復(fù)方中藥超微粉對斷乳仔豬免疫機(jī)能的影響

●趙麗君

（河北省張家口市張北縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 河北 張家口 076450）

目前，研發(fā)替抗性藥物或者添加劑（中藥、益生菌及抗菌肽等）成為熱點(diǎn)問題，中藥、益生菌等制劑被廣泛應(yīng)用[1]。相關(guān)研究表明，中藥及中藥提取物具有提高免疫水平、抗氧化能力、促進(jìn)動(dòng)物生長、改善肉品質(zhì)及調(diào)整腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)等優(yōu)勢，被廣泛應(yīng)用于動(dòng)物健康養(yǎng)殖中[2]。傳統(tǒng)的中藥粉碎方式利用率較低，由于中藥的有效成分多數(shù)存在于細(xì)胞的胞漿中，且中藥的胞漿結(jié)構(gòu)致密，活性成分不能有效釋放，很難被動(dòng)物機(jī)體腸道吸收利用，中藥的超微粉碎技術(shù)可以彌補(bǔ)傳統(tǒng)的中藥粉碎缺點(diǎn)，中藥通過超微粉碎可將有效成分釋放，提高其在動(dòng)物腸道內(nèi)的生物利用率。以斷乳仔豬為研究對象，添加不同水平復(fù)方中藥添加劑，研究其對仔豬免疫機(jī)能的影響，為進(jìn)一步的臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

復(fù)方中藥制劑主要包括黃芪1·5份、當(dāng)歸1·5份、淫羊藿1·5份、巴戟天1份、麥冬1份、甘草1份，購自北京同仁堂醫(yī)藥有限公司。

1.2 復(fù)方中草藥超微粉的制備

按照上述復(fù)方中藥制劑中單味中藥的比例進(jìn)行混合烘干，進(jìn)行普通粉碎機(jī)粉碎、過篩，再用超微粉碎機(jī)進(jìn)行超微粉碎，制成復(fù)方中藥超微粉添加劑。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理

在張家口市的規(guī)?；B(yǎng)殖場，選擇體重相近的“杜×長×大”三元雜交斷乳仔豬進(jìn)行飼養(yǎng)試驗(yàn)。采用單因素隨機(jī)設(shè)計(jì)試驗(yàn)，選擇健康、體重為（25±2）kg“杜×長×大”三元雜交斷乳仔豬100頭，隨機(jī)分成4組，分別為1組（基礎(chǔ)精料）、2組（基礎(chǔ)精料+1%復(fù)方中藥超微粉）、3組（基礎(chǔ)精料+2%復(fù)方中藥超微粉）、3組（基礎(chǔ)精料+3%復(fù)方中藥超微粉），每組25只，預(yù)飼喂10 d，試驗(yàn)期90 d。按照養(yǎng)殖場中斷乳仔豬規(guī)范的飼養(yǎng)管理制度進(jìn)行飼養(yǎng)試驗(yàn)和疫苗免疫及環(huán)境消毒等。基礎(chǔ)飼料配制組成及營養(yǎng)水平，見表1。

表1 日糧組成成分與營養(yǎng)水平

1.4 免疫指標(biāo)的測定

1.4.1 血清中IgG、IgA、IL-2含量測定 試驗(yàn)結(jié)束（90 d），斷料12 h后每個(gè)試驗(yàn)組隨機(jī)選擇體重相近的20只試驗(yàn)斷乳仔豬進(jìn)行保定，從前腔靜脈采集血液樣品，用低速離心方式對采集的血液樣品進(jìn)行血清分離，-20℃保存。按照哺乳動(dòng)物IgG、IgA、IL-2 ELISA試劑盒說明書進(jìn)行含量測定。

1.4.2 豬5種病毒性疾病抗體水平的測定 用本文“1·4·1”采集的血液分離血清，采用ELISA試劑盒檢測仔豬血清中豬瘟病毒（CSFV）、豬偽狂犬病毒 gB（PR-gB）、豬圓環(huán)病毒2型（PCV-2）、豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）和豬口蹄疫病毒（FMDV）抗體水平。

1.5 數(shù)據(jù)處理及分析

對每個(gè)試驗(yàn)組進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，用SPSS 18·0軟件對每個(gè)重復(fù)組的數(shù)據(jù)比較，用Duncan's 法對每個(gè)試驗(yàn)組數(shù)據(jù)進(jìn)行多重因素比較，用P＜0·05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

不同處理斷乳仔豬免疫指標(biāo)結(jié)果，見表2。

表2 斷乳仔豬免疫指標(biāo)結(jié)果（）

表2 斷乳仔豬免疫指標(biāo)結(jié)果（）

注：同列肩標(biāo)不同小寫字母表示組間存在顯著性差異（P＜0·05），相同字母表示差異不顯著（P＞0·05）。

FMDV/（pg·mL-1）1組1·12±0·17b1·18±0·22b14·16±0·12b3·62±0·15b2·18±0·18b1·16±0·281·14±0·211·16±0·14 2組1·18±0·11ab1·22±0·13ab15·42±0·48ab3·73±0·23ab2·45±0·24ab1·19±0·241·16±0·151·18±0·12 3組1·21±0·16a1·31±0·15a18·72±0·22a4·42±0·22a2·79±0·12a1·22±0·131·18±0·141·20±0·13 4組1·22±0·22a1·33±0·12a18·76±0·14a4·12±0·32a2·82±0·12a1·23±0·121·19±0·171·21±0·11項(xiàng)目IgA/（g·L-1）IgG /（g·L-1）IL-2/（pg·mL-1）CSFV/（pg·mL-1）PR-gB/（pg·mL-1）PCV-2/（pg·mL-1）PRRS/（pg·mL-1）

由表2可知，試驗(yàn)2、3、4組斷乳仔豬血清中IgA、IgG、IL-2含量均高于1組，其中試驗(yàn)3、4組斷乳仔豬血清中IgA、IgG、IL-2含量顯著高于1組（P＜0·05），試驗(yàn)2組斷乳仔豬血清中IgA、IgG、IL-2含量高于1組，但差異不顯著（P＞0·05），試驗(yàn)2、3、4組之間相比，差異不顯著（P＞0·05）；試驗(yàn)2、3、4組斷乳仔豬血清中PCV-2、PRRS、FMDV抗體水平均高于1組，差異不顯著（P＞0·05）；試驗(yàn)2、3、4組斷乳仔豬血清中CSFV、PR-gB抗體水平均高于1組，其中試驗(yàn)3、4組斷乳仔豬血清中CSFV、PR-gB抗體水平顯著高于1組（P＜0·05），試驗(yàn)2組斷乳仔豬血清中CSFV、PR-gB抗體水平高于1組，但差異不顯著（P＞0·05），試驗(yàn)2、3、4組之間相比，差異性不顯著（P＞0·05）。

3 討論

國內(nèi)許多研究表明，中藥及中藥提取物中富含有多糖、黃酮、皂苷及有機(jī)酸等生物活性物質(zhì)，同時(shí)含有多種氨基酸、維生素及礦物質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)，在豬、雞等動(dòng)物養(yǎng)殖過程中被廣泛使用。免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM 等）主要作用為介導(dǎo)動(dòng)物機(jī)體的體液免疫，尤其在動(dòng)物抗感染免疫中起著重要作用。IL-2是由淋巴細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，主要作用為介導(dǎo)動(dòng)物機(jī)體的細(xì)胞免疫。CSFV、PRV、PCV-2、PRRS、FMDV等相關(guān)病毒性疾病在養(yǎng)豬過程中危害較大，且臨床中沒有有效的藥物進(jìn)行治療，主要通過疫苗接種獲得相應(yīng)的免疫力，疫苗接種后其機(jī)體內(nèi)CSFV、PRV、PCV-2、PRRS、FMDV抗體水平的高低直接影響著疫苗的免疫效果及豬對該病的抗感染能力。相關(guān)研究表明，中藥及中藥提取物制劑可以有效提高動(dòng)物免疫機(jī)能。本試驗(yàn)研究表明，試驗(yàn)2、3、4組“杜×長×大”三元雜交斷乳仔豬血清中PCV-2、PRRS、FMDV抗體水平均高于1組，但差異不顯著（P＞0·05），試驗(yàn)3、4組“杜×長×大”三元雜交斷乳仔豬血清中IgA、IgG、IL-2含量顯著高于1組（P＜0·05），CSFV、PR-gB抗體水平顯著高于1組（P＜0·05）。說明復(fù)方中草藥超微粉可以提高斷乳仔豬的免疫機(jī)能，以基礎(chǔ)精料+2%復(fù)方中藥超微粉、基礎(chǔ)精料+3%復(fù)方中藥超微粉添加較適宜。斷乳仔豬產(chǎn)生較好免疫效果，原因可能是由于中藥通過超微粉碎后使其有效成分更好的釋放，提高其在動(dòng)物體內(nèi)的吸收效果和利用率，進(jìn)而提高仔豬的免疫機(jī)能。

4 結(jié)論

不同劑量的復(fù)方中藥超微粉均可以提高“杜×長×大”三元雜交斷乳仔豬的免疫水平，其中以基礎(chǔ)精料+2%復(fù)方中藥超微粉、基礎(chǔ)精料+3%復(fù)方中藥超微粉效果較好。