HIV/AIDS 合并機(jī)會(huì)性感染患者IP-10、SAA、hs-CRP、PCT、CD4+ T 細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)的意義

趙 靜 李永勤 李 艷 范偉光 楊學(xué)剛

（1. 保定市人民醫(yī)院感染科，河北 保定 071000；2. 保定市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 保定 071000）

機(jī)會(huì)性感染（opportunistic infection，OI）是指當(dāng)人體免疫功能下降時(shí)，寄生于人體中的一些非致病性微生物導(dǎo)致的感染或?qū)χ虏∥⑸锏囊赘行栽黾佣l(fā)生的感染。OI是導(dǎo)致獲得性免疫缺陷綜合征（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS）患者死亡的重要原因，是人類免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染和AIDS（簡(jiǎn)稱HIV/AIDS）患者管理的關(guān)鍵，有超過(guò)50%的HIV/AIDS患者死亡與OI有關(guān)[1-2]。由于病毒和宿主、抗病毒啟動(dòng)的時(shí)機(jī)差異，不同患者表現(xiàn)出不同的免疫狀態(tài)。本研究擬通過(guò)檢測(cè)HIV/AIDS患者外周血中γ-干擾素誘導(dǎo)蛋白10（interferon-gamma induced protein 10，IP-10）、高敏C反應(yīng)蛋白（high-sensitivity C-reactive protein，CRP）、血清淀粉樣蛋白A（serum amyloid A，SAA）、降鈣素原（procalcitonin，PCT）、CD4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)，探討OI對(duì)AIDS病程進(jìn)展的影響。

1 材料和方法

1.1 研究對(duì)象

采用回顧性病例對(duì)照方式，選取2019年5月—2021年2月在保定市人民醫(yī)院接受治療和隨訪的HIV/AIDS患者187例，其中男165例、女22例，年齡（39.15±12.92）歲。根據(jù)是否合并OI將187例患者分為OI組[63例，其中男57例、女6例，年齡（39.07±13.19）歲]和無(wú)OI組[124例，其中男108例、女16例，年齡（39.30±12.47）歲]；合并OI的HIV/AIDS患者根據(jù)隨訪結(jié)果分為預(yù)后良好組（45例）和預(yù)后不良組（18例）。追蹤所有患者感染途徑，經(jīng)性傳播途徑感染169例（90.37%）。OI涉及的疾病有馬爾尼菲青霉菌病、細(xì)菌性肺炎、結(jié)核病、口腔念珠菌病、卡氏肺孢子菌肺炎、巨細(xì)胞病毒感染、皰疹病毒感染、新型隱球菌腦膜炎，有40例合并2種及以上感染。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)保定市疾病預(yù)防控制中心采用蛋白免疫印跡法確診為HIV-1抗體陽(yáng)性，OI的診斷參照《中國(guó)艾滋病診療指南（2021年版）》[3]中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。本研究經(jīng)保定市人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)[【2020】科倫審字（07）號(hào)]，所有患者均簽署知情同意書。

1.2 方法

采集所有患者就診（治療前）和復(fù)診（治療4周后）時(shí)的靜脈血樣本，檢測(cè)SAA、PCT、hs-CRP水平，另檢測(cè)所有患者治療前的CD4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)。剩余靜脈血樣本分離血漿后-80 ℃凍存，統(tǒng)一檢測(cè)IP-10和HIV RNA。

采用FS-301全自動(dòng)免疫熒光定量檢測(cè)儀（廣州萬(wàn)孚公司）和配套試劑（免疫熒光法）檢測(cè)SAA、PCT、hs-CRP。采用FACS Calibur流式細(xì)胞儀（美國(guó)BD公司）和配套試劑進(jìn)行CD4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血漿IP-10水平，試劑盒（檢測(cè)限為3.5 pg/mL，線性范圍為31.25～2 000.00 pg/mL）購(gòu)自杭州聯(lián)科生物技術(shù)有限公司，檢測(cè)儀器為Multiskan MK3酶標(biāo)儀（美國(guó)ThermoFisher Scientific公司）。采用cobas TaqMan全自動(dòng)病毒載量分析系統(tǒng)（瑞士羅氏公司）和配套試劑檢測(cè)HIV RNA載量，檢測(cè)下限和定量下限均為20拷貝/mL。嚴(yán)格按儀器和試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 25.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。采用GraphPad Prism 9.0軟件作圖。呈非正態(tài)分布的計(jì)量資料以中位數(shù)（M）[四分位數(shù)（P25～P75）]表示，2個(gè)組之間比較采用Mann WhitneyU檢驗(yàn)，多組間比較采用Kruskal-Wallis檢驗(yàn)。采用Logistic回歸分析評(píng)估HIV/AIDS患者合并OI的危險(xiǎn)因素。采用Spearman秩相關(guān)分析評(píng)估各項(xiàng)指標(biāo)之間的相關(guān)性。采用受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線評(píng)估各指標(biāo)診斷HIV/AIDS患者合并OI的效能，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組治療前后SAA、PCT、hs-CRP和IP-10水平比較

治療前預(yù)后良好組和預(yù)后不良組SAA、PCT、hs-CRP和IP-10水平均顯著高于無(wú)OI組（P<0.05），預(yù)后不良組治療前IP-10水平高于預(yù)后良好組（P<0.05）。預(yù)后良好組和無(wú)OI組治療4周后SAA、PCT、hs-CRP和IP-10水平均低于治療前（P<0.05），而預(yù)后不良組治療前后各項(xiàng)指標(biāo)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表1。

表1 各組治療前后SAA、PCT、hs-CRP和IP-10水平比較

2.2 SAA、PCT、hs-CRP和IP-10診斷HIV/AIDS患者OI的效能

以無(wú)OI組為對(duì)照，ROC曲線分析結(jié)果顯示，SAA、PCT、hs-CRP和IP-10診斷OI的曲線下面積（area under curve，AUC）分別為0.849、0.707、0.793、0.760。見(jiàn)圖1、表2。

表2 SAA、PCT、hs-CRP和IP-10診斷HIV/AIDS患者OI的效能

2.3 HIV/AIDS 患者合并OI的危險(xiǎn)因素分析

2.3.1 單因素分析

根據(jù)SAA、PCT、hs-CRP和IP-10的最佳臨界值分別分組。單因素分析結(jié)果顯示，OI組和無(wú)OI組不同CD4+T細(xì)胞、SAA、PCT、hs-CRP和IP-10水平所占比例差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。不同年齡、性別、感染途徑和HIV RNA載量所占比例2個(gè)組之間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表3。

表3 OI組與無(wú)OI組之間各項(xiàng)指標(biāo)的單因素分析

2.3.2 多因素Logistic回歸分析

多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，CD4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)減少和SAA、PCT、hs-CRP、IP-10升高是HIV/AIDS患者合并OI的危險(xiǎn)因素[比值比（odds ratio，OR）值分別為0.028、15.606、25.499、9.147、10.303，95%CI分別為0.006～0.128、3.224～75.532、1.544～421.002、1.705～49.071、2.582～41.118，P<0.05]。見(jiàn)表4。

表4 HIV/AIDS患者合并OI的危險(xiǎn)因素分析

2.4 IP-10、SAA、hs-CRP、PCT與CD4+ T細(xì)胞計(jì)數(shù)的相關(guān)性

IP-10、SAA、hs-CRP、PCT與CD4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)均呈負(fù)相關(guān)（r值分別為-0.297、-0.390、-0.348、-0.264，P<0.05）。

3 討論

HIV/AIDS患者的OI病原體種類繁多，常發(fā)生混合性感染，癥狀不典型，易復(fù)發(fā)，臨床診治較為困難[4]，且OI是AIDS患者死亡的重要原因。因此，早期發(fā)現(xiàn)和識(shí)別AIDS患者的OI非常重要。

CD4+T細(xì)胞是一種輔助性T淋巴細(xì)胞，是HIV進(jìn)入人體后感染的主要靶細(xì)胞，可引起CD4+T細(xì)胞進(jìn)行性減少。MOORE等[5]發(fā)現(xiàn)，CD4+T細(xì)胞數(shù)量減少是AIDS患者合并OI的主要原因。目前，CD4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)已成為判定AIDS患者病情、預(yù)測(cè)臨床進(jìn)展和評(píng)價(jià)抗病毒治療療效的重要指標(biāo)[6]。本研究結(jié)果顯示，CD4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)減少是HIV/AIDS患者發(fā)生OI的危險(xiǎn)因素（OR=0.028，95%CI為0.006～0.128），相對(duì)于CD4+T細(xì)胞<200個(gè)/μL的HIV/AIDS患者，CD4+T細(xì)胞≥200個(gè)/μL的患者發(fā)生OI的風(fēng)險(xiǎn)降低97.2%。本研究中，OI組和無(wú)OI組HIV RNA載量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），與BOULWARE等[7]的報(bào)道一致，與王政等[8]的報(bào)道不一致，可能是由于統(tǒng)計(jì)方法不同所致。研究AIDS患者HIV RNA載量下降的程度更有意義[9]，但本研究由于隨訪患者較少而未進(jìn)行分析，這也是本研究的不足之處。

當(dāng)機(jī)體受到細(xì)菌、病毒、真菌、原蟲等的刺激后，會(huì)產(chǎn)生一系列的病理生理變化，如白細(xì)胞介素1、白細(xì)胞介素6、腫瘤壞死因子α調(diào)控表達(dá)升高，促使肝臟合成大量淀粉樣蛋白A和CRP，在急性感染期，SAA、CRP可升高達(dá)1 000倍；PCT由甲狀腺C細(xì)胞產(chǎn)生，細(xì)菌感染時(shí)會(huì)被大量釋放入血液[10]。SAA是細(xì)菌、病毒感染的雙敏感因子[11]，PCT、CRP只對(duì)細(xì)菌感染敏感[12]。本研究結(jié)果顯示，合并OI的HIV/AIDS患者治療前SAA、PCT、hs-CRP、IP-10水平顯著高于未合并OI的患者（P<0.05），治療4周后，預(yù)后良好組和無(wú)OI組SAA、PCT、hs-CRP、IP-10水平均顯著降低（P<0.05），但是預(yù)后不良組治療前后差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），SAA、PCT、hs-CRP和IP-10升高是HIV患者合并OI的危險(xiǎn)因素[OR值分別為15.606、25.499、9.147、10.303，95%CI分別為3.224～75.532、1.544～421.002、1.705～49.071、2.582～41.118，P<0.05]，與文獻(xiàn)報(bào)道[14-15]一致。CRP、SAA、PCT水平與HIV疾病進(jìn)展和OI有關(guān)，基線CRP、SAA、PCT水平較高的HIV/AIDS患者更易發(fā)生OI，對(duì)HIV/AIDS患者預(yù)后評(píng)估也有一定的價(jià)值[13-14]。

IP-10是目前研究較多的一種γ干擾素誘導(dǎo)趨化因子，屬于一種促炎因子，參與了白細(xì)胞遷移至炎癥組織的過(guò)程，維持炎癥反應(yīng)，在炎癥性組織損傷中起關(guān)鍵作用，是很多感染性疾病、自身免疫性疾病和腫瘤進(jìn)展相關(guān)的標(biāo)志物[15-17]。本研究結(jié)果顯示，預(yù)后不良組、預(yù)后良好組、無(wú)OI組IP-10水平依次升高（P<0.05），這與CRP、SAA、PCT等急性時(shí)相反應(yīng)蛋白的表現(xiàn)不同。ROC曲線分析結(jié)果顯示，IP-10診斷OI的Youden指數(shù)最高（0.703），說(shuō)明IP-10判定OI的真實(shí)性優(yōu)于急性時(shí)相反應(yīng)蛋白。這可能是由于IP-10不僅募集、活化T細(xì)胞等免疫細(xì)胞，參與炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致一些細(xì)胞因子水平發(fā)生變化；還參與了HIV的復(fù)制過(guò)程，促進(jìn)靜息記憶CD4+T細(xì)胞中潛伏的HIV激活；另外，高水平的IP-10會(huì)抑制T細(xì)胞的增殖能力和自然殺傷細(xì)胞的功能，不僅增加了HIV高危人群對(duì)HIV的易感性，也增加了對(duì)其他病原體的易感性[18-19]。

本研究結(jié)果還顯示，IP-10、SAA、hs-CRP、PCT與CD4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)均呈負(fù)相關(guān)（r值分別為-0.297、-0.390、-0.348、-0.264，P<0.05）。進(jìn)一步說(shuō)明SAA、PCT、hs-CRP、IP-10與HIV/AIDS患者合并OI有關(guān)。

綜上所述，SAA、PCT、hs-CRP、IP-10在HIV/AIDS患者合并OI的診斷和預(yù)后評(píng)估中均有一定價(jià)值。由于本研究樣本量較小，且缺乏隨訪數(shù)據(jù)，因此研究結(jié)論尚需大樣本、多中心研究進(jìn)一步驗(yàn)證。