2021 年新疆部分地區(qū)規(guī)?；i場O 型口蹄疫病毒抗體檢測與分析

侯宮明珠 邱國斌 陳朝陽 陳新華 李彥芳 屈勇剛*

（1 石河子大學動物科技學院，新疆石河子 832003；2 新疆生產(chǎn)建設兵團第四師畜牧獸醫(yī)工作站，新疆可克達拉 835216）

口蹄疫（Foot and Mouth Disease,FMD）是由口蹄疫病毒（Foot and Mouth Disease virus,FMDV）引起的一種傳染性強、傳播迅速的人畜共患傳染病。FMDV 主要侵害豬、牛、羊、鹿等偶蹄類動物，其中豬的易感性較高，尤其仔豬，其死亡率可達100.00%。口蹄疫在豬群中一年四季均可發(fā)生[1]，且容易形成大規(guī)模發(fā)病，該病不僅會給養(yǎng)豬企業(yè)造成重大經(jīng)濟損失，還危害公共衛(wèi)生安全。世界動物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為必須報告的動物疫病，我國將其歸為一類動物疫病[2]。

對易感動物進行免疫接種是防控此病最有效的措施，目前，我國采取強制免疫政策來防控FMD，免疫抗體水平監(jiān)測是了解疫苗免疫效果最有效的方法。液相阻斷酶聯(lián)免疫吸附試驗（Liquid-phase Blocking Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,LPB-ELISA） 是目前用于評價FMD 免疫水平普遍采用的試驗技術，其精確性、穩(wěn)定性高于正向間接血凝試驗（PHA），且重復性優(yōu)于病毒中和試驗（VNT）[3]。本試驗采用O 型口蹄疫病毒LPB-ELISA 試劑盒對新疆部分地區(qū)規(guī)?；i場中的豬血清樣品進行抗體水平檢測，并對結果進行分析，可為新疆地區(qū)豬場O 型口蹄疫的防控提供依據(jù)，以減少口蹄疫在豬場的發(fā)生，保障豬群安全。

1 材料與方法

1.1 試驗樣品

2021 年1—12 月期間，從新疆3 個地區(qū)7 個規(guī)?；B(yǎng)豬場隨機采集豬全血樣品，無菌分離血清1 mL 放入滅菌離心管中，共獲得353 份血清樣品。

1.2 試驗材料和儀器

口蹄疫O 型抗體液相阻斷ELISA 抗體檢測試劑盒購自中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所；全波長酶標儀購自美國賽默飛世爾科技有限公司。

1.3 試驗方法

1.3.1 樣品處理

豬全血樣品在室溫下靜置2～3 h，待析出清亮血清后，收集1 mL 至無菌EP 管中，依次編號。血清可直接檢測或置于4℃保存待檢。

1.3.2 LPB-ELISA 檢測法

檢測盒中所有試劑需放置室溫后再使用，使用前輕微震蕩混勻。嚴格按照檢測試劑盒說明書進行操作。

1.3.3 結果判定

臨界值的計算：4 個病毒抗原的OD450nm值，棄去最大值和最小值，剩余數(shù)值的平均值再除以2。當樣品抗體效價的OD450nm值＞臨界值時判定為陰性；當OD450nm值≤臨界值時判定為陽性。

1.3.4 數(shù)據(jù)分析

使用Excel 軟件和SPSS 軟件對試驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。

2 試驗結果

2.1 不同地區(qū)豬O 型FMDV 抗體檢測結果

不同地區(qū)豬O 型FMDV 抗體水平如表1 所示。3 個地區(qū)O 型FMDV 抗體平均陽性率為76.77%（271/353），達到國家70.00%的規(guī)定標準。3 個地區(qū)的FMDV 陽性率均高于國家標準，分別為77.97%、78.72%和71.43%。其中3 號地區(qū)的抗體平均OD 值最高，為0.73；2 號地區(qū)的平均OD 值最低，為0.58；各地區(qū)之間的平均OD 值差異不顯著（P＞0.05）。

表1 不同地區(qū)豬O 型FMDV 抗體檢測結果

2.2 不同規(guī)模化豬場O 型FMDV 抗體檢測結果

不同規(guī)?；i場O 型FMDV 抗體水平如表2 所示。7 個規(guī)模化豬場O 型FMDV 抗體平均陽性率為76.77%（271/353），達到國家規(guī)定標準。在7 個豬場中，有6個豬場的FMDV 陽性率高于國家標準，分別為A、C、D、E、F、G 豬場,其抗體陽性率分別為72.07%、70.45%、71.43%、91.80%、85.00%和100.00%；只有B 豬場的FMDV 陽性率為62.96%，低于國家標準（70%）。B 場的平均OD 值最高，為0.94，G 場的平均OD 值最低，為0.09；B 場與E、F、G 場之間的差異顯著（P＜0.05），與A、C、D 場差異均不顯著（P＞0.05）。

表2 不同規(guī)?；i場O 型FMDV 抗體檢測結果

3 討論與分析

口蹄疫的主要發(fā)生區(qū)域為非洲、中東、亞洲及南美洲部分地區(qū)[5]。在口蹄疫病毒的7 個血清型中，O 型和A 型是豬口蹄疫常見的血清型，其中O 型口蹄疫病毒的發(fā)病率最高[6]。目前，我國規(guī)定豬場每年需要接種2 次口蹄疫滅活疫苗，注射密度不低于80%，并監(jiān)測口蹄疫病毒抗體水平，當口蹄疫病毒抗體水平低于70%時，需要及時進行加強免疫[7]。可見通過檢測口蹄疫抗體水平評估養(yǎng)豬場的免疫情況尤為重要[8]。養(yǎng)豬場應嚴格按照國家相關規(guī)定開展口蹄疫防疫工作，并定期監(jiān)測口蹄疫疫苗免疫效果，這是保障豬場健康生產(chǎn)的有效方法之一。

常軍帥等[9]曾對2019—2020 年新疆部分地區(qū)豬O型口蹄疫病毒抗體水平進行監(jiān)測，發(fā)現(xiàn)這些地區(qū)口蹄疫病毒的平均陽性率高達81.88%（339/414），明顯高于國家規(guī)定標準。趙陳霞等[10]對2011—2020 年新疆兵團六師豬O 型口蹄疫病毒抗體水平進行監(jiān)測，發(fā)現(xiàn)近10年內(nèi)的該地區(qū)豬群口蹄疫病毒抗體水平平均陽性率為77.96%，高于國家規(guī)定標準；從疫苗生產(chǎn)廠商、生豬生長階段和存欄規(guī)模等不同因素進行分析，豬O 型口蹄疫病毒抗體陽性率均達到國家規(guī)定標準。張小玉等[11]對2020 年新疆9 個規(guī)模化養(yǎng)豬場的整體O 型口蹄疫病毒體水平進行了監(jiān)測，發(fā)現(xiàn)平均陽性率為88.06%，也超過了國家規(guī)定標準。本試驗結果發(fā)現(xiàn)，新疆3 個地區(qū)的口蹄疫病毒抗體水平陽性率均高于國家規(guī)定標準（70.00%）；在7 個豬場中，僅有B 場口蹄疫病毒抗體陽性率為62.96%（17/27），低于國家規(guī)定標準，需及時加強免疫。試驗結果表明，近些年新疆各養(yǎng)殖場豬O 型口蹄疫病毒抗體水平相對較高，口蹄疫疫苗的整體免疫效果較好。

雖然，近些年豬O 型口蹄疫防控工作取得較好成果，但仍不能掉以輕心?？茖W飼養(yǎng)也是防控口蹄疫不可或缺的重要環(huán)節(jié)。首先，養(yǎng)殖戶要定期對養(yǎng)殖區(qū)域進行清掃，做好相應的消毒工作，給豬群創(chuàng)造干凈的飼養(yǎng)環(huán)境。其次，要科學管理，在給豬只提供充足基礎營養(yǎng)的同時，保證微量元素和維生素的攝入，以提高豬的免疫能力[12]。最后，采取自繁自養(yǎng)的飼養(yǎng)模式，盡量減少引種。確需引種時，要確保引種地區(qū)不屬于疫區(qū)，種豬經(jīng)過屬地檢疫合格后方可引進。引入種豬需要進行30 d 的隔離飼養(yǎng)觀察，健康無疫后可以與豬群混群飼養(yǎng)。大規(guī)模養(yǎng)豬場應定期對豬群進行抗體水平監(jiān)測[13]，根據(jù)每次的免疫效果不斷優(yōu)化免疫程序。研究發(fā)現(xiàn)，目前市面上的口蹄疫疫苗對豬群的保護效果都很高[14]，而且大規(guī)模養(yǎng)豬場的免疫效果普遍高于散養(yǎng)戶[15,16]，中小養(yǎng)豬場需加強生物安全防控及免疫制度。

4 小結

通過調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)，新疆部分地區(qū)規(guī)模化養(yǎng)殖場FMD 免疫效果良好，豬群O 型口蹄疫病毒抗體水平高于國家標準。完善的生物安全措施和科學的飼養(yǎng)管理是防控豬口蹄疫發(fā)生的有效措施，各養(yǎng)殖場仍然需要繼續(xù)開展防控工作，確保豬場健康生產(chǎn)，以此推動新疆養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。