10%嘧啶肟草醚懸浮劑的高效液相色譜分析

夏友青，龔順澤，金銀秀，徐德鋒

（臺州職業(yè)技術(shù)學院醫(yī)藥學院，浙江 臺州 318000）

嘧啶肟草醚（Pyribenzoxim）是由韓國LG 化學集團研發(fā)的嘧啶水楊酸類除草劑，主要通過抑制乙酰乳酸合成酶而起除草的作用，是一種廣譜選擇性芽后除草劑。對水稻田多種一年生禾本科雜草、闊葉雜草、莎草科雜草均具有明顯的防效，使用方式靈活，既可用于水稻直播田又可用于水稻移栽田，使用技術(shù)簡單［1-4］。有關(guān)嘧啶肟草醚的分析方法標準研究相對較少。關(guān)于嘧啶肟草醚殘留的分析方法報道，潘金菊等［5］、張玉婷等［6］建立了超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定水稻中嘧啶肟草醚殘留量的方法，陳曉林等［7，8］建立了嘧啶肟草醚在水稻田土壤、植株和大米（糙米）中的殘留分析方法。本研究通過試驗研究，建立了10%嘧啶肟草醚懸浮劑的定量分析方法，該方法具有操作簡單、快速、準確等特點。

1 材料與方法

1.1 試劑

乙腈（色譜純）、甲醇（色譜純）［阿拉丁試劑（上海）有限公司）］；超純水；嘧啶肟草醚標準品，10%嘧啶肟草醚懸浮劑樣品（江蘇潤澤農(nóng)化有限公司）。

1.2 試驗儀器

Agilent 1260 型高效液相色譜儀，具有紫外列檢測器、自動進樣器和色譜工作站；ODS-3 色譜柱（C18，250.0 mm×4.6 mm，5 μm，日本島津公司）；Millipore integral 10 型超純水系統(tǒng)（密立博中國有限公司）；XS205 型分析天平（梅特勒-托利多公司）；0.45 μm 尼龍濾膜（上海安譜實驗科技股份有限公司）［9-11］。

1.3 液相色譜操作條件

流動相為乙腈∶水∶乙酸=800∶200∶0.5（體積比）；柱溫為室溫；流速1.0 mL∕min；檢測波長245 nm；進樣體積10 μL，保留時間約14 min。

1.4 測定步驟

1.4.1 標準溶液配制 準確稱取嘧啶肟草醚標準樣品0.038 5 g（精確至0.2 mg），置于50 mL 容量瓶中，加適量乙腈超聲溶解5 min，冷卻至室溫后加乙腈定容搖勻，用0.45 μm 微孔濾膜過濾，靜置備用。

1.4.2 試樣溶液配制 準確稱取嘧啶肟草醚試樣0.396 0 g（精確至0.2 mg），置于500 mL 容量瓶中，加適量乙腈超聲溶解5 min，冷卻至室溫后加乙腈定容搖勻，用0.45 μm 微孔濾膜過濾，靜置備用。

1.4.3 測定 在上述操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標準溶液，待各針相對響應值變化小于1.5%時，按照標準溶液、試樣溶液、試樣溶液、標準溶液的順序進樣測定。

1.4.4 質(zhì)量分數(shù)計算 將測得的2 針試樣溶液和試樣溶液前后2 針標準溶液中嘧啶肟草醚的峰面積（圖1、圖2）分別取平均值。試樣中嘧啶肟草醚的質(zhì)量分數(shù)X（%）按下式計算。

圖1 嘧啶肟草醚標樣色譜分布

圖2 10%嘧啶肟草醚懸浮劑色譜分布

式中，A1為標準溶液中嘧啶肟草醚峰面積的平均值；A2為試樣溶液中嘧啶肟草醚峰面積的平均值；m1為嘧啶肟草醚標樣的質(zhì)量，單位為g；m2為嘧啶肟草醚試樣的質(zhì)量，單位為g；P為標準品中嘧啶肟草醚的質(zhì)量分數(shù)，單位為%。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜條件的選擇

通過Agilent 1260 型高效液相色譜儀的光譜數(shù)據(jù)采集功能，獲得嘧啶肟草醚的紫外可見吸收光譜（圖3）。從圖3 中可以看到，在吸收波長190～400 nm區(qū)域內(nèi)，嘧啶肟草醚有2個吸收峰波長分別在202 nm和245 nm 附近，由于最大吸收波長202 nm 附近溶劑的干擾比較明顯，因此將檢測波長定為245 nm。依據(jù)嘧啶肟草醚的理化性質(zhì)，選用乙腈和酸性水溶液作為流動相，用乙腈溶解樣品，二者均能很好地分離且峰形對稱，基線平穩(wěn)，結(jié)果較好。

圖3 嘧啶肟草醚全波長掃描結(jié)果

2.2 線性相關(guān)性測定

在上述色譜分析條件下，配制了一系列不同質(zhì)量濃度的嘧啶肟草醚標準溶液進行測定。以質(zhì)量濃度（x）為橫坐標、峰面積（y）為縱坐標，得到嘧啶肟草醚的線性相關(guān)曲線。線性方程為y=21 406x+57.41，相關(guān)系數(shù)r=0.999 6，表明使用該方法測定的嘧啶肟草醚標準品在0.10～0.98 g∕L 濃度范圍內(nèi)線性相關(guān)性良好。

2.3 精密度測定

按照上述分析條件，取配制好的10%嘧啶肟草醚懸浮劑溶液，平行進樣5 次，計算嘧啶肟草醚的標準偏差和相對標準偏差（RSD），考察該分析方法的精密度，結(jié)果見表1。由表1 可知，該方法的相對標準偏差較小，僅為0.12，說明分析方法的儀器精密度較好。

表1 10%嘧啶肟草醚懸浮劑精密度測定

2.4 準確度測定

在已知質(zhì)量濃度的10%嘧啶肟草醚懸浮劑中，分別添加不同量的10%嘧啶肟草醚標準品。按照上述色譜條件分析其含量，計算回收率，結(jié)果見表2。由表2 可知，使用該分析方法的回收率在98.11%～100.00%，平均回收率為98.48%，說明測量準確度較好。

表2 10%嘧啶肟草醚懸浮劑加標回收率的測定

3 結(jié)論

本研究通過對流動相與檢測波長的選擇，精確度與回收率的驗證等，建立了10%嘧啶肟草醚懸浮劑的高效液相色譜分析方法。該方法嘧啶肟草醚在0.10～0.98 g∕L 的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系（r=0.999 6）；標準偏差為0.12，相對標準偏差為1.21%，方法的儀器精密度較高；平均加標回收率為98.48%，準確度較好。該方法具有操作簡便、快速、經(jīng)濟等特點，適合在生產(chǎn)和試驗中對10%嘧啶肟草醚懸浮劑進行定量分析，是進行產(chǎn)品質(zhì)量檢測較理想的分析方法。