福建泉州石香薷萃取物的GC-MS分析

楊曉燁 李贊錦 張鴻燕 賴晨楠 茍文韜 洪鈴冰 葉明星 郭琳娟 張偉云，*

1.廈門醫(yī)學院藥學系/廈門市中藥生物工程重點實驗室，福建 廈門 361023；2.福建醫(yī)科大學藥學院，福建 福州 350122

石香薷(MoslachinensisMaxim.)系唇形科 (Labiatae)薺寧屬一年生草本植物，別名青香薷、土香薷、野香薷、還魂草、七星劍等[1]。石香薷作為我國特有中藥材，性味溫辛，歸肺、胃經(jīng)，常用于治療中暑發(fā)熱、感冒惡寒、頭痛無汗、腹痛吐瀉等癥[2]?，F(xiàn)代研究[3]表明，石香薷中含有揮發(fā)油類、黃酮苷類及酚酸類等多種化學成分，揮發(fā)油是石香薷發(fā)揮藥理活性的主要成分，具有抗菌抑菌[4]、抗氧化[5]、抗流感病毒[6]等生理活性。

我國石香薷資源分布廣泛，主產(chǎn)于廣西、廣東、湖南、湖北、浙江、江西、四川、福建等地，具有廣闊的應用前景[7]。研究[8]表明，產(chǎn)地是影響石香薷藥材質量的重要因素之一，可能與其土壤、氣候有關。目前有較多針對湖南、江西及浙江等產(chǎn)地的石香薷化學成分的研究報道，對福建泉州產(chǎn)石香薷的研究報道較少。本研究通過超臨界流體萃取法對福建泉州產(chǎn)石香薷中揮發(fā)油等化學成分進行了提取，運用薄層色譜法和氣質聯(lián)用儀對其化學成分進行分析，分析比對不同產(chǎn)地石香薷成分及其含量之間存在的差異，以期為研究石香薷相關藥效物質基礎提供文獻參考，也為今后石香薷的開發(fā)研究利用打下基礎。

1 材料與儀器

1.1 藥品與試劑 石香薷產(chǎn)于福建泉州，經(jīng)廈門大學藥學院陳全成副教授鑒定為石香薷MolsachinensisMaxim.的干燥地上部分。2，4-二硝基苯肼、1%香草醛-濃硫酸試劑、0.05%溴酚藍試劑，均為分析級，購自海晟泰化工(廈門)有限公司；甲醇為色譜級，購自上海安譜實驗科技股份有限公司。

1.2 儀器 QEY-300 g高速粉碎機，浙江屹立工貿(mào)有限公司生產(chǎn)；六號(100目)標準藥篩，浙江省紹興上虞華豐五金儀器有限公司生產(chǎn)；JCS-W5003電子天平，哈爾濱眾匯衡器有限公司生產(chǎn)；硅膠薄層板，海晟泰化工(廈門)有限公司生產(chǎn)；氣質聯(lián)用儀，型號：7890B/7000，美國安捷倫科技有限公司生產(chǎn)；超臨界流體萃取儀，型號：*LC-2000，日本分光株式會社生產(chǎn)。

2 方法與結果

2.1 方法

2.1.1 福建泉州石香薷SFE提取 參照參考文獻中的方法[9-11]，將福建泉州產(chǎn)石香薷粉碎，過六號標準藥篩，稱取10.00 g石香薷用于超臨界流體萃取，萃取溫度45 ℃，壓力20 MPa，CO2流量3 mL/min，90 min后得到石香薷萃取物。吸取少量黃褐色的萃取物置于未使用且干凈的EP管中，加入適量色譜甲醇溶解，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過濾，作為石香薷萃取物GC-MS分析用樣品。

2.1.2 TLC薄層檢測條件 取福建泉州石香薷萃取物適量，分別點樣于硅膠G-CMC-Na薄層板的三處，分別用2，4-二硝基苯肼，1%香草醛-濃硫酸試劑和0.05%溴酚藍試劑進行顯色，然后分別觀察顏色變化。

2.1.3 GC-MS條件 參照參考文獻中的方法[10，12-15]，氣相色譜的色譜柱為HP-5MS 5%苯基甲基硅氧烷毛細管柱(30 m×250 μm×0.25 μm)，設置初始柱溫為50 ℃，保持5 min，程序升溫5 ℃/min，260 ℃保持5 min。柱子參數(shù)：柱內(nèi)流量為1 mL/min，氦氣作為載氣，進樣量為1 μL，流速1 mL/min，無分流進樣，溶劑延遲5 min。質譜條件：選用電子轟擊離子源，電子轟擊能量70 eV，離子源溫度230 ℃，四極桿溫度150 ℃，質量掃描范圍為40～550 m/z。

2.2 結果

2.2.1 SFE提取的石香薷萃取物狀態(tài)及提取率 SFE提取所得萃取物呈黃褐色，液體呈濃稠狀，提取率為2.85%。

2.2.2 TLC顯色結果 如圖1所示，石香薷SFE萃取物分別在薄層板點樣三處，經(jīng)0.05%溴酚藍試劑顯色，呈現(xiàn)黃色斑點，提示可能含有中含有酸性化合物；經(jīng)2，4-二硝基苯肼試劑顯色，呈現(xiàn)黃色斑點，提示可能含有醛或酮類化合物；經(jīng)1%香草醛-濃硫酸試劑顯色，呈現(xiàn)紫色斑點，提示可能含有油脂類化合物。

圖1 超臨界流體萃取法提取福建泉州-產(chǎn)石香薷的TLC顯色圖

2.2.3 超臨界萃取及其GC-MS成分 在上述實驗條件的操作分析中，采用超臨界流體萃取法得到萃取物并進行GC-MS分析，得到福建泉州產(chǎn)石香薷的GC-MS總離子流圖。譜圖如圖2所示。

圖2 超臨界流體萃取法提取福建泉州產(chǎn)石香薷的GC-MS總離子流圖

使用Agilent Mass Hunter Qualitative Analysis B.06.00(AgtQual)分析軟件分析福建泉州產(chǎn)石香薷萃取物的總離子流圖(TIC)，通過NIST MS譜庫進行檢索比對，共發(fā)現(xiàn)有198個色譜峰，初步確定了112個化合物。具體見表1。

表1 SFE提取所得福建泉州產(chǎn)石香薷化學成分表

表1(續(xù))

表1(續(xù))

表1(續(xù))

分析結果表明，福建泉州產(chǎn)石香薷所得化合物以烯烴、醇、酚、有機酸、酯類化合物為主，使用AgtQual軟件通過峰面積歸一法測定萃取物中化合物相對含量，總峰面積為140558316.30，所得鑒定峰峰面積合計為133901135.89，所得鑒定峰峰面積占總峰面積的95.26%，其中6個化合物占比>1%，從高到低依次為百里香酚(66.23%)；乙酸瑞香[草]酯(5.68%)；α-石竹烯(3.77%)；葉綠醇(3.57%)；反式角鯊烯(2.31%)；順-8，11，14-二十碳三烯酸(1.30%)。

3 結果與討論

經(jīng)過與文獻[16]對比分析，湖南邵東產(chǎn)石香薷采用SFE得到萃取物，萃取條件為萃取壓力為20 MPa，萃取溫度為45℃，與本實驗的萃取條件相同，因此比較兩產(chǎn)地超臨界萃取物的化學成分差異，其所得萃取物的化學成分含量由高到低依次是百里香酚、香薷酮和鄰異丙基甲苯。兩種產(chǎn)地的石香薷萃取物中含量最高的化學成分均為百里香酚。兩種產(chǎn)地的石香薷所得化合物有部分相同，僅有6種化合物為共有成分，具體為百里香酚、萜品烯、β-石竹烯、α-石竹烯、鄰異丙基甲苯和松油烯。現(xiàn)代相關研究[17]表明，百里香酚是石香薷的主要活性成分之一，又稱麝香草酚，對常見食源性真菌、金黃色葡萄球菌、黃曲霉孢子等均有抑制作用，而上述兩個產(chǎn)地石香薷萃取物中主要活性成分含量的不同，可能對其藥理活性產(chǎn)生影響，可能是由采摘時間、儲存時間不同所致，尚且需要對應實驗驗證和深入研究。

本實驗通過超臨界流體萃取法萃取福建泉州產(chǎn)石香薷中揮發(fā)油等多種化學成分并進行了GC-MS成分分析，豐富了其化學成分研究，為今后的石香薷藥用資源的開發(fā)利用提供一定的理論依據(jù)。