胸水細(xì)胞蠟塊結(jié)合免疫組織化學(xué)染色技術(shù)診斷肺癌的臨床意義

張玉春，戴陸春

睢寧縣人民醫(yī)院呼吸與危重醫(yī)學(xué)科，江蘇睢寧 221200

肺癌在多年來(lái)一直作為高發(fā)惡性腫瘤存在，且 病死率較高。雖然在臨床醫(yī)療技術(shù)不斷進(jìn)步下，對(duì)于肺癌可行手術(shù)、放化療等手段治療，但依然無(wú)法確保絕大多數(shù)患者獲益[1]。尤其肺癌早期不具有特異性表現(xiàn)，難以引起患者關(guān)注，多數(shù)患者在體檢時(shí)被發(fā)現(xiàn)，或出現(xiàn)癥狀后檢查發(fā)現(xiàn)進(jìn)入晚期[2]。但對(duì)于手術(shù)治療而言，早期確診時(shí)手術(shù)預(yù)后良好，若為晚期則可失去手術(shù)時(shí)機(jī)[3]。因此，對(duì)于肺癌的早期診斷長(zhǎng)久以來(lái)較為受到關(guān)注，包括早期篩查的影像學(xué)檢測(cè)技術(shù)、免疫組化染色技術(shù)、胸水檢測(cè)等[4]。影像學(xué)技術(shù)可輔助進(jìn)行腫瘤早期篩查，但因部分腫瘤所處部位難以檢出，容易出現(xiàn)漏診情況，且難以進(jìn)行腫瘤類型鑒別。而免疫組化染色技術(shù)近年來(lái)在肺癌診斷中呈現(xiàn)出一定優(yōu)勢(shì)[5]。本研究選取2021年5 月—2023 年3 月睢寧縣人民醫(yī)院收治的疑似肺癌患者67 例為研究對(duì)象進(jìn)行回顧性分析，分析胸水細(xì)胞蠟塊結(jié)合免疫組織化學(xué)染色技術(shù)診斷肺癌價(jià)值?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院收治的疑似肺癌患者67 例為研究對(duì)象。其中男35 例，女32 例；年齡56～79 歲，平均（66.52±5.38）歲。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：均疑似肺癌，行病理檢查。排除標(biāo)準(zhǔn)：①肺癌未合并胸水；②臨床資料不完整；③中途退出研究。

1.3 方法

免疫組化檢查：采集患者胸水100 mL 放到保存液內(nèi)，混勻，取50 mL 離心處理5 min，去上清液，加5 mL 細(xì)胞固定液，混勻后離心5 min，去上清液，加1 mL 緩沖液，混勻。取800 μg 于沉降倉(cāng)靜置20 min，去沉降液，加1 mL 沖洗液反復(fù)沖洗2 次。取其中1 mL 緩沖液2 次，以蘇木素染液1 mL染色，靜置90 s，倒掉，后以1 mL 沖洗液與1 mL 緩沖液沖洗2 次，以伊紅染液1 mL 染色10 s，沖洗2 次，取出玻片，以無(wú)水乙醇2 min，二甲苯2 min 后封片。

胸水細(xì)胞蠟塊檢查：薄層液基細(xì)胞學(xué)沉降制片后，將其他胸水加保存液，于4℃環(huán)境下靜置，觀察細(xì)胞充分沉淀后去上清液，離心5 min。取沉淀加5 mL 福爾馬林溶液震蕩，離心5 min，取沉淀，加10 mL 的95%乙醇脫水，離心5 min，放到取材盒內(nèi)，脫水3 h 常規(guī)包埋，切片。以MaxVision 二步法對(duì)細(xì)胞蠟塊免疫組化染色。蠟塊切片厚度3 μm，二甲苯脫蠟，梯度乙醇至水，高壓修復(fù)，3% H2O2室溫環(huán)境靜置10 min。一抗37℃環(huán)境下孵育1 h，二抗37℃環(huán)境15 min，以DAB 顯色。

1.4 觀察指標(biāo)

以病理檢查結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，比較不同檢查方法的診斷結(jié)果精準(zhǔn)度。陽(yáng)性預(yù)測(cè)值=真陽(yáng)性例數(shù)/（真陽(yáng)性例數(shù)+假陽(yáng)性例數(shù)）×100%。陰性預(yù)測(cè)值=真陰性例數(shù)/（真陰性例數(shù)+假陰性例數(shù)）×100%。準(zhǔn)確性=（真陽(yáng)性例數(shù)+真陰性例數(shù)）/總例數(shù)×100%；特異度=真陰性例數(shù)/（真陰性例數(shù)+假陽(yáng)性例數(shù)）×100%；靈敏度=真陽(yáng)性例數(shù)/（真陽(yáng)性例數(shù)+假陰性例數(shù)）。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 21.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料用例數(shù)（n）和率（%）表示，行χ2檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同方法診斷效能分析

67 例患者中經(jīng)病理檢查確診肺癌47 例、良性病變20 例，細(xì)胞蠟塊結(jié)合免疫組織化學(xué)染色檢查靈敏度、特異度、準(zhǔn)確性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值均高于液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)結(jié)果，見(jiàn)表1、表2。

表1 不同方法檢測(cè)結(jié)果比較(n)

表2 不同檢測(cè)方法診斷效能分析（%）

2.2 不同方法診斷符合率對(duì)比

以病理檢查為金標(biāo)準(zhǔn)，細(xì)胞蠟塊結(jié)合免疫組織化學(xué)染色檢查對(duì)于腺癌診斷符合率100.00%，高于液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的78.95%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表3。

表3 不同方法診斷符合率對(duì)比[n(%)]

3 討論

肺癌既是發(fā)生在肺臟的惡性腫瘤，其發(fā)生與進(jìn)展與多因素相關(guān)。如長(zhǎng)期吸煙可增加肺癌風(fēng)險(xiǎn)，作為常見(jiàn)誘發(fā)因素。疾病還具有一定遺傳性特征，家族內(nèi)成員患有肺癌，則其他人員發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)較高[6]。近年來(lái)環(huán)境污染問(wèn)題在肺癌患病率增長(zhǎng)方面也起到一定作用，如吸入過(guò)度煙塵、工業(yè)廢氣、化學(xué)物質(zhì)等，可引起肺部病變，進(jìn)而發(fā)展為肺癌[7]。對(duì)于肺癌目前以手術(shù)治療為主，同時(shí)可配合放化療等治療手段?；疾≡缙谛惺中g(shù)治療，在術(shù)后配合化療，多數(shù)患者預(yù)后良好，但晚期患者可能失去手術(shù)時(shí)機(jī)，或預(yù)后不佳[8]。

肺癌作為全球范圍內(nèi)患病率屈居高位的惡性腫瘤，其臨床診治備受關(guān)注。鑒于早期治療與預(yù)后之間的密切關(guān)聯(lián)，肺癌早期診斷尤為關(guān)鍵[9]。以胸腔積液檢測(cè)為例，腫瘤細(xì)胞學(xué)檢測(cè)可用于肺癌診斷[10]。其具體檢測(cè)方法應(yīng)用中，常規(guī)細(xì)胞學(xué)涂片操作簡(jiǎn)單，便于開(kāi)展及推廣，但容易受到人為因素干擾，且可能出現(xiàn)細(xì)胞重疊與結(jié)構(gòu)不清晰等情況影響診斷準(zhǔn)確性[11]。后期在相關(guān)檢測(cè)技術(shù)與設(shè)備不斷進(jìn)步下，胸水細(xì)胞蠟塊與免疫組化染色技術(shù)等得以應(yīng)用其中。經(jīng)本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)，液基細(xì)胞學(xué)診斷靈敏度、特異度、均低于細(xì)胞蠟塊結(jié)合免疫組織化學(xué)染檢測(cè)結(jié)果。細(xì)胞蠟塊與免疫組化染色技術(shù)結(jié)合應(yīng)用可凸顯協(xié)同優(yōu)勢(shì)，強(qiáng)化診斷準(zhǔn)確性，為臨床進(jìn)行腫瘤來(lái)源評(píng)估與組織分型等提供指導(dǎo)[12]。若為晚期肺癌患者，胸腔積液作為具有代表性癥狀。以傳統(tǒng)細(xì)胞學(xué)檢測(cè)僅可輔助評(píng)估惡性腫瘤，難以識(shí)別原發(fā)病灶[13]。而細(xì)胞蠟塊組織切片可反復(fù)與連續(xù)操作，無(wú)細(xì)胞丟失情況，對(duì)于極少數(shù)惡性細(xì)胞識(shí)別率也較高，有利于對(duì)漏診與誤診的防控[14]。臨床實(shí)踐中，若有腫塊表面壞死現(xiàn)象，通過(guò)氣管鏡下難以識(shí)別腫塊，采集活檢標(biāo)本難度較高，且無(wú)法進(jìn)行病理組織分型，不利于后期診斷[15]。將其與免疫組化染色技術(shù)進(jìn)行聯(lián)合應(yīng)用則有助于解決此種缺陷，進(jìn)一步提升肺癌鑒別診斷可靠性。本研究中，以病理檢查為金標(biāo)準(zhǔn)，細(xì)胞蠟塊結(jié)合免疫組織化學(xué)染色檢查對(duì)于腺癌診斷符合率100.00%，高于液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的78.95%（P＜0.05）。張連美等[16]研究結(jié)果顯示，細(xì)胞蠟塊結(jié)合免疫組化染色技術(shù)對(duì)腺癌診斷符合率為96.00%，較液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的78.00%更高（P＜0.05），與本文研究結(jié)果具有一致性。提示此種檢查方法能夠?yàn)榉伟╊愋丸b別提供可靠依據(jù)。兩種檢測(cè)技術(shù)的聯(lián)合應(yīng)用能夠進(jìn)行細(xì)胞組織分型，為疾病類型鑒別提供參考[17]。其中細(xì)胞塊便于保存，能夠連續(xù)切片，后續(xù)免疫組化染色操作便捷度較高，且免疫細(xì)胞化學(xué)染色背景清晰，著色均勻，陽(yáng)性定位精準(zhǔn)，相應(yīng)資料可長(zhǎng)時(shí)間保存，在此種情況下細(xì)胞學(xué)也可存在組織病理學(xué)特征。若有必要還能夠直接開(kāi)展基因檢測(cè)[18]。在臨床檢查時(shí)，為確保其診斷價(jià)值，常規(guī)要求離心處理轉(zhuǎn)速不超過(guò)2 500 r/min。另外，離心管應(yīng)采用漏斗狀，若為含血標(biāo)本，首要工作為去除紅細(xì)胞，避免其形成檢測(cè)結(jié)果干擾。

綜上所述，肺癌診斷中，以胸水細(xì)胞蠟塊結(jié)合免疫組化染色技術(shù)應(yīng)用價(jià)值較高，除進(jìn)行肺癌檢出之外，還可進(jìn)行腫瘤類型鑒別。