17個煙草品種（系）的煙草黃瓜花葉病毒抗性鑒定

余金龍,劉 璐,鄭維威,李云霞,彭宣翔,王丹丹

（1.郴州市煙草公司，湖南 郴州 423000；2.郴州市農(nóng)業(yè)科學研究所，湖南 郴州 423000）

煙草是我國重要的經(jīng)濟作物之一。危害我國煙草種植的主要病毒有煙草普通花葉病毒、黃瓜花葉病毒、馬鈴薯Y 病毒、煙草脈帶花葉病毒、煙草蝕紋病毒等［1-2］，由此產(chǎn)生的病毒病給煙葉生產(chǎn)造成較大危害，且發(fā)生后不易控制，因此被稱為“植物癌癥”。由于品種、種植制度、氣候條件等因素的影響，煙草黃瓜花葉病在我國南北煙區(qū)均會發(fā)生，但南方煙區(qū)發(fā)病情況相對較普遍且日益嚴重［3-4］。煙草黃瓜花葉病早期感病常造成植株嚴重矮化、葉片皺縮，對煙葉產(chǎn)量造成嚴重影響；成株后感病雖對產(chǎn)量影響較小，但對煙葉的外觀質(zhì)量和內(nèi)在成分影響較大，使烤后顏色不均，煙味較差，上中等煙的比例下降，降低煙葉的可利用性。煙草黃瓜花葉病已成為高品質(zhì)煙草生產(chǎn)的重大阻礙因素［5-7］。目前對花葉病的防治，主要依賴于篩選抗病品種、科學栽培管理及生化防治等［7］。研究表明，高抗病品種的病毒病發(fā)生程度及發(fā)病損失均比非抗病品種低［8］。因此，選育抗病品種是防治黃瓜花葉病發(fā)生的有效途徑，進而使選育和推廣高抗（耐）病品種成為煙草種植的重要任務之一［9-10］，對實現(xiàn)優(yōu)質(zhì)煙葉生產(chǎn)具有重要意義。為湖南省煙葉生產(chǎn)上篩選對煙草黃瓜花葉病抗性較好的煙草品種（系）提供參考，對參與2022 年湖南省烤煙區(qū)試、湖南省株系聯(lián)合鑒定、生產(chǎn)試驗等試驗的17 個煙草品種（系）進行人工接種煙草黃瓜花葉病毒的抗性試驗，鑒定其在病毒接種后一定時期內(nèi)的抗性級別。

1 材料與方法

1.1 試驗地點

試驗設在湖南省郴州市桂陽縣龍?zhí)渡鐓^(qū)汪山組的煙草試驗基地。整個試驗過程皆在抗性鑒定大棚中完成，大棚占地面積240 m2，可滿足每批次50個以上品種的鑒定需要。

1.2 試驗材料

1.2.1 煙草品種（系） 試驗煙草品種（系）共17 個：CS19、CZ-67、YZ2008、CS08、K326（CK1）、云煙87（CK2）、HC2030、HC2032、CS12、SY146-1、YZ09、YZ10、M87、C81-3-5、CZ-66、Ti245、G28。其均為參與2022 年湖南省烤煙區(qū)試、湖南省株系聯(lián)合鑒定、生產(chǎn)試驗等試驗的品種（系），農(nóng)藝、經(jīng)濟性狀表現(xiàn)均較穩(wěn)定良好，由中南煙草試驗站提供。

1.2.2 煙草黃瓜花葉病毒原液（CMV） 于2022 年4 月27 日（病毒接種前1 d）在試驗煙區(qū)大田中采集發(fā)病癥狀明顯的CMV 病株，取發(fā)病煙葉約1 kg，研磨成漿狀后用紗布過濾獲得病毒原液0.25 kg。

1.2.3 育苗設施與材料 200 孔泡沫漂浮盤、育苗塑料缽直徑（20 cm、高20 cm）、金剛砂、育苗基質(zhì)與營養(yǎng)液。

1.3 試驗方法

1.3.1 煙苗培育 各品種于1 月26 日播種，按常規(guī)淺水漂浮育苗法育苗。4 月11 日移栽于育苗塑料缽中，每品種育苗21 株，重復3 次共63株栽于1盤。

1.3.2 病毒接種 于4月28日煙株6片真葉時，將CMV 病毒原液用水稀釋1 倍，加金剛砂15 g，用棉簽蘸取病毒原液在每株煙的中上部葉片上接種，一手托住葉片，一手稍用力摩擦表皮2～3遍。

1.3.3 病情調(diào)查與抗性級別鑒定 于4月28日接種后的第14 天（5 月12 日）、第21 天（5 月19 日）、第28 天（5 月26 日）、第35 天（6 月2日）各調(diào)查1次全部煙株的煙草黃瓜花葉病發(fā)病情況，記載各品種各重復各小區(qū)的總株數(shù)、各級發(fā)病株數(shù)。按照煙草黃瓜花葉病的病害分級執(zhí)行標準，將病情劃分為0—9級：0級，全株無??；1 級，心葉脈明或輕微花葉，病株無明顯矮化；3 級，1/3 葉片花葉但不變形，或病株矮化為正常株高的3/4 以上；5 級，1/3～1/2葉片花葉，或少數(shù)葉片變形，或主脈變黑，或病株矮化為正常株高的2/3～3/ 4；7 級，1/2～2/3葉片花葉，或變形或主側(cè)脈壞死，或病株矮化為正常株高的1/2～2/ 3；9 級，全株葉片花葉，嚴重變形或壞死，或病株矮化為正常株高的1/2以上。

根據(jù)病情調(diào)查情況計算病情指數(shù)，對滿足試驗樣本量要求的品種（系）進行抗性級別鑒定。品種的抗性劃分為6 級：高抗或免疫（I），病情指數(shù)為0；抗?。≧），病情指數(shù)為0.1～20.0；中抗（MR），病情指數(shù)為20.1～40.0；中感（MS）：病情指數(shù)為40.1～60.0；感?。⊿），病情指數(shù)為60.1～80.0；高感（HS），病情指數(shù)為80.1～100.0。

2 結(jié)果與分析

2.1 供試煙草品種（系）在病毒接種后第14天的病情指數(shù)和抗性

4 月28 日病毒接種前各煙草品種（系）均無病害，接種后第14天，各煙草品種（系）的病情指數(shù)為0.18～14.64，調(diào)查中發(fā)現(xiàn)大部分品種（系）出現(xiàn)輕度感病情況，但抗性級別還未表現(xiàn)出感病，均表現(xiàn)為抗?。ū?）。

表1 供試煙草品種（系）的煙草黃瓜花葉病病情指數(shù)和抗性

2.2 供試煙草品種（系）在病毒接種后第21天的病情指數(shù)和抗性

病毒接種后第21 天，各煙草品種（系）的病情指數(shù)為0.00～33.16。其中，CS19 的病情指數(shù)為0.00，抗性表現(xiàn)為免疫級別；CZ-67、HC2030、C81-3-5、CZ-66 的病情指數(shù)為18.52～19.93，抗性表現(xiàn)為抗病級別；YZ2008 等12 個品種（系）的病情指數(shù)為23.46～33.16，抗性表現(xiàn)為中抗級別（表1）。

2.3 供試煙草品種（系）在病毒接種后第28天的病情指數(shù)和抗性

病毒接種后第28 天，各煙草品種（系）的病情指數(shù)為0.00～67.55。其中，CS19 的病情指數(shù)為0.00，抗性表現(xiàn)為免疫級別；CS08、CS12、YZ10、M87 的病情指數(shù)為61.90～67.55，抗性表現(xiàn)為感病級別；CZ-67 等12 個品種（系）的病情指數(shù)為50.62～57.32，抗性表現(xiàn)為中感級別（表1）。除CS19 以外，其他品種（系）的感病程度進一步加深，抗性有所減弱。

2.4 供試煙草品種（系）在病毒接種后第35天的病情指數(shù)和抗性

病毒接種后第35 天，各煙草品種（系）的病情指數(shù)為0.00～67.90。其中，CS19 病情指數(shù)為0.00，抗性表現(xiàn)為免疫級別；YZ2008、K326（CK1）、HC2032、CS12、YZ09、Ti245共6 個品種的病情指數(shù)為53.44～59.61，抗性表現(xiàn)為中感級別；CZ-67、CS08、云煙87（CK2）、HC2030、SY146-1、YZ10、M87、C81-3-5、CZ-66、G28 共10 個品種（系）的病情指數(shù)為61.73～67.90，抗性表現(xiàn)為感病級別（表1）。隨著病毒接種后時間的進一步增加，除CS19 仍未感病，抗性達免疫級別外，其他品種（系）的感病程度進一步加深，抗性進一步減弱（表1）。

3 結(jié)論

17 個煙草品種（系）在病毒接種后第14 天對煙草黃瓜花葉病毒的抗性均表現(xiàn)為抗病。在病毒接種后的第14 天、第21 天、第28 天、第35 天，CS19 對煙草黃瓜花葉病毒的抗性均表現(xiàn)為免疫，其余品種（系）煙草黃瓜花葉病毒的抗性隨病毒接種后時間的增加而減弱。病毒接種后第35 天，YZ2008、K326、HC2032、CS12、YZ09、Ti245 共6 個品種（系）的抗性表現(xiàn)為中感，CZ-67、CS08、云煙 87、HC2030、SY146-1、YZ10、M87、C81-3-5、CZ-66、G28 共10 品種（系）的抗性表現(xiàn)為感病。CS19對煙草黃瓜花葉病毒的抗性表現(xiàn)優(yōu)異，抗性遠優(yōu)于試驗地所在煙區(qū)的主栽品種云煙87和K326；其余6個中感品種（系）的抗性表現(xiàn)也優(yōu)于云煙87，可為選育煙草黃瓜花葉病毒的煙草品種提供材料。