• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    馬鈴薯淀粉汁水混菌發(fā)酵條件優(yōu)化及應(yīng)用

    2023-11-09 12:28:38張惠玲周慧寧李海峰
    關(guān)鍵詞:質(zhì)量

    胡 羚, 張惠玲, 周慧寧, 李海峰*

    (1. 寧夏大學(xué)食品與葡萄酒學(xué)院,寧夏銀川 750021;2. 寧夏食品微生物應(yīng)用技術(shù)與安全控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,寧夏銀川 750021)

    馬鈴薯(Solanum tuberosumL.)產(chǎn)業(yè)近年來(lái)在國(guó)內(nèi)迅速發(fā)展,在青海、寧夏、甘肅等西北地區(qū)形成了產(chǎn)業(yè)化基地[1]。 僅寧夏南部山區(qū)的馬鈴薯加工企業(yè)就有近3 000 家[2],已成為當(dāng)?shù)亟?jīng)濟(jì)增長(zhǎng)的支柱產(chǎn)業(yè)之一。 而在馬鈴薯加工中,會(huì)產(chǎn)生大量的汁水,其中約90%來(lái)自土豆淀粉、 土豆粉生產(chǎn)等加工工業(yè)[3],平均每處理6.5 t 馬鈴薯,就會(huì)產(chǎn)出1 t 淀粉、5 t 薯渣和20 t 汁水[4]。大量的馬鈴薯淀粉汁水的排放處理已成為馬鈴薯加工中亟待解決的問(wèn)題。

    研究表明,馬鈴薯淀粉加工汁水中主要含有碳水化合物、蛋白質(zhì)、脂類、有機(jī)酸、多酚、礦物質(zhì)、纖維和生物堿[5],同時(shí)汁水具有“三高”的特點(diǎn),即高泡沫、高化學(xué)需氧量、高生化需氧量[6]。 如果直接排放,汁水中的有機(jī)物質(zhì)非常有利于微生物或致病菌的大量生長(zhǎng)繁殖,可能造成環(huán)境中的生物污染問(wèn)題[7],且廢水中的蛋白質(zhì)會(huì)在自然發(fā)酵后釋放出硫化氫、氨氣、腐胺、尸胺等惡臭氣味污染環(huán)境[8]。 因此對(duì)馬鈴薯淀粉加工汁水進(jìn)行合理化處理至關(guān)重要。

    目前馬鈴薯淀粉加工汁水的處理方式有物理法、化學(xué)法、生物法[9]。 生物法因相對(duì)物理法和化學(xué)法具有操作簡(jiǎn)便,成本低廉等優(yōu)勢(shì),受到廣泛關(guān)注。但馬鈴薯淀粉加工主要集中在當(dāng)年的9 月至次年3 月[10],由于秋冬季環(huán)境溫度較低(3~20 ℃),菌株生長(zhǎng)緩慢,從而延長(zhǎng)了發(fā)酵周期,明顯增加了發(fā)酵過(guò)程中的能耗。 相比于單菌發(fā)酵,混菌發(fā)酵過(guò)程菌種之間存在相互協(xié)同作用,能夠擴(kuò)大對(duì)原料的適應(yīng)性和防雜菌的能力,因此作者選擇混合菌發(fā)酵馬鈴薯淀粉汁水。

    選用能在低溫(15 ℃)發(fā)酵降解馬鈴薯淀粉加工汁水的好氧型苔蘚假單胞菌和厭氧型黏質(zhì)沙雷氏菌混合使用,通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)、響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)提高馬鈴薯淀粉加工汁水中蛋白質(zhì)的降解率,縮短發(fā)酵周期,降低臭味物質(zhì)的產(chǎn)生,提高植物生長(zhǎng)所需的生長(zhǎng)素、氨基酸等,并將發(fā)酵后的汁水進(jìn)行應(yīng)用,以促進(jìn)黃瓜種子發(fā)芽。 在馬鈴薯淀粉廢水綠色化處理的基礎(chǔ)上,將其綜合利用開發(fā),實(shí)現(xiàn)了環(huán)境效益與社會(huì)效益雙贏。 尤其對(duì)于自然資源匱乏、干旱落后、 水資源極度短缺的寧夏南部山區(qū)而言,本研究為馬鈴薯產(chǎn)品加工后汁水的處理與利用提供了參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    黏質(zhì)沙雷氏菌(0 號(hào)菌):由作者所在實(shí)驗(yàn)室篩選并保藏于廣東省微生物菌種保藏中心(GDMCC);苔蘚假單胞菌(4 號(hào)菌):由作者所在實(shí)驗(yàn)室篩選并保藏。

    甲醇、乙腈(色譜純):Merck 公司產(chǎn)品;腐胺、酪胺、 組胺、 精胺、 亞精胺、 尸胺、 色胺標(biāo)準(zhǔn)品:Olchemim/isoReag 公司產(chǎn)品;BCA 試劑盒:賽默飛世爾科技有限公司產(chǎn)品;NB 培養(yǎng)基、 酪蛋白培養(yǎng)基:北京索萊寶科技有限公司產(chǎn)品; 磷酸鹽試劑盒:上海齊源生物科技有限公司產(chǎn)品。

    1.2 儀器與設(shè)備

    氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)聯(lián)用儀和1100 Series高效液相色譜儀: 美國(guó)安捷倫科技有限公司產(chǎn)品;NBS-I 型氮吹儀:合肥艾本森科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品;FR980 恒溫培養(yǎng)箱: 上海復(fù)日科技有限公司產(chǎn)品;全自動(dòng)氨基酸分析儀:蘇州華美辰公司產(chǎn)品;酶標(biāo)儀:山東博科生物產(chǎn)業(yè)有限公司產(chǎn)品;冷凍高速離心機(jī):美國(guó)Applied Biosystems 公司產(chǎn)品。

    1.3 實(shí)驗(yàn)方法

    1.3.1 菌株活化將保藏在甘油管中的菌株按接種體積分?jǐn)?shù)2% 分別接種在NB 液體培養(yǎng)基中活化,28 ℃恒溫培養(yǎng)24 h,轉(zhuǎn)接到酪蛋白固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)48 h。

    1.3.2 混合菌株拮抗實(shí)驗(yàn)采用劃線法[11],將活化的菌株在酪蛋白平板上兩兩劃線,一個(gè)菌株先平行劃4 條直線,另一個(gè)菌株在其垂直方向劃4 條與其相交的線,觀察16 個(gè)相交點(diǎn)上是否有抑菌圈,若無(wú)則表示2 個(gè)菌株間無(wú)拮抗作用,反之,則有拮抗作用。

    1.3.3 單菌發(fā)酵實(shí)驗(yàn)參考前期單菌發(fā)酵最優(yōu)條件進(jìn)行單菌發(fā)酵[8],4 號(hào)菌株在15 ℃發(fā)酵48 h、pH為5.35、接種體積分?jǐn)?shù)為2.37% 的條件下發(fā)酵馬鈴薯汁水, 測(cè)其蛋白質(zhì)降解率;0 號(hào)菌株在15 ℃發(fā)酵48 h,pH 為6.18,接種體積分?jǐn)?shù)為4.99% 的條件下發(fā)酵馬鈴薯汁水,測(cè)其蛋白質(zhì)降解率。

    1.3.4 混合菌單因素實(shí)驗(yàn)

    1) 接種體積分?jǐn)?shù)對(duì)蛋白質(zhì)降解率的影響 發(fā)酵溫度為15 ℃, 發(fā)酵時(shí)間為48 h,1∶1 的質(zhì)量比混合,接種體積分?jǐn)?shù)分別為1%、2%、3%、4%、5%,測(cè)定發(fā)酵后蛋白質(zhì)質(zhì)量濃度的變化。

    2) 菌種配比對(duì)蛋白質(zhì)降解率的影響 發(fā)酵溫度為15 ℃,發(fā)酵時(shí)間為48 h,接種體積分?jǐn)?shù)為2%,0 號(hào)菌與4 號(hào)菌質(zhì)量比分別為1∶3、1∶2、1∶1、2∶1、3∶1,測(cè)定發(fā)酵后蛋白質(zhì)質(zhì)量濃度的變化。

    1.3.5 混合菌響應(yīng)面優(yōu)化實(shí)驗(yàn)根據(jù)單因素試驗(yàn),選擇菌種復(fù)配比、接種體積分?jǐn)?shù)這2 個(gè)因素中自變量的最佳參數(shù), 進(jìn)行兩因素三水平的正交試驗(yàn),并利用 Design Expert 8.0 軟件, 采用 Central Composite Design 進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化。 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)因素見(jiàn)表1。

    表1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)因素Table 1 Experimental design factors

    1.3.6 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)將響應(yīng)面優(yōu)化后得到的最適條件進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),在15 ℃發(fā)酵48 h,測(cè)定空白(未發(fā)酵)、0 號(hào)菌、4 號(hào)菌、最優(yōu)混合菌發(fā)酵液中的蛋白質(zhì)、氨氮、磷酸鹽、胺類物質(zhì)、揮發(fā)性物質(zhì)、氨基酸及植物生長(zhǎng)激素。

    1.3.7 黃瓜種子發(fā)芽實(shí)驗(yàn)每個(gè)培養(yǎng)皿中加適當(dāng)稀釋的自然發(fā)酵汁水、混菌發(fā)酵汁水各10 mL,將預(yù)處理好的30 粒黃瓜種子均勻擺入培養(yǎng)皿中, 以去離子水作對(duì)照, 每個(gè)處理6 次重復(fù),28 ℃恒溫培養(yǎng)2 d,發(fā)芽結(jié)束后統(tǒng)計(jì)發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率、胚軸長(zhǎng)度。

    1.4 測(cè)定方法

    1.4.1 蛋白質(zhì)質(zhì)量濃度測(cè)定取發(fā)酵后的汁水,用BCA 蛋白質(zhì)試劑盒在酶標(biāo)儀中測(cè)定樣品中的蛋白質(zhì)質(zhì)量濃度,蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線見(jiàn)圖1。Fig. 1 Protein standard curve

    圖1 蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線

    1.4.2 氨氮質(zhì)量濃度測(cè)定參考GB/T 6432—2018《飼料中粗蛋白的測(cè)定凱氏定氮法》[12]進(jìn)行測(cè)定。

    1.4.3 磷酸鹽質(zhì)量濃度測(cè)定磷酸鹽質(zhì)量濃度的變化采用孔雀綠顯色劑和鉬酸鹽,鉬酸鹽可與無(wú)機(jī)磷酸鹽特異結(jié)合形成一種穩(wěn)定的有色化合物[13]。

    1.4.4 氨基酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)測(cè)定采用全自動(dòng)氨基酸分析儀測(cè)定汁水中各必需氨基酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)。

    1.4.5 胺類物質(zhì)測(cè)定采用高效液相色譜法測(cè)定,參考GB 5009.208—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中生物胺的測(cè)定》進(jìn)行測(cè)定[14]。

    1.4.6 揮發(fā)性氣體測(cè)定取5 mL 樣品置于頂空瓶中,用帶有50/30 μm DVB/CAR on PDMS 萃取纖維頭的自動(dòng)進(jìn)樣器插入瓶?jī)?nèi),于90 ℃平衡30 min,再壓縮手柄伸出萃取頭萃取30 min,取出,立即插入氣相色譜儀進(jìn)樣口(溫度250 ℃)解析3 min[15]。 GC條件為:HP-5 MS 石英毛細(xì)管柱(0.25 mm×30 mm,0.25 μm),程序升溫(初始溫度50 ℃,保持1 min;以4 ℃/min 升溫至250 ℃,保持5 min),進(jìn)樣口溫度250 ℃,載氣高純度氦氣,載氣流量1.0 mL/min,不分流進(jìn)樣。 MS 條件為:電子轟擊離子源(EI),離子源溫度230 ℃,四級(jí)桿溫度180 ℃,電子能量70 eV,m/z檢測(cè)范圍35~550[16]。

    1.4.7 植物生長(zhǎng)激素質(zhì)量濃度測(cè)定

    1) 樣本前處理 移取50 μL 樣本,用1 mL 甲醇-水-甲酸(體積比15∶4∶1)進(jìn)行提取濃縮[17],后用100 μL 體積分?jǐn)?shù)80% 甲醇溶液復(fù)溶, 過(guò)0.22 μm濾膜,置于進(jìn)樣瓶中,等待LC-MS/MS 分析[18]。

    2) 液相條件 色譜柱:Waters ACQUITY UPLC HSS T3 C18 柱(1.8 μm,100 mm×2.1 mm);流動(dòng)相:A 相超純水,B 相乙腈,梯度洗脫程序:流動(dòng)相體積比A/B在0~8.0 min 為95∶5;8.0 min 時(shí)變至5∶95,保持1 min;9.1 min 時(shí)變?yōu)?5∶5,保持至12.0 min。流量0.35 mL/min,柱溫40 ℃,進(jìn)樣量2 μL[19-20]。質(zhì)譜條件主要包括:電噴霧離子源(Electrospray Ionization,ESI)溫度550 ℃,正離子模式下質(zhì)譜電壓5 500 V,負(fù)離子模式下質(zhì)譜電壓-450 0 V, 氣簾氣(Curtain Gas)241 kPa。在Q-Trap 6500+中,根據(jù)優(yōu)化的去簇電壓(DP)和碰撞能(CE)對(duì)每個(gè)離子進(jìn)行掃描檢測(cè)[21-22],再利用軟件Analyst1.6.1 處理所得數(shù)據(jù)。

    3) 標(biāo)準(zhǔn)曲線 配制0.05、0.5、1、5、10、50、100 ng/mL 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,測(cè)定各個(gè)質(zhì)量濃度的峰面積,以各質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo),繪制不同物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)曲線[23],標(biāo)準(zhǔn)曲線線性方程及相關(guān)系數(shù)見(jiàn)表2。

    表2 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性方程及相關(guān)系數(shù)Table 2 Standard Curves

    4) 各激素質(zhì)量濃度的計(jì)算 將檢測(cè)到的所有樣本的積分峰面積比值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線線性方程進(jìn)行計(jì)算。

    式中:Cs為樣本中激素質(zhì)量濃度,ng/mL;c為樣本中積分峰面積比值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的質(zhì)量濃度,ng/mL;V1為復(fù)溶時(shí)所用溶液的體積,μL;V2為移取的樣本體積,mL。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 拮抗實(shí)驗(yàn)

    如圖2 所示, 酪蛋白平板上2 株菌均生長(zhǎng)良好,兩兩交叉處無(wú)抑菌圈,說(shuō)明2 株菌之間無(wú)拮抗作用,可以用于混合發(fā)酵。

    圖2 2 株菌的拮抗實(shí)驗(yàn)Fig. 2 Antagonistic effect test of 2 strains of bacteria

    2.2 單因素實(shí)驗(yàn)

    2.2.1 不同接種體積分?jǐn)?shù)對(duì)蛋白質(zhì)降解率的影響馬鈴薯淀粉汁水中的有機(jī)物的降解率往往會(huì)隨著微生物濃度的提高而增加。 由圖3 可知,隨著接種質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加,蛋白質(zhì)降解率先升高后又逐漸降低, 接種體積分?jǐn)?shù)在2% 時(shí)蛋白質(zhì)降解率最高,達(dá)26.91%。 當(dāng)接種體積分?jǐn)?shù)過(guò)小時(shí),菌種濃度過(guò)低,在低溫環(huán)境過(guò)久菌種活性可能會(huì)降低, 生長(zhǎng)緩慢,導(dǎo)致蛋白質(zhì)的利用率低;接種體積分?jǐn)?shù)過(guò)大時(shí),可能導(dǎo)致菌種因營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不足相互競(jìng)爭(zhēng), 導(dǎo)致菌體死亡,降解率下降;而當(dāng)接種體積分?jǐn)?shù)為5%時(shí),蛋白質(zhì)降解率有一定回升,可能是汁水中有微生物在競(jìng)爭(zhēng)中處于優(yōu)勢(shì)地位,導(dǎo)致某些菌種死亡。

    圖3 不同接種體積分?jǐn)?shù)對(duì)蛋白質(zhì)降解率的影響Fig. 3 Effect of different inoculation amount on protein degradation rate

    2.2.2 不同菌種配比對(duì)蛋白質(zhì)降解率的影響混菌發(fā)酵時(shí),菌種會(huì)有協(xié)同作用,也會(huì)抑制其他雜菌的生長(zhǎng)。 當(dāng)0 號(hào)菌與4 號(hào)菌質(zhì)量比為1∶2 時(shí),蛋白質(zhì)降解率最高,為31.36%;當(dāng)0 號(hào)菌∶4 號(hào)菌比例增大時(shí),蛋白質(zhì)降解率呈下降趨勢(shì),見(jiàn)圖4。 這可能是由于混菌中的0 號(hào)菌為黏質(zhì)沙雷氏菌,會(huì)產(chǎn)生一種具有生物活性的天然色素——靈菌紅素[24]。 研究發(fā)現(xiàn),靈菌紅素具有廣譜的殺菌能力,可高效殺死大腸桿菌、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌和新生隱球菌等多種細(xì)菌和真菌[25]。 可能在發(fā)酵過(guò)程中靈菌紅素抑制了其他微生物的生長(zhǎng),導(dǎo)致蛋白質(zhì)的降解率下降。

    圖4 不同菌種質(zhì)量比對(duì)蛋白質(zhì)降解率的影響Fig. 4 Effect of different mass ratio of strains on protein degradation rate

    2.3 響應(yīng)面優(yōu)化實(shí)驗(yàn)

    通過(guò)Design Expert 8.0 軟件對(duì)表3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行多元回歸擬合,根據(jù)實(shí)際因素建立二次多項(xiàng)式回歸方程:Y=56.32-0.069A+2.80B-1.18AB-2.92A2-8.30B2

    表3 響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果Table 3 Design and results of response surface experimental

    由表4 可知,模型方差分析P<0.05 顯著,失擬項(xiàng)P=0.213 9,不顯著,決定系數(shù)R2=0.984 1,R2adj=0.972 8, 表明該模型能夠解釋97.28%的關(guān)鍵因子對(duì)蛋白質(zhì)降解的影響, 可用于預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)降解條件。 根據(jù)方程標(biāo)準(zhǔn)化回歸系數(shù)中一次項(xiàng)系數(shù)的絕對(duì)值(A=0.069,B=2.8)可以得出,所選2 個(gè)變量對(duì)蛋白質(zhì)降解的影響大小為:B>A, 即菌種質(zhì)量比>接種體積分?jǐn)?shù)。

    表4 回歸模型方差分析表Table 4 Analysis of variance of regression model

    菌種質(zhì)量比和接種體積分?jǐn)?shù)呈向上凸包裹狀且等高線呈橢圓形, 說(shuō)明其具有一定的交互作用,配比對(duì)蛋白質(zhì)降解影響最大,但并未顯現(xiàn)出與其他因素的顯著交互作用, 見(jiàn)圖5。 通過(guò)Design Expert 8.0 軟件計(jì)算得出蛋白質(zhì)降解的最佳發(fā)酵條件為:0號(hào)菌與4 號(hào)菌質(zhì)量比為2.0∶1.7, 接種體積分?jǐn)?shù)為1.98%;預(yù)測(cè)此時(shí)蛋白質(zhì)降解率為56.56%。

    圖5 兩因素交互作用對(duì)蛋白質(zhì)降解率影響的響應(yīng)面圖Fig. 5 Response surface diagram of the effect of the interaction of two factors on protein degradation rate

    2.4 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    2.4.1 不同發(fā)酵組對(duì)蛋白質(zhì)、磷酸鹽、氨氮質(zhì)量濃度的影響馬鈴薯淀粉汁水具有高泡沫性,會(huì)減少汁水中的溶氧量[1],而利用好氧菌與厭氧菌相互作用,可減少單菌發(fā)酵時(shí)的動(dòng)力消耗,加快蛋白質(zhì)的降解速率。 利用最適發(fā)酵條件發(fā)酵馬鈴薯淀粉加工汁水,發(fā)現(xiàn)混菌的蛋白質(zhì)降解率為65.32%,顯著高于單菌種發(fā)酵(P<0.05),說(shuō)明混菌發(fā)酵性能顯著高于單菌發(fā)酵,見(jiàn)圖6。 在發(fā)酵過(guò)程中,磷酸鹽的質(zhì)量濃度無(wú)論單菌發(fā)酵或者混菌發(fā)酵都有一定程度提高,混菌發(fā)酵時(shí)磷酸鹽質(zhì)量濃度達(dá)2.86 mg/dL,較未發(fā)酵組顯著(P<0.05)升高,且顯著(P<0.05)高于單菌發(fā)酵,見(jiàn)圖7。 經(jīng)過(guò)微生物發(fā)酵,汁水中的磷酸鹽質(zhì)量濃度升高, 可能是因?yàn)樵谖⑸锏淖饔孟?,汁水中部分有機(jī)磷被分解為磷酸鹽,使得汁水中磷酸鹽質(zhì)量濃度增加。 氨氮質(zhì)量濃度過(guò)高會(huì)引起水體富營(yíng)養(yǎng)化,而少量的氨氮有利于植物生長(zhǎng),未發(fā)酵的馬鈴薯淀粉汁水中氨氮質(zhì)量濃度為3.33 g/L, 顯著高于其他組(P<0.05)。汁水經(jīng)微生物發(fā)酵后,氨氮含量降低, 混菌發(fā)酵后汁水中氨氮質(zhì)量濃度為1.63 g/L,較未發(fā)酵組降低51.05%,見(jiàn)圖8。 菌種在發(fā)酵過(guò)程中都能降低馬鈴薯淀粉加工汁水中的氨氮含量, 這可能是由于混菌由好氧菌與厭氧菌相組合,而這2 種菌種擁有硝化和反硝化微生物特性,能夠同時(shí)進(jìn)行硝化和反硝化,從而有效降低了馬鈴薯淀粉汁水中氨氮的質(zhì)量濃度。

    圖6 蛋白質(zhì)降解率驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)Fig. 6 Verification experiment of protein degradation rate

    圖7 磷酸鹽質(zhì)量濃度驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)Fig. 7 Verification experiment of phosphate content

    圖8 氨氮質(zhì)量濃度驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)Fig. 8 Verification test of ammonia nitrogen content

    2.4.2 不同發(fā)酵組對(duì)臭味物質(zhì)的影響馬鈴薯淀粉廢水中含有大量的有機(jī)物質(zhì),是微生物生長(zhǎng)的天然培養(yǎng)基, 當(dāng)馬鈴薯淀粉加工汁水自然發(fā)酵時(shí),會(huì)有大量的微生物聚集,其中蛋白質(zhì)是微生物的主要有機(jī)氮來(lái)源,一些異養(yǎng)微生物可以產(chǎn)生胞外蛋白酶將其水解成可利用的氨基酸和寡肽,為自身提供營(yíng)養(yǎng),也可能為其他不能產(chǎn)生胞外蛋白酶的微生物提供營(yíng)養(yǎng)[26]。 而蛋白質(zhì)在水解過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生具有刺激性臭味的硫化氫、氨氣,且有些氨基酸經(jīng)脫羧酶的作用會(huì)產(chǎn)生尸胺、腐胺等惡臭味物質(zhì)。由表5 可知,未發(fā)酵的馬鈴薯淀粉汁水中尸胺質(zhì)量濃度為4.72 mg/L,總生物胺質(zhì)量濃度為9.66 mg/L,均顯著高于其他處理組(P<0.05),而通過(guò)混菌發(fā)酵馬鈴薯淀粉汁水中總生物胺僅含0.93 mg/L,且沒(méi)有產(chǎn)生尸胺等惡臭味物質(zhì)。 單菌及混菌發(fā)酵的汁水中均未檢測(cè)到有吲哚、3-甲基吲哚、 硫化氫等刺激性惡臭味揮發(fā)物質(zhì),見(jiàn)表6。表明混菌在發(fā)酵馬鈴薯淀粉汁水降解蛋白質(zhì)的同時(shí)沒(méi)有產(chǎn)生多余的惡臭味物質(zhì),所以該混菌可用于發(fā)酵降解馬鈴薯淀粉汁水,減少臭味物質(zhì)的產(chǎn)生。

    表5 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中主要生物胺質(zhì)量濃度Table 5 Main substance content in the verification experiment

    2.4.3 不同發(fā)酵組對(duì)氨基酸、植物激素的影響有研究表明,胞外蛋白酶可能是通過(guò)一個(gè)或多個(gè)特定氨基酸或寡肽、或氨基酸和寡肽同時(shí)作為信號(hào)分子與膜傳感器相互作用,將信號(hào)傳遞到細(xì)胞中刺激產(chǎn)生的[24]。 表7 中混菌發(fā)酵后馬鈴薯汁水中氨基酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)比單菌株發(fā)酵高,但沒(méi)有未發(fā)酵的高。 可能是由于菌株在發(fā)酵過(guò)程中將部分氨基酸轉(zhuǎn)化為其他物質(zhì),也可能菌種將氨基酸作為一種信號(hào)分子傳遞到細(xì)胞中產(chǎn)生胞外蛋白酶,從而減少了氨基酸的量。由表8 可知,經(jīng)混合菌發(fā)酵后汁水中吲哚乙酸-纈氨酸甲酯、氧化吲哚乙酸、吲哚乙酸-亮氨酸、3-吲哚乙酰胺等植物激素的質(zhì)量濃度增高,因此該發(fā)酵汁水可能對(duì)植物生長(zhǎng)有益。

    表7 混菌發(fā)酵后馬鈴薯淀粉汁水中各氨基酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)Table 7 Content of amino acids in potato starch juice after mixed bacteria fermentation

    表8 混菌發(fā)酵后汁水中植物激素的質(zhì)量濃度Table 8 Content of plant hormones in the juice after mixed bacteria fermentation

    2. 5 黃瓜種子發(fā)芽結(jié)果

    經(jīng)混菌發(fā)酵后的馬鈴薯淀粉加工汁水稀釋后對(duì)黃瓜種子的發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率、胚軸長(zhǎng)度的作用效果均最好,可有效促進(jìn)黃瓜種子萌發(fā),見(jiàn)表9。

    表9 發(fā)芽結(jié)果Table 9 Germination results

    可能是由于混菌發(fā)酵可將蛋白質(zhì)降解為小分子氨基酸、氮磷等營(yíng)養(yǎng)元素,更有利于黃瓜發(fā)芽過(guò)程中對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收。 因此,馬鈴薯淀粉加工汁水經(jīng)混菌發(fā)酵后進(jìn)行適當(dāng)稀釋,可有效促進(jìn)黃瓜種子萌發(fā),同時(shí)為使用該汁水進(jìn)行還田灌溉提供了依據(jù)。

    3 結(jié) 語(yǔ)

    作者以苔蘚假單胞桿菌(4 號(hào)菌)與黏質(zhì)沙雷氏菌(0 號(hào)菌)混合發(fā)酵馬鈴薯淀粉加工汁水,通過(guò)單因素和響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)優(yōu)化發(fā)酵工藝,并對(duì)其進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與氣味分析。在15 ℃發(fā)酵48 h 的最適發(fā)酵條件為苔蘚假單胞菌:黏質(zhì)沙雷氏菌質(zhì)量比為1.7∶2.0,接種體積分?jǐn)?shù)為1.98%。 在此優(yōu)化工藝條件下進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明:蛋白質(zhì)降解率為65.32%,顯著高于單菌發(fā)酵 (P<0.05); 磷酸鹽質(zhì)量濃度為2.86 mg/dL,較未發(fā)酵組升高了18.67%;氨氮質(zhì)量濃度較未發(fā)酵組降低了51.05%;且尸胺、組胺、色胺等生物胺未檢出,總生物胺質(zhì)量濃度僅為0.93 mg/L,顯著低于其他處理組(P<0.05);吲哚、硫化氫、3-甲基吲哚等惡臭味物質(zhì)未檢出;同時(shí)混合菌在發(fā)酵過(guò)程中植物生長(zhǎng)激素質(zhì)量濃度增加, 且氨基酸含量豐富;將其進(jìn)行一定稀釋后可以促進(jìn)黃瓜種子的發(fā)芽,因此將好氧型苔蘚假單胞菌和厭氧型黏質(zhì)沙雷氏菌混合應(yīng)用于馬鈴薯淀粉加工汁水的發(fā)酵,可顯著提高蛋白質(zhì)降解率和減少臭味物質(zhì)產(chǎn)生,減少了對(duì)環(huán)境的污染,并對(duì)植物生長(zhǎng)具有一定促進(jìn)作用。

    猜你喜歡
    質(zhì)量
    聚焦質(zhì)量守恒定律
    “質(zhì)量”知識(shí)鞏固
    “質(zhì)量”知識(shí)鞏固
    質(zhì)量守恒定律考什么
    做夢(mèng)導(dǎo)致睡眠質(zhì)量差嗎
    焊接質(zhì)量的控制
    關(guān)于質(zhì)量的快速Q(mào)&A
    初中『質(zhì)量』點(diǎn)擊
    質(zhì)量投訴超六成
    汽車觀察(2016年3期)2016-02-28 13:16:26
    你睡得香嗎?
    民生周刊(2014年7期)2014-03-28 01:30:54
    tube8黄色片| 亚洲精品粉嫩美女一区| 51午夜福利影视在线观看| 久9热在线精品视频| √禁漫天堂资源中文www| 热re99久久国产66热| 热re99久久精品国产66热6| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 国产一区二区激情短视频| 18在线观看网站| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 脱女人内裤的视频| 久久久久久久大尺度免费视频| 精品一品国产午夜福利视频| 亚洲av日韩在线播放| 极品人妻少妇av视频| 免费在线观看日本一区| 亚洲国产成人一精品久久久| 国产一区二区三区综合在线观看| 国产精品成人在线| 我的亚洲天堂| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 国产精品偷伦视频观看了| 色综合欧美亚洲国产小说| 91九色精品人成在线观看| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 欧美日本中文国产一区发布| 高清毛片免费观看视频网站 | 国产av一区二区精品久久| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 天堂8中文在线网| 亚洲熟女毛片儿| 人妻 亚洲 视频| 亚洲av日韩在线播放| 女人精品久久久久毛片| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 亚洲五月色婷婷综合| 一区福利在线观看| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 夫妻午夜视频| 一二三四在线观看免费中文在| 亚洲欧美色中文字幕在线| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 操美女的视频在线观看| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 97在线人人人人妻| 在线看a的网站| 亚洲成国产人片在线观看| 热re99久久国产66热| www.自偷自拍.com| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 999久久久国产精品视频| 欧美日本中文国产一区发布| 亚洲成a人片在线一区二区| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产高清视频在线播放一区| 免费高清在线观看日韩| av网站在线播放免费| 女性被躁到高潮视频| 少妇精品久久久久久久| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 国产在线精品亚洲第一网站| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 久久九九热精品免费| 91大片在线观看| 一二三四在线观看免费中文在| 国产精品久久久人人做人人爽| 中亚洲国语对白在线视频| 色尼玛亚洲综合影院| 不卡av一区二区三区| 日本欧美视频一区| 十八禁人妻一区二区| 色尼玛亚洲综合影院| 亚洲精品成人av观看孕妇| 国产不卡一卡二| 国产精品av久久久久免费| a级毛片在线看网站| 久久久欧美国产精品| 中国美女看黄片| 欧美精品av麻豆av| 午夜精品国产一区二区电影| 亚洲九九香蕉| 美女扒开内裤让男人捅视频| 麻豆乱淫一区二区| 亚洲男人天堂网一区| 亚洲熟女精品中文字幕| 亚洲欧美一区二区三区久久| 国产淫语在线视频| 国产av又大| 天堂8中文在线网| 国产精品99久久99久久久不卡| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 男女床上黄色一级片免费看| 男女免费视频国产| 久久亚洲真实| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 国产一区二区在线观看av| 欧美大码av| 不卡av一区二区三区| 久久精品国产a三级三级三级| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 最近最新中文字幕大全免费视频| 99精品久久久久人妻精品| 夫妻午夜视频| 美国免费a级毛片| 飞空精品影院首页| 国产高清激情床上av| 成在线人永久免费视频| 欧美日韩成人在线一区二区| 精品午夜福利视频在线观看一区 | 久久久精品区二区三区| 午夜福利免费观看在线| 夫妻午夜视频| 韩国精品一区二区三区| 亚洲国产欧美一区二区综合| 窝窝影院91人妻| 乱人伦中国视频| 18禁美女被吸乳视频| svipshipincom国产片| 中文亚洲av片在线观看爽 | 麻豆国产av国片精品| 中文字幕高清在线视频| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 动漫黄色视频在线观看| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 叶爱在线成人免费视频播放| 一区二区av电影网| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 午夜激情av网站| 涩涩av久久男人的天堂| av有码第一页| 色精品久久人妻99蜜桃| 久久ye,这里只有精品| 欧美亚洲日本最大视频资源| 18禁美女被吸乳视频| 国产高清videossex| 老司机靠b影院| 亚洲人成77777在线视频| av又黄又爽大尺度在线免费看| 黄色成人免费大全| 亚洲av电影在线进入| 精品午夜福利视频在线观看一区 | 亚洲欧美一区二区三区黑人| 日本av手机在线免费观看| 久久精品国产a三级三级三级| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 国产亚洲欧美在线一区二区| 国产精品免费大片| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 久久国产精品大桥未久av| 国产精品免费大片| 国产在线一区二区三区精| 欧美精品一区二区大全| 在线观看免费高清a一片| 亚洲第一av免费看| 中文字幕人妻熟女乱码| 黄色视频在线播放观看不卡| 久久精品人人爽人人爽视色| www.熟女人妻精品国产| 十八禁高潮呻吟视频| 夜夜爽天天搞| 亚洲av成人一区二区三| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 久久性视频一级片| 91九色精品人成在线观看| 两个人免费观看高清视频| 制服诱惑二区| 午夜激情av网站| 成年人免费黄色播放视频| 夜夜夜夜夜久久久久| 一级a爱视频在线免费观看| 国产午夜精品久久久久久| 久久久久视频综合| 男人舔女人的私密视频| 亚洲一码二码三码区别大吗| 真人做人爱边吃奶动态| 久久天堂一区二区三区四区| 精品久久蜜臀av无| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 高清毛片免费观看视频网站 | 一进一出抽搐动态| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 极品教师在线免费播放| 黄色怎么调成土黄色| 国产野战对白在线观看| 丝袜人妻中文字幕| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 亚洲视频免费观看视频| 精品久久蜜臀av无| 成人国产一区最新在线观看| 中文欧美无线码| 热re99久久国产66热| 一区二区日韩欧美中文字幕| 久久这里只有精品19| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 国产在线视频一区二区| 欧美一级毛片孕妇| 久久精品国产a三级三级三级| 啪啪无遮挡十八禁网站| 亚洲国产欧美网| 国产av一区二区精品久久| 欧美日韩一级在线毛片| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 久久久国产精品麻豆| 成人18禁在线播放| 亚洲少妇的诱惑av| 精品熟女少妇八av免费久了| 午夜福利影视在线免费观看| 国产精品久久久av美女十八| 夜夜爽天天搞| 丰满少妇做爰视频| 精品视频人人做人人爽| 国产成人影院久久av| 午夜日韩欧美国产| 九色亚洲精品在线播放| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 日日夜夜操网爽| av欧美777| av福利片在线| 欧美成人午夜精品| 99国产精品一区二区蜜桃av | 不卡一级毛片| 色精品久久人妻99蜜桃| 一区二区三区国产精品乱码| 午夜福利,免费看| 亚洲精品乱久久久久久| 男人舔女人的私密视频| 成人黄色视频免费在线看| 成年版毛片免费区| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 午夜91福利影院| 美国免费a级毛片| 老司机靠b影院| 成人亚洲精品一区在线观看| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 亚洲中文日韩欧美视频| 动漫黄色视频在线观看| 久久久国产精品麻豆| 日本一区二区免费在线视频| 日日爽夜夜爽网站| 国产一区二区三区视频了| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 无人区码免费观看不卡 | 国产日韩欧美在线精品| 老鸭窝网址在线观看| 青青草视频在线视频观看| 国产成人欧美| 亚洲成人国产一区在线观看| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 大片电影免费在线观看免费| 亚洲精品成人av观看孕妇| 美女高潮到喷水免费观看| 视频区欧美日本亚洲| 777米奇影视久久| 999久久久精品免费观看国产| 午夜福利一区二区在线看| 久久午夜亚洲精品久久| 欧美久久黑人一区二区| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 久久狼人影院| 91成年电影在线观看| 亚洲精品乱久久久久久| 热99国产精品久久久久久7| h视频一区二区三区| 日韩人妻精品一区2区三区| 亚洲综合色网址| 少妇 在线观看| 欧美激情 高清一区二区三区| 亚洲五月婷婷丁香| 男女高潮啪啪啪动态图| 婷婷成人精品国产| 一个人免费在线观看的高清视频| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 欧美日韩av久久| 日本精品一区二区三区蜜桃| 亚洲精品国产色婷婷电影| 午夜福利视频在线观看免费| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 精品福利永久在线观看| 亚洲一区中文字幕在线| 久久精品国产亚洲av高清一级| 色播在线永久视频| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 久久人妻av系列| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 精品午夜福利视频在线观看一区 | 超色免费av| 手机成人av网站| 香蕉丝袜av| 美女福利国产在线| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 欧美精品高潮呻吟av久久| 天堂8中文在线网| 精品人妻1区二区| 啪啪无遮挡十八禁网站| 丰满迷人的少妇在线观看| 亚洲精品国产区一区二| 精品久久久久久久毛片微露脸| 午夜激情久久久久久久| 亚洲中文字幕日韩| 老汉色av国产亚洲站长工具| 日本vs欧美在线观看视频| 午夜91福利影院| av在线播放免费不卡| 国产黄色免费在线视频| 丝袜美足系列| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 香蕉国产在线看| 搡老熟女国产l中国老女人| 精品一品国产午夜福利视频| 久久久国产成人免费| 国产老妇伦熟女老妇高清| 国产av精品麻豆| 精品高清国产在线一区| 露出奶头的视频| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 亚洲,欧美精品.| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 久久亚洲精品不卡| 黄色丝袜av网址大全| 国产又色又爽无遮挡免费看| 美女扒开内裤让男人捅视频| 久热这里只有精品99| 国产亚洲欧美精品永久| 久久狼人影院| av又黄又爽大尺度在线免费看| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 日韩人妻精品一区2区三区| 老司机亚洲免费影院| 国产精品av久久久久免费| 我的亚洲天堂| av在线播放免费不卡| 亚洲成国产人片在线观看| 精品亚洲成a人片在线观看| 日本wwww免费看| 久久人人97超碰香蕉20202| 日本av免费视频播放| 动漫黄色视频在线观看| 久久久国产成人免费| 国产成人欧美| 国产国语露脸激情在线看| 国产高清视频在线播放一区| 国产成人av教育| 自线自在国产av| 99热国产这里只有精品6| 中文字幕制服av| 美女主播在线视频| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 女警被强在线播放| 国产在线一区二区三区精| 久久这里只有精品19| 国产精品影院久久| 一本色道久久久久久精品综合| 午夜免费成人在线视频| 狂野欧美激情性xxxx| 国产成人系列免费观看| 2018国产大陆天天弄谢| 一区二区日韩欧美中文字幕| av一本久久久久| 他把我摸到了高潮在线观看 | 99re在线观看精品视频| 欧美中文综合在线视频| 国产欧美日韩一区二区三| 国产高清国产精品国产三级| 国产精品二区激情视频| 日日爽夜夜爽网站| 国产精品国产av在线观看| 成年动漫av网址| av超薄肉色丝袜交足视频| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 免费观看人在逋| 国产成+人综合+亚洲专区| 久久中文字幕一级| 免费日韩欧美在线观看| 交换朋友夫妻互换小说| 日韩一区二区三区影片| 久久香蕉激情| www.自偷自拍.com| 国产区一区二久久| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 狂野欧美激情性xxxx| 国产真人三级小视频在线观看| 最新在线观看一区二区三区| 91成人精品电影| 精品久久蜜臀av无| 午夜福利一区二区在线看| 国产人伦9x9x在线观看| 精品少妇黑人巨大在线播放| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 欧美 亚洲 国产 日韩一| 俄罗斯特黄特色一大片| 免费日韩欧美在线观看| 中国美女看黄片| 久久久精品区二区三区| 视频区图区小说| 日本五十路高清| 中文字幕色久视频| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 热re99久久精品国产66热6| 波多野结衣一区麻豆| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 国产单亲对白刺激| 考比视频在线观看| 国产成人av激情在线播放| 欧美日本中文国产一区发布| 丰满少妇做爰视频| 久久亚洲真实| 亚洲精品成人av观看孕妇| 午夜福利在线观看吧| 一级黄色大片毛片| 久久香蕉激情| 午夜免费成人在线视频| 777米奇影视久久| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 曰老女人黄片| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 蜜桃国产av成人99| aaaaa片日本免费| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 亚洲精品国产一区二区精华液| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 久久久精品94久久精品| 日本精品一区二区三区蜜桃| 色播在线永久视频| 69av精品久久久久久 | 午夜老司机福利片| 啦啦啦免费观看视频1| 国产精品免费大片| www.999成人在线观看| 亚洲 欧美一区二区三区| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 久久久国产欧美日韩av| 精品一区二区三区四区五区乱码| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 午夜两性在线视频| 午夜老司机福利片| 亚洲午夜理论影院| 搡老岳熟女国产| 一级毛片电影观看| 成年人免费黄色播放视频| 91老司机精品| 午夜福利在线免费观看网站| 国产精品久久久久久精品电影小说| a在线观看视频网站| 亚洲成人免费电影在线观看| 一区二区av电影网| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 丰满迷人的少妇在线观看| 高清视频免费观看一区二区| 色播在线永久视频| 亚洲中文av在线| 777米奇影视久久| 91老司机精品| 国产xxxxx性猛交| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 久久这里只有精品19| 极品少妇高潮喷水抽搐| 亚洲免费av在线视频| 在线观看人妻少妇| av片东京热男人的天堂| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 一进一出抽搐动态| 亚洲专区中文字幕在线| 大香蕉久久成人网| 水蜜桃什么品种好| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 丝袜喷水一区| 精品久久久久久电影网| 纯流量卡能插随身wifi吗| 波多野结衣一区麻豆| 国产一区二区三区视频了| 在线观看免费日韩欧美大片| 久久国产精品影院| 男女边摸边吃奶| 成年版毛片免费区| 国产成人精品久久二区二区91| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 黑丝袜美女国产一区| 美女福利国产在线| 性高湖久久久久久久久免费观看| 亚洲精品av麻豆狂野| 岛国毛片在线播放| 脱女人内裤的视频| 日本黄色日本黄色录像| 精品少妇久久久久久888优播| 天堂动漫精品| 91老司机精品| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 黑人欧美特级aaaaaa片| 日本精品一区二区三区蜜桃| 91九色精品人成在线观看| 色精品久久人妻99蜜桃| 丝瓜视频免费看黄片| 午夜激情久久久久久久| 在线天堂中文资源库| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 欧美日韩视频精品一区| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 国产91精品成人一区二区三区 | 欧美在线黄色| 久久国产精品大桥未久av| 又大又爽又粗| 午夜视频精品福利| 两人在一起打扑克的视频| 91成人精品电影| 老司机午夜福利在线观看视频 | 女人久久www免费人成看片| 亚洲欧美一区二区三区久久| 满18在线观看网站| 午夜激情av网站| 亚洲av国产av综合av卡| 免费日韩欧美在线观看| 国产精品 国内视频| 久久久久网色| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 亚洲av电影在线进入| 一区二区三区国产精品乱码| 国产精品二区激情视频| 黑人猛操日本美女一级片| 波多野结衣av一区二区av| 国产单亲对白刺激| 欧美在线黄色| 国产男女内射视频| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 色婷婷av一区二区三区视频| 韩国精品一区二区三区| 热99re8久久精品国产| 飞空精品影院首页| 午夜精品久久久久久毛片777| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 免费日韩欧美在线观看| 精品福利永久在线观看| 热re99久久精品国产66热6| 黄色片一级片一级黄色片| 国产在线一区二区三区精| 老司机午夜十八禁免费视频| 日韩中文字幕欧美一区二区| 制服诱惑二区| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 视频区图区小说| 久久精品国产a三级三级三级| 夜夜夜夜夜久久久久| 免费黄频网站在线观看国产| 色视频在线一区二区三区| 久久人妻熟女aⅴ| 午夜两性在线视频| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 欧美激情高清一区二区三区| 婷婷成人精品国产| 国产男女内射视频| 免费高清在线观看日韩| 麻豆成人av在线观看| 十分钟在线观看高清视频www| 欧美黑人欧美精品刺激| 在线 av 中文字幕| 成人手机av| 韩国精品一区二区三区| 国产精品亚洲av一区麻豆| 啦啦啦免费观看视频1| 91大片在线观看| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 老汉色∧v一级毛片| 欧美中文综合在线视频| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 久久狼人影院| 丝袜美足系列| 国产精品成人在线| av在线播放免费不卡| 亚洲国产欧美网| 青草久久国产| 美女午夜性视频免费| 色综合婷婷激情| 国产精品成人在线| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 色综合婷婷激情| 久久九九热精品免费| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 亚洲av片天天在线观看| 成年人黄色毛片网站| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 99久久99久久久精品蜜桃| 日本av免费视频播放| 国产高清激情床上av| 午夜福利影视在线免费观看| 99精品久久久久人妻精品| 久久毛片免费看一区二区三区| 丰满少妇做爰视频| 久久香蕉激情| 亚洲视频免费观看视频| 欧美精品啪啪一区二区三区| 日韩有码中文字幕| 欧美激情 高清一区二区三区| 国产老妇伦熟女老妇高清| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 欧美日韩av久久| 日韩大片免费观看网站| av有码第一页| 在线观看www视频免费| 国产成人啪精品午夜网站|