檢出限待測液2；吸取三氯殺螨醇標(biāo)準(zhǔn)使用液0.125 mL到25 mL 作為定量限待測液。經(jīng)測量，結(jié)果見表5。

表5 三氯殺螨醇GC-ECD 檢出限和定量限表

由以上數(shù)據(jù)分析可知，方法檢出限：當(dāng)稱樣量為5 g，稀釋體積為10.0 mL，檢出限為0.012 mg/kg，定量限為0.05 mg/kg，符合標(biāo)準(zhǔn)要求。

3 結(jié)語

綜上所述，本試驗(yàn)室依照GB/T 5009.176—2003，進(jìn)行系統(tǒng)適用性、線性、精密度、回收率、檢出限和定量限驗(yàn)證分析，由各指標(biāo)結(jié)果可知，各項驗(yàn)證指標(biāo)均符合GB/T 32465—2015《化學(xué)分析方法驗(yàn)證確認(rèn)和內(nèi)部質(zhì)量控制要求》及GB/T 27417—2017 《合格評定 化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南》的要求，表明本試驗(yàn)室具備按照該標(biāo)準(zhǔn)檢測茶葉中三氯殺螨醇?xì)埩袅康哪芰Α?/p>