氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法在中藥材農(nóng)藥殘留分析中的應(yīng)用

芮天來

在中藥材種植過程中肆意使用農(nóng)藥，會導(dǎo)致最終的中藥產(chǎn)品中存在過量的農(nóng)藥殘留，不利于藥材作用的發(fā)揮，甚至?xí)＜叭梭w健康。為此，文章采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法對中藥材農(nóng)藥殘留進(jìn)行了分析研究。

一、試劑與藥材

將農(nóng)藥混合對照品試劑的質(zhì)量濃度設(shè)定為10μg/mL；甘草、黃芪、黨參等中藥材樣品來源于專項(xiàng)抽驗(yàn)品種。

二、方法與結(jié)果

1.樣品前處理方法的優(yōu)化。將待測的甘草、黃芪、黨參3種中藥材樣品研成粉末，經(jīng)三號篩過濾后，精密稱取3g樣品置于50mL的聚苯乙烯具塞離心管中，加入1%的冰醋酸溶液15mL，利用搖晃形成的旋渦使藥粉充分溶解并浸潤。將試管靜置30min后，向其中加入15mL乙腈溶液，渦旋混勻后放置在振蕩器上，以500次/min的頻率劇烈振蕩5min，再加入7.5g比例為4：1的無水硫酸鎂與無水乙酸鈉的混合粉末，快速搖勻后置于振蕩器上劇烈振蕩，以500次/min的頻率劇烈振蕩3min，再放在冰浴環(huán)境中冷卻10min。以4000r/min的頻率離心5min后，取上層清液9mL，放到預(yù)先裝有900mg無水硫酸鎂、300mg N-丙基乙二胺、300mg十八烷基硅烷鍵合硅膠、300mg硅膠、90mg石墨化炭黑的材料中，待上述材料固相分散后完成萃取工作。將萃取后的材料放置在凈化管中，渦旋混勻后放置到振蕩器上，以500次/min的頻率劇烈振蕩5min，使所有材料完全凈化。以4000r/min的頻率離心5min后，取上層清液5mL放置在氮吹儀上，在40℃水浴條件下濃縮至0.4mL，再利用乙腈溶液將其定容到1mL，然后通過渦旋作用綜合搖勻，利用0.22μm的微孔濾膜過濾，最后將過濾得到的濾液作為試驗(yàn)材料。

對專項(xiàng)抽驗(yàn)的甘草、黃芪、黨參3種中藥材進(jìn)行樣品前的優(yōu)化處理后，進(jìn)一步利用GC-MS分析條件檢測樣品中含有的殘留農(nóng)藥的具體參數(shù)，每種中藥材取樣平行測定2次，得到最終參數(shù)結(jié)果圖：圖1為甘草樣品MRM總離子流圖，圖2為黨參樣品MRM總離子流圖，圖3為黃芪樣品MRM總離子流圖。在對甘草、黃芪、黨參進(jìn)行殘留農(nóng)藥檢測的過程中，甘草樣品中檢測出了農(nóng)藥P，P-DDE，其真實(shí)含量參數(shù)為1.54μg/kg；黃芪樣品中檢測出了農(nóng)藥α-硫丹和六氯苯，其真實(shí)含量參數(shù)分別為0.3μg/kg和1.5μg/kg；黨參樣品中檢測出了農(nóng)藥六氯苯、α-硫丹和狄氏劑，其真實(shí)含量參數(shù)均處于較低狀態(tài)，處于0.01μg/kg-0.05μg/kg。

2.色譜條件和質(zhì)譜條件的優(yōu)化。選擇15.00m×0.25mm的毛細(xì)管柱結(jié)構(gòu)，將進(jìn)樣口溫度設(shè)定為250℃，基礎(chǔ)進(jìn)樣方式為不分流進(jìn)樣；整個農(nóng)藥殘留分析過程搭載純度≥99.999%的高純度氦氣和氮?dú)鉃闅庀嘟Y(jié)構(gòu)條件，最后的淬滅氣為氦氣，參數(shù)值設(shè)定為2.25mL/min；碰撞氣設(shè)定為氮?dú)?，參?shù)值設(shè)定為1.5mL/min；整個毛細(xì)管柱結(jié)構(gòu)的色譜柱流速參數(shù)設(shè)定為1.2mL/min。

在設(shè)置質(zhì)譜條件的過程中，主要采用電子轟擊源結(jié)構(gòu)形式為甘草、黃芪、黨參3種中藥材的農(nóng)藥殘留分析過程提供所需的各種能量，整個能量參數(shù)值為70eV，離子源結(jié)構(gòu)的溫度為230℃，結(jié)構(gòu)上的質(zhì)譜傳輸線溫度為250℃，最后選擇4.0min的溶劑延遲形式，得到甘草、黃芪、黨參3種中藥材的農(nóng)藥殘留分析過程。按照每一種農(nóng)藥分別選擇1對定量離子和2對定性離子的參數(shù)設(shè)置形式，根據(jù)出峰時間，對甘草、黃芪、黨參3種中藥材中所有待檢測的參數(shù)離子分時段分別展開針對性檢測。在多反應(yīng)下，甘草、黃芪、黨參3種中藥材中的21個組分可達(dá)到基線分離，且最終成型的峰形良好。本文對甘草、黃芪、黨參3種中藥材中農(nóng)藥殘留分析監(jiān)測的參數(shù)設(shè)置進(jìn)行了統(tǒng)計，如表1所示。

3.方法學(xué)驗(yàn)證。整個實(shí)驗(yàn)的方法學(xué)驗(yàn)證主要包括線性關(guān)系考察、精密度檢驗(yàn)、檢測限及定量限檢驗(yàn)等內(nèi)容。將質(zhì)量濃度為10μg/mL的農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)品，利用物理方法逐步稀釋到4ng/mL-200ng/mL，農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)品的系列質(zhì)量濃度隨之改變，根據(jù)分析條件分別進(jìn)行取樣分析、進(jìn)樣觀察后，以質(zhì)量濃度（μg/mL）為橫坐標(biāo)，以峰面積（A）為縱坐標(biāo)，根據(jù)相關(guān)參數(shù)結(jié)果繪制得到標(biāo)準(zhǔn)的曲線圖形。進(jìn)一步觀察利用質(zhì)量濃度參數(shù)和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測試甘草、黃芪、黨參3種中藥材后峰面積參數(shù)之間的線性關(guān)系，結(jié)果表明在一定的參數(shù)范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)曲線圖形的線性結(jié)構(gòu)關(guān)系良好，顯著性檢驗(yàn)參數(shù)經(jīng)過計算后呈現(xiàn)出R≥0.9900的趨勢。整個實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)匯總結(jié)果詳見表2。

綜上，應(yīng)用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測定甘草、黃芪、黨參中截然不同的21種農(nóng)藥殘留，具有較強(qiáng)的可操作性和可重復(fù)性，且識別性高，能夠從甘草、黃芪、黨參中藥材中測出多種農(nóng)藥殘留痕量，符合現(xiàn)階段對甘草、黃芪、黨參等中藥材中殘留農(nóng)藥的技術(shù)測試要求，能夠?yàn)楹笃谥兴幉牡慕】蛋踩褂么蛳赂訄?jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。