EGFR、P53、Ki-67在結(jié)直腸癌患者癌組織中的表達(dá)及與臨床病理學(xué)特征、預(yù)后的相關(guān)性分析

欒煥玲 徐 強(qiáng) 杜曉楠

山東省乳山市中醫(yī)院 264500

結(jié)直腸癌是源于結(jié)直腸黏膜的惡性腫瘤,早期病情隱匿,隨著病情發(fā)展出現(xiàn)大便習(xí)慣改變、腹痛、便血等癥狀,未引起患者重視,診斷時(shí)往往為晚期,失去手術(shù)治療機(jī)會[1]。并且該病病因尚不明確,臨床治療得不到根本控制,故尋找結(jié)直腸癌的標(biāo)記物,對結(jié)直腸癌患者預(yù)后具有重要的意義[2]。表皮生長因子受體(EGFR)能夠誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞增殖、分化和侵襲;突變型P53能夠抑制腫瘤細(xì)胞凋亡;Ki-67是一種核基質(zhì),能夠促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖,增強(qiáng)其侵襲性,三者與結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[3-4]。鑒于此,本文為了探究EGFR、P53、Ki-67在結(jié)直腸癌患者癌組織中的表達(dá),分析其與臨床病理學(xué)特征、預(yù)后的相關(guān)性,對我院收治的79例結(jié)直腸癌患者進(jìn)行研究,現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2018年11月—2021年11月我院收治的79例結(jié)直腸癌患者。其中男45例,女34例;年齡51～68(59.51±8.03)歲;腫瘤直徑1.8～4.5(3.42±1.03)cm;腫瘤部位:結(jié)腸、直腸分別為41、38例;病理類型:管狀腺癌、乳頭狀腺癌、黏液細(xì)胞癌分別為34、33、12例;分化程度:低/中/高分化分別為14、58、7例;TNM分期:Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ/Ⅳ期分別為7、28、38、6例;浸潤深度:T1/T2/T3/T4分別為5、28、40、6例。納入標(biāo)準(zhǔn):依據(jù)《中國結(jié)直腸腫瘤早診篩查策略專家共識》并經(jīng)病理學(xué)檢查確診者[5];預(yù)計(jì)生存期不低于6個(gè)月者;知情本次研究者。排除標(biāo)準(zhǔn):意識障礙者;自身免疫性疾病者;1周內(nèi)接受化療或放療者;伴有影響本次研究檢測指標(biāo)疾病者。本次研究獲得我院倫理委員會的認(rèn)證。

1.2 試劑及藥品 兔多克隆抗體EGFR、鼠抗人單克隆抗體P53、Ki-67及免疫組染色(SP)試劑盒、二氨基聯(lián)苯胺(DBA)顯色試劑盒均采購于福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司。

1.3 方法 結(jié)直腸癌切除術(shù)后取結(jié)直腸癌患者癌組織及癌旁組織,依次經(jīng)甲醛固定、石蠟包埋切片、SP染色處理。陰性對照為自制磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗,陽性對照為陽性組織切片,按照購買試劑盒操作說明操作。結(jié)直腸癌患者癌組織及癌旁組織標(biāo)本EGFR、P53、Ki-67的表達(dá)情況:EGFR陽性細(xì)胞依據(jù)組織標(biāo)本中細(xì)胞膜呈棕色判定;P53、Ki-67陽性細(xì)胞均依據(jù)細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒判定。在400倍鏡下隨機(jī)選取500個(gè)細(xì)胞中,EGFR陽性細(xì)胞≥25%判定為EGFR陽性;P53陽性細(xì)胞≥10%判定為P53陽性;Ki-67陽性細(xì)胞≥10%判定為Ki-67陽性,反之則陰性。研究EGFR、P53、Ki-67的表達(dá)狀況與臨床病理參數(shù)(包括性別、年齡、臨床分期、腫瘤直徑、腫瘤部位、病理類型、分化程度、TNM分期、浸潤深度)的相關(guān)性。術(shù)后隨訪12個(gè)月后,統(tǒng)計(jì)結(jié)直腸癌患者術(shù)后生存率,分析末次檢查結(jié)直腸組織標(biāo)本EGFR、P53、Ki-67表達(dá)情況與預(yù)后的關(guān)系。

2 結(jié)果

2.1 結(jié)直腸癌患者癌組織及相對應(yīng)的癌旁組織標(biāo)本EGFR、P53、Ki-67的表達(dá)情況比較 相比結(jié)直腸癌患者癌旁組織標(biāo)本,結(jié)直腸癌患者癌組織EGFR、P53、Ki-67陽性率明顯更高(P<0.05)。詳見表1。

表1 結(jié)直腸癌患者癌組織及相對應(yīng)的癌旁組織標(biāo)本EGFR、P53、Ki-67的表達(dá)情況比較[n(%)]

2.2 結(jié)直腸癌患者癌組織中EGFR、P53、Ki-67的表達(dá)與臨床病理參數(shù)的相關(guān)性分析 結(jié)直腸癌患者性別、年齡、腫瘤部位、病理類型與結(jié)直腸癌組織中EGFR、P53、Ki-67的陽性表達(dá)無相關(guān)性(P>0.05)。結(jié)直腸癌患者腫瘤直徑、分化程度、TNM分期、浸潤深度與結(jié)直腸癌組織中EGFR、P53、Ki-67的陽性表達(dá)呈正相關(guān)(r均>0,P<0.05)。詳見表2。

表2 結(jié)直腸癌患者癌組織中EGFR、P53、Ki-67的表達(dá)與臨床病理參數(shù)的相關(guān)性分析[n(%)]

2.3 結(jié)直腸癌患者癌組織中EGFR、P53、Ki-67的表達(dá)與預(yù)后的相關(guān)性分析 隨訪12個(gè)月,結(jié)直腸癌患者生存率為77.22%(61/79),其中EGFR、P53、Ki-67陽性表達(dá)患者生存率分別為39.29%(11/28)、69.09%(38/55)、74.29%(52/70),比陰性表達(dá)患者的98.04%(50/51)、95.83%(23/24)、100.00%(9/9)明顯更低(P<0.05)。

3 討論

近年來,隨著我國人民飲食結(jié)構(gòu)的改變,結(jié)直腸癌發(fā)病率逐年增加[6]。并且到目前為止該病發(fā)病原因、早期診斷標(biāo)志物、改善患者預(yù)后的標(biāo)志尚不清楚,臨床上雖然常用手術(shù)、放療、化療、靶向治療該病,但是5年生存率約為60%,生存率仍然不高[7-8]。故研究結(jié)直腸癌的病因,尋找新的特異性標(biāo)志物,進(jìn)一步改善結(jié)直腸癌患者預(yù)后,延長生存周期成為新的研究熱點(diǎn)[9]。

EGFR是上皮生長因子細(xì)胞增殖和信號傳導(dǎo)的受體,能夠促進(jìn)細(xì)胞的生長、增殖和分化;P53在腫瘤細(xì)胞中表現(xiàn)為突變型,空間構(gòu)象發(fā)生改變,失去對細(xì)胞生長、凋亡和DNA 修復(fù)的調(diào)控,促進(jìn)細(xì)胞增殖;Ki-67是一種增殖細(xì)胞的相關(guān)抗原,其功能與有絲分裂密切相關(guān),在細(xì)胞增殖中是不可缺少的[10]。并且近年來臨床研究表明[11],三者與結(jié)直腸癌的發(fā)生、發(fā)展及患者預(yù)后密切相關(guān)。本次研究發(fā)現(xiàn),相比結(jié)直腸癌患者癌旁組織標(biāo)本,結(jié)直腸癌患者癌組織EGFR、P53、Ki-67陽性率明顯更高。分析原因?yàn)镋GFR貫穿細(xì)胞膜,高表達(dá)引起下游信號傳導(dǎo)的增強(qiáng),持續(xù)自活化,進(jìn)而破壞受體下調(diào)機(jī)制,并通過自分泌形式激活EGFR促進(jìn)細(xì)胞增殖,使得結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖;P53蛋白是一種腫瘤促進(jìn)因子,可以消除正常P53的功能,進(jìn)而使得結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖、分化;Ki-67在腫瘤細(xì)胞周期S、G1、G2、M期均有表達(dá),與結(jié)直腸癌腫瘤的分化程度、浸潤、轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān),故三者在結(jié)直腸癌組織中出現(xiàn)高表達(dá)。

并且本次研究發(fā)現(xiàn),結(jié)直腸癌患者腫瘤直徑、分化程度、TNM分期、浸潤深度與其癌患者癌組織中EGFR、P53、Ki-67的陽性表達(dá)呈正相關(guān)。分析原因?yàn)镋GFR、P53、Ki-67的陽性表達(dá),促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖、分化,使得結(jié)直腸癌患者腫瘤直徑變大、分化程度增高,進(jìn)而使得TNM分期更嚴(yán)重。另外,腫瘤直徑增大,分化程度增高,會增加結(jié)直腸癌浸潤深度。

同時(shí)本次研究發(fā)現(xiàn),隨訪12個(gè)月,結(jié)直腸癌患者生存率為77.22%,其中EGFR、P53、Ki-67陽性表達(dá)患者生存率分別為39.29%、69.09%、74.29%,比陰性表達(dá)患者的98.04%、95.83%、100.00%明顯更低。分析原因?yàn)镋GFR、P53、Ki-67陽性表達(dá),促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖、分化、浸潤、轉(zhuǎn)移,使得結(jié)直腸癌患者腫瘤直徑、分化程度、TNM分期、浸潤深度增加,預(yù)后越差,縮短患者生存周期。這與焦俊霞等[12]研究的檢測EGFR、P53和Ki-67在結(jié)直腸癌中的表達(dá)有利于對腫瘤惡性程度和預(yù)后的評估相似。

綜上所述,EGFR、P53、Ki-67在結(jié)直腸癌患者癌組織中呈現(xiàn)高表達(dá),結(jié)直腸癌患者癌組織中EGFR、P53、Ki-67的陽性表達(dá)與患者腫瘤直徑、分化程度、TNM分期、浸潤深度呈正相關(guān),且與患者術(shù)后生存率有密切的關(guān)系。