噬菌體展示疫苗的研究進(jìn)展

王財，趙子紅 綜述，李唯峰，張玉妥 審校

河北北方學(xué)院病原生物學(xué)與免疫研究所，河北張家口075000

噬菌體展示疫苗是一種基于噬菌體展示技術(shù)開發(fā)的新型疫苗制備技術(shù)，其利用噬菌體作為載體，將外源多肽或蛋白基因重組至噬菌體基因組中，以融合蛋白的形式展示在噬菌體表面，從而實現(xiàn)疫苗的制備［1-2］。與傳統(tǒng)疫苗比較，噬菌體展示疫苗具有免疫源性強，能夠表達(dá)天然蛋白構(gòu)象，制備簡單等優(yōu)點，因此受到廣泛關(guān)注和研究。自1985 年SMITH［3］開創(chuàng)了噬菌體展示技術(shù)以來，基于該技術(shù)研發(fā)的噬菌體展示疫苗的報道陸續(xù)涌現(xiàn)。目前，研究人員利用此技術(shù)開發(fā)了多種新型疫苗，涉及病毒、細(xì)菌、真菌等領(lǐng)域。雖然噬菌體展示疫苗取得了突破性的進(jìn)展，但仍面臨一些挑戰(zhàn)，如最佳噬菌體展示系統(tǒng)的選擇、噬菌體展示系統(tǒng)穩(wěn)定性的優(yōu)化等方面均需深入研究。本文就噬菌體展示疫苗的免疫學(xué)基礎(chǔ)、展示系統(tǒng)種類及其在疾病預(yù)防應(yīng)用的研究進(jìn)展作一綜述，以期為噬菌體展示疫苗的研發(fā)與應(yīng)用提供參考。

1 噬菌體展示疫苗的免疫學(xué)基礎(chǔ)

1.1噬菌體免疫原性 噬菌體本身固有的免疫原性是構(gòu)建噬菌體展示疫苗的優(yōu)勢所在。目前較為認(rèn)可的機制是噬菌體基因組內(nèi)存在較高比例的脫氧胞苷-磷酸-脫氧鳥苷（cytidine-phosphate-guanosine，CpG）序列，CpG寡核苷酸參與Toll樣受體9（Toll-like receptor 9，TLR9）信號級聯(lián)反應(yīng)，促進(jìn)炎性反應(yīng)及抗原提呈細(xì)胞（antigen-presenting cells，APCs）的成熟，并增強其噬菌體肽抗原向B細(xì)胞和T細(xì)胞高效呈遞，激活適應(yīng)性免疫反應(yīng)［4］。DONG 等［5］研發(fā)了一種基于M13 噬菌體的疫苗遞送平臺，可通過簡單的吸附遞送多種腫瘤特異性抗原，證明該平臺可通過TLR9信號通路激活抗原呈遞細(xì)胞，從而增強先天性和適應(yīng)性免疫反應(yīng)。GOMES-NETO 等［6］研究表明，重組絲狀噬菌體通過TLR9 依賴性機制誘導(dǎo)特異性IgG 和CD8+T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)，可為人類寄生蟲感染提供保護(hù)。SARTORIUS 等［7］研發(fā)了一種基于絲狀噬菌體fd顆粒通過DEC-205 傳遞抗原決定因子的遞送系統(tǒng)（fd displaying an anti-DEC-205 single-chain-variable fragment，fdsc-αDEC），即使在無佐劑或樹突狀細(xì)胞（dendritic cells，DCs）刺激的情況下，也能誘導(dǎo)CD8+T 細(xì)胞反應(yīng)，進(jìn)一步證實了fdsc-αDEC 是依賴TLR9信號通路的激活來誘導(dǎo)促炎細(xì)胞因子與Ⅰ型干擾素分泌的。GOGOKHIA 等［8］闡明了一種腸道噬菌體以TLR9 依賴的方式驅(qū)動Ⅰ型干擾素的產(chǎn)生。因此,噬菌體的固有免疫原性在一定程度上為噬菌體展示疫苗的發(fā)展奠定了基礎(chǔ)。

1.2噬菌體展示疫苗免疫機制 以噬菌體為載體的疫苗發(fā)揮免疫作用的關(guān)鍵之一取決于B 細(xì)胞抗原表位（B-cell epitopes，BCEs）和T 細(xì)胞抗原表位（T-cell epitopes，TCEs）的選擇［9］。目前，普遍認(rèn)為噬菌體展示疫苗被細(xì)胞內(nèi)吞，通過APCs 加工提呈，經(jīng)MHCⅠ和MHCⅡ類分子途徑誘導(dǎo)CD4+和CD8+T細(xì)胞免疫，同時經(jīng)B 細(xì)胞提呈誘導(dǎo)體液免疫［10］。SINHA 等［11］研究顯示，fd 絲狀噬菌體能夠觸發(fā)所有的免疫反應(yīng)，特別是表面展示的MHCⅠ類限制性抗原決定簇誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性T 淋巴細(xì)胞反應(yīng)（cytotoxic T lymphocyte，CTL）。另有研究發(fā)現(xiàn)，fd 噬菌體可靶向小鼠DCs，在不需要外源性佐劑的情況下激活先天和適應(yīng)性免疫反應(yīng)。有研究報道，以白色念珠菌Fba1表位YGKDVKDLFDYAQE構(gòu)建的絲狀噬菌體展示疫苗免疫小鼠能夠誘導(dǎo)強烈的體液和細(xì)胞免疫反應(yīng)，還可在細(xì)胞免疫方面增強Th1（IFNγ，IL-2）和Th17（IL-17）型細(xì)胞因子水平，這可能在抗白色念珠菌保護(hù)中發(fā)揮重要作用［12-13］。MASCOLO 等［14］研究表明，重組噬菌體在小鼠體內(nèi)引起的CTL 效應(yīng)反應(yīng)也許是在噬菌體衣殼蛋白刺激增殖的CD4+T 細(xì)胞輔助下所產(chǎn)生的，這可能是由于噬菌體外殼蛋白不表達(dá)或低表達(dá)共刺激分子所致。有研究報道，絲狀噬菌體pⅧ外殼蛋白上的高拷貝B 細(xì)胞表位能誘導(dǎo)體液免疫［12］。而針對單一肽產(chǎn)生的體液免疫并不能提供有效保護(hù)能力，另外，在抗體滴度和記憶方面的個體間差異也是一項重要的挑戰(zhàn)，使用展示多個不同抗原表位的噬菌體混合物可能是克服該問題的方法之一［13］。

2 噬菌體展示系統(tǒng)

2.1絲狀噬菌體（filamentous bacteriophage）展示系統(tǒng)絲狀噬菌體是一類F+大腸埃希菌專一性噬菌體［15］。用于噬菌體展示的主要是Ff組的M13、f1、fd噬菌體，此類噬菌體介于溫和噬菌體和毒性噬菌體之間，在感染宿主后使宿主細(xì)胞處于一種慢性感染狀態(tài)，噬菌體顆粒從宿主細(xì)胞中緩慢釋放，宿主細(xì)胞仍保持繼續(xù)生長和分裂。絲狀噬菌體由蛋白質(zhì)外殼與環(huán)狀單鏈DNA（cssDNA）組成，基因組長度為6 408 bp，共有11個基因組成，編碼11種蛋白，其中編碼5種衣殼蛋白分別為pⅢ、pⅥ、pⅦ、pⅧ和pⅨ［15］。由于pⅢ和pⅧ蛋白處于噬菌體結(jié)構(gòu)的固定位置，二者常用于展示系統(tǒng)的構(gòu)建。次要衣殼蛋白pⅢ約含5個拷貝，由于噬菌體拷貝數(shù)較少，在一定程度上空間結(jié)構(gòu)的影響可忽略不計，因此，pⅢ蛋白更適合表達(dá)較大的多肽，但表現(xiàn)出低免疫原性［16］。與之相比，pⅧ為主要衣殼蛋白，約含2 700個拷貝，提供更高水平的免疫原暴露，因此，pⅧ表現(xiàn)出的免疫原性更強，廣泛應(yīng)用于疫苗的研制。同時也亟需一種策略解決只能展示短肽的局限性，最大限度地提高系統(tǒng)的展示靈活性［16-17］。

SHI等［12］將白色念珠菌Fba1 上一個優(yōu)勢表位肽（YGKDVKDLFDYAQE）展示于絲狀噬菌體fUSE55 pⅢ與F88-4 pⅧ上，構(gòu)建了兩種展示噬菌體疫苗，結(jié)果表明，兩種展示噬菌體疫苗均能明顯誘導(dǎo)感染小鼠的體液和細(xì)胞免疫應(yīng)答，減輕白色念珠菌感染所致腎臟損傷狀況，并顯著提高小鼠存活率。該研究在一定程度上體現(xiàn)出YGKDVKDLFDYAQE-絲狀噬菌體展示疫苗成為新型白念珠菌候選疫苗的潛力。GONZáLEZ-MORA 等［18］在M13噬菌體表面展示了牛蜱蟲蛋白Bm86 上的多肽Sbm746，結(jié)果表明，所設(shè)計的疫苗能夠誘導(dǎo)牛單核細(xì)胞源性樹突狀細(xì)胞（monocyte derived dendritic cells，Mo-DCs）成熟和外周血單個核細(xì)胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMCs）增殖，通過ELISA 法及斑點印跡免疫檢測技術(shù)有效鑒定了靶標(biāo)抗原的表達(dá)。因此，M13噬菌體展示平臺有望成為獸疫領(lǐng)域生產(chǎn)新型、穩(wěn)定和高效益疫苗的關(guān)鍵技術(shù)。STAQUICINI 等［19］采用fd 衍生噬菌體在主要衣殼蛋白pⅧ上展示了嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒2（severe acute respiratory symptom coronavirus 2，SARS-CoV-2）蛋白抗原表位（aa 662-671），在次要衣殼蛋白pⅢ上展示了肺靶向肽CAKSMGDIVC，構(gòu)建了噬菌體雙展示疫苗。結(jié)果顯示，該疫苗經(jīng)黏膜免疫誘發(fā)了小鼠系統(tǒng)性和特異性的免疫反應(yīng)。絲狀噬菌體是一種使用最為廣泛噬菌體展示系統(tǒng)，但其存在一個關(guān)鍵性難題，即該噬菌體屬于非裂解增殖，展示的肽或蛋白質(zhì)必須通過宿主細(xì)胞內(nèi)膜分泌才能重新組裝，因此所展示的肽或蛋白質(zhì)的長度、序列和空間結(jié)構(gòu)在一定程度上受到限制［20］。

2.2Lambda 噬菌體展示系統(tǒng) Lambda 噬菌體由二十面體頭部（直徑約60 nm）和彎曲的尾部（長約150 nm）組成［20］，是一種溫和的噬菌體，包含溶原性和溶菌性2個周期。Lambda噬菌體含有48 500 bp線性dsDNA，分子兩端有12 個堿基組成的黏性末端，在感染大腸埃希菌后，黏性末端環(huán)化形成環(huán)狀DNA分子。Lambda噬菌體外部由主要衣殼蛋白gpD 和gpE、門戶蛋白gpB、支架蛋白gpNu3、病毒蛋白gpC 和尾蛋白gpV 組成。Lambda噬菌體展示技術(shù)系統(tǒng)通常采用頭蛋白D和尾蛋白V作為展示位點，D蛋白在頭部空間結(jié)構(gòu)中比較突出，易與配體結(jié)合，可將外源蛋白質(zhì)在此融合；尾蛋白V 具有2 個折疊結(jié)構(gòu)域，C-末端不是必需的，可被外源多肽或蛋白質(zhì)取代，不會明顯影響噬菌體的增殖。與尾蛋白V 比較，頭蛋白D 由于拷貝數(shù)更多，更適合作為展示位點。

DAVENPORT 等［21］開發(fā)了一種基于Lambda 噬菌體優(yōu)化的噬菌體樣顆粒（phage-like particle，PLP），設(shè)計了展示SARS-CoV-2和MERS-CoV 表位的3款疫苗（RBDSARS-PLPs，RBDMERS-PLPs 及聯(lián)合疫苗hCoVRBD PLPs）。結(jié)果顯示，用RBDSARS-PLPs 和RBDMERSPLPs 免疫的BALB／c 小鼠可誘導(dǎo)產(chǎn)生具有中和活性的抗體；僅用1μg的RBDSARS-PLPs免疫就能產(chǎn)生高滴度抗體，且這些抗體在發(fā)病后6個月仍保持較高水平。在攻毒試驗中，用RBDSARS-PLPs、RBDMERS-PLPs和hCoV-RBD PLPs 免疫的小鼠對SARS-CoV-2 和MERS-CoV 的感染具有保護(hù)作用。這些數(shù)據(jù)表明，基于Lambda噬菌體優(yōu)化的PLP系統(tǒng)為高效產(chǎn)生單靶點或多靶點疫苗提供了一個可靠平臺。GONZáLEZCANO 等［22］在Lambda噬菌體頭部蛋白D上展示了鹿朊病毒蛋白的3 個特異性表位，構(gòu)建了朊病毒噬菌體展示疫苗LDP（lambda display phage）-DSE（disease specific epitopes）。結(jié)果表明，在無佐劑的情況下，經(jīng)黏膜給藥可誘導(dǎo)強烈的IgA 抗體反應(yīng)。LDP-DSE 噬菌體展示疫苗能夠在消化道中生存下來，具有成為口服疫苗遞送系統(tǒng)的潛力。與絲狀噬菌體比較，Lambda 噬菌體可在D 蛋白上展示更復(fù)雜的蛋白，且使許多在其他噬菌體展示系統(tǒng)中難以通過膜分泌的多肽或蛋白得以展示。雖然Lambda 噬菌體具有諸多優(yōu)勢，但仍有一些問題限制了Lambda 噬菌體的廣泛應(yīng)用［20］。由于Lambda 噬菌體屬于溫和噬菌體，其形式表現(xiàn)出多樣化：①具有感染性的噬菌體顆粒游離態(tài)；②宿主菌細(xì)胞質(zhì)內(nèi)類似質(zhì)粒形式的噬菌體核酸；③前噬菌體（整合在細(xì)菌染色上的噬菌體基因）。這種復(fù)雜的生物學(xué)特性使Lambda 噬菌體展現(xiàn)出比絲狀噬菌體更低的免疫原性，且由于Lambda 噬菌體基因組更大，使基于分子水平的操作更加復(fù)雜。

2.3T4 噬菌體展示系統(tǒng) T4 噬菌體是一種感染大腸埃希菌的毒性噬菌體［20］，由頭部、尾部和12 個尾部纖維組成。成熟T4噬菌體的頭部是一個扁長的二十面體衣殼，包裹著線性dsDNA 基因組（168 000 bp）。頭部被9～19 種蛋白質(zhì)所覆蓋，其中Hoc（相對分子質(zhì)量約40 000，包括155～160個拷貝）和Soc（相對分子質(zhì)量約9 000，包括810～960 個拷貝）是在衣殼組裝完成后結(jié)合至衣殼外表面的2 個非必需蛋白［16］，Hoc和Soc具有較強的抗原性，常用于構(gòu)建T4噬菌體展示系統(tǒng)，該系統(tǒng)不僅可在單個Hoc 或Soc位點上展示外源肽或蛋白，還可在Soc和Hoc 位點上展示雙重外源肽或蛋白。

TAO 等［23］構(gòu)建了一種以T4 噬菌體為平臺的炭疽-鼠疫雙展示疫苗，將炭疽保護(hù)性抗原（anthrax protective antigen，PA）、鼠疫桿菌Ⅲ型分泌體的囊膜抗原F1 和低鈣反應(yīng)V 抗原突變體（F1mutV）融合至外殼蛋白Soc 上。結(jié)果表明，炭疽-鼠疫雙展示疫苗在小鼠、大鼠和兔3 種動物模型中均可激發(fā)強烈的特異性免疫反應(yīng)，在攻毒試驗中均可提供完全保護(hù)。因此，T4噬菌體有望成為構(gòu)建多價疫苗的通用平臺。LI 等［24］將流感基質(zhì)蛋白2 胞外域（influenza matrix protein 2 ectodomain，M2e）展示在T4 噬菌體樣顆粒（T4 virus-like particle，VLP）上，制備成M2e-T4 VLP噬菌體展示疫苗。結(jié)果表明，在無任何佐劑的情況下，可誘發(fā)強烈的體液和細(xì)胞免疫反應(yīng)，具有超強的免疫原性，且對致命流感病毒攻擊具有保護(hù)能力。HASHEMI 等［25］用T7 噬菌體展示M2e，結(jié)果顯示，雖然可誘導(dǎo)針對多種亞型甲型流感病毒的保護(hù)性抗體，但不能完全預(yù)防致死性流感病毒的攻擊，這可能是由于T7 噬菌體衣殼上M2e 分子拷貝數(shù)較低所致。DENG 等［26］將M2e 展示在f88 噬菌體外殼蛋白pⅧ上，雖然外殼蛋白pⅧ多達(dá)2 700個拷貝，但僅有部分M2e 可展示在噬菌體f88 表面上。T4 噬菌體的優(yōu)勢在于其衣殼蛋白Soc 和Hoc 為高密度的抗原分子提供了展示平臺，可用于展示不同大小的抗原分子，甚至全長蛋白質(zhì)，這是該噬菌體展示系統(tǒng)所特有的。

2.4T7 噬菌體展示系統(tǒng) T7 噬菌體屬于毒性噬菌體［20］，在細(xì)胞質(zhì)中組裝并通過裂解細(xì)菌釋放，具有獨立于大腸埃希菌的分泌機制。其頭部是包裹線性dsDNA的二十面體衣殼，由415個拷貝的衣殼蛋白組成，具有完美的結(jié)構(gòu)對稱性。在T7噬菌體展示系統(tǒng)中，用于展示多肽或蛋白的衣殼蛋白通常包括10A和10B 2種形式，分別由344和397個氨基酸組成，后者是由前者的341位氨基酸的翻譯移碼形成的［27］。

XU 等［28］將口蹄疫病毒（foot-and-mouth disease virus，F(xiàn)MDV）結(jié)構(gòu)蛋白VP1 的G-H 環(huán)編碼入T7 Select 415-1b 載體，構(gòu)建了重組T7-GH 噬菌體展示疫苗，評估單劑量免疫后的效果。結(jié)果表明，與兩種市售FMDV 疫苗（InactVac 和PepVac）比較，VP1／LPBE抗體滴度及抗原特異性淋巴細(xì)胞增殖率與PepVac組相當(dāng)，但弱于InactVac組，免疫保護(hù)率為80%（4／5），表明FMDV 噬菌體展示疫苗具有良好的免疫原性。WU 等［29］將FMDV AKT-Ⅲ株的結(jié)構(gòu)蛋白VP1 于T7噬菌體衣殼表面展示，結(jié)果表明，免疫BALB／c小鼠后能夠快速產(chǎn)生高滴度的FMDV 抗體，且抗體可在較長時間內(nèi)維持在較高水平。體外試驗表明，AKT-T7噬菌體展示疫苗對倉鼠腎細(xì)胞（BHK-21）、牛腎細(xì)胞（MDBK）和羊腎細(xì)胞均未產(chǎn)生細(xì)胞毒性。LIU 等［30］開發(fā)了ΦC31 整合酶介導(dǎo)的T7 噬菌體體內(nèi)整合系統(tǒng)，該系統(tǒng)允許快速敲入超過2 000 bp 的外源DNA，而不會損害其結(jié)構(gòu)完整性。T7噬菌體主要具有以下優(yōu)勢：①呈雙鏈DNA，具有良好的穩(wěn)定性，在復(fù)制過程中不易發(fā)生突變；②子代噬菌體的組裝在細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行，通過細(xì)胞膜裂解而釋放，因此展示的肽段或蛋白無大小限制和分泌過程導(dǎo)致的宿主毒性風(fēng)險；③增殖速度比絲狀和Lambda 等噬菌體更快，在3 h 內(nèi)即可產(chǎn)生空斑，節(jié)省了大量的克隆和篩選時間；④在其他噬菌體不能存活的極端條件（pH 與溫度）下的穩(wěn)定表達(dá)。這些優(yōu)勢使T7 噬菌體展示系統(tǒng)更具吸引力［31］。

3 噬菌體展示疫苗的應(yīng)用

3.1細(xì)菌感染性疾病的預(yù)防 TAO等［23］通過T4噬菌體展示系統(tǒng)構(gòu)建了炭疽-鼠疫雙展示噬菌體疫苗，該疫苗成功誘導(dǎo)了強烈的炭疽桿菌和鼠疫桿菌特異性免疫反應(yīng)，并在3 種動物（小鼠、大鼠和兔）攻毒模型中對吸入性炭疽桿菌和鼠疫桿菌提供了完全保護(hù)，即使同時受到致命劑量的炭疽桿菌和鼠疫桿菌攻擊，這種保護(hù)仍有效。因此，T4噬菌體展示系統(tǒng)對于研制高危細(xì)菌病原體多價疫苗具有巨大潛力，是一種獨特的疫苗遞送平臺。

3.2病毒感染性疾病的預(yù)防 LI等［24］利用T4 VLP平臺開發(fā)了一種基于M2e 的流感噬菌體展示疫苗，在不使用任何佐劑的情況下，可誘導(dǎo)強烈的免疫反應(yīng)，并對流感病毒感染的小鼠提供了不同的保護(hù)作用［32-35］。STAQUICINI 等［19］通過絲狀噬菌體fd 展示系統(tǒng)構(gòu)建了SARS-CoV-2 噬菌體雙展示疫苗，一定程度上彌補了傳統(tǒng)疫苗的缺陷，基于噬菌體展示技術(shù)的遞送平臺有可能成為研發(fā)病毒疫苗的得力助手。

3.3真菌感染性疾病的預(yù)防 白色念珠菌（Candida albicans）是一種機會性真菌病原體，特別是針對免疫功能低下的人群，目前，臨床上仍缺乏有效的預(yù)防和治療策略，因此亟需開發(fā)有效的防治制劑。SHI等［12］采用絲狀噬菌體展示系統(tǒng)展示了白色念珠菌Fba1的肽表位，構(gòu)建了2種噬菌體展示疫苗（噬菌體-3F 和噬菌體-8F）。結(jié)果表明，該疫苗對感染小鼠具有明顯的保護(hù)作用。球孢子絲菌是一種真菌，通常感染免疫功能低下的人群，目前仍無任何可以預(yù)防球孢子菌病的方法，臨床上常建議盡量避免參與環(huán)境中產(chǎn)生較多粉塵的相關(guān)活動。一種被稱為70 kDa的糖蛋白（Gp70）是球孢子絲菌細(xì)胞表面的主要黏附因子，是一種與真菌毒力相關(guān)的交叉免疫原性蛋白。CHEN 等［36］將Gp70 的表位多肽Kpvqhaltplgldr 展示在fuse5 主要外殼蛋白pⅢ上，構(gòu)建球孢子絲菌噬菌體展示疫苗，結(jié)果顯示，該疫苗可誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生中和抗體，抑制球孢子絲菌的感染，提高存活率。

3.4寄生蟲病的預(yù)防 牛蜱（Rhipicephalus microplus）是一種寄生在全球熱帶和亞熱帶地區(qū)牛體表的吸血寄生蟲［37-38］。GONZáLEZ-MORA 等［18］以牛蜱蛋白Sbm7462 上短肽Bm86 為抗原展示在M13 噬菌體上，制備了牛蜱噬菌體展示疫苗，采用牛單核細(xì)胞來源的DCs 進(jìn)行體外試驗，結(jié)果證明，疫苗具有免疫原性，但仍需在牛模型中進(jìn)一步評估其免疫原性及安全性。肝片形吸蟲病是一種全球范圍內(nèi)出現(xiàn)的人畜共患?。?9］，VILLA-MANCERA 等［40］將組織蛋白酶肽表位CL1（TPWKDKQ）、CL2（YGSCFLR）以單獨和聯(lián)合的形式展示在M13 噬菌體上，制備了肝片形吸蟲噬菌體展示疫苗，通過評估對感染囊蚴綿羊的吸蟲大小與數(shù)量、糞便卵數(shù)目、肝酶血清水平等方面來驗證疫苗的有效性。結(jié)果表明，以CL1 為肽表位構(gòu)建的組別效果最佳，可誘導(dǎo)產(chǎn)生IgG 特異性抗體，對肝片形吸蟲的感染具有保護(hù)作用，能夠有效預(yù)防肝片形吸蟲的感染。

4 小結(jié)與展望

噬菌體展示疫苗的優(yōu)勢主要有：①在無需佐劑的條件下即可有效誘導(dǎo)產(chǎn)生保護(hù)性抗體；②通過細(xì)菌培養(yǎng)即可實現(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)；③運輸和儲存成本比傳統(tǒng)疫苗更加經(jīng)濟(jì)，方式更加便捷；④人體給藥安全；⑤即使在相對較低的劑量下，也能獲得比傳統(tǒng)疫苗更好的免疫效果。但也存在一些缺陷：噬菌體雖然不會對人體致病，但在噬菌體展示疫苗獲得批準(zhǔn)之前還需對噬菌體的生物學(xué)特性進(jìn)行全面研究，并進(jìn)行臨床試驗以對其安全性進(jìn)行評估。關(guān)于噬菌體展示疫苗引發(fā)免疫應(yīng)答的潛在機制尚未明確，還需進(jìn)行大量的基礎(chǔ)研究與臨床試驗。綜上所述，噬菌體展示疫苗雖不能克服疫苗生產(chǎn)領(lǐng)域面臨的所有障礙，但仍是疾病防治領(lǐng)域一種具有競爭力的候選疫苗。