氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時測定水果蔬菜中的四種農(nóng)藥殘留

唐 澈，郭自國，周天明，高 進(jìn)，王 偉，吳君哲，趙 靜，余 靜，田 甜

（湖北省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測中心，武漢 430070）

對農(nóng)產(chǎn)品進(jìn)行農(nóng)藥殘留檢測，確保農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全是長期、艱巨復(fù)雜的任務(wù)［1］。農(nóng)藥殘留的檢測方法主要有氣相、液相、液質(zhì)聯(lián)用等［2-8］，氣質(zhì)檢測方法報道較少，而液質(zhì)一般較氣質(zhì)昂貴，使用成本更高，為整合資源，提高檢測效率，建立4種農(nóng)藥殘留的氣質(zhì)檢測方法很有必要。

QuEChERS 方法具有簡單、快速、高效、便宜、可靠、安全等優(yōu)點，已在農(nóng)藥殘留檢測中廣泛應(yīng)用［8-10］。氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（GC-MS/MS）法作為高靈敏度、高選擇性的儀器已廣泛用于農(nóng)藥殘留的定量檢測中［11，12］。本研究利用QuEChERS 進(jìn)行前處理，GC-MS/MS 進(jìn)行檢測，建立了水果、蔬菜中醚菊酯、蟲螨腈、嘧菌酯、烯酰嗎啉4 種農(nóng)藥殘留的檢測方法，該方法簡單、快速、靈敏度高、線性范圍寬，能夠滿足新國標(biāo)GB2763—2019 對農(nóng)藥殘留檢測限量的要求［13］。

1 材料與方法

1.1 試劑、標(biāo)準(zhǔn)溶液與耗材

4 種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品均購自于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心（天津），濃度均為1 000 mg/L。乙腈和丙酮均為J.T.Baker 的色譜純；QuEChERS 萃取包（4 g 無水硫酸鎂、1 g 二水檸檬酸鈉、1 g 氯化鈉、0.5 g 檸檬酸二鈉）、凈化管（200 mg PSA）均購自于武漢康月萊德科技有限公司；陶瓷均質(zhì)子購自上海安譜科技有限公司；0.22 μm 尼龍微孔濾膜，購自天津津騰實驗設(shè)備有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

Trace 1300-TSQ 9000 三重四極桿質(zhì)譜氣質(zhì)聯(lián)用儀（新加坡Thermo Fisher），電子天平（PL202，上海梅特勒），氮吹儀N-EVAP112（美國Organomation），臺式微量高速離心機(jī)（CF16RN，日本日立），高速離心機(jī)HC-3108（安徽中科）。

1.3 GC-MS-MS 條件

1.3.1 色譜條件 DB-5MS（30.00m×0.25mm×0.25μm）柱，載氣為氦氣，柱流量為1.2 mL/min，進(jìn)樣口為PTV 進(jìn)樣口，進(jìn)樣方式為大體積進(jìn)樣，進(jìn)樣體積為5 μL。進(jìn)樣口及柱溫箱設(shè)置見表1 和表2。

表1 PTV 進(jìn)樣口條件

表2 柱溫箱程序升溫條件

1.3.2 質(zhì)譜條件 離子源為EI 源，電子轟擊能量為70 eV，掃描方式為多反應(yīng)監(jiān)測（SRM），三重四極桿質(zhì)量分析器，離子源溫度為300 ℃；離子傳輸線溫度為280 ℃；燈絲電流為50 μA。MS/MS分析條件見表3。

表3 MS/MS 分析參數(shù)

1.4 方法

稱取10 g（精確至0.01 g）樣品于50 mL 離心管中，加入10.00 mL 乙腈，加入萃取包（4 g 無水硫酸鎂、1 g 二水檸檬酸鈉、1 g 氯化鈉、0.5 g 檸檬酸二鈉），同時加入1 粒陶瓷均質(zhì)子，劇烈振蕩1 min后5 000 r/min 離心5 min，吸取8 mL 上清液于凈化管（含200 mg PSA）中，再次劇烈振蕩1 min，9 000 r/min高速離心5 min。準(zhǔn)確吸取2 mL 上清液于10 mL 玻璃離心管中，70 ℃氮吹至近干，準(zhǔn)確加入1 mL 丙酮，渦旋均勻，過微孔濾膜上機(jī)。

2 結(jié)果與分析

2.1 MS/MS 方法的優(yōu)化

在AutoSRM 的模式下，先進(jìn)行fullscan，掃描范圍50～500 m/z，挑選豐度較大的2 個離子作為母離子，進(jìn)行子離子掃描，挑選子離子豐度前三的3 對離子作為定量定性離子，其對應(yīng)的碰撞能量作為離子對的碰撞能量。

2.2 氮吹水浴溫度的確定

在80、70、40 ℃3 個水浴溫度下回收率沒有明顯的差異，但40 ℃水浴溫度氮吹時間過長，影響濃縮效率，而80 ℃接近乙腈的沸點81.6 ℃，蒸發(fā)過快，在終點時不好控制，因此選擇70 ℃作為氮吹的水浴溫度，既保證了工作效率又保證了檢測質(zhì)量。

2.3 定量計算

所有組分都基于峰面積定量。烯酰嗎啉有2 個峰，定量時用2 個定量峰的峰面積加和進(jìn)行計算。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線和檢出限

將10 mg/L 的混合溶液用丙酮稀釋成1.00、0.50、0.05 mg/L 3 個梯度。為抵消基質(zhì)效應(yīng)對檢測結(jié)果帶來的影響，工作曲線所有的點均用空白基質(zhì)提取液配制。在“1.3”的GC-MS/MS 條件下測定，4種農(nóng)藥的線性范圍、相關(guān)系數(shù)、定量限見表4。由表4 可知，4 種農(nóng)藥殘留的線性相關(guān)系數(shù)R2均大于0.995。以3 倍信噪比計算農(nóng)藥的檢出限，4 種農(nóng)藥的檢出限為0.002 mg/kg；以大于10 倍信噪比的添加濃度，且在該濃度下回收率和準(zhǔn)確度能夠滿足GB27404—2008 的定量限［14］，確定4 種農(nóng)藥的定量限為0.01 mg/kg。

表4 4 種農(nóng)藥的加標(biāo)回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=6）

2.5 回收率和精密度

在已知不含目標(biāo)農(nóng)藥的甘藍(lán)和葡萄中，進(jìn)行3個水平的添加回收試驗。添加濃度分別為0.01、0.02、0.10 mg/kg，每個水平進(jìn)行6 個平行試驗，用對應(yīng)的空白樣品配制標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量，結(jié)果見表5。由表5 可知，4 種農(nóng)藥3 個水平的回收率在89.1%～113.1%，標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.0%～10.3%，結(jié)果表明4 種農(nóng)藥在甘藍(lán)和葡萄的添加回收率和精密度均能滿足植物源性食品中農(nóng)藥殘留檢測方法的要求［15］。

表5 4 種農(nóng)藥在甘藍(lán)、葡萄3 個水平的添加回收率和精密度（n=6）（單位：%）

2.6 實際樣品的檢測

采用本研究的方法對88 個樣品進(jìn)行檢測，其中蔬菜樣品60 個，水果樣品28 個。蟲螨腈檢出3 次，全部為蔬菜樣品，檢出量分別為0.036、0.026、0.026 mg/kg；醚菊酯檢出2 次，含量未達(dá)到定量限；嘧菌酯檢出2 次，檢出量分別為0.190、0.061 mg/kg，均為葡萄樣品；烯酰嗎啉檢出6 次，梨、西瓜、豇豆、辣椒、番茄和黃瓜的檢出量分別為0.012、0.010、0.033、0.056、0.012、0.015 mg/kg，各檢出1 次。上述樣品雖有檢出，但低于國家標(biāo)準(zhǔn)要求的最大殘留限量值，不會對消費者的身體健康造成影響。實際樣品提取離子譜如圖1 所示。

圖1 樣品提取離子譜

3 小結(jié)

本研究采用QuEChERS 方法進(jìn)行前處理，建立水果、蔬菜中蟲螨腈、醚菊酯、嘧菌酯、烯酰嗎啉的GC-MS/MS 檢測方法，該方法簡單、快速、準(zhǔn)確、可靠，測定的4 種農(nóng)藥殘留的定量限能夠滿足GB2763—2019對水果、蔬菜中農(nóng)藥殘留限量的要求。